中医药调控细胞焦亡治疗糖尿病肾脏疾病的机制探讨

糖尿病肾脏疾病(Diabetes kidney disease,DKD)是糖尿病严重的并发症之一。细胞焦亡作为一种新型的程序性细胞死亡方式,在DKD发展中发挥着重要作用。由消皮素(Gasdermin,GSDM)家族介导,并伴随大量炎症因子、趋化因子等的释放,从而导致一系列的炎症和免疫反应,因此调节细胞焦亡在治疗DKD方面有着重要意义。中医药可通过多途径、多靶点调节细胞焦亡,在治疗DKD方面具有显著优势。研究发现,细胞焦亡途径治疗DKD的中医药以中药复方为主,中药单体为辅。聚焦于细胞焦亡的分子机制,将DKD与细胞焦亡关系进行综述,同时对中医药抑制细胞焦亡改善DKD的作用机制进行探讨,旨在探究更多有效治疗DKD的新途径。

一种中药组合物对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积肝损伤的保护作用研究

目的探讨一种中药组合物对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的小鼠胆汁淤积肝损伤的保护作用。方法取8周龄SPF级昆明小鼠,随机分成6组,每组10只,分别为空白对照组(灌胃生理盐水),模型对照组(灌胃生理盐水),中药组合物低(灌胃剂量5.25 g/kg)、中(灌胃剂量11.25 g/kg)、高(灌胃剂量20.25 g/kg)剂量组,阳性对照组(熊去氧胆酸,0.1 g/kg),每日1次,连续灌胃药7 d。第5天,空白对照组灌胃给予等量橄榄油,其他各组灌胃ANIT(65 mg/kg)造模。造模48 h后,各组小鼠末次给药后30 min,收集小鼠血液和肝组织样本,进行各项指标的检测。采用试剂盒检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆红素(TBIL)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)含量。采用HE染色观察小鼠肝脏病理学变化。结果与模型组相比,中药组合物各剂量组能够明显降低小鼠外周血清中ALT、AST、ALP、TBA、TBTL、γ-GT和MDA含量(P<0.05),显著提高SOD和GSH-PX水平(P<0.05)。与模型组相比,中药组合物低剂量组、高剂量组肝细胞脂肪变性减少,炎症浸润减轻;中剂量组肝脏细胞脂肪变性显著减少,炎症浸润现象明显改善,肝细胞呈索状排列,肝小叶结构完整。结论中药组合物能够改善肝损伤血清生化学指标、降低黄疸和清除氧化自由基,从而发挥对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用。

孕期情志应激致胎损的机制及防治措施

目前国内外在孕期情志应激致胎损的机制研究及防治措施方面已经取得了较大的进展,但目前的研究还存在以下问题。第一,从理论上分析,孕期七情过极均可导致胎损,但目前除恐应激之外其他情志应激导致胎损的实验研究较少,需要进一步加强。第二,情志应激致胎损的防治方面,目前大部分研究关注的焦点在孕期情志的调理,对情志应激所致胎损的治疗探讨仍较少。第三,防治措施方面,多是采用现有适用于普通人群的食疗、五行音乐、运动、正念及心理干预方法,缺乏专门针对孕妇设计的方案。第四,各种干预疗法的效果缺乏大样本、多中心的高水平循证评估。今后应明晰单种情志或多种情志组合造成胎损的机制,并制定相应的防治措施。

雷公藤多苷纳米粒的制备及其对关节炎大鼠的治疗作用

目的 制备雷公藤多苷纳米粒,探究其对胶原诱导型(collagen-induced arthritis, CIA)关节炎大鼠的治疗作用。方法 运用薄膜分散法制备雷公藤多苷纳米粒,对其进行质量评估。构建CIA模型,进行药物干预,称量大鼠体质量、测定足趾肿胀度和关节炎指数;观察大鼠脏器、膝、踝关节滑膜的病理改变;检测大鼠血清中肝肾功能水平和炎症因子表达。结果 制备的雷公藤多苷纳米粒在电镜下呈圆粒状且分布均匀,性质稳定。相较于模型组,给药组大鼠左右足趾肿胀度均明显下降(P<0.01),关节炎指数明显降低(P<0.01)。其中TG-NPs组的疗效优于TG组。与正常组相比,大鼠心脏、脾、肾、睾丸指数均明显降低(P<0.05,P<0.01)。TG-NPs组膝踝关节软骨病理损伤明显减轻,凋亡的滑膜细胞增加;与模型组相比,TG-NPs组大鼠血清中的ALT、BUN、CRE水平均明显降低(P<0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6含量下降明显(P<0.05)。结论 TG-NPs通过诱导滑膜细胞凋亡和降低炎性细胞因子的表达对CIA有较好的治疗作用,通过静脉注射血液循环,可实现药物的缓、控释,避免口服药物造成的首过效应,减轻脏器的毒性,为治疗类风湿关节炎的新型纳米制剂的开发提供了实验依据。

泽泻汤基于PI3K/AKT通路调节巨噬细胞M1/M2极化平衡机制研究

目的:探讨泽泻汤(ZXT)对巨噬细胞M1/M2极化平衡的影响及可能的作用机制。方法:体内使用西式饮食(WD)诱导脂代谢紊乱小鼠模型,体外通过LPS/IL-4诱导RAW264.7细胞M1/M2型巨噬细胞模型,设置空白组、模型组、ZXT组。采用免疫荧光染色观察脂肪组织和RAW264.7细胞M1、M2型巨噬细胞标志物荧光强度;Western blot检测p-AKT、AKT、COX-2蛋白水平;qPCR分析M1、M2型巨噬细胞标志基因mRNA水平;ELISA测定IL-1β、IL-10分泌量;Griess法检测NO含量;Docking分析泽泻、白术活性成分与PI3K蛋白的结合情况。结果:与WD组相比,ZXT组CD11c表达显著减少,CD206表达量显著上调;ZXT逆转了LPS诱导的CD80表达升高,下调M1型巨噬细胞标志基因iNOS等mRNA水平,降低COX-2蛋白表达,抑制IL-1β分泌;ZXT促进IL-4诱导的CD206表达,上调M2型巨噬细胞标志基因Arg-1等mRNA水平及IL-10的分泌;ZXT逆转了LPS引起的NO释放增加;ZXT给药后体内外p-AKT/AKT蛋白水平均上升;Docking结果显示泽泻、白术中多个活性成分可与PI3K蛋白形成氢键稳定结合。结论:泽泻汤调节巨噬细胞M1/M2极化平衡,其作用机制可能与调控PI3K/AKT通路有关。

六味地黄丸介导RAGE抑制MMP-2/MMP-9对Aβ_(1-40)损伤bEnd.3细胞紧密连接蛋白的影响

目的探讨六味地黄丸对β淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))损伤的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的保护作用及其机制。方法采用CCK8法检测Aβ_(1-40)和六味地黄丸含药血清(MSLDP)对细胞活性的影响,筛选合适的作用浓度。将bEnd.3细胞分为对照组、Aβ_(1-40)组、MSLDP+Aβ_(1-40)组和MSLDP组,采用Western blot检测低密度脂蛋白相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,免疫荧光检测LRP1、RAGE、ZO-1表达;再将bEnd.3细胞分为对照组、Aβ_(1-40)组、FPS-ZM1(RAGE抑制剂)+Aβ_(1-40)组和FPS-ZM1+Aβ_(1-40)+MSLDP组,Western blot检测RAGE、MMP-9、MMP-2、ZO-1蛋白表达。结果Aβ_(1-40)呈剂量依赖性降低bEnd.3细胞活性(P<0.01),MSLDP对Aβ_(1-40)损伤的细胞活性具有保护作用(P<0.05,P<0.01),因此选择10μmol/L Aβ_(1-40)和10%MSLDP进行后续实验。与对照组比较,Aβ_(1-40)组RAGE、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高(P<0.01),LRP1、ZO-1、BDNF蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),并且LRP1、ZO-1荧光强度降低(P<0.01),RAGE荧光增强(P<0.01);与Aβ_(1-40)组比较,MSLDP组RAGE、MMP-2、MMP-9蛋白表达和RAGE荧光强度降低(P<0.05,P<0.01),而LRP1、ZO-1、BDNF蛋白表达和LRP1、ZO-1荧光强度升高(P<0.05,P<0.01)。与Aβ_(1-40)组比较,Aβ_(1-40)+FPS-ZM1组MMP-2、MMP9、RAGE蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),ZO-1蛋白表达升高(P<0.05);Aβ_(1-40)+FPS-ZM1+MSLDP组MMP-2、MMP9、RAGE蛋白表达降低(P<0.01),ZO-1蛋白表达升高(P<0.01),FPS-ZM1和MSLDP联合使用的效果更佳。结论六味地黄丸能够保护Aβ_(1-40)损伤的脑微血管内皮的细胞紧密连接,减轻血脑屏障障碍,保护神经血管单元防治阿尔茨海默病,可能通过调节RAGE途径抑制MMP-2/MMP-9途径实现。

五行音乐对孕期恐应激子代社交行为的影响及机制研究

目的探究五行音乐对孕期恐应激子代社交行为的影响和机制,为临床胎源性情志疾病的早期防治提供依据。方法将45只孕鼠随机分为空白组、模型组和五行音乐组。其中,模型组、五行音乐组均采用旁观电击法造模,五行音乐组在孕期的每天17:00~19:00播放五行音乐中的宫调。孕第19天对各组孕鼠采用ELISA法检测血清中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质醇(corticosterone,CORT)的含量进行造模评价。仔鼠延续母鼠的分组,于8周龄时进行三箱社交实验观察社交行为;免疫荧光双标法检测仔鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)谷氨酸能神经元活性的表达;高效液相色谱法检测仔鼠mPFC区谷氨酸(glutamate,Glu)总含量;高尔基染色观察仔鼠mPFC区神经元树突棘的变化。结果与空白组相比,模型组孕鼠血清中ACTH、CORT含量显著上升,模型组仔鼠社交交互时间和社会新奇偏好指数显著降低,谷氨酸能神经元活性、谷氨酸含量及神经元树突棘显著下降。与模型组相比,五行音乐组孕鼠血清中ACTH、CORT的含量降低及仔鼠社交行为、谷氨酸能神经元活性、谷氨酸含量及神经元树突棘的状态得到改善。结论五行音乐干预能够有效改善孕期恐应激所致子代的社交行为障碍,其机制可能与增强mPFC区谷氨酸能神经元的活性有关。

STAT3在糖尿病肾病中的作用机制研究进展

信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)可调控细胞转化、增殖、存活等多种基因的表达,已成为癌症治疗的重要靶点。越来越多的研究表明,STAT3的异常激活在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)发生发展中发挥着重要作用。因此,本文将重点介绍STAT3在DKD中的治疗潜力,包括STAT3的结构、活性调控机制、在DKD中的异常激活作用机制以及研究现状的整理总结,以期为DKD发病机制研究以及新药研发提供参考。

生物信息学在诊疗阿尔茨海默病的应用研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)发病机制复杂,诊断方法局限,且临床上缺乏有效的治疗药物,是现代医学领域的难点。生物信息学可为筛选AD关键病理学生物标志物、分析AD差异性表达基因、筛选AD有效药物作用靶点、研究AD的发病机制,以及发现抗AD新型药物提供了新的思路。然而,在生物信息学研究中数据的预处理和统计分析方式会对结果造成较大影响,且在实际研究中跨平台和跨实验室的分析方法缺乏一致协调性,导致难以进行数据间的对比。因此,建立标准的操作程序和质量控制协议、提高跨平台之间方法的可重复性、促进研究间的数据对比至关重要。

中医药高校硕士研究生科研能力培养

中医药研究生的科研能力系统性培养是其整个培养过程中最重要的组成部分。文章以研究生培养实际为例,从时间管理(以总体实验进展情况展开为例),课题调整(以课题遇到瓶颈为例),满足工作与考博需求以及关心工作、生活等四方面入手,详细阐述研究生培养的模式及重点注意事项。希望为中医药研究生的培养,尤其是其科研能力的培养提供可靠的实例和模式。

中医药高校本科生科研项目创新实验设计

中医药高校本科生科研项目是以中医药创新研究为出发点,通过师生团队合作,利用高校科研平台进行的本科生创新实验设计,为拓展本科生中医药研究创新思维提供了良好的契机。文章以指导中医药高校本科生科研项目为例,以中医药研究为对象,从组建团队、查阅资料和选题、初步验证、提出假说、实验设计与实施等方面,探索并总结出培养本科生创新实验设计的思路及措施,以激发本科生对科研的浓厚兴趣和创新思维。

脑缺血合并高脂血症模型大鼠脑组织的病理改变

背景:大多数脑缺血是在高血压、高脂血症、糖尿病等基础病变条件下发生的。因此,构建高脂血症复合脑缺血大鼠模型,研究基础性病变对脑缺血的影响具有重要意义。目的:观察高脂血症复合脑缺血大鼠模型脑组织病理学改变,及其高脂血症病理因素对脑缺血的影响。方法:实验以高脂饲料喂养大鼠制备高脂血症大鼠模型,然后线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,建模成功后 3,7 d,采用 TTC 染色的方法,观察各组大鼠脑组织缺血部位体积,苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑组织缺血边缘区组织病理学改变,透射电镜观察各组大鼠脑组织缺血边缘区细胞超微结构改变。结果与结论:TTC 染色结果显示高脂+脑缺血 7 d 组大鼠的脑缺血部位体积明显减小。苏木精-伊红染色结果显示所有脑缺血模型都呈典型的缺血性改变,脑缺血 7 d 的小胶质细胞数量比 3 d 的明显减少,高脂+脑缺血7d 相对于 3 d 的变化更明显。超微结构显示所有脑缺血模型的神经元和胶质细胞核膜皱缩,线粒体嵴基本完全消失,内皮细胞线粒体减少,神经突触的突触小泡大部分溶解,缺血 7 d,尤其是高脂+脑缺血 7 d 的上述损伤减轻,神经元变性、坏死减少,线粒体损伤恢复,线粒体嵴也明显增多,神经突触的突触小泡明显恢复。说明高脂血症促进了脑缺血损伤的恢复,其原因可能是高脂血症因素激活了体内某种保护机制。

松辽盆地南部白兴吐地区油气后生还原对铀成矿的作用

白兴吐地区姚家组铀矿化岩石中有机炭和有机硫都较低,而矿石中烃类含量比围岩高数至数十倍,油气对砂岩型铀矿成矿作用明显。油气及热液沿断裂上升,热事件有利于CH4在溶液中发生TSR反应,并加速铀的沉淀。断裂及油气是该区铀矿化的主要因素。

用世界卫生组织生存质量量表评价中风患者的生存质量

目的对中风病患者生理状态、心理状态、社会关系领域和环境诸领域的生存质量进行评价。方法采用世界卫生组织编制的生存质量量表(WHOQOL-BREF)对随机入组的134例病程在3个月以内的中风病患者进行评估,并与80例正常人进行比较。结果中风病患者的心理状态、生理状况以及对自身健康状况总的主观感觉比正常人差(P<0.05)。结论WHOQOL-BREF能反映中风病患者的生存质量,为中风病的中医药干预疗效评价的生存质量评价尺度提供依据。

浅析油气对松辽盆地南部姚家组砂岩型铀矿成矿的作用

松辽盆地南部姚家组铀矿化的岩石学、岩石化学、同位素、X衍射、包裹体特征分析表明,与铀矿关系密切的含油层位为下伏营城组和登娄库组。油气对铀矿成矿的作用表现为油气后生还原褪色蚀变形成局部还原障;形成黄铁矿、地沥青还原物质,提高砂体的还原能力;直接使铀矿沉淀富集。油气作为姚家组砂岩型铀矿成矿的主控矿因素之一,可用于找矿有利地段的预测。

补阳还五汤对脑缺血大鼠模型ITGαvβ3表达及脑皮质区新生血管的影响

目的研究补阳还五汤对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用,并观察对脑组织VEGF和ITGαvβ3的表达及脑皮质区新生血管的影响。方法采用"线栓法"制备大鼠脑缺血-再灌注模型;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中内皮生长因子(VEGF)、ITGαvβ3的含量;免疫组化法测定各组模型缺血侧大脑皮质区VEGF及CD34的表达。结果补阳还五汤可以显著升高血浆中VEGF和ITGαvβ3的表达(P<0.01),增加缺血侧大脑皮质区VEGF的表达和微血管密度(P<0.01)。结论补阳还五汤能够促使血管生成,改善脑循环,促进缺血脑组织的修复。

高脂血症对脑缺血大鼠血清超氧化物歧化酶、丙二醛和脑组织细胞间黏附分子-1、新生血管的影响

目的探讨高脂血症对脑缺血大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和脑组织细胞间黏附分子(ICAM)-1及新生血管影响。方法构建高脂血症复合大脑动脉缺血模型,酶联免疫法(ELISA)检测血清SOD和MDA的含量和免疫组化法测定脑组织中ICAM-1和CD34的表达。结果复合脑缺血组与单纯脑缺血组相比较,血清MDA在缺血3、7 d含量均下降(P<0.05);复合脑缺血组与单纯脑缺血组比较,脑组织梗死边缘区ICAM-1和CD34在缺血3、7 d表达增高(P<0.05)。结论高脂血症对脑缺血在不同时期相关因素具有特异性的表达有影响,这可能在脑缺血恢复期有助于脑组织损伤的修复。

RV减速器用轴承的受力分析

针对RV减速器用轴承设计过程中存在受力状况难以确定的问题,从RV减速器的运动原理出发,结合减速器的结构特点及理论力学,对3类轴承的受力状况进行分析。研究表明,RV减速器内部角接触球轴承受力最大,保持架组件次之,圆锥滚子轴承受力最小。

高脂血症对脑缺血大鼠血管调节因子的影响

目的比较高脂血症条件下复合脑缺血大鼠模型在缺血不同时间血管内皮细胞功能及血管调节因子的变化特点,分析高血脂因素对脑缺血性损伤的影响。方法实验动物随机分为正常组、高脂血症组、假手术组、高脂假手术组、单纯脑缺血组、复合脑缺血组,高脂饲料喂养大鼠,制备高脂血症大鼠模型线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)。分别在缺血3天、7天取材,用酶联免疫法(ELISA)检测血清中血管性血友病因子(vWF)、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)、6-酮-前列腺F1a(6-keto-FGF1α)(前列环素PGI2的代谢产物)、血栓素B2(TXB2)(血栓素TXA2的代谢物)的含量。结果与相应假手术组相比较,复合脑缺血组和单纯脑缺血组中vWF和TXB2因子在脑缺血模型各时间点血清含量呈增多趋势;vWF在单纯脑缺血7天和复合脑缺血3天血清含量均增多,具有统计学意义(P<0.05);而ET-1的含量无明显变化(P>0.05);TXB2单纯脑缺血3天和7天血清含量均增多,具有统计学意义(P<0.05),而在复合脑缺血的血清中含量无明显变化(P>0.05);NO、6-keto-FGF1α在缺血3天、7天血清含量均高于相应的假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05)。复合脑缺血组与单纯脑缺血组组间比较,vWF复合脑缺血组在缺血3天、7天血清含量均增多(P<0.05);ET-1的含量无显著性变化(P>0.05);TXB2复合脑缺血组血清含量减少,缺血3天、7天含量均明显增加(P<0.05);NO、6-keto-FGF1α复合脑缺血组在缺血3天、7天血清含量均减少,但在缺血3天组间比较无明显变化(P>0.05),缺血7天组间明显增加(P<0.05)。结论高脂血症条件下,血管调节因子在缺血不同时期既有累积现象,又有特异性的表达,可能在脑缺血恢复期有助于损伤的修复。

化痰通络汤预先灌胃的合并高脂血症脑缺血大鼠神经系统功能、脑组织病理变化观察

目的观察化痰通络汤预先灌胃的合并高脂血症脑缺血大鼠神经系统功能及脑组织病理变化,并探讨其可能作用机制。方法 70只大鼠予高脂饲料喂养6周,制作高脂血症模型,将大鼠随机分为高脂血症对照组(正常组) 15只、高脂血症假手术组(假手术组) 15只、高脂血症合并脑缺血组模型组(模型组) 20只、治疗组20只,饲养第7周开始,治疗组予化痰通络方1. 330 g/(kg·d)灌胃处理,正常组、假手术组和模型组予等体积生理盐水,连续4周,每天1次。饲养第9周模型组、治疗组采用线栓法建制备脑缺血模型,假手术组手仅分离不结扎血管。正常组大鼠不做任何处理。饲养11周时,评定模型组、治疗组大鼠神经系统功能,处死大鼠取脑组织,计算脑梗死体积比。饲养11周时取各组大鼠,处死后取脑组织,采用ELISA法检测各组脑组织一氧化氮(NO)、血管内皮素-1(ET-1)和血管性血友病因子(v WF),免疫组化法检测脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、CD34。结果治疗组与模型组大鼠神经功能评分分别为(1. 63±0. 20)、(3. 11±0. 22)分,二者比较,P <0. 05。治疗组与模型组大鼠脑梗死体积比分别为16. 82%±7. 18%、32. 97%±9. 86%,二者比较,P <0. 05。与正常组、假手术组比价,模型组脑组织ET-1和v WF含量增加(P均<0. 05),治疗组脑组织NO、ET-1和v WF含量增加(P均<0. 05)。与模型组比较,治疗组脑组织NO含量增加、ET-1和v WF含量均降低(P均<0. 05)。与正常组、假手术组比较,模型组、治疗组脑组织VEGF和CD34阳性表达量均升高(P均<0. 05);与模型组相比,治疗组脑组织VEGF和CD34阳性表达量增加(P均<0. 05)。结论化痰通络汤预先灌胃的合并高脂血症脑缺血大鼠的神经系统功能降低、脑梗死体积减少,其机制可能为促进脑组织NO、VEGF、CD34表达,降低ET-1和v WF含量。