利用网络药理学方法研究热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制

采用分子对接、网络分析预测热毒宁注射液抗流感病毒的分子作用机制,并通过已建立的体外流感病毒神经氨酸酶筛选模型对网络预测结果验证.结果表明,热毒宁注射液所含化合物在化学空间上具有类药性质;网络分析揭示出热毒宁注射液是通过与流感病毒吸附、脱壳、复制以及释放等环节的多个蛋白相互作用发挥抗流感病毒作用的;对于预测的15个活性分子而言,实验结果初步证实,对A型流感病毒,木犀草素呈现较强的抑制作用,槲皮素则呈现较弱的抑制作用,这也初步证实了预测结果.

天然气井用泡沫排水剂的筛选及应用研究

针对靖边气田局部区块产水日趋严重的现状,为其选择适用的排水采气工艺。结合该气田的地质条件和目前的工艺现状,优选出泡沫排水采气工艺。首先,对产水气井进行分类,选择出具有代表性的三口典型产水气井作为研究对象;然后,以典型井产水为基准,对国内7种起泡剂和2种消泡剂进行室内评价实验,结果表明,三口井适用的起泡剂分别是UT-11B、UT-15和UT-8,最佳工艺参数:w(起泡剂)=0.30%,w(消泡剂)=0.30%,m(起泡剂):m(消泡剂)=1:1;最后,进行现场应用实验,结果表明,优选的泡排剂使1#井日均产水量增加1.88m3,日均产气量增加3780m3;2#井日均产水量增加4.0m3,日均产气量增加952m3;3#井从无法带液生产,到实验后日均产气量2.0×104m3,日均产水量28.4m3。

钾盐复合变质剂对高钒高速钢中碳化钒形态与分布的影响

采用不同的钾盐复合变质剂(含B钾盐、含Ti钾盐、含Zr钾盐)对高钒高速钢进行变质处理。试验结果表明,在高钒高速钢中加入含B钾盐、含Ti钾盐复合变质剂,能使初生VC的数量有所增加,形态更为圆整,分布均匀。加入含Zr钾盐复合变质剂,初生VC数量变化不大,但形态有所改变,共晶碳化钒断开,更加细化。

通塞脉微丸含药脑脊液对PC12细胞的保护作用研究

目的通过观察通塞脉微丸含药脑脊液对不同因素所致的PC12细胞损伤模型的保护作用，探讨通塞脉微丸防治缺血性脑中风的作用机理。方法以MTT法观察通塞脉微丸含药脑脊液对过氧化氢、连二亚硫酸钠、谷氨酸造成的PCI2细胞损伤模型中细胞存活率的影响。结果连续多次给药（1．45/kg）后0．5～3h的通塞脉微丸含药脑脊液对过氧化氢损伤的PC12细胞均有明显保护作用（P〈0．05～0．01），其中以2．0h的通塞脉微丸含药脑脊液保护作用最明显；该时间点通塞脉微丸含药脑脊液对谷氨酸、连二亚硫酸钠造成的PC12细胞损伤模型亦有显著保护作用。结论通塞脉微丸含药脑脊液对PC12细胞损伤有显著保护作用，其机制与抑制细胞内钙超载、对抗自由基的氧化损伤和谷氨酸的兴奋性毒性等有关。

稀土变质处理对高钒高速钢中碳化钒形态的影响

采用稀土硅镁铁合金对高钒高速钢进行变质处理,金相分析表明,碳化钒的颗粒数目增多、变细,形态趋于规整,尺寸相对均匀,分布趋向均匀。稀土硅镁铁合金变质处理后,初生碳化钒颗粒内的白色异质晶核为镁、钾等活性元素的氧化物和硫化物。采用形状系数因子K、当量直径D、周长/面积比B等参数判定碳化物形态和大小,自编分析软件,能使金相图片上的视觉形象得到量化,得出比仅凭视觉判断更准确的结论。

金属凝固过程中初生小晶面相变质机理研究综述

综述了不同合金初生小晶面相的生长过程以及变质处理对其形态与合金性能的影响。介绍了合金的初生小晶面相的形核和生长机制,不同变质剂对其形态的作用机理。对合金中初生小晶面相变质处理的研究提出几点建议,为该类合金的研究和应用提供参考。

经验放大法对肺炎链球菌规模化发酵工艺条件的研究

目的应用经验放大法探索肺炎链球菌规模化基本发酵工艺条件。方法复苏肺炎链球菌菌种,传代培养,最后接种于30 L发酵罐中,以细菌发酵的培养时间、收获液菌浓度A600 nm值、荚膜多糖产率为指标评价发酵工艺;以纯化多糖的功能基团含量、相对分子质量大小(色谱分配系数KD值)、生物活性为指标评价多糖质量。以4型、19F型肺炎链球菌为首选菌株,用于筛选高产菌株、优化传代方法、培养基及30 L发酵罐的通气条件,并应用经验放大法至270 L及1 200 L发酵罐,并将发酵条件推演到其他血清型肺炎链球菌。结果筛选出肺炎链球菌4型和19F高产菌株,利用市售复合培养基,经3代种子液体-液体传代法,0.03 VVM通气条件下,4型和19F菌株在3 0 L发酵罐中获得良好的培养结果;并采用经验放大法至1 200 L发酵罐,获得良好结果。采用此发酵工艺条件,其他20个血清型肺炎链球菌在1 200 L发酵罐中也获得较理想结果。结论应用经验放大法初步探索了肺炎链球菌在1 200 L发酵罐中的发酵工艺条件。

肺炎链球菌发酵过程中质控方法的应用

目的建立肺炎链球菌发酵过程中的质控方法。方法应用革兰染色镜检与荚膜肿胀试验监测菌种的退化及发酵罐染菌情况,或用于退化菌种的复壮;应用发酵过程中测定培养液光密度(A600)的方法监测发酵状况、确定培养液初始浓度以及收获时间;应用血糖仪测定发酵过程中的葡萄糖含量,保证发酵过程中碳源的及时补充;应用渗透压仪检测发酵过程中培养液渗透压的变化,确定补料策略。结果确立了细菌革兰染色、荚膜肿胀试验、葡萄糖含量、渗透压、光密度(A600)等作为肺炎链球菌发酵过程中的质控方法。结论实验研究中建立的肺炎链球菌发酵过程质控方法能够较好地监测和评价肺炎链球菌的发酵过程。

基于功效成分群的中成药全过程质量控制体系探索

中成药是在继承中医药理论、发扬中医药特色的基础上,采用现代生产工艺研制而成的中药新药,是我国医疗体系中的重要组成部分。中成药生产过程中质量控制始终面临着控制哪些成分和如何控制的问题,尤其中成药以原药材为原料,经历提取、纯化、浓缩、干燥、制剂成型的多道复合工艺过程。从中成药产品质量出发,运用科学的方法解析其功效成分群,依据功效成分群制定质量控制指标,并建立生产全过程质量控制体系,以期保障复杂体系的中成药质量均一,确保药物有效。

不同方法制备的1型肺炎球菌多糖-蛋白结合疫苗生化及免疫学特性比较

目的对两种方法制备1型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗的生化及免疫学特性进行比较。方法分别采用溴化氰活化法与胺还原法制备结合物,并对其进行生化及免疫学检测。结果采用溴化氰活化法制备的结合物,较胺还原法具有较高的结合率及高分子结合物含量,免疫小鼠产生的抗体效价较胺还原法明显提高。结论采用溴化氰活化法制备1型肺炎球菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗优于胺还原法。

从网络角度研究腰痹通胶囊整体调控腰椎间盘突出的分子作用机制

目的研究腰痹通胶囊(三七、川芎、延胡索,等)治疗腰椎间盘突出的分子作用机制。方法采用文献挖掘、分子对接以及分子-靶蛋白网络特征分析的方法研究腰痹通胶囊中化合物群与靶蛋白的相互作用。结果分子对接发现腰痹通胶囊中有46个活性成分,且大部分具有良好的口服生物利用度和较高的中枢神经暴露量,进一步网络分析发现,其中coptisine、diligustilide、corypalmine、chuanxiongterpene等11个化合物为其主要活性成分,可通过与p38、CGRP、MMPs、TNFα等19个靶蛋白作用,抑制过度性炎症反应和椎间盘内毛细血管浸入,降低神经对刺激的敏感性,调控椎间盘内胶原、蛋白聚糖的代谢平衡,从而缓解疼痛,改善腰椎间盘突出。结论通过网络分析明确了腰痹通胶囊调控腰椎间盘突出的分子作用机制,诠释了其科学内涵,有助于推动后续药效物质基础研究和分子机制实验研究。

近10年网络药理学应用于中医药研究的文献计量学分析

网络药理学(Network pharmacology)是以系统生物学为理论基础,融合药理学、信息网络学和计算机科学的一门综合学科。近年来,网络药理学与中医药研究相结合,从整体、协同、动态水平上探讨中医方证关系,与中医学"整体观"和"辨证施治"相融合,为科学阐释中医的理、法、方、药提供了新思路和新方法。以中国知网数据库中网络药理学与中医药研究相结合的文献为对象,科学运用文献计量学的方法,对网络药理学应用于中医药研究的相关论文进行统计分析,具体分析了文献的发表年度及发文量、关键词及共现关系、主题、作者、机构、基金资助六个方面的情况,从而使研究人员能够准确、清晰、及时地把握中医药领域运用网络药理学的研究现状和方向,并为研究者提供有益的参考和借鉴,为该领域后续的研究工作提供坚实的文献学研究基础。

核磁共振波谱法在肺炎球菌荚膜多糖检定中的应用

目的建立1H-NMR波谱法检定23价肺炎球菌荚膜多糖结构的方法。方法用1H-NMR方法分析肺炎球菌荚膜多糖,选择(5.89～4.64)ppm区作为‘指纹’鉴定区,以默克公司公布的肺炎球菌荚膜多糖波谱为参照谱图,将检定样品的波谱与其相比较。对1H-NMR波谱进行专属性和耐用性验证。结果实验中应用1H-NMR波谱分析法对23价肺炎球菌多糖疫苗包含的所有血清型多糖的检定结果与默克公司公布的结果完全一致,该方法有很好的专属性和耐用性。结论实验中建立的1H-NMR波谱法适用于肺炎球菌荚膜多糖的检定,与传统方法相比,该方法有检测速度快,样品易于准备的优点等。

中药复方制剂物质基础研究思路及方法探讨

中药复方制剂物质基础研究是中药制剂工艺研究的基础,其研究思路与方法是否正确将直接影响中药制剂工艺的合理性与临床疗效。本文综合分析了当前中药制剂物质基础研究思路与方法的特点,探索性的提出中药复方制剂物质基础研究的思路与方法。

1型和14型肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗中糖链长度与免疫原性的相关性

目的探讨1型、14型肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗中糖链长度和免疫原性的相关性,以解决多糖结合物难以纯化的问题。方法肺炎球菌荚膜多糖经过乙酸水解成为寡糖,与原糖采用相同的方法与破伤风类毒素结合,免疫小鼠后检测抗体水平,并与原糖结合物进行比较。结果小鼠体内均能产生较高的抗体水平,且具有免疫加强效应,寡糖结合物与原糖结合物的免疫原性差异无显著意义。结论1型、14型肺炎球菌的荚膜多糖经酸水解降解,不影响结合物的免疫原性。

14型肺炎链球菌荚膜多糖纯化工艺中两种去除蛋白方法的比较

目的苯酚抽提法和脱氧胆酸钠沉淀法去除14型肺炎链球菌荚膜多糖中蛋白质的效果比较。方法将3批次14型肺炎链球菌发酵培养液经超滤、乙醇沉淀等方法初步纯化后,平分成两份,分别采用苯酚抽提法和脱氧胆酸钠沉淀法去除蛋白,通过比较多糖收获量、多糖组分检定结果、多糖分子质量、多糖抗原活性、多糖核磁共振图谱,以此评价这两种蛋白去除方法的效果。结果与苯酚抽提法相比,脱氧胆酸钠沉淀法制备的14型肺炎链球菌纯化荚膜多糖除收获量较高,蛋白和核酸杂质含量较低外,氨基己糖含量、多糖分子质量、抗原活性和多糖核磁共振图谱的检定分析结果无显著性差异(P>0.1)。结论作为14型肺炎链球菌荚膜多糖纯化工艺中的除蛋白方法,脱氧胆酸钠沉淀法优于苯酚抽提法。

14型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗的研制

将14型肺炎球菌的荚膜多糖(PS)与破伤风类毒素(TT)通过化学方法结合,制备成多糖-蛋白结合疫苗(PS14-TT)。用该结合疫苗免疫小鼠,在小鼠体内产生了高滴度的PS-IgG抗体和TT-IgG抗体,且再次注射后有加强应答效应,表明制备的结合疫苗保留了完好的抗原性,具有胸腺依赖性抗原的特性。

硫酸-咔唑微孔板法检测肺炎链球菌荚膜多糖中糖醛酸含量

目的利用微孔板检测肺炎链球菌荚膜多糖中糖醛酸含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法以微孔板为反应容器,对常规硫酸-咔唑法的咔唑质量浓度和加热时间进行优化;并对建立的方法进行线性范围、精密度以及准确度的验证及初步应用。结果最佳的咔唑质量浓度为0.10 mg/m L,加热时间为20 min。标准品D-葡萄糖醛酸在4~40μg/m L范围内,其质量浓度与校正后吸光值呈良好的线性关系,r2>0.99;批内及批间CV值分别为1.54%~3.02%及4.53%~7.75%;加入5μg/m L、10μg/m L、20μg/m LD-葡萄糖醛酸的8-160502、9V-160102、22F-160103荚膜多糖,D-葡萄糖醛酸的回收率为92.21%~110.47%。微孔板法校正前与常规方法在测定肺炎链球菌荚膜多糖中糖醛酸含量时差异无统计学意义(P>0.05),与校正后结果差异有统计学意义(P<0.05)。微孔板法测定分子质量分布与常规方法有较好的一致性。结论硫酸-咔唑微孔板法可有效检测肺炎球菌荚膜多糖中糖醛酸含量,操作简便快捷,精密度和准确度良好,可用于肺炎链球菌荚膜多糖疫苗的质量控制。

酶解蛋膜制备小分子多肽的工艺研究

目的以废弃蛋膜为原料,用碱性蛋白酶水解制备小分子多肽。方法在单因素实验的基础上以水解度、肽质量分数为响应值,采用4因素(时间、温度、酶用量、pH)3水平的响应面(Re-sponse SurfaceMethod,RSM)分析法根据回归分析确定影响因子。结果在分析各因素的显著性和交互作用后,得到最佳水解条件:时间2.3h、温度48℃、酶用量2.0%、pH9.1,蛋膜水解度(DH)达到18.23%,肽含量达到62.38%。结论为废弃蛋膜的综合利用提供了一条思路。

高钒高速钢碳化钒形态的数值化分析

针对碳化钒的不同形态,设计出定量分析软件,并利用形状因子K,实现了高钒高速钢不同碳化物形态数值化处理,当K介于0.785～1.000之间碳化钒形态为团球状;K≤0.223,碳化钒呈开花状.高钒高速钢当碳含量达到4.2%时,K为0.86和当量直径D为0.78μm,碳化物呈团球状均匀分布.