宝华山典型群落物种多样性的差异性分析

采用F 检验和t 检验,对宝华山5种典型群落乔、灌、草、藤4种生活型植物的物种丰富度、物种多样性指数、均匀度指数的波动幅度及其均值的差异性进行了研究,分析比较了群落间不同生活型物种对群落的差异性反应。通过对比研究发现,不同生活型物种均匀度指数之间的差异性比相应的物种多样性指数要大。另外,在计算群落的物种多样性和均匀度指数时,使用重要值作为测度指标比使用个体数更能提高差异的检出水平。

不同密度条件下芨芨草空间格局对环境胁迫的响应

基于小尺度上植物间相互作用与空间格局的高度相关性,选用可避免环境异质性影响的K2点格局函数,研究了沙枣-芨芨草群落中63个芨芨草样方(3密度条件×3生境条件×7重复)中芨芨草种群在小尺度下(0—0.5 m)的空间格局,探讨了在3种密度条件(高、中、低)及3种生境条件下(冠盖区、过渡区、空旷区),芨芨草种群空间格局对土壤理化性质胁迫(盐分、有机质及容重)程度的响应。研究结果表明,就土壤盐分,养分含量及土壤容重而言,土壤理化性质胁迫程度沿冠盖区、过渡区和空旷区增加的趋势。相应地,芨芨草种群呈聚集分布的样方比例在沿冠盖区(6/21)较低,而在过渡区(11/21)和空旷区(11/21)较高。然而,在不同密度条件下,芨芨草种群空间格局对土壤性质胁迫的响应不同。在低密度条件下,芨芨草种群在冠盖区多数为聚集分布(4/7),在过渡区和空旷区全部为聚集分布;中密度条件下,芨芨草聚集分布样方比例沿冠盖区-过渡区-空旷区梯度增加(分别为2/7,3/7,4/7),但低于同等胁迫条件下低密度样方中聚集分布数量;高密度条件下,在各胁迫条件下,除了一个过渡区高密度样方,其余芨芨草种群均为随机分布。总体上,随着环境胁迫增强,在中低密度下,芨芨草种群趋向于聚集分布;但在高密度下,芨芨草种群均以随机分布为主。此外,芨芨草种群空间格局随密度变化趋势比随土壤理化性质胁迫梯度变化趋势更加明显,可能表明相对于土壤理化性质胁迫程度,芨芨草种群密度对其空间格局影响更大。因此,在考虑芨芨草种群空间格局对环境胁迫的响应时,应当考虑种群密度因素。

南京市区景观破碎化过程中的斑块规模结构动态

基于南京市1988、1998和2003年3期TM影像，将农田、林地、居民聚居地及在建用地按斑块面积分为16个级别，研究了景观破碎化过程中，不同级别斑块数量的变化情况。结果表明，农田面积持续萎缩，破碎度上升，中小型斑块数量以较稳定速度增长；林地总面积略有波动，大中型斑块数量较为稳定，而中小型斑块受城市化进程影响，数量高度不稳定；居民聚集地在1988～1998年以在原有基础上扩张为主，在1998-2003年出现了大量新斑块，且两个时段的各级别斑块数量增长率呈极显著负相关；在建用地数量迅速增长，土地利用更加规模化。以上表明，斑块类型和大小对斑块的稳定性及变化趋势均有影响。

新媒体的特点及其在医学教育中应用

新媒体不仅是技术平台,也是媒体机构,促进了传统媒介的深度融合,展现出平民化、泛化、碎片化的特点,并具有和跨越时空互动性和智能媒体学习能力。大量的新媒体平台,如慕课、微型学习、微信群、医学公众平台、易班等与传统教育资源地充分融合正在从根本上丰富和改善了原有教学模式,从而在推进学历教育、继续医学教育和科学知识普及、专业期刊出版等方面发挥重要作用。

枣果中环磷酸腺苷(cAMP)的提取工艺及含量测定

大枣中的环磷酸腺苷(cAMP)含量丰富而且稳定,在已测的动植物材料中居首位。试验采用超声水浴提取的方法,考察超声时间、乙醇浓度、料液比3个因素对cAMP提取率的影响,结果表明料液比为主要影响因素,超声时间、乙醇浓度次之;确定了cAMP最佳提取工艺:料液比1∶25,乙醇浓度15%,超声时间20 min。并采用高效液相色谱法测定了8种枣果中的cAMP的含量,最高的为朝阳圆枣(375.61μg/g),最低为1-早脆王(46.01μg/g)。

抗哇巴因鸡蛋黄IgY与兔抗体IgG在酶联免疫检测中的比较

目的:探讨提高内源性哇巴因(EO)检测方法的准确性及特异性,为哇巴因的研究打下基础。方法:分别制备出鸡蛋黄抗哇巴因多克隆抗体及兔抗体。然后采用酶联免疫吸附法(ELISA)比较两种抗体检测内源性哇巴因的准确性及特异性。结果:采用IgY检测EO的平均批内变异系数为2.03%,批间变异系数为2.34%。兔抗体IgG则分别为2.83%、3.29%;两者均与氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应,与西地兰和地高辛分别存在3.45%vs5.95%、3.20%vs5.20%的交叉反应。结论:IgY比兔抗体ELISA检测内源性哇巴因的特异性及准确性较高。

斑蝥酸钠维生素B_6注射液联合化疗治疗肝癌临床疗效观察

目的观察斑蝥酸钠维生素B6注射液联合化疗治疗肝癌的疗效。方法将76例肝癌患者随机分成治疗组(38例)和对照组(38例),治疗组给予斑蝥酸钠维生素B6注射液配合化疗进行治疗,对照组单纯给予化疗治疗,观察疗效和不良反应。结果治疗组有效率为42.1%,对照组为39.5%,两组比较差异无统计学意义(P=0.81);但治疗组稳定率为78.9%,对照组为67.9%,两组比较差异有统计学意义(P=0.048)。治疗组生活质量改善、症状改善、体重增加均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。同时治疗组CD3、CD4、CD4/CD8水平的提高亦明显高于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组的主要毒副反应明显减轻,尤其在消化道反应和骨髓抑制方面,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论斑蝥酸钠维生素B6注射液联合化疗治疗肝癌具有提高免疫功能作用,可降低进展率和毒副反应发生率,提高生活质量,值得临床推广应用。

大鼠钠泵α2亚单位M1-M2膜外区多肽体外活性鉴定

本文旨在研究含大鼠钠泵α2亚单位M1-M2膜外区的多肽片段（peptide containing rat sodium pumpα2subunit M1-M2extramembrane fragment,RES2衍生物）是否具有与内源性钠泵抑制因子结合以及改善钠泵α亚单位活性的作用。采用Fmoc固相合成法合成多肽（Leu-Ala-Ala-Met-Glu-Asp-Glu-Pro-Ser-Asn-Asp-Asn-Gly-Gly-Gly-Ser）,产物经高效液相色谱技术纯化,并进行质谱分析。采用放射性配体-受体结合法检测其与哇巴因的结合能力,进而采用人红细胞86Rb摄取实验检测其生物学活性。结果显示,RES2衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力,其平衡解离常数（Kd）为38.46nmol/L,IC50为6.353nmol/L。RES2衍生物可以阻断哇巴因对红细胞膜Na＋,K＋-ATPase的抑制作用,使红细胞86Rb摄取率从38.53%上升到83.69%左右,并呈一定的剂量依赖关系。因此,RES2衍生物不仅具有体外结合活性,而且具有改善钠泵活性的生物学效应,为其成为有效的抗高血压药物提供科学依据。

人Na^+、K^+-ATPase α1亚单位M1～M2膜外区片段结合活性的研究

目的研究包含人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1～M2膜外区的多肽片断(HES1衍生物),是否具有与哇巴因结合的能力。方法采用Fmoc固相合成法进行多肽合成,产物经HPLC纯化,并进行质谱分析。然后采用放射性配体受体结合法检测其与哇巴因的结合能力。结果人Na+、K+-ATPaseHES1衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力。3H-ouabain与Na+,K+-ATPaseHES1衍生物结合的平衡解离常数为24.58nmol·L-1,受体密度为492.43fmol·mg-1蛋白。IC50=3.078×10-7mol·L-1。结论人Na+、K+-ATPaseHES1衍生物具有与哇巴因结合的活性,为其作为一种新型药物奠定实验基础。

南京市主城区乡土木本植物应用调查及开发建议

针对城市绿化中乡土植物应用的薄弱环节,重点开发稀缺物种,对于加速以乡土植物为主的园林绿化建设具有重要意义。采用样方法及标准段法调查了南京市主城区61个非道路绿地和150段道路绿地中的木本植物在乡土特性、应用频度及观赏特性等方面的特点,共有木本植物246种,其中,乡土木本植物仅69种。研究建议:非道路绿地中,乡土植物应用推广序列为乡土观果乔灌木>乡土色叶乔灌木>乡土观花乔木>其他。而在道路绿地中,乡土植物应用推广序列为乡土色叶灌木>乡土观果灌木和乡土观花乔木>其他。在此基础上,提出了可开发推广的乡土木本植物种类建议。

抗哇巴因鸡蛋黄抗体IgY的制备

目的制备出高特异性的抗哇巴因多克隆抗体,为进一步提高内源性哇巴因的检测的敏感性和特异性提供实验基础。方法采用不同剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物(0.5 mg/kg;1.0 mg/kg)免疫母鸡,收集鸡蛋;采用聚乙二醇法分离、纯化鸡蛋黄中抗哇巴因抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY(yolk immunoglobulin)的抗体效价。SDS-PAGE电泳分析IgY纯度。结果免疫后1周,鸡蛋黄中可检测出IgY;免疫后6周,鸡蛋黄中IgY的效价迅速升高,最高效价达到1∶10 240,持续至少4周。结果还显示,大剂量免疫母鸡获得高效价抗体持续时间较长。结论采用大剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物免疫母鸡,可以获得较高效价的抗哇巴因IgY。该方法简单,高效价抗体持续时间长,是制备抗体较为有效的方法。

In-fusion技术构建表达、纯化钠泵α3亚单位膜外区截断性片段重组质粒

目的构建重组pGEX-6P-1原核表达载体，表达和纯化大鼠钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区的截断性片段。方法利用In-fusion技术将钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区基因片段插入线性化的pGEX-6P-1载体中，转化，提取质粒，PCR鉴定；用阳性重组质粒pGEX-Trf-α3转化大肠杆菌，IPTG诱导、表达融合蛋白GST—Trf-α3。采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白，SDS-PAGE电泳分析表达产物的可溶性及含量。采用放射性配体结合法检测其生物活性。结果PCR和基因测序分析显示大鼠钠泵a3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区被成功插入pGEX-6P-1载体GST基因3’端，蛋白序列分析表明GsT-Trf-α3融合蛋白总长度262个氨基酸，理论相对分子质量应约为33．22×10^3。IPTG诱导后，GST-Trf-α3融合蛋白的表达量为10％，多以可溶性形式存在，可溶性蛋白表达量为80．8％。SDS-PAGE结果显示其纯度〉95％。生物活性实验结果显示GST—Trf-α3融合蛋白与^3H-哇巴因具有一定的结合能力，但结合能力较弱。结论采用In-fusion技术成功构建了表达GST-Trf-α3融合蛋白的原核表达载体，建立了纯化方法，获得高纯度的融合蛋白，为钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区功能以及其潜在的药理学作用研究获得了实验数据。

哇巴因对大鼠血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨哇巴因对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内Ca2+浓度的影响。方法用组织块贴壁法进行大鼠胸主动脉VSMCs原代培养,用免疫组织化学方法进行细胞鉴定,采用放射自显影术检测哇巴因对大鼠胸主动脉VSMCs的结合能力,采用Fluo 3-AM(钙离子荧光探针)法研究哇巴因在短时间内对VSMCs细胞内Ca2+浓度的影响,探讨不同浓度的钠泵α2亚单位截断性片段的拮抗作用。结果(1)放射自显影术检测结果显示,哇巴因与VSMCs间有一定的结合能力。在0.1~100 nmol/L浓度范围,随着哇巴因浓度的增加,VSMCs与哇巴因的结合能力增加;(2)Fluo 3-AM检测VSMCs内Ca2+浓度结果显示:不同浓度的哇巴因在短时间内能够引起VSMCs内Ca2+浓度的变化。在0~3200 nmol/L浓度范围,细胞内Ca2+离子浓度会随着哇巴因浓度的增加呈现出逐渐升高的趋势;(3)不同浓度的钠泵α2亚单位截断性片段可以拮抗哇巴因引起的VSMCs内Ca2+浓度的升高作用。结论哇巴因引起的细胞内高钙是高哇巴因高血压发生的细胞学基础,钠泵α2亚单位截断性片段可以拮抗哇巴因引起的VSMCs内Ca2+浓度的升高作用,为进一步探讨哇巴因的作用机制结高血压的治疗提供了实验依据。

瓯江生态修复示范段大型底栖动物类群与微生境的关系

在浙江瓯江生态修复示范段(水阁段和南山段)竣工初期,对9个样点的大型底栖动物类群与微生境因子进行了调查。结果表明,在生态修复段,大型底栖动物类群多样性与水生植被盖度显著正相关(r=0.787,P=0.012),与COD显著负相关(r=-0.680,P=0.044)。在4项主要水质指标中(TP、氨氮、COD、溶解氧),仅总磷(TP)含量与水蛭频度(r=-0.699,P=0.036)及椎实螺频度(r=-0.722,P=0.028)呈显著负相关;而水生植被盖度则与椎实螺密度(r=0.808,P=0.008)及频度(r=0.778,P=0.014)、水蛭频度(r=0.670,P=0.048)、蜉蝣频度密度(r=0.706,P=0.034)及频度(r=0.795,P=0.010)均显著正相关;相对于水质,水生植被盖度与主要大型底栖动物类群的关联可能更强。水阁段和南山段在岸线修复方式上有所差异,但两段间TP(P=0.065)、氨氮(P=0.285)、COD(P=0.635)、溶解氧(P=0.069)指标无显著差异,大型底栖动物类群也较为近似;而水阁段各样点之间水质和底栖动物类群较南山段的差异更大。

内源性哇巴因在肾上腺组织中表达的意义

目的 本研究目的在于探索内源性哇巴因 (EO)在肾上腺组织中表达的意义。方法 选择近 5年来行肾上腺切除术的肾上腺疾病患者 (31例 ) ,将其分为高血压组 (15例 )和正常血压组 (16例 )。采用免疫组织化学SP法 ,检测EO在其肾上腺组织中的表达。结果 高血压组 ,即继发性高血压患者组较正常血压组的肾上腺组织EO的表达增强(P <0 0 2 5 )。EO在其肾上腺组织中的表达强度与血浆醛固酮 (ALD)水平相关。术后 80 % (12例 )患者血压在 1周内降至正常水平 ,仅有 3例 (2 0 % )患者术后血压降低 ,但仍高于正常水平 ,且其降压药物用量较手术前减少 ,而且降压效果较好。结论 EO在肾上腺疾病所致继发性高血压的发生。

哇巴因多克隆抗体F(ab)_2片段的制备及其分子量测定

目的制备哇巴因多克隆抗体F(ab) 2 片段 ,并对其进行分子量的测定。方法免疫家兔制备哇巴因多克隆抗体 ,在适宜的条件下 ,用胃蛋白酶酶解哇巴因多克隆抗体 ,制备F(ab) 2 片段。酶解产物经HPSEC分析、纯化 ,ELISA法检测其免疫学活性。并在适宜的色谱条件下 ,分别测定三种标准蛋白的洗脱体积 ,绘制标准曲线 ,测定其分子量。结果 10 0mg哇巴因多克隆抗体在 2mg胃蛋白酶消化 18h ,反应体系pH 3 .0的条件下消化 ,制备出了活性的F(ab) 2 片段 ,其相对分子质量为 10 7kD。结论用胃蛋白酶消化哇巴因多克隆抗体 ,可制备出活性的F(ab) 2 片段 ,同时其相对分子质量的测定为其进一步研究提供了依据。

康艾注射液联合化疗治疗中、晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的:探讨康艾注射液联合化疗治疗中、晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法:选择中、晚期非小细胞肺癌患者120例,随机分为治疗组和对照组。治疗组采用康艾注射液联合化疗,对照组采用单纯化疗,观察治疗前后肿瘤病灶大小、临床症状、体重、生存质量、毒副反应的变化。结果:治疗后,总有效率治疗组为53.33%,对照组为31.67%;外周血白细胞降低2度以上的发生率治疗组为35%,对照组为58.33%;体重增加、临床症状减轻、生存质量评分升高、药物毒副反应发生率降低方面,两组之间比较有统计学差异(P<0.05)。结论:康艾注射液联合化疗治疗中、晚期非小细胞肺癌有明显协同作用,能减轻化疗不良反应,改善临床症状,保护造血系统,增强免疫功能,改善患者的生活质量。

抗哇巴因多克隆抗体F(ab)_2片段的研制及鉴定

目的 用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体 ,制备出F(ab) 2 片段 ,为改型抗体的研究提供依据。方法 免疫家兔制备出抗哇巴因多克隆抗体 ,并用胃蛋白酶分别在不同的酶解条件下消化抗体 ,继之用高效液相排阻色谱法 (HPSEC)对其进行分析、纯化 ,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测、鉴定其活性。结果 用胃蛋白酶 2mg/1 0 0mg抗哇巴因多克隆抗体 ,消化 1 8h ,反应体系的 pH3 0时 ,可获得F(ab) 2 片段。结论 用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体是研制出有活性的F(ab) 2

改良PICC在肿瘤患者化疗中的应用及护理

对165例肿瘤化疗患者应用改良PICC(经外周穿刺置入中心静脉导管)进行临床护理。结果本组一次置管成功138例,二次置管成功21例,穿刺失败6例。经X线胸片示156例导管末端置入中心静脉,余3例导管末端异位,经处理后能正常使用。认为对肿瘤化疗患者采用PICC置管,操作方便,穿刺成功率高,创伤小,保留时间长,并发症少,达到了预防局部组织坏死、静脉炎等目的,值得在临床推广应用。

心肌肥厚小鼠心肌组织Beclin1的表达及其意义

目的本研究拟采用心肌肥厚动物模型来探讨自噬相关蛋白Beclin1在心肌肥厚中的表达以及意义。方法选用20只WT小鼠,完全随机化分为两组:一组为实验组(皮下置入微量泵,异丙肾上腺素ISO 30μg/(g·d),n=10),一组为对照组(假手术组,微量泵,0.9%Na Cl,n=10)。分别在实验开始时与4周时,对各组小鼠进行超声心动图学检测,包括:LVPWd、LVPWs、IVS、FS、LVEF、Vcfc。并且在第4周末处死小鼠,获得体重、组织质量,并取心脏组织进行HE和Masson染色,进行心脏间质纤维化的分析与评价。并取左室心肌组织进行自噬相关蛋白Beclin1的免疫组化检测,分析自噬在心肌重塑中的作用和意义。结果 1微量泵入去甲肾上腺素(ISO)4周后,小鼠的心脏组织代偿性增生,心脏体重指数实验组较对照组明显增加(P<0.001),心脏彩超的结果显示LVPWd、LVPWs、FS、LVEF、Vcfc实验组较对照组明显增加(P均<0.001),进一步提示其为心功能正常心肌肥厚模型。Masson染色结果显示心肌组织发生明显的纤维化。2自噬相关蛋白Beclin1在实验组小鼠心肌纤维化区的表达较对照组心脏组织中的表达明显降低。结论通过置入微量泵体内缓慢输注异丙肾上腺素可以在较短时间内成功建立心肌肥厚模型,而自噬相关蛋白Beclin1表达下调可能是心肌细胞应对ISO输注引起的心肌肥厚的保护性反应,利于心肌细胞的存活。