乌蕨总黄酮提取工艺研究

目的筛选乌蕨中总黄酮的最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,考察乙醇浓度、溶剂倍数、提取时间对总黄酮提取率的影响。采用分光光度法测定总黄酮的含量,并与水煎法、乙醇温浸法比较。结果乌蕨的乙醇回流提取法效果最好。结论乌蕨中总黄酮提取的最佳工艺条件为加15倍量65%的乙醇,回流提取2次,每次1h。

GC/MS法对南方红豆杉种皮抑制物分析研究

[目的]研究南方红豆杉种皮内源抑制物的种类。[方法]采用系统溶剂分离法对南方红豆杉种皮提取液进行分离,并对乙酸乙酯相、甲醇相、石油醚相进行甲酯化后采用气相色谱-质谱联用仪进行鉴定分析。[结果]南方红豆杉种皮石油醚相中含有8种化合物,乙酸乙酯相中含有6种化合物,甲醇相中含有5种化合物,其主要内源抑制物为十六烷酸、十八烷酸、9-十八碳烯酸、9,12-十八碳二烯酸等,以(Z)9-十八碳烯酸含量最高,在乙酸乙酯相中存在1种未知醇类。[结论]该研究为南方红豆杉种子的综合利用提供科学依据,同时也为完善南方红豆杉种子休眠机理提供理论依据。

慢性心力衰竭心阳虚证大鼠模型的建立与评价研究

目的:构建和评价慢性心力衰竭心阳虚证大鼠模型。方法:30只SD大鼠随机分成假手术组、腹主动脉缩窄术组和腹主动脉缩窄术后冷刺激组,造模时间5周。对3组大鼠的体质量、生存率、呼吸频率、耳温、心率和B型脑钠肽(BNP)进行整合比较,并按照阳虚证加上心的定位症状和体征来综合判断并制定相应心阳虚慢性心衰大鼠的诊断标准。结果:与假手术组相比,手术组和术后冷刺激组在造模过程中均逐渐出现一系列心阳虚症状,术后冷刺激组较手术组明显。结论:腹主动脉缩窄术联合寒冷刺激的造模方法能够很好地建立模拟慢性心力衰竭心阳虚证的SD大鼠模型,其造模时间短,成功率高。

白及提取物对炎症因子抑制活性的谱效关系分析

目的:建立白及提取物HPLC指纹图谱,以LPS诱导RAW264.7巨噬细胞为炎症模型,考察各提取物对IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子抑制活性,分析其谱效关系。方法:采用聚酰胺柱色谱和系统溶剂萃取等方法制备系列白及提取物,并建立其HPLC指纹图谱。以LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞为炎症模型,采用CBA法及流式细胞术测定各提取物对炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的抑制作用;通过灰色关联度分析法研究其谱效关系。结果:白及各提取物F1～F8,除了F5抗炎活性较差外,其余各部位均具有一定抗炎活性,其中F7和F3具有显著抗炎活性。白及醇提物18个特征峰中,对IL-1β、IL-6、TNF-α抑制活性关联度大于0.8的峰分别有7、7、4个,其中9号峰对各炎症因子抑制活性均表现出较强活性;通过制备、鉴定该峰对应化合物为贝母兰宁,并进一步确证了其抗炎活性。结论:本研究构建了白及抗炎谱效关系,并鉴定了其抗炎活性较强的药效成分,确证贝母兰宁为白及发挥抗炎活性的主要药效成分之一,这为进一步科学合理开发利用白及奠定了良好基础。

高效液相色谱指纹图谱法分析南方红豆杉药材的氯仿提取物

建立了南方红豆杉药材氯仿提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法。采用Eurospher100C18色谱柱(250mm×4mm,5μm),以甲醇和水为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL/min,检测波长为232nm,柱温为30℃。以10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)为参照物,在相同的色谱条件下测定了10批不同产地的南方红豆杉药材氯仿提取物的指纹图谱,获得了11个共有指纹峰,并利用主成分分析法(PCA)对指纹图谱进行统计分析。结果表明南方红豆杉药材的质量与种植区域有关。该方法稳定、可靠,可用于南方红豆杉药材的质量控制。

响应面优化酶法提取平菇多糖工艺研究

目的:建立平菇多糖的含量测定方法,确定纤维素酶法提取平菇多糖的最佳工艺条件。方法:采用苯酚-硫酸法测定平菇多糖的含量。以平菇多糖得率为指标,考察酶解时间、酶解温度、pH值等3个因素对平菇多糖纤维素酶提取工艺的影响,采用响应面分析法优化工艺条件。结果:平菇多糖的最佳提取工艺条件为酶解时间135min、酶解温度49℃、pH5.30,在此条件下得率可达6.82%。结论该法成本低、产品得率高,比传统水提法提高3.98%。

珍珠粉临床应用的最新研究进展

目的:探讨珍珠粉作为单方和复方在临床的应用。方法:查阅有关珍珠粉在临床应用的有关文献,并进行分析总结。结果:珍珠粉已广泛应用于内科、外科、妇科、儿科等,疗效显著。结论:珍珠粉医用前景广阔,但其活性成分,药理作用,临床应用标准等有待于深入研究,以进一步提高其临床应用价值。

不同处理方法南方红豆杉种子浸提液内源抑制物活性研究初探

[目的]研究南方红豆杉种子萌发的机理,探讨南方红豆杉种子浸提液内源抑制物活性。[方法]分别采用低温层积处理及混合营养液加变温层积法处理南方红豆杉种子,通过测定不同方法处理后南方红豆杉种子浸提液对油菜种子幼苗萌发及生长状况的影响,以确定其内源抑制物的存在部分及初步活性。[结果]南方红豆杉种子种皮、胚乳中含有抑制油菜种子萌发及幼苗生长的物质,随着该物质浓度的增加,抑制作用更为显著;相同浓度的胚乳浸提液对油菜种子萌发及幼苗生长的抑制作用显著高于种皮浸提液;低温层积处理的南方红豆杉种子浸提液对油菜种子萌发及幼苗生长的抑制作用显著高于混合营养液加变温层积法处理南方红豆杉种子浸提液。[结论]南方红豆杉种皮及胚乳中均含有内源抑制物,经混合营养液加变温层积法处理能显著降低其内源抑制物的抑制作用。

破除南方红豆杉种子休眠方法的研究

[目的]研究南方红豆杉种子休眠机理,探究其最佳破除休眠方法。[方法]采用流水法、激素法、变温层积法、激素加变温层积法等对南方红豆杉种子进行破除休眠,通过比较处理后种子水提液对油菜种子发芽率抑制情况,来确定最佳破除休眠方法。[结果]通过四种方法处理过的南方红豆杉种子水提液对油菜种子的发芽率抑制情况比较,结果表明激素加变温层积法的抑制程度最低。[结论]最佳破除休眠的方法为以0.05%赤霉素处理辅以低(4℃)-暖(23℃)-低(4℃)变温层积法处理120天。

光照强度对南方红豆杉紫杉醇含量及相关酶基因表达的影响

[目的]研究光照强度对南方红豆杉中紫杉醇和10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ(10-deacetylbaccatin III,10-DABⅢ)含量变化,探讨其可能的环境适应机制。[方法]通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定不同遮光率(50%、70%和90%)分别遮光30、60、90d后紫杉醇和10-DABⅢ含量;通过PCR法测定相关酶基因表达量。[结果]光照强度能够影响紫杉醇的积累。遮光0~90d,空白组紫杉醇和10-DABIII含量呈下降趋势,各遮光组呈先升后降的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。其中50%和70%遮光组明显高于空白组及90%遮光组(P<0.01)。此外,光照对紫杉二烯5α-羟基化酶(taxane 5α-hydroxylase,TH5α)、紫杉烷7β-羟基化酶(taxane 7β-hydroxylase,7β)和紫杉烷14β-羟基化酶(taxane 14β-hydroxylase,14OH)基因表达也存在明显影响,70%遮光组TH5α基因表达量随遮光时间延长而增加,14OH基因则下降(P<0.01)。[结论]本研究初步得到光照因素可以影响南方红豆杉次生代谢产物的合成及相关酶基因的表达,适当的遮光(70%遮光)可以提高紫杉醇的含量,且遮光3月内紫杉醇含量稳定。

正交设计法优选参附汤提取工艺

目的:优化参附汤的提取工艺。方法:采用正交实验设计,考察水的用量、提取时间、提取次数3个因素,以人参总皂苷含量、附子总生物碱含量和浸膏得率为评定指标,用综合评分法进行数据处理,对参附汤的提取工艺进行优化。结果:所考察的因素中,对提取工艺影响程度依次为:提取次数>水的用量>提取时间。参附汤最佳提取工艺为加10倍量的水,提取3次,每次提取0.5h。结论:该提取工艺合理,有效成分提取效率较高。

不同产地郁金茎叶挥发油化学成分及指纹图谱对比研究

目的:研究不同产地郁金茎叶的GC-MS指纹图谱,以期为郁金茎叶的质量标准建立提供依据。方法:通过水蒸气蒸馏法提取10个不同产地郁金茎叶中挥发油成分,运用GC-MS分析10个产地郁金茎叶挥发油成分的组成与含量差异,建立指纹图谱,所得图谱采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版"软件进行分析并计算相似度。结果:10个批次郁金茎叶挥发油指纹图谱有11个共有峰,其中参照峰为桉叶油醇。除了四川产黄丝郁金、广西产桂郁金、乐清虹桥2号、瑞安湖岭产温郁金茎叶指纹图谱相似度<0.9,浙江瑞安马屿、乐清白石、瑞安陶山、永嘉乌牛、乐清虹桥1号、丽水云和6个产地温郁金茎叶指纹图谱相似度均>0.9。结论:不同品种的郁金茎叶挥发油成分差异较大,不同产地的温郁金茎叶挥发油成分指纹图谱也存在差异。

微波法提取茯苓多糖的工艺研究

目的优选茯苓多糖微波最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,用微波法提取茯苓多糖,并用苯酚-硫酸法测定其含量。结果微波法最佳提取工艺为加20倍量水,在1470MHz下微波提取15min,提取1次。结论微波法省时、简便、提取效率高,适合大生产应用。

平菇多糖提取工艺优化研究

[目的]优化水提法提取平菇多糖的工艺,为平菇多糖的提取提供一种简单有效的方法。[方法]通过单因素试验和正交试验对水提法提取平菇多糖的工艺进行了研究,考察料液比、提取时间、提取温度三个因素对平菇多糖提取率的影响,并以正交试验设计优化工艺条件。[结果]平菇多糖的最佳提取工艺条件为料液比1:35、提取时间3h、提取温度90℃。在此条件下得率可达2.84%。[结论]该方法简便、价廉、准确、灵敏度高,适合于平菇多糖的提取。

南方红豆杉的鉴别研究

目的：对南方红豆杉枝叶进行鉴别研究。方法：采用系统的中药鉴定方法对南方红豆杉枝叶的性状、组织显微进行研究,并以10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ（10-DABⅢ）为对照对南方红豆杉枝叶进行薄层鉴别。结果：南方红豆杉枝叶性状特征：茎上小枝不规则互生,叶片全缘,近革质,中脉隆起明显,叶背具有2条黄褐色气孔带。茎横切面特征：形成层明显,木质部发达,年轮清晰,有髓射线,髓发达;叶横切面特征：叶表面具角质层,叶肉组织异面型,栅栏组织通过中脉,气孔分布于下表皮;叶上表皮栅表比为0.33,叶下表皮气孔带内的气孔指数为0.074~0.085;粉末特征：表皮细胞、纤维、气孔多见,色素块棕色或红棕色,木栓细胞黄棕色,管胞多为环-螺纹和螺纹,偶见绿色草酸钙方晶。薄层色谱法可检出10-DABⅢ。结论：本研究结果为南方红豆杉的药材鉴定、资源利用和质量标准制定提供科学依据。

HPLC同时测定参附汤中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1含量的研究

目的:建立参附汤中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定方法。方法:采用Inertsil ODS–SP(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,柱温25℃,流动相为乙腈:水,梯度洗脱,流速:1.0mL.min-1,检测波长203nm。结果:人参皂苷Rg1在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.86%,RSD为2.32%;人参皂苷Re在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.09%,RSD为2.22%;人参皂苷Rb1在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.53%,RSD为1.68%;结论:该方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于同时测定参附汤中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量,为参附汤的质量控制提供依据。

响应面分析南方红豆杉黄酮微波提取工艺研究

目的:优化南方红豆杉[Taxus mairei(Lemee et Levl.)S.Y.Hu ex Liu]枝叶中总黄酮的微波提取工艺。方法:在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝叶中总黄酮提取率的主要因素(提取时间、料液比和乙醇体积分数)进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳微波提取工艺条件。结果:南方红豆杉枝叶中总黄酮最佳微波提取工艺为:料液比27.39(V/W),乙醇体积分数61.44%,提取时间15.27min,微波频率1 887MHz。结论:采用响应面法对南方红豆杉中总黄酮的提取条件进行优化,该方法合理可靠,为生产工艺提供理论依据。

乌蕨不同部位总黄酮和元素的分析

[目的]比较乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位总黄酮和元素的含量差异。[方法]采用可见分光光度法测定不同部位总黄酮的含量;采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES法)测定不同部位元素的含量。[结果]乌蕨全草、根、茎、叶等不同部位总黄酮含量分别11.89%、4.47%、3.46%和11.75%,不同药用部位元素的含量存在一定的差异。[结论]乌蕨含有丰富的黄酮类化合物和多种元素,具开发价值。

HPLC同时测定参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的研究

[目的]建立参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量测定方法。[方法]采用Hypersil BDS C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,柱温25℃,流动相为甲醇、0.1%三乙胺,梯度洗脱,流速：1.0mL.min-1,检测波长237nm。[结果]新乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.49%,相对标准偏差（RSD）为2.31%;乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.88%,RSD为1.57%;次乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.67%,RSD为1.75%。[结论]该方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于同时测定参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,为参附汤的质量控制提供依据。

HPLC分析比较不同产地郁金姜黄素的化学组分

目的:对不同产地郁金炮制品及其生品、茎叶中姜黄素类成分含量上的差异进行比较分析,以期为浙产温郁金建立起科学合理的质量评价方法。方法:采用HPLC法测定不同产地郁金炮制品及其茎叶、生品中的姜黄素含量。结果:茎叶样品中四川产黄丝郁金的姜黄素含量最高,温郁金中含有的姜黄素量比黄丝郁金少得多;从部位来看,茎叶的姜黄素含量比块根要略高,而生品要比炮制品略高。结论:不同品种、产地及加工方法的郁金炮制品、生品及其茎叶中姜黄素含量存在较大的差异。经优选色谱条件建立的HPLC法可以简便、准确地测定姜黄素类成分含量,为控制和评价浙江道地药材温郁金的质量提供科学依据。