目的研究乙酰胆碱途径药物对Ha Ca T细胞黏附功能的影响及其作用机制。方法培养Ha Ca T细胞至融合状态后,分别加入适当浓度的乙酰胆碱途径药物(M受体抑制剂阿托品,N受体抑制剂筒箭毒碱,乙酰胆碱受体激动剂卡巴胆碱),用细胞黏附检测方法...目的研究乙酰胆碱途径药物对Ha Ca T细胞黏附功能的影响及其作用机制。方法培养Ha Ca T细胞至融合状态后,分别加入适当浓度的乙酰胆碱途径药物(M受体抑制剂阿托品,N受体抑制剂筒箭毒碱,乙酰胆碱受体激动剂卡巴胆碱),用细胞黏附检测方法检测细胞黏附的变化情况,结果以细胞碎片数表示;分别用Triton X-100和RIPA裂解细胞,得到胞浆蛋白和总蛋白,用蛋白免疫印迹测定细胞表面与黏附相关的蛋白桥粒芯蛋白1、桥粒芯蛋白3、桥斑珠蛋白、E-钙黏素的变化;用定量多聚酶链反应(q PCR)检测上述细胞表面蛋白在mRNA水平的变化。结果对照组、阿托品、筒箭毒碱、卡巴胆碱作用后细胞碎片数目分别为6.33±1.15,35.00±2.65,6.33±1.53,6.00±1.00;阿托品在蛋白质和mRNA水平减少桥粒芯蛋白3表达,并使桥粒芯蛋白3从胞膜脱离,卡巴胆碱可增加桥粒芯蛋白1、桥粒芯蛋白3、桥斑珠蛋白表达,并促使桥粒芯蛋白1、桥斑珠蛋白黏附于胞膜。筒箭毒碱对各种细胞表面蛋白均无明显影响。结论 Ha Ca T细胞表面的乙酰胆碱受体可以调节细胞间黏附分子,尤其是桥粒分子的表达,并影响这些分子在细胞膜上的稳定性,从而介导细胞间黏附,这种作用主要通过M受体实现。展开更多
目的探讨IL-1β对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblast,HDF)的细胞抑制率、促血管生成因子和炎症因子分泌的影响。方法 CCK8法检测不同浓度IL-1β对HDF的细胞抑制率,ELISA法检测3,10ng/m L IL-1β处理HDF24h后上清中血管内皮生长...目的探讨IL-1β对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblast,HDF)的细胞抑制率、促血管生成因子和炎症因子分泌的影响。方法 CCK8法检测不同浓度IL-1β对HDF的细胞抑制率,ELISA法检测3,10ng/m L IL-1β处理HDF24h后上清中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、IL-6的表达。结果 0.3、1、3、10ng/m L IL-1β对HDF的抑制率分别为(1.22±0.78)%,(3.72±1.21)%,(9.10±2.60)%,(14.42±3.36)%。3、10ng/m L IL-1β作用于HDF 24h后,两组上清的VEGF、FGF水平较空白对照组均升高(FGF P<0.05,VEGF P<0.01),3,10ng/ml IL-1β两个浓度组间无统计学差异。3、10ng/m L IL-1β两组HDF上清中IL-6浓度较空白对照组均增加(P<0.05,P<0.001),且10ng/m L IL-1β组较3ng/m L组IL-6浓度更高,有统计学差异(P<0.001)。结论 IL-1β可促进HDF分泌VEGF、FGF和IL-6,提示IL-1β可能通过促进成纤维细胞分泌促血管生成和炎症因子,进而促进肿瘤生成、浸润和转移。展开更多
老年皮肤生理特征的改变包括形态学的变化:表皮变薄、表皮更替时间延长、真表皮交界变平,真表皮间角质形成细胞黏附下降,黑素细胞的分布改变、朗格汉斯细胞数量也随之减少,真皮胶原合成降低、弹力纤维降解。更重要的是生理功能也发生改...老年皮肤生理特征的改变包括形态学的变化:表皮变薄、表皮更替时间延长、真表皮交界变平,真表皮间角质形成细胞黏附下降,黑素细胞的分布改变、朗格汉斯细胞数量也随之减少,真皮胶原合成降低、弹力纤维降解。更重要的是生理功能也发生改变,主要是表皮通透性屏障功能的变化,包括表皮通透性屏障功能恢复减慢,透皮失水(transepidermal water loss,TEWL)降低,角质层含水量降低,及表皮pH增高。因此,导致了老年皮肤科门诊临床最常见的干燥症与瘙痒的发生,且这些改变均能导致持续轻微的炎症继而可能导致系统炎症及疾病的发生,具有重要临床意义。展开更多
文摘目的研究乙酰胆碱途径药物对Ha Ca T细胞黏附功能的影响及其作用机制。方法培养Ha Ca T细胞至融合状态后,分别加入适当浓度的乙酰胆碱途径药物(M受体抑制剂阿托品,N受体抑制剂筒箭毒碱,乙酰胆碱受体激动剂卡巴胆碱),用细胞黏附检测方法检测细胞黏附的变化情况,结果以细胞碎片数表示;分别用Triton X-100和RIPA裂解细胞,得到胞浆蛋白和总蛋白,用蛋白免疫印迹测定细胞表面与黏附相关的蛋白桥粒芯蛋白1、桥粒芯蛋白3、桥斑珠蛋白、E-钙黏素的变化;用定量多聚酶链反应(q PCR)检测上述细胞表面蛋白在mRNA水平的变化。结果对照组、阿托品、筒箭毒碱、卡巴胆碱作用后细胞碎片数目分别为6.33±1.15,35.00±2.65,6.33±1.53,6.00±1.00;阿托品在蛋白质和mRNA水平减少桥粒芯蛋白3表达,并使桥粒芯蛋白3从胞膜脱离,卡巴胆碱可增加桥粒芯蛋白1、桥粒芯蛋白3、桥斑珠蛋白表达,并促使桥粒芯蛋白1、桥斑珠蛋白黏附于胞膜。筒箭毒碱对各种细胞表面蛋白均无明显影响。结论 Ha Ca T细胞表面的乙酰胆碱受体可以调节细胞间黏附分子,尤其是桥粒分子的表达,并影响这些分子在细胞膜上的稳定性,从而介导细胞间黏附,这种作用主要通过M受体实现。
文摘目的探讨IL-1β对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblast,HDF)的细胞抑制率、促血管生成因子和炎症因子分泌的影响。方法 CCK8法检测不同浓度IL-1β对HDF的细胞抑制率,ELISA法检测3,10ng/m L IL-1β处理HDF24h后上清中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、IL-6的表达。结果 0.3、1、3、10ng/m L IL-1β对HDF的抑制率分别为(1.22±0.78)%,(3.72±1.21)%,(9.10±2.60)%,(14.42±3.36)%。3、10ng/m L IL-1β作用于HDF 24h后,两组上清的VEGF、FGF水平较空白对照组均升高(FGF P<0.05,VEGF P<0.01),3,10ng/ml IL-1β两个浓度组间无统计学差异。3、10ng/m L IL-1β两组HDF上清中IL-6浓度较空白对照组均增加(P<0.05,P<0.001),且10ng/m L IL-1β组较3ng/m L组IL-6浓度更高,有统计学差异(P<0.001)。结论 IL-1β可促进HDF分泌VEGF、FGF和IL-6,提示IL-1β可能通过促进成纤维细胞分泌促血管生成和炎症因子,进而促进肿瘤生成、浸润和转移。
文摘老年皮肤生理特征的改变包括形态学的变化:表皮变薄、表皮更替时间延长、真表皮交界变平,真表皮间角质形成细胞黏附下降,黑素细胞的分布改变、朗格汉斯细胞数量也随之减少,真皮胶原合成降低、弹力纤维降解。更重要的是生理功能也发生改变,主要是表皮通透性屏障功能的变化,包括表皮通透性屏障功能恢复减慢,透皮失水(transepidermal water loss,TEWL)降低,角质层含水量降低,及表皮pH增高。因此,导致了老年皮肤科门诊临床最常见的干燥症与瘙痒的发生,且这些改变均能导致持续轻微的炎症继而可能导致系统炎症及疾病的发生,具有重要临床意义。