青藤碱对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MyD88、TRAF-6表达的影响

目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)增生导致RA软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形的作用机制。方法:体外培养RA-FLS细胞,分为对照组与(0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)SIN组,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测0.5 mmol/L SIN组的细胞增殖率;荧光定量PCR法测定对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6基因表达;Western blot法检测对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6蛋白表达。结果:SIN各组ALP活性均低于对照组,其中以0.5 mmol/L SIN组的ALP活性为最低(P<0.01)。CCK-8法检测,0.5 mmol/L SIN组RA-FLS细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01),SIN诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期,之后细胞的增殖率开始下降。荧光定量PCR和Western blot法检测,0.5 mmol/L SIN组的My D88和TRAF-6基因及蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:SIN通过对TLR信号转导通路的影响有效地抑制RA-FLS细胞内My D88和TRAF-6的表达,这可能是其治疗RA防止软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形发生的重要分子机制之一。

鹿茸多肽对人骨髓间充质干细胞BMP-2和Runx2表达的影响

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中骨形态发生蛋白2(BMP-2)和骨特异性转录因子2(Runx2)基因和蛋白表达的影响,阐明其对骨合成及hBMSCs向成骨细胞方向分化的作用机制。方法:体外培养的hBMSCs分为对照组和5、10、15、20g·L-1 VAP组,通过检测各组hBMSCs中碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测对照组和10g·L-1 VAP组hBMSCs增殖情况;荧光定量PCR法与Western blotting法测定对照组和10g·L-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因与蛋白的表达。结果:VAP各组细胞中ALP活性均高于对照组,其中以10g·L-1 VAP组细胞中ALP活性最高(P<0.01);CCK-8法,10g·L-1 VAP组hBMSCs增殖率明显高于对照组(P<0.05),VAP诱导培养第9天hBMSCs增殖率最高,且进入平台期,之后hBMSCs的增殖率开始下降;荧光定量PCR和Western blotting检测,10g·L-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因及蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VAP能够提高hBMSCs中ALP活性,促进hBMSCs增殖分化,上调hBMSCs中BMP-2及其下游Runx2基因和蛋白的表达,这可能是VAP对hBMSCs骨形成及骨代谢影响的分子调控机制之一。

人参皂苷Re对UVC辐射损伤细胞的保护作用

目的:研究人参皂苷Re对短波紫外线(UVC)辐射损伤人胚胎纤维芽细胞RSa的保护作用,探讨人参皂苷Re抗UVC辐射的作用机制。方法:采用不同强度的UVC辐射RSa细胞,在辐射前后给予50mg.L-1的人参皂苷Re(UVC+Re组),同时设UVC模型组和UVC+Rg1组,利用MTT法检测细胞生存率,采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡情况;酶生化法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性,集落形成分析法检测SOD抑制剂作用细胞后细胞的生存率。结果:MTT法,与UVC模型组比较,UVC+Re和UVC+Rg1组细胞生存率比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。FCM,不同剂量(5、10和15J.m-2)的UVC辐射可引起RSa细胞早期的凋亡,UVC+Re组细胞凋亡率小于UVC模型组。细胞周期检测,UVC辐射可导致G2期细胞百分比增加(P<0.01),UVC+Re组G2期细胞百分比例明显小于UVC模型组(P<0.01)。UVC+Re组SOD活性明显高于UVC模型组(P<0.01)。结论:人参皂苷Re有较好的抗UVC效果,能够有效提高RSa细胞的生存率,减少UVC辐射引起的细胞早期凋亡,增加RSa细胞内SOD活性。

雷公藤多苷对强直性脊柱炎患者成纤维细胞中BMP-2表达的影响

目的:探讨雷公藤多苷(LGTDG)对骨形态发生蛋白(BMP)信号转导通路及BMP-2表达的影响,阐明LGTDG抗强直性脊柱炎(AS)骨化的作用机制。方法:体外培养的AS成纤维细胞分为对照组与0.5、1.0、1.5和2.0 mg·L-1给药组,检测各组细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性及最佳药物浓度;CCK-8法检测1.0mg·L-1给药组的细胞增殖率;生化检测法定量检测对照组与1.0 mg·L-1给药组BMP-2表达水平;Western blotting法检测对照组与1.0mg·L-1给药组BMP-2和Cbfal蛋白表达。结果:各给药组细胞中ALP活性均低于对照组,其中以1.0mg·L-1给药组细胞的ALP活性为最低(P<0.01)。CCK-8法检测,1.0mg·L-1给药组AS成纤维细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01),LDTDG诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期后细胞的增殖率开始下降。生化检测法和Western blotting法检测,1.0mg·L-1给药组BMP-2的蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。结论:LGTDG通过对BMP信号转导通路的影响有效地抑制AS成纤维细胞内BMP-2表达,延缓细胞向成骨型分化导致AS骨化发生。

葛根素对人肾近曲小管上皮细胞ABCG2表达影响

目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对HK2细胞的影响;检测ALP活性,观察HK2细胞内酶促反应状态;荧光定量PCR法、Western blotting法检测对照组与给药组HK2细胞内ABCG2基因蛋白表达。结果葛根素对HK2细胞有促进增殖作用(P<0.05);100 mg/L葛根素组ALP活性最佳(P<0.01)。荧光定量PCR和Western blotting法检测结果显示,葛根素组HK2细胞内ABCG2基因及蛋白表达明显高于对照组,其中100 mg/L葛根素组HK2细胞内ABCG2最为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素能够增加HK2细胞内ABCG2基因蛋白的表达,这可能是葛根素调节痛风患者血尿酸水平的重要分子机制之一。

人参、黄芩仿生化提取物对UVB照射HaCaT细胞HIF-1α表达的影响

目的探讨人参、黄芩仿生化提取物(SQBE)对中波紫外线(UVB)照射人永生化角质形成细胞(Ha Ca T)缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响,阐明SQBE预防UVB辐射所致皮肤癌发生的可能作用机制。方法将对数生长期的Ha Ca T细胞,接种于含有10%胎牛血清DMEM培养基的培养皿中,于37℃、5%CO2的细胞培养箱内常规培养;分为对照组和SQBE 1组(终浓度为12.5μg·ml-1的SQBE)、SQBE 2组(终浓度为25.0μg·ml-1的SQBE)、SQBE 3组(终浓度为50.0μg·ml-1的SQBE),各组在给药4 h后与对照组同时进行UVB(0、20、40、60 m J·cm-2)照射;继续培养24 h后,采用MTT法检测细胞生存率,荧光定量PCR法及Western blotting法检测HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白的表达。结果与对照组相同照射剂量比较,SQBE 3组的细胞生存率明显提高(P<0.05),SQBE1组和SQBE 2组差异无统计学意义(P>0.05);SQBE 3组能够有效降低细胞内HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白的表达。结论大剂量人参、黄芩仿生化提取物(SQBE)可通过对细胞内HIF-1α表达的影响,预防UVB辐射导致的皮肤癌发生。

人参三醇组皂苷对UVC照射引起的RSa细胞损伤保护作用的研究

目的研究人参三醇组皂苷对短波紫外线(UVC)损伤人胚胎纤维芽细胞(RSa)的保护作用,筛选具有显著抗辐射功能的皂苷单体。方法采用MTT法检测细胞生存率,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况,酶生化法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果强度为5 J/m2、10 J/m2、15 J/m2的UVC照射,可造成体外培养的RSa细胞增值率逐级下降、细胞内SOD活性逐级降低;在照射前后给予50μg/ml浓度的人参三醇组皂苷,能够提高细胞增殖活力,增加细胞内SOD的活性,人参皂苷Re可显著改善15 J/m2UVC照射RSa细胞的生存率(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示,5 J/m2UVC照射,可引起RSa细胞早期的凋亡,人参三醇组皂苷组的细胞凋亡率明显小于UVC模型组(P<0.01)。结论人参三醇组皂苷对UVC照射引起细胞的损伤,具有一定的保护作用,其机制可能与它的抗氧化、增强细胞生存活力有关,其中人参皂苷Re的抗辐射活性优于其它三醇组皂苷。

黄瓜子不同炮制品中化学成分的对比

目的通过对黄瓜子不同炮制品中化学成分的对比分析,研究不同炮制方法对黄瓜子中化学成分的影响。方法分别用清炒法和微波炮制法对黄瓜子进行炮制,比较炮制品和生品中钙磷比、氨基酸及脂肪油含量的异同。结果黄瓜子生品钙磷比为2.79∶1,黄瓜子清炒品钙磷比为2.45∶1,黄瓜子微波制品钙磷比为2.26∶1;黄瓜子微波制品的氨基酸含量及脂肪油含量高于清炒品和生品。结论用微波法对黄瓜子进行炮制可提高黄瓜子的利用率。

参芩仿生化提取物对中波紫外线照射致生物体损伤的保护作用

目的通过人参、黄芩仿生化提取物,对中波紫外线(UVB)照射致人永生化角质形成细胞(HaCaT)及小鼠皮肤损伤的保护作用进行研究,为中药抗辐射提供理论依据。方法采用MTT法检测HaCaT细胞生存率,黄嘌呤氧化酶法检测细胞溶解液中及小鼠皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞溶解液中及小鼠皮肤组织匀浆中丙二醛(MDA)含量变化。结果参芩仿生化提取物能够显著提高UVB照射损伤细胞的活性,明显升高细胞溶解液及小鼠皮肤组织匀浆中SOD活力,降低MDA含量。结论参芩仿生化提取物对UVB辐射致HaCaT细胞和小鼠皮肤损伤均有明显的保护作用,能够有效的抵抗UVB所致的氧化损伤。

正常国人骨盆易损部位(或危险点)应力应变分布的实验研究

报道了模拟正常国人双肢站立位，骨盆在承受体重（300牛顿、600牛顿和900牛顿静载荷）时，用应变电测法得到的应力、应变分布、以及各测点的实测线应变，并计算出骨盆在不同载荷下各测点的最大最小应变值。数据通过电子计算机处理，得出主应力σ1、σ2和主应力方向角度。

参芩抗辐射凝胶抗UVB辐射作用研究

目的研究参芩抗辐射凝胶(SQ)对UVB照射所致小鼠皮肤及免疫系统损伤的保护作用。方法采用SQ处置、UVB照射小鼠后,观察其对小鼠脏器指数,皮肤组织形态学,血液中白细胞、血小板等改变;应用MTT法检测脾淋巴细胞转化率,醇生化法检测皮肤匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果 SQ能够增加小鼠胸腺指数及白细胞计数,提高小鼠淋巴细胞转化率及小鼠皮肤组织中SOD活性。结论 SQ能够抵御UVB照射及对小鼠免疫系统、皮肤组织有明显的保护作用。

人参皂苷Rg3对UVB致抑郁模型大鼠行为学的影响

目的探究人参皂苷Rg3对UVB致抑郁模型大鼠行为学的影响。方法采用体外单胺氧化酶试验对人参皂苷Rg3、Rb1、Rc、Re、Rf、Rg1、Rh2进行抗抑郁作用筛选。将SD大鼠随机分成空白组、UVB模型组及人参皂苷Rg3低、高剂量组(40.0、80.0 mg/kg)。建立UVB辐射大鼠抑郁模型,给药组连续给药21 d,空白组及UVB模型组每日给予等量生理盐水。通过糖水偏好和强迫游泳实验观察大鼠抑郁行为,ELISA法测定血清5-HT及皮质酮水平。结果人参皂苷Rg3对单胺氧化酶A有较好的抑制效果,可以有效阻断单胺氧化酶A和底物结合,其IC 50值为3.094μmol/mL。与模型组比较,人参皂苷Rg3低、高剂量组糖水偏好率增加(P<0.01);强迫游泳实验中大鼠不动时间缩短(P<0.01);大鼠血清中5-HT水平升高(P<0.01),血清中皮质酮水平降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3具有较好的抗抑郁作用,可以明显改善UVB辐射导致的大鼠抑郁行为,其机制可能与对5-HT及皮质酮的调节有关。

黄瓜籽乙酸乙酯提取物对人成骨肉瘤细胞骨形态发生蛋白-2的影响

目的通过测定骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达,探讨黄瓜籽乙酸乙酯提取物(CSA)对人成骨肉瘤(MG63)细胞的活性的影响。方法采用体外培养MG63细胞,给予CSA与MG6置于37 e,5%CO2饱和湿度培养箱中共同孵育48 h,MTT比色法检测黄瓜籽提取物对细胞活性的影响;生化法检测ALP含量,ELISA法定量检测BMP-2的含量;免疫组化法测定BMP-2表达。结果 MTT法,CSA具有明显促进MG63细胞活力(P<0101);免疫组织化学染色法,CSA细胞中的BMP-2的表达量明显高于空白组;CSA组ALP和BMP-2含量高于空白组(P<0101)。结论 CSA对MG63具有保护作用,能够有效的提高MG63细胞的生存率,其机制可能与促进BMP-2表达、升高ALP和BMP-2的含量有关。

综合治疗急性腰扭伤48例

急性腰扭伤是临床常见病，对其治疗方法很多，但治疗不当或失治，可形成慢性腰肌劳损，时轻时重，缠绵不愈。笔者采用“一针三搬一牵法”，治疗急性腰扭伤48例，疗效满意。报道如下：

通筋正骨胶囊与玻璃酸钠联合治疗膝痹

目的观察通筋正骨胶囊与玻璃酸钠联合应用治疗中重度膝痹(肝肾亏损型)的临床疗效。方法将近两年收治的60例中重度膝痹(肝肾亏损型)患者随机分为对照组和治疗组,各30例。对照组给予关节腔内注射玻璃酸钠;治疗组口服通筋正骨胶囊,关节腔内注射玻璃酸钠;5周为1个疗程,观察2组患者临床疗效。治疗前后采用膝关节视觉模拟评分法(VAS)、西安大略和麦马斯特大学骨关节炎指数可视化量表(WOMAC)及总体疗效进行评定。结果治疗后膝骨关节炎患者VAS、WOMAC评分显著降低,且治疗组低于对照组,具有统计学意义(P<0.05);治疗组总有效率为80%,明显优于对照组的53.33%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论通筋正骨胶囊与玻璃酸钠内外联合治疗中重度膝骨关节炎,在改善患者临床症状、减轻关节疼痛、改善关节功能。

中西医内外联合治疗中重度膝骨关节炎临床观察

目的：观察口服通筋正骨胶囊与局部注射玻璃酸钠联合治疗中重度膝骨关节炎的临床疗效。方法：将近2年收治的70例中重度膝骨关节炎患者随机分为对照组和观察组，每组35例。对照组给予关节腔内注射玻璃酸钠；观察组口服通筋正骨胶囊，关节腔内注射玻璃酸钠；5周为1个疗程，观察2组患者临床疗效。治疗前后采用膝关节视觉模拟评分法（VAS）、西安大略和麦马斯特大学骨关节炎指数可视化量表（WOMAC）及总体疗效进行评定。结果：本法治疗后膝骨关节炎患者VAS、WOMAC评分较治疗前显著降低，观察组优于对照组，具有统计学意义（P〈0．05）；观察组患者总有效率为82．86％，明显优于对照组的54．29％，差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：通筋正骨胶囊与玻璃酸钠内外联合治疗中重度膝骨关节炎，在改善患者临床症状、减轻关节疼痛、改善关节功能方面疗效确切，值得临床推广应用。

枸杞多糖对中波紫外线照射HaCaT细胞低氧诱导因子1α、血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的 探讨枸杞多糖对中波紫外线（UVB）照射HaCaT细胞低氧诱导因子1α（HIF？1α）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。方法 将常规培养的HaCaT细胞，分为对照组和枸杞多糖给药组（12.5、25.0、50.0、100.0 μg/ml浓度），各组在给药4 h后同时进行不同强度UVB（0、20、40、60 mJ/cm2）照射，培养24 h。用CCK？8法检测细胞生存率。酶生化法检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）的活性；RT？PCR及Western 印迹检测HIF？1α、VEGF基因及蛋白的表达。结果 对照组同照射剂量比，枸杞多糖（12.5 、25.0 、100.0 μg/ml浓度）各组不同程度提高UVB照射损伤细胞的生存率（P 〈 0.05），以50.0 μg/ml 枸杞多糖组升高最明显，差异有统计意义（P 〈 0.01）。枸杞多糖各给药组SOD活性以50.0 μg/ml SOD活性升高最明显，差异有统计学意义（P 〈 0.01）。随着UVB照射剂量（20、40、60 mJ/cm2）增加，HIF？1α、VEGF基因、蛋白的表达也逐渐增高，与对照组相比，50.0 μg/ml 枸杞多糖给药组能够有效降低细胞内HIF？1α、VEGF基因及蛋白的表达，差异有统计意义（P 〈 0.05）。结论 枸杞多糖通过对HaCaT细胞内HIF？1α、VEGF基因及蛋白表达的影响，可能参与预防UVB照射损伤的过程。

GC-MS分析比较人参花水蒸气与超临界CO2提取物及其脂肪酸成分的研究

目的:对水蒸气蒸馏法(SD法)、超临界CO_2萃取法(SFECD法)提取的人参花挥发性成分进行分析比较,并鉴定人参花中的脂肪酸成分。方法:利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS技术)检测提取物及酸催化的人参花脂肪酸衍生物。色谱条件:采用HP-5ms(30 mm×0.25 mm×0.25μm)石英毛细管柱,载气为氦气,流速为1 m L·min^(-1),汽化室温度280℃,进样方式为分流进样,分流比为50∶1(挥发油)及30∶1(脂肪酸衍生物),进样量为1μL,溶剂延迟时间为3.8 min;检测以SD法提取的挥发油,以SFECD法提取的挥发油,以及脂肪酸衍生物时的柱温采用不同的升温程序。质谱条件:电离源为EI源,电离能量为70 e V,离子源温度230℃,四极杆温度150℃,加速电压1 300 V,质量扫描范围为m/z 50~550。以峰面积归一化法测得挥发油各组分相对百分含量。结果:通过与数据库及文献比对,鉴定出以SD法提取的挥发油中的67种成分,以SFECD法提取的挥发油中的20种成分,以峰面积归一化法计算上述2种提取方法提取的各组分相对百分含量分别占挥发油总流出物峰面积的89.67%及61.84%。水蒸气法提取人参花挥发油组分中含量超过1%的共有11个,全部为萜类;SFECD法提取人参花挥发油流出物中,含量在1%以上的有9个化合物,经酸催化衍生后鉴定出13种脂肪酸,主要为亚油酸、十四甲基-十五酸、亚麻酸,棕榈酸。结论:水蒸气蒸馏法提取的挥发油中低沸点,高挥发性组分含量较多,而超临界CO_2萃取法可萃取出较高的极性、高沸点组分,表明超临界法提取的挥发油分解情况较少,稳定性更好。

仿生化提取人参皂苷类成分的初步研究

目的:对人参中的皂苷类成分进行仿生化提取。方法:以人参超微粉为原料,分别以仿生溶媒和水作为提取溶剂提取人参皂苷类成分。采用紫外-可见分光光度法测定人参总皂苷的含量;高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量之和,并分析色谱图特征;以成分的提取率为指标比较仿生化和水提取法的优劣。结果:仿生化提取人参总皂苷的提取率为61.31%,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总提取率为62.63%;水提取人参总皂苷的提取率为54.26%,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总提取率为43.09%。结论:仿生化提取法对人参总皂苷、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的提取效率高于水提取法,且仿生化提取物色谱图中显示有新成分产生。