社区与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及耐药性比较

目的比较社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的分子分型、毒力基因及耐药基因。方法选取2019年1月至2020年12月绍兴市人民医院收治的34例门诊及住院患者,共分离获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)34株,其中CA-MRSA 7株(占20.6%),HA-MRSA 27株(占79.4%)。采用头孢西丁纸片扩散法进行药敏试验,全基因组测序法进行分子分型[包括葡萄球菌mec盒式染色体(SCCmec)分型、葡萄球菌A蛋白(spa)分型、多位点基因序列类型(MLST)分型]、毒力基因及耐药基因检测。结果CA-MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、利福平、磷霉素、四环素均敏感,对复方新诺明的敏感率为85.7%;HA-MRSA对庆大霉素、利福平、复方新诺明、四环素的敏感率均在80%以上。两种不同来源菌株对各种常用抗菌药物敏感率以及SCCmec、spa、MLST分型比例比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。CA-MRSA的lukF-PV、lukS-PV检出率均明显高于HA-MRSA菌株(均P<0.05),sea检出率明显低于CA-MRSA菌株(P<0.05)。HA-MRSA的环丙沙星耐药基因gyrA检出率明显高于CA-MRSA菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。CA-MRSA同时携带1~6种抗菌药物耐药基因,头孢西丁-青霉素-克林霉素-红霉素为优势耐药谱;HA-MRSA同时携带1~9种抗菌药物耐药基因,头孢西丁-青霉素-克林霉素-红霉素、阿米卡星-妥布霉素-头孢西丁-青霉素-环丙沙星-克林霉素-红霉素和庆大霉素-阿米卡星-妥布霉素-头孢西丁-青霉素-环丙沙星-四环素-克林霉素-红霉素为优势耐药谱。结论本院CA-MRSA分离率较高,其携带毒力基因lukF-PV、lukS-PV的比例高于HA-MRSA。

不同树形桃树冠层光照分布对果实产量和品质的影响

以主干形、30°双株V字形和60°双株V字形3种树形的‘燕红’桃树为试材,采用以树干为中心用竹竿将树冠分成不同层次、方位的50 cm×50 cm×50 cm的立方体的方法,同时按冠层高度将树冠分为下部、中部和上部,研究了6—8月不同树形的冠层光照分布的动态变化,并于果实成熟期测定了各树形的产量及果实品质,以期更加全面了解不同树形的冠层光照分布,为生产中桃树树形选择提供参考依据。结果表明:在果实生长的关键时期,主干形树形冠层相对光照强度在30%~80%的范围内所占比例最高;对于同一树形,相对光照强度小于30%的光照强度所占比例随着垂直高度的增加呈递减趋势,大于80%的光照强度随高度增加呈递增趋势;3种树形的果实产量主要分布于冠层的中部和上部,主干形各部位果实产量高于其他2种树形;各树形果实品质随着树体高度的降低而降低,且各部位之间存在显著性差异,这与各部位的光照强度变化趋势大体一致;主干形各部位果实品质优于其他2种树形。对于单干形‘燕红’桃树品种,主干形‘燕红’桃树在冠层有效光分布、果实产量以及品质上均优于30°和60°双株V字形,且树势健壮,冠层光照分布合理,可作为适宜树形进行示范推广应用。

不同方法测定桃树抗寒性关系研究

以生产中抗寒性表现较强、中等、较弱的3个桃品种为试材,应用电解质渗透法(EL)和电阻抗图谱法(EIS)研究了不同时期枝条抗寒性和未经冷冻处理枝条EIS参数的变化,并对未经冷冻处理枝条EIS参数、冷冻处理枝条EIS参数测定的半致死温度与EL测定的半致死温度的关系进行了统计分析。结果表明:未经冷冻处理3个桃品种的胞外电阻率(r_e)和胞内电阻率(r_i)均随着外界温度的降低而升高,随着外界温度的升高而降低;弛豫时间(τ)与r_(e)、r_(i)变化趋势相反;通过对4个电阻抗参数与EL测定的半致死温度统计分析得出,EIS(r_(i))是最佳参数,其相关系数为-0.828,通径系数为-7.385,线性回归方程为y=-4.063 9x+4.333 8,R^(2)=0.686。EL和EIS参数法测定3个桃品种的抗寒性与生产上抗寒性强弱表现一致;通过对2种方法统计分析得出,EL与EIS 4个参数法测定抗寒性均呈极显著正相关,其中弛豫时间法相关系数、通径系数和决定系数均最高,因此,弛豫时间是预测冷冻处理桃树枝条抗寒性的适宜参数。

酸枣新品种“长丰”的选育

“长丰”酸枣是从辽宁省朝阳地区众多野生酸枣中经过结实丰产性、特异性、稳定性、一致性及抗逆性等综合评价选育而成。果实圆柱形,熟时浅红色,硬质者深红色至暗红色,平均纵径20.40 cm,平均横径16.21 cm,果味甜酸,平均单果质量2.87 g,可食率92.00%,可溶性固形物含量32.00%,总酸含量3.48%,总糖含量28.32%。平均单核质量0.23 g、平均纵径10.38 mm、平均横径6.84 mm,平均单仁质量0.047 g。出仁率20.91%,双仁率28.00%,药食兼用。“长丰”酸枣平均果实产量为普通酸枣的2倍。

Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡对金黄色葡萄球菌体外药敏、耐药表型及AES修正能力评估

目的评估Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡(简称中国定制卡)测定金黄色葡萄球菌体外药敏、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、红霉素诱导克林霉素耐药试验及高级专家系统(AES)的修正能力。方法选取2020年5月至2021年9月绍兴市人民医院临床分离的非重复金黄色葡萄球菌100株,分别采用中国定制卡及微量肉汤稀释法测定万古霉素、替考拉宁、替加环素、利奈唑胺、达托霉素、苯唑西林、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方新诺明和利福平的敏感性。分别以微量肉汤稀释法、PCR和D试验为参考方法,评估中国定制卡的可靠性,并对AES修正能力进行评估。结果中国定制卡对金黄色葡萄球菌体外药敏分类一致性(CA)为95.38%,极大错误(VME)、大错误(ME)、小错误(MIE)分别为0.31%、3.77%、0.54%,其中万古霉素、替考拉宁、替加环素、利奈唑烷、达托霉素CA均为100.00%,苯唑西林、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方新诺明、利福平、MRSA、红霉素诱导克林霉素耐药试验的CA分别为95.00%、95.00%、66.00%、94.00%、98.00%、97.00%、98.00%、97.00%。左氧氟沙星、复方新诺明和利福平均出现了2.00%的ME,红霉素、MRSA、红霉素诱导克林霉素耐药试验出现了1.00%、2.00%、1.00%的VME。AES将4株苯唑西林敏感菌株和28株克林霉素敏感菌株修正为耐药,虽然均消除了1.00%的VME,但均增加了ME(分别为5.00%、34.00%)。PCR和D试验证实,被修正的4株苯唑西林敏感菌株均携带mecA基因,即与AES修正相符;被修正的28株克林霉素敏感菌株中26株D试验阳性,即AES存在7.14%(2/28)的错误修正率。结论中国定制卡对金黄色葡萄球菌体外药敏、MRSA表型、红霉素诱导克林霉素耐药试验的筛选有较高的准确性,AES对苯唑西林、克林霉素的修正结果可以有效的避免抗菌药物的错误选择,可靠性好,但也存在一定的错误率和局限性,应予以关注。

高寒地区菊芋青贮物料耐低温乳酸菌的筛选与鉴定

为筛选可提升高寒地区菊芋(Helianthus tuberosus)青贮发酵品质的耐低温乳酸菌,本研究以‘青芋2号’菊芋青贮物料为材料,利用平板培养法分离乳酸菌株,分析菌株生理生化特性,并通过16S rRNA测序进行菌株种属鉴定。结果表明,菊芋青贮物料中共分离得到34株乳酸菌株,经低温及生理生化筛选获得13株耐低温乳酸菌株,包括11株同型发酵乳酸菌和2株异型发酵乳酸菌,其耐酸性和耐盐性均较强;经产酸和生长能力对比,GN02菌株生长最快(OD=2.63),GN10菌株具有更强的产酸能力(pH=3.59),XN25菌株兼具较强的生长和产酸能力;16S rRNA测序鉴定出9株植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)、1株戊糖乳杆菌(Lactiplantibacillus pentosus)、1株棒状乳杆菌(Lactiplantibacillus coryniformis)、1株短乳杆菌(Lactiplantibacillus brevis)及1株无法鉴定。本研究筛选出适合高寒地区菊芋青贮发酵的耐低温植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、短乳杆菌各1株。

菊苣肉质根膨大与其生理及基因表达变化初步研究

初步探究菊苣肉质根膨大发育进程的农艺性状、生理指标和基因表达变化,以期进一步探讨肉质根发育的生理和分子调控机理。以盆栽根用菊苣‘Hera’和叶用菊苣‘将军’为材料,获取8个不同发育时期的肉质根样品,对糖和内源激素进行定量分析,并对转录因子基因进行qPCR表达量分析。结果表明,根用菊苣根径、根干质量、根冠比和根库活性均大于叶用菊苣。‘Hera’肉质根果糖、葡萄糖和蔗糖含量分别在S2、S3和S4时期最高,且葡萄糖、果糖含量在各时期均高于‘将军’。‘Hera’肉质根生长素IAA、细胞分裂素CTK和赤霉素GA含量均呈现膨大前期高、中期低、后期较高的态势,转录因子基因CiMYB73、CiERF13、CiNAC017、CibZIP53均在S2时期(播种后38 d)呈现高表达。根用菊苣与叶用菊苣农艺性状差异显著,糖和激素可能协同作用于肉质根的膨大发育,播种后38 d可能为菊苣肉质根膨大发育的关键时期。研究结果对后续菊苣肉质根的遗传调控研究、基因工程改良等有一定的参考价值。

经鼻蝶入路神经内镜手术治疗症状性Rathke囊肿的疗效分析

目的探讨症状性Rathke囊肿的临床特征及经鼻蝶入路神经内镜手术治疗的疗效。方法回顾性分析2016年8月至2021年8月神经内镜手术治疗的53例症状性RCCs的临床资料。结果头痛、头晕44例,视觉诱发电位异常43例,视力下降27例,视野缺损23例,垂体激素功能紊乱29例。MRI显示囊肿最大直径10~38 mm,平均(15.2±0.8)mm;其中≤15 mm有36例,>15mm有17例;囊肿主体位于鞍内25例,鞍内-鞍上28例。囊肿全切除30例,大部分切除或仅行囊肿开窗引流23例。术后发生电解质紊乱25例,垂体功能低下14例,颅神经损伤7例,脑脊液鼻漏4例。出院后随访3~60个月,平均(13.5±5.6)个月;复发6例(11.3%),复发时间13~52个月,平均(21.5±4.9)月;2例再次手术治疗,4例随访观察。结论症状性RCCs的临床表现多种多样且缺乏特异性,MRI是术前评估的主要方法。经鼻蝶入路神经内镜手术治疗的疗效良好。

不同植物伴生对辣椒生长和根际土壤养分的影响

【目的】明确伴生栽培对辣椒的作用,为辣椒伴生栽培提供理论依据。【方法】以乐都长辣椒为试验材料,设置小麦伴生辣椒(X)、韭菜伴生辣椒(J)、蒜伴生辣椒(S)、葱伴生辣椒(C)、辣椒单作(CK)5个栽培处理,分析不同伴生条件下辣椒的生长发育、品质产量及土壤养分的变化。【结果】S处理可显著促进辣椒株高、茎粗的生长;与CK相比,所有伴生处理均降低了辣椒植株的干物质积累,其中以S处理降幅最小且根系活力最高。从辣椒果实品质方面看,不同的伴生栽培对辣椒果实品质的影响存在差异,其中X和C伴生处理增加了辣椒果实可溶性糖的含量;所有伴生处理均显著提高了辣椒果实VC的含量;S处理显著提高了辣椒果实可溶性蛋白质的含量。从辣椒产量方面看,J、S、C伴生处理均显著增加了辣椒单株产量。从根际土壤看,S、C伴生处理显著增加了辣椒根际土壤全氮、全磷、速效钾含量,X伴生处理显著增加了辣椒根际土壤碱解氮、速效磷含量,且所有伴生处理均降低了根际土壤pH。通过主成分分析选取了11个较大特征向量指标,对这11个指标进行隶属函数综合分析,综合排名为S>C>X>CK>J。【结论】蒜伴生能较为全面的促进辣椒生长,改善辣椒根际环境。

酸枣种子性状及生物活性成分综合评价与分析

为深入发掘辽西地区酸枣种质资源,筛选具有重要应用潜力的资源类型,本试验以4个优良酸枣为研究对象,测定种子的横径、纵径、百粒重、总皂苷、生物碱、黄酮、脂肪酸等14个主要性状及生物活性成分,并利用相关性分析及隶属函数法对其进行综合评价。结果表明,参试的4个酸枣品种中,优系2的出仁率最高,达23.15%,优系1虽然种核最大、重量最高,但出仁率最低,仅10.02%,4个酸枣品种种子均有双仁现象。优系2的总糖、黄酮、总酚含量最高,优系1的总皂苷含量最高,优系3的总生物碱含量最高,优系4的粗脂肪含量最高。平均隶属函数值依次为:优系2>优系1>优系3>优系4。14个指标变异系数在4%~46%之间,总糖、总酚的变异系数小于10%,生物碱、总皂苷、核百粒重、双仁率、黄酮、出仁率的变异系数较大。种核横径、种核纵径、两径均值、核型指数、核百粒重、仁百粒重、总皂苷之间呈极显著或显著正相关。经隶属函数法确定综合得分从高到低依次是优系2、优系1、优系3、优系4。

基于SSR标记的文冠果遗传多样性分析及指纹图谱构建

【目的】为快速鉴定和利用文冠果种质资源,探明文冠果种质亲缘关系。【方法】从20对SSR引物筛选得到11对条带清晰、多态性好的引物,对29个文冠果品种(系)进行分析,采用荧光毛细管电泳技术进行多态检测,通过邻接法进行聚类分析,利用数字和字母赋值编码构建分子身份证。【结果】共检测到66个等位基因(Na),每对引物检测到3-10个Na。Shannon信息指数(I)变化范围介于0.349-1.723之间,平均值为1.16。不同引物揭示的多态信息含量(PIC)变幅介于0.276-0.841,平均为0.66。观测杂合度(Ho)变幅为0.137-0.958,平均值为0.739;期望杂合度(He)变幅为0.187-0.79,平均值为0.648;在11个位点中,有7个位点的平均观测杂合度大于平均期望杂合度。遗传相似系数变化范围为0-1,平均为0.31,遗传相似系数在0.6以上的有15个,仅占全部数据的5.17%。邻接法聚类分析结果显示,在遗传距离为0.42时,可将29份文冠果种质分为三大类群。构建了0/1形式的指纹数据库和分子身份证,除个别品种外均具有唯一性,可用于品种鉴定。【结论】29份文冠果种质资源的遗传多样性相对较高,但也存在一定的近交现象。利用SSR标记构建文冠果分子身份证操作简便可行,可为文冠果品种真伪鉴定、权益保护、身份识别、溯源管理及新品种选育提供技术支撑和科学依据。

消瘀化石汤联合体外冲击波碎石术对输尿管结石患者结石排出和血清炎症因子的影响

目的 探讨消瘀化石汤联合体外冲击波碎石术对输尿管结石患者结石排出和血清炎症因子的影响。方法 回顾性分析80例输尿管结石患者的临床资料,将实施单纯体外冲击波碎石术治疗的40例分为对照组,实施消瘀化石汤+体外冲击波碎石术治疗的40例分为观察组。治疗14 d并完成6个月随访。比较两组临床疗效、中医证候积分、治疗前后血清炎症因子[C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)]及肾功能[血肌酐(serum creatinine, Scr)、微量白蛋白(microalbumin, mALB)及β2微球蛋白(β2-microglobulin, β2-MG)]的变化,并记录治疗期间并发症情况;随访6个月,比较两组复发情况。结果 观察组临床总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组中医证候积分各维度分值均降低(P<0.05),且观察组更低(P<0.05)。治疗后,两组CRP、TNF-α及IL-6均降低(P<0.05),且观察组更低(P<0.05)。治疗后,两组Scr、mALB及β2-MG均下降(P<0.05),且观察组更低(P<0.05)。两组总并发症发生率及复发率无显著差异(P>0.05)。结论 对输尿管结石患者实施消瘀化石汤联合体外冲击波碎石术排石效果显著,将降低患者中医证候积分及血清炎症因子水平,改善患者肾功能,且未增加不良反应发生率。

主动外排系统介导的大肠杆菌多重耐药性的确证

为检测和证实主动外排系统 (外输泵 )在细菌多重耐药机制中的作用 ,用四环素和水杨酸钠对大肠杆菌质控株进行了体外人工诱导 ,筛选出多重耐药株 ,再用能量抑制剂 CCCP(Carbongl cyanide m- chloropheyhydrazone)对耐药株和质控株进行了环丙沙星摄取抑制试验。结果 :在耐药株 ,其菌体内环丙沙星稳态浓度明显低于质控株 ;多重耐药株在有 CCCP存在时 ,菌体内环丙沙星的浓度随时间的延长而递增 ,而无 CCCP的抑制时 ,菌体内环丙沙星的浓度递增缓慢 ;在质控株 ,不论有无 CCCP存在 ,菌体内环丙沙星的浓度都随时间的延长而呈递增趋势 ,且保持较耐药株明显高的水平。结论 :体外诱导多重耐药大肠杆菌多重耐药性的产生 。

大肠杆菌耐药株的体外诱导及其acrA和marA基因分析

为检测大肠杆菌在某抗菌素的环境压力下耐药性的变化及其与acrA和marA基因突变的关系。分别用四环素、氯霉素和环丙沙星对大肠杆菌质控株ATCC25922进行体外诱导培养,测定诱导前后多种抗菌药的MIC的变化;对各菌株的acrA和marA基因进行克隆和测定。四环素诱导株产生重耐药,氯霉素和环丙沙星的诱导引起单药耐药;四环素诱导株、氯霉素诱导株和环丙沙星诱导株的acrA和marA基因序列均与ATCC25922的一致。四环素、氯霉素和环丙沙星的诱导培养并未引起ATCC25922的acrA和marA基因突变,诱导引起的大肠杆菌耐药性变化是由于其acrA和marA基因突变以外的其他原因所致。

北京地区板栗主要病虫害种类初步调查

2006-2007年,在北京周边的怀柔、密云、昌平、平谷和延庆5个区县共36个调查点对板栗病虫害种类及危害状况进行了实地调查,初步查清了北京地区板栗生产中主要发生的病虫害种类,在此基础上提出板栗疫病、针叶小爪螨和桃蛀螟是当前板栗生产中病虫害防治的主要对象。

离体水稻叶片划伤接种鉴定稻瘟菌的致病型

抗瘟品种的培育和抗瘟基因布局需要快速、准确、大规模地定性水稻抗源及其后代的抗瘟基因型和稻瘟菌致病型。为此，本研究建立了水稻离体叶片划伤接种方法。该方法依据主效抗瘟基因抵抗稻瘟菌在寄主体内扩展的特点，通过针刺在水稻叶片上造成伤口，避免了寄主侵入抗性的干扰，从而有利于抗扩展性的定性鉴定。作者利用活体喷雾接种、叶片无划伤接种和本研究建立的离体叶片划伤接种等3种接种方法，在秧苗4～6叶龄期，对菌株12-DG-68在24个水稻抗瘟单基因系上的致病反应进行了测定，结果显示：叶片划伤接种的检测结果稳定、一致；而叶片无划伤接种和活体喷雾接种的检测结果假抗性比例分别为12．5％和4．2％，不同叶龄期的叶片间反应型不一致率达7％。此外，离体叶片划伤接种还可利用菌丝块接种，以鉴定分生孢子产量低的菌株的致病型。因此，水稻叶片划伤接种是一种准确、稳定和方便的稻瘟菌接种方法，可用于大规模定性测定水稻抗源及其后代的抗瘟基因型和稻瘟菌的致病型。

大肠杆菌acrA基因的克隆、表达、抗体制备及不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平的检测

检测不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平,探讨耐药水平与AcrA蛋白表达水平之间的关系。对acrA基因进行克隆、表达、制备抗AcrA抗体,Westernblot方法比较同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平。结果表明,多重耐药株SEMR的AcrA表达明显高于单药耐药株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922。因此SEMR多重耐药性的产生与AcrA的高效表达直接有关。

经支气管镜球囊扩张术治疗良性气管狭窄

目的评价局部麻醉下纤维支气管镜(纤支镜)介导下球囊扩张术治疗良性气管狭窄的疗效和安全性。方法对30例气管、支气管良性狭窄患者,根据狭窄部位、长度,选择不同型号的球囊导管,实施球囊扩张术。对球囊扩张后疗效、肺功能改善、并发症以及综合治疗方法进行分析。结果对30例患者进行球囊扩张,平均接受球囊扩张术(2.4±1.2)次,扩张后气管、支气管管径较前明显增大,症状明显缓解,即刻疗效达100%,术后狭窄段气管支气管直径、气促评分、肺功能指标均明显改善,无严重并发症。随访4～53个月。远期疗效达80.0%。结论局部麻醉下经纤支镜引导球囊扩张术治疗良性气管狭窄是一项安全、快速和有效的方法。

高频电圈套治疗气道肿瘤的临床应用

目的探讨支气管镜下高频电圈套在中心气道肿瘤狭窄治疗中的临床疗效和安全性。方法回顾性分析2013年7月-2016年4月支气管镜下高频电圈套治疗中心气道狭窄患者18例,部分联合氩离子凝固术(APC)和冷冻术,观察术后症状缓解情况及并发症。结果术后临床症状明显改善,气促缓解,气促指数评分好转,气道狭窄程度改善。所有患者均未出现大咯血等严重并发症。结论支气管镜下高频电圈套治疗中心气道肿瘤狭窄安全有效。