高效液相色谱-质谱技术在蛋白质组学中的应用

蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究从肽段分离,延伸到蛋白质和蛋白质复合物的分离,随着分析物的分子质量不断增大,其结构和组成复杂性也持续增加,分子特性也发生改变。面对不同的蛋白质组学研究对象,选择不同的分离模式、分离条件以及固定相参数是进行深度蛋白质组学研究的关键。本文综述了实验室常用的液相色谱分离模式,包括反相色谱(RPLC)、亲水相互作用色谱(HILIC)、疏水相互作用色谱(HIC)、离子交换色谱(IEC)和体积排阻色谱(SEC),以及其不同的组合模式与质谱联用在自下而上(bottom-up)分析、自上而下(top-down)分析、蛋白-蛋白相互作用分析中应用的研究。具体分析了色谱流动相与被分析对象之间的兼容性问题、色谱流动相与质谱兼容性问题,以及多维色谱中不同色谱模式之间流动相的兼容性问题。重点关注存在不兼容问题时研究者所提出的解决方案。此外,本文还评述了HPLC-MS结合样本前处理的方法在外泌体和单细胞蛋白质组学中的应用研究。总之,文章聚焦于近年来HPLC-MS技术在蛋白质组学中的研究进展,旨在为未来蛋白质组学领域的研究提供参考。

近年中国色谱研究进展

20世纪末至今,是中国色谱学科全面快速发展的重要时期。伴随着生命科学、材料科学、能源科学、环境科学等学科的不断发展,特别是功能基因组学、蛋白质组学、代谢组学和糖组学等组学研究的兴起,色谱学科得到了更加密切的关注和更加广泛的运用,我国色谱工作者也在上述方面取得了显著的成绩,一些研究成果在国际上具有一定的影响力。本文对近年来我国色谱工作者在色谱基础理论、分离分析方法与技术、新型色谱柱和富集材料、新型色谱分析仪器设备以及相关开发与应用等方面的一些典型工作进行介绍。

快速气相色谱法测定汽车工业废气中芳烃排放量

采用气体直接进样及快速程序升温气相色谱法,能在80s内快速、简单地测定废气中芳烃等多种组分的含量.在本方法中,芳烃的最低检出浓度为0.1mg/m^3.该方法约在两周内测定了汽车喷漆车间48个排气口的576个样品,具有简单、快速、灵敏、实用等优点,特别适合于涂装工业气体稀释溶剂样品的测定.

毛细管电泳泡状检测池的制备及性能考察

采用局部成泡法自行制备毛细管电泳仪用泡状检测池.与普通圆柱形检测池相比,采用泡状池,检测信号可以提高6倍.对照讨论了泡状池对电泳过程的影响.

色谱隶属函数定性研究

采用模糊集有关理论对所有可能影响保留指数定性准确度因素通过隶属函数表示出来。本方法弃之以传统“定性窗口”的概念,代之以隶属度,并根据最大隶属原则定性。不仅如此,本方法尚具有“窗口”定性法不具备的多种优点,使得定性可靠性大大增加。而且本方法还为定性结果优化、因素校正提供了有效的手段。经过对任意多阶方式下石脑油组分定性分析证明了其特有的作用。

色谱双柱系统智能定性方法

双柱系统分析未知样品能提供交叉信息.因此,可以提高峰定性的可靠性.如何有效地利用交叉信息,将指定组分识别出来,本文进行了研究.根据每支选择性不同柱子上,色谱峰的流出次序、位置和峰面积信息,采用模糊数学方法和领域专家的逻辑,编制智能定性软件,可以比较方便、快速、准确地对包括重叠峰在内的流出峰进行定性.通过空气毒物卤代烃化合物,对双柱智能定性方法进行了验证.

气相色谱模糊定性研究

采用模糊集理论将所有可能利用的信息及造成保留值测量不精确的因素通过隶属函数表示,并以隶属度大小对组分定性,提高了定性结果可靠性,并有传统方法不具备的多种优点。通过对两种不同升温方式下的实际样品定性分析得到证明。

色谱-质谱技术在生物分析研究中的最新进展

本文对近期色谱-质谱相关技术和方法学研究进展进行简略评述。由于色谱方法研究和应用领域十分广泛,涉及方方面面,本文仅简要介绍色谱、多维色谱及其与质谱联用技术在生物物质分析领域（主要是人类染色体蛋白质组、糖蛋白、磷酸化蛋白质组）的研究工作,此外还包括体积排阻色谱分离病毒颗粒、量子点、肝素方面的研究和多维气相色谱分析进展及其他亮点文章。

智能多柱系统选择性优化研究

复杂混合物样品分高应采用统一方法、多柱系统。多元切换或多柱串联调节选择性在仪器和操作上均不适合作为通用方法。因此提出了智能多柱系统的概念，探讨了智能多柱系统选择性优化原则和多柱系统选择性优化方法。对多种官能团取代基化合物混合物样品，最佳多柱系统是针对其中的特殊重叠组分进行的，一般采用选择性有足够差别的弱极性柱子组成最佳多柱系统。对同族化合物异构体复杂混合物，多拄系统一般采用作用距离和分子构型差别大的柱子组成多柱系统，对光学异构体则必须采用相应的手性柱子组成多柱系统。双柱规律保留值方程中Ａ系数可以定量比较固定相间对异构体选择性的相对变化，Ｃ值则可以用于描述不同族化合物混合物分离时选择性匹配程度。用实际样品分析数据和例子验证了方法的正确性。

全柱成像激光诱导荧光微阵列芯片检测器

随着微分离技术的发展和微电子、微制造技术的进步,芯片分析仪器已成为当今一个重要的发展方向.传统的单通道、单点检测所存在的弊端是检测通量太小.而微芯片检测系统与传统检测器具有较大的差别,发展新型高灵敏度芯片检测技术一直是微分析技术能否实用化的关键.……

反相液相色谱中同族化合物作用指数的预测

基于气相色谱与液相色谱的内在联系，首次讨论了用气相色谱保留值预测两元冲洗体系反相液相色谱作用指数的方法。该方法经文献数据验证，其预测结果达到了实验精度。这为扩大反相液相色谱的作用指数库提供了一个实用的方法。

HPLC法测定广西十个不同产地两面针中新棒状花椒酰胺的含量

分析并比较了广西十个不同产地的两面针中具有镇痛、抗炎和止血活性的新棒状花椒酰胺的含量。采用HPLC法,色谱柱为HYPERSILBDSC18,流动相为乙腈:水(50:50),流速为1.0mL/min,柱温40℃,检测波长268nm,进样量为20.0μL。发现不同产地的两面针中新棒状花椒酰胺的含量差别较大,金秀样品含量最高,为0.468%;桂林样品含量最低,为0.009%。本研究将为两面针在镇痛、抗炎和止血等方面的开发利用提供了可靠的科学依据,具有重要的应用前景。

中孔分子筛SBA-15作为液相色谱固定相以及在巯基化合物分离中的应用

采用共表面活性剂法合成了孔道结构高度有序、孔径较大且粒径均匀的 SBA-1 5颗粒 ,并在此基础上研究了其作为毛细管液相色谱柱的填料基体的特性 .在 SBA-1 5材料上进行 C1 8官能团化前后 ,分别对 4种巯基化合物即半胱氨酸、谷胱甘肽、多巴胺和

黄土区土地整理压实土壤物理性状的初步研究

拟了解黄土丘陵土地整理区的土壤压实情况,从而制定相应的改良措施,促进土地资源的优化配置和有效利用。以闻喜县后宫乡的土地整理项目为研究对象,调查了压实地土壤的容重、紧实度、含水量以及渗水速率。结果表明:(1)与一般农田土壤相比,整理区土壤容重平均增高1.34倍、紧实度平均高484倍。(2)压实土壤的初始渗透速率为1.21mm/10min,稳渗速率为0.7mm/10min,约相当于一般农田土壤的16%和28%。这些物理性状表明土地整理区内土壤压实程度非常严重,必须采取相应措施改良压实的土壤,迅速提高土地的生产力。

渗漉法提取两面针活性成分工艺的研究

目的研究渗漉法提取两面针中具有镇痛、抗炎和止血活性成分新棒状花椒酰胺工艺。方法在两面针的提取中对新棒状花椒酰胺有影响的3个因素乙醇体积分数、浸泡时间和渗漉体积流量,每个因素选择3个指标,通过正交试验进行工艺的优选,以新棒状花椒酰胺的提取率为评价指标,采用HPLC法测定两面针提取液中新棒状花椒酰胺。结果最佳提取工艺条件是两面针用乙醇体积分数为95%、浸泡时间为72h、渗漉体积流量为3.9mL/min的时,两面针提取液中新棒状花椒酰胺的质量分数最高,为0.74%。结论渗漉法提取两面针活性成分的最佳提取方法与用回流法比较,提取率较接近,也完全适合两面针中新棒状花椒酰胺提取。

多维液相色谱 bottom-up top-down 阵列式 完整蛋白质 蛋白质分离

蛋白质组学出现之后,多维高效液相色谱（multidimensional HPLC,MD-HPLC）系统以其快速、高效、自动化程度高以及容易与质谱等其他技术联用等优势而成为蛋白质组学相关分析技术中研究应用的热点。本文主要以本实验室在蛋白质组学研究中的技术进展为主线,介绍了多维高效液相色谱技术的发展,包括经典的“bottom-up”技术和“top-down”式的多维高效液相色谱技术路线,以及为了提高系统的分离通量而自行设计搭建的阵列式多维高效液相色谱平台,这些技术路线在蛋白质组学研究中有着极大的潜在应用价值。

利用液相色谱-质谱多反应监测方法测定食物中主要的牛奶过敏原α-酪蛋白

采用液相色谱-质谱串联的多反应监测技术检测食物中的牛奶过敏原成分α-酪蛋白,检出限达到了0.5mg/L,与目前已报道的检出限水平相当。该过敏原成分在0.5～250 mg/L范围内线性关系良好,说明本方法对于食品中牛奶过敏原成分的检测具有极好的实际应用价值。

两面针提取物(S0)对小鼠镇痛、抗炎和止血作用的研究(英文)

本研究对两面针根的提取物S0进行了镇痛、止血和抗炎药理实验,每种作用选用两种实验方法来评价。镇痛作用采用热板法和扭体法。热板法实验显示,S0在150mg/kg剂量时,小鼠痛阈值明显提高(P<0.01);扭体法实验显示,S0在150mg/kg剂量为时,对冰醋酸致痛的小鼠扭体反应次数减少了70.96%(P<0.01)。抗炎实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法及腹腔染料渗出法。二甲苯致炎剂实验表明,S0在150mg/kg剂量时,对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用,抑制率为63.45%(P<0.01);冰醋酸所致的腹腔毛细血管通透性实验中,S0在150mg/kg和75mg/kg两个剂量组时,对小鼠的抗炎效果分别为52.94%(P<0.01)和52.00%(P<0.01)。止血实验采用毛细玻璃管法和载玻片法。毛细玻璃管实验表明S0在150mg/kg和75mg/kg两个剂量时,凝血时间明显缩短(P<0.01);载玻片实验表明S0在150mg/kg剂量时,凝血时间明显缩短(P<0.01)。总之,两面针中提取物S0对小鼠具有显著的镇痛、止血和抗炎作用。

广西十个不同产地的两面针中活性成分的分析

采用HPLC法对广西十个不同产地的两面针中具有抗肿瘤活性的氯化两面针碱和具有镇痛活性的 L-芝麻脂素的含量进行了分析和比较。发现在不同产地的两面针中氯化两面针碱和L-芝麻脂素的含量差别 都较大,广西百色的两面针中氯化两面针碱含量和L-芝麻脂素的含量均最高,氯化两面针碱0．467％,L-芝麻 脂素0．160％;广西金秀的两面针中氯化两面针碱含量和L-芝麻脂素的含量均最低,氯化两面针碱0．0490％, L-芝麻脂素0．0370％。分析的色谱柱为HYPERSIL BDS C18,测定氯化两面针碱的条件为,流动相乙腈: 0．02 mol／L KH2PO4溶液(34:66),流速为1．0 mL／min,柱温40℃,检测波长329 nm,进样量为20μL;测定 L-芝麻脂素的条件为,流动相乙腈:水(50:50),流速为1．0 mL／min,柱温40℃,检测波长287 nm,进样量为 20μL。该研究为两面针在抗肿瘤药物和镇痛等方面的开发利用提供了可靠的理论依据,具有重要应用价值。