彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

血清CYFRA21-1、CA125联合HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的价值及病理特征研究

目的分析血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)联合HPV DNA检测在宫颈癌早期筛查中的价值及病理特征。方法选取2019年8月至2023年6月沧州市中心医院收治的宫颈癌患者152例为观察组,另选取同期在本院行体检且各项正常女性80名为对照组;对比两组血清CYFRA21-1、CA125水平以及HPV DNA检测结果;对比观察组不同手术病理结果及血清CYFRA21-1、CA125表达水平以及HPV DNA检测结果;以病理学检查为金标准,分析血清CYFRA21-1、CA125水平以及HPV DNA检测单独以及联合诊断宫颈癌的一致性;绘制ROC曲线,分析血清CYFRA21-1、CA125联合HPV DNA单独检测及联合检测宫颈癌的效能。结果152例患者中,鳞状细胞癌104例,腺癌患者48例;其中轻度不典型增生66例、中度不典型增生57例、重度不典型增生29例。观察组血清CYFRA21-1、CA125水平以及HPV DNA阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清CYFRA21-1、CA125水平:鳞状细胞癌<腺癌,轻度不典型增生<中度不典型增生<重度不典型增生,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组不同分期、不同肿瘤增生类型的HPV DNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);血清CYFRA21-1、CA125水平、HPV DNA检测单独以及联合诊断宫颈癌与病理学检查结果的一致性Kappa值分别为0.677、0.731、0.756、0.902;CA125+CYFRA21-1+HPV DNA联合检测的AUC为0.894,高于CA125、CYFRA21-1、HPV DNA单独检测(P>0.05)。结论血清CYFRA21-1、CA125联合HPV DNA检测的诊断效能高于单一检测,提示三指标联合检测可显著提高宫颈癌早期筛查的诊断价值,可为制定临床治疗方案提供参考资料。

Pokemon在卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨Pokemon蛋白在人卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化法检测50例卵巢癌组织中Pokemon蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征(年龄、临床分期、病理分级和淋巴结转移)的关系。选取同期20例卵巢交界性肿瘤组织和20例正常卵巢组织作对照。结果 Pokemon的阳性表达定位于细胞核和胞质,其在卵巢癌的阳性表达率高于正常卵巢和卵巢交界性肿瘤(P<0.05),而卵巢交界性肿瘤的亦高于正常卵巢(P<0.05);Pokemon阳性表达在不同临床分期、病理分级及淋巴结转移中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Pokemon在卵巢癌组织中高表达,并与卵巢癌组织分化、临床分期及淋巴结转移有关,对卵巢癌的发生发展有重要作用。

四硫化四砷对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响

目的利用BALB/C裸鼠和人卵巢癌细胞株SKOV3建立裸鼠皮下移植瘤,探讨四硫化四砷在卵巢癌组织中的抑瘤作用及机制。方法建立卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤模型,按照给药剂量(50mg/kg和100mg/kg)及肿瘤生成大小(3mm×3mm和10mm×10mm)将裸鼠随机分成小剂量早期治疗组、大剂量早期治疗组、小剂量治疗组和大剂量治疗组,分别予四硫化四砷隔日灌胃,并设裸鼠生理盐水对照组。观察四硫化四砷对肿瘤的生长的影响;RT-PCR法及Western blotting法检测四硫化四砷对肿瘤组织中Bcl-2/Bax蛋白和mRNA表达的影响。结果各组裸鼠一般情况良好。小剂量早期治疗组、大剂量早期治疗组和大剂量治疗组的抑瘤率分别为84.98%、87.55%和74.25%,与小剂量治疗组的35.19%相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR显示肿瘤组织Bcl-2 mRNA表达下调和Bax mRNA表达上调,Western blotting显示其Bcl-2蛋白表达降低和Bax蛋白表达增加。结论四硫化四砷可以抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长,并诱导卵巢癌细胞凋亡。其作用机制可能与凋亡调控基因Bcl-2/Bax表达的改变有关。

Pokemon在卵巢上皮细胞肿瘤中的表达及意义

目的:探讨上皮性卵巢肿瘤组织中Pokemon的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法分别检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤、30例卵巢上皮性癌组织中Pokemon蛋白表达水平,并分析其与卵巢癌临床病例特征的关系。结果:Pokemon在卵巢上皮性癌、卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中表达,表达率分别为90%、30%、5%,差异有统计学意义(P<0.05)。Pokemon过表达与卵巢癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05)。结论:Pokemon在卵巢癌组织中高表达与卵巢癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关,在卵巢癌的发生发展中起重要作用。

四硫化四砷对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑瘤作用的研究

目的探讨四硫化四砷（As4S4）对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长和瘤细胞凋亡的影响。方法建立卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤模型，观察As4S4对肿瘤生长的抑制情况；RT—PCR法检测As4S4对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中bcl-2和baxmRNA表达水平的影响；Westernblot法检测As4S4对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中bcl—2和bax蛋白表达的影响。结果As4S4作用于卵巢癌裸鼠皮下移植瘤后，肿瘤的体积和重量明显减小，而且随药物剂量的增加抑瘤率明显增加。As4S4作用后，RT—PCR可见bcl-2mRNA表达强度减弱，baxmRNA表达强度增强；Westernblot法可见bcl-2蛋白带变细，bax蛋白带增粗。结论As4S4可以抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长，诱导肿瘤细胞凋亡，其作用机制可能与调节Bcl-2／Bax的表达有关。

雄黄抑制卵巢癌细胞株SKOV3增殖和诱导凋亡的体外研究

目的研究中药雄黄主要成分As4S4对卵巢癌细胞株SKOV3细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法 不同浓度As4S4（20pμmol／L、40Iμmol／L、60pμmol／L、80pμmol／L），处理SKOV3细胞24h，48h，72h后，透射电镜观察细胞形态变化；MTY法测定细胞增殖抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化；RT—PCR法和Westernblot法检测As4S4对卵巢癌细胞株SKOV3细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达影响。结果 不同浓度As4S4处理的卵巢癌细胞株SKOV3，细胞增殖受到抑制，作用呈明显的浓度、时间依赖性，差异有统计学意义（P〈0．01）；流式细胞仪进行细胞周期DNA成分分析结果显示，随着As4S4浓度的增加SKOV3细胞G0／G1期细胞百分比明显降低，S期细胞百分比上升；Bcl一2的表达随药物作用浓度的增加而递减，Bax的表达随药物作用浓度的增加而增强。结论 四硫化四砷具有抑制SKOV3细胞生长增殖的作用，其作用机制与诱发细胞凋亡和调节Bcl一2与Bax表达有关。

白藜芦醇诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡的作用机制

目的探讨白藜芦醇对人卵巢癌SKOV3细胞的诱导凋亡作用,并探讨该凋亡的发生机制。方法对人卵巢癌SKOV3细胞采用不同浓度的白藜芦醇(400、200、100、50、25μmol/L)处理24、48、72 h后,采用MTT法检测细胞存活率,透射电镜观察细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞周期的改变,RT-PCR法、Western blot法检测细胞mRNA、蛋白表达。结果白藜芦醇对人卵巢癌SKOV3细胞抑制作用明显,并且呈时间和浓度依赖性关系(P<0.05或<0.01);白藜芦醇作用后SKOV3细胞出现典型的凋亡超微结构改变;SKOV3细胞凋亡并阻滞于S期;细胞中Bcl-2 mRNA、蛋白表达下调,Bax mRNA、蛋白表达上调。结论白藜芦醇能有效地抑制SKOV3细胞生长,其机制可能与抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达、增强凋亡促进因子Bax的表达有关。

ATIP3a-HMGA2-ERK信号通路对卵巢上皮细胞癌顺铂耐药性的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体的相互作用蛋白3a(angiotensinⅡtype 2receptor-interacting protein3a,ATIP3a)-高迁移率族蛋白A2(high mobility group AT-hook 2,HMGA2)-细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)信号通路对卵巢上皮细胞癌顺铂耐药性的影响。方法培养顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP、A2780/DDP,分为8组(n=3),对照组C1和C2组仅向SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞中加入RMPI 1640培养基,A1组和A2组为分别向SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞中加入ATIP3a多肽(1nmol/L)处理6h,S1和S2组为分别向SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞中转染siRNA-ATIP3a,VC1和VC2组分别向SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞中转染siRNA-vector作为对照。顺铂3μg/mL处理72h后,采用乳酸脱氢酶法检测细胞的增殖能力,体外侵袭实验检测细胞侵袭能力,Real-time PCR法检测HMGA2mRNA表达,免疫蛋白印记法检测HMGA2和磷酸化ERK的表达。结果A1组SKOV3/DDP细胞增殖率和侵袭能力、HMGA2 mRNA和蛋白表达、磷酸化ERK蛋白表达明显低于C1组,S1组SKOV3/DDP细胞增殖率和侵袭能力、HMGA2mRNA和蛋白表达、磷酸化ERK蛋白表达明显高于C1组、A1组,VC1组SKOV3/DDP细胞增殖率和侵袭能力、HMGA2 mRNA和蛋白表达、磷酸化ERK蛋白表达高于A1组,低于S1组,差异均有统计学意义(P<0.05);A2组A2780/DDP细胞增殖率和侵袭能力、HMGA2mRNA和蛋白表达、磷酸化ERK蛋白表达低于C2组;S2组A2780/DDP细胞增殖率和侵袭能力、HMGA2 mRNA和蛋白表达、磷酸化ERK蛋白表达明显高于C2组、A2组,VC2组A2780/DDP细胞增殖率和侵袭能力、HMGA2mRNA和蛋白表达、磷酸化ERK蛋白表达高于A2组,低于S2组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢上皮细胞癌顺铂耐药性可能与ATIP3a-HMGA2-ERK信号通路有关。

MiR-144-3p靶向SGK3通过Hippo信号通路抑制卵巢癌的生长和侵袭

目的:探讨miR-144-3p对卵巢癌生长和侵袭的作用及机制。方法:RT-qPCR检测正常卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞miR-144-3p与SGK3mRNA的表达,双荧光素酶报告检测靶向关系,将卵巢癌SKOV3细胞分为对照组(Control组)、模拟物对照组(mimic-NC组)、miR-144-3p高表达组(miR-144-3p mimic组)、SGK3高表达组(pc-SGK3组)、miR-144-3p和SGK3都高表达组(miR-144-3p+SGK3组),CCK-8法检测细胞增殖,克隆形成实验检测细胞生长,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,蛋白质印迹分析检测p-MST,p-LATS,p-YAP,MST,LATS,YAP蛋白表达水平;裸鼠后肢腹侧皮下注射SKOV3细胞悬液构建移植瘤,每周检测移植瘤体积,第30天颈椎脱位法处死裸鼠,完整取出皮下肿瘤,电子天平称重,蛋白质印迹分析检测SGK3,p-MST,p-LATS,p-YAP,MST,LATS,YAP蛋白表达水平。结果:MiR-144-3p在卵巢癌细胞中低表达,而SGK3高表达;miR-144-3p靶向负调控SGK3;miR-144-3p过表达能够明显减弱卵巢癌细胞增殖、减少每视野中卵巢癌细胞克隆数目,减短细胞周期,增加细胞凋亡率,减少侵袭细胞数目、上调p-MST/MST,p-LATS/LATS,p-YAP/YAP蛋白表达(P<0.01),再加入SGK3高表达和Hippo信号通路抑制剂XMU-MP-1后均能逆转上述反应。结论:MiR-144-3p靶向SGK3通过Hippo信号通路抑制卵巢癌的生长和侵袭。

Rac1蛋白在人卵巢浆液性腺癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞SKOV3迁移能力的影响

目的探讨Rac 1蛋白在人卵巢浆液性腺癌组织中的表达情况及其对卵巢癌细胞SKOV3迁移能力的影响。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)检测59例卵巢浆液性腺癌组织、31例卵巢良性浆液性囊腺瘤组织和3 5例卵巢正常组织中Rac 1蛋白的相对表达量。筛选出抑制Rac 1蛋白表达效果最佳的载体,构建稳定转染细胞株SKOV3-Racli;采用细胞划痕实验检测SKOV3-Racli细胞的迁移能力。结果卵巢浆液性腺癌组织中Racl蛋白的相对表达量高于卵巢良性浆液性囊腺瘤组织和卵巢正常组织(P<0.05)。与阴性质粒比较,1号片段质粒的抑制率为12.59%,2号片段质粒的抑制率为56.48%,3号片段质粒的抑制率为73.68%。与野生型SKOV3组相比,SKOV3-Racli细胞组SKOV3-Racli细胞的迁移能力下降(P <0.05)。结论 Rac1蛋白对卵巢浆液性腺癌细胞迁移能力的影响可能与下调卵巢浆液性腺癌组织中Rac 1蛋白的表达有关。

血清miR-30c-2-3p与卵巢癌组织内质网应激相关蛋白表达及患者预后的相关性

目的:分析血清miR-30c-2-3p与卵巢癌(OC)组织内质网应激(ERS)相关蛋白表达、患者临床特征及预后的关系。方法:招募2018年1月至2020年12月期间70例于我院接受治疗的OC患者(OC组),并纳入同期100例健康志愿者作为对照组。采用蛋白质印迹法分析OC组织C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(BIP)的表达情况。使用定量实时聚合酶链反应检测血清miR-30c-2-3p表达。随访记录患者的无病生存期(DFS)。结果:OC组患者基线血清miR-30c-2-3p表达显著低于对照组受试者(0.77±0.25 vs.1.15±0.39,t=7.869,P<0.001)。经受试者工作特征曲线分析,基线血清miR-30c-2-3p表达诊断OC的曲线下面积为0.785(95%CI 0.718~0.852)。基线血清miR-30c-2-3p表达≤0.703的患者FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期概率更大,肿瘤直径也更大(P<0.05)。基线血清miR-30c-2-3p表达水平与OC组织CHOP表达呈正相关(r=0.483,P<0.001),与BIP表达呈显著负相关(r=-0.240,P=0.045)。经多元线性回归分析,OC组织中CHOP(t=4.080,P<0.001)、BIP(t=-2.048,P=0.045)都是影响基线血清miR-30c-2-3p表达水平的独立因子。绘制Kaplan-Meier生存曲线,基线血清miR-30c-2-3p低表达OC患者中位DFS显著短于高表达者(χ^(2)=7.515,P=0.006)。经多因素COX回归分析显示,基线血清miR-30c-2-3p低表达为OC患者术后复发的独立临床因素(OR=0.399,95%CI 0.201~0.791,P=0.009)。结论:血清miR-30c-2-3p在OC患者中多呈低表达,并可能通过调节ERS影响患者预后。因此,血清miR-30c-2-3p表达对OC患者术后复发具有预测价值。

卵巢癌中Pokemon的表达及临床意义

[目的]探讨Pokemon在人卵巢癌组织中的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组化方法检测Pokemon在50例卵巢癌组织中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。[结果]Pokemon在卵巢癌组织中的阳性表达率为84%,卵巢交界性肿瘤中的阳性表达率为25%,正常卵巢组织中为5%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Pokemon过表达与卵巢癌组织分化程度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄无关(P>0.05)。[结论]Pokemon在卵巢癌组织中高表达,并与卵巢癌组织分化程度、淋巴结转移及临床分期有关,在卵巢癌的发生发展中起重要作用。

四硫化四砷对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用

目的:研究四硫化四砷(As4S4)对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用及其作用机制。方法:体外培养SGC7901,取对数生长期的细胞分为空白对照组(不加药物)和20、40、60、80μmol/LAs4S4处理组,分别作用24、48、72 h。采用MTT法检测细胞增殖的抑制率,透射电镜观察细胞的形态,流式细胞仪分析细胞的周期分布,逆转录-聚合酶链式反应法和蛋白质印迹法检测作用48 h后细胞中凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,20(作用48、72 h)、40、60、80μmol/LAs4S4处理组细胞增殖的抑制率明显升高(P<0.01),与浓度和时间呈正相关;从40μmol/L As4S4处理组细胞开始出现凋亡,60μmol/L As4S4处理组细胞开始出现大量凋亡,细胞周期阻滞于S期;与空白对照组比较,As4S4处理组细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白表达随As4S4浓度的增加而减弱,Bax mRNA和蛋白表达随As4S4浓度的增加而增强。结论:As4S4具有抑制SGC7901细胞增殖的作用,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调Bcl-2表达、上调Bax表达有关。

卵巢癌患者实施不同术式的研究

对比分析卵巢癌患者实施不同术式的疗效。方法:对本院接入的110例卵巢癌患者实施不同手术方式治疗,对比分组不同手术疗效。结果:48例单侧病灶切除(A组),34例单双侧病灶剥除术(B组),28例单双侧病灶剥除+分期手术(C组),术后均化疗且进行为期24个月随访观察,21例复发(均为B组)。术后12个月生理周期正常107例,A组生理周期正常率高于C组(p<0.05)。三组术后成功妊娠率差异显著(p<0.05)。结论:对生育功能有需要的卵巢癌患者,单侧病灶切除疗效更佳。