超高效液相色谱-二极管阵列检测-串联质谱法测定菊花中的10种咖啡酰基奎宁酸和22种黄酮类化合物

采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以含0.1%甲酸的乙腈-水为流动相,0.3 mL/min梯度洗脱以超高效液相色谱-串联质谱法建立了测定菊花中多酚类化合物的方法。菊花样品经过甲醇水溶液超声提取后直接进样分析,通过质谱分析以及比对标准品或文献中化合物的保留时间和质谱参数等,鉴定了亳菊、滁菊、贡菊和杭菊中10种咖啡酰基奎宁酸类化合物和22种黄酮类化合物。结果表明,4种菊花中多酚类化合物的含量均符合《中国药典》规定的要求,但各种类咖啡酰基奎宁酸和黄酮化合物的组成及含量差异显著,含量较高的除绿原酸(3-CQA),3,5-二咖啡酰基奎宁酸(3,5-DCQA)和木犀草苷(L-7-O-Glu)之外,还有芹菜素-7-O-丙二酰葡萄糖苷(AP-7-O-6″-MGlu)、4,5-二咖啡酰基奎宁酸(4,5-DCQA)、1,5-二咖啡酰基奎宁酸(1,5-DCQA)、木犀草素-7-O-丙二酰葡萄糖苷(L-7-O-6″-MGlu)和芹菜素-7-O-葡萄糖苷(AP-7-O-Glu)等。4种菊花中,黄酮类化合物总量差异较大,但咖啡酰基奎宁酸类化合物总量相当,对多酚类化合物总量而言,贡菊含量最高,达66.85 mg/g,其次为杭菊、滁菊和亳菊,含量分别为54.69,44.59和37.10 mg/g。

表面活性剂在胶束电动力学色谱中的应用

系统地综述了表面活性剂在MEKC中的应用 ,阐述了不同种类表面活性剂和混合表面活性剂胶束体系的特征和应用范围 ,也对表面活性剂浓度的优化策略作了初步探讨。引用文献 5 6篇。

柱前衍生超高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定仙草多糖组成及其含量

建立了测定仙草多糖组成及其含量的超高效液相色谱-串联四极杆质谱分析方法。仙草样品在碱性条件下用沸水提取,提取液经固相萃取小柱净化后加三氟乙酸在110℃水解,然后采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生。以Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm i.d.×50 mm,1.7μm)为分析柱,乙腈和缓冲盐溶液(0.5 mmol/L乙酸铵-0.05%乙酸)为流动相进行梯度洗脱分离,流速0.5 mL/min,电喷雾正离子多反应监测模式检测,内标法定量。结果显示8种单糖在1～100μmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r2均大于0.96,方法的回收率为84%～112%,相对标准偏差(RSD)不高于4.7%。仙草多糖由甘露糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖8种单糖组成,其摩尔百分比为7.4%、5.7%、4.2%、0.9%、28.4%、26.5%、16.4%和10.6%。该法简单、快速、灵敏高、重现性好,可用于仙草多糖的单糖组成分析和含量测定。

超高效液相色谱-光电二极管阵列检测-串联四级杆质谱法测定红洋葱中黄酮醇及其糖苷类化合物

采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以含0.1%甲酸的乙腈-水为流动相,0.3 mL/min梯度洗脱方式辅以光电二极管阵列检测-串联四级杆质谱进行定性与定量分析,建立了种同时测定红洋葱中13种黄酮醇及其糖苷类化合物的方法,其中包含6种槲皮素及其糖苷、4种异槲皮素及其糖苷和3种山奈素及其糖苷。结果表明,红洋葱中主要的黄酮醇及黄酮醇糖苷类化合物是槲皮素-4'-葡萄糖糖苷、槲皮素-3,4'-二葡萄糖糖苷、槲皮素和异槲皮素-4'-葡萄糖糖苷。红洋葱的不同部位黄酮醇及其糖苷的含量和分布并不致,以干燥品计算,在相同质量的各部位中,外两层、第三层和内层中总黄酮醇及其糖苷含量的比例为60.3∶33.0∶6.7,其中各部位槲皮素及槲皮素糖苷占黄酮总量的92.1%以上;外两层中黄酮醇单糖糖苷含量大,第三层中黄酮醇苷元含量大,而内层中黄酮醇二糖糖苷含量大。另外,在红洋葱中还发现了少量的山奈素及其糖苷,主要存在于洋葱外层中。本方法简单快速、准确性好,可用于洋葱产品中黄酮醇及其糖苷类化合物的分析。

色谱柱分离过程的驰豫理论基本模型的建立

根据样品分子在色谱柱分离过程中的输运特征，认为样品在系统中以跃迁的方式完成迁移，建立了色谱柱分离过程驰豫理论的基本模型。假设溶质在两相间平衡，用母函数方法研究非连续递推形式的驰豫理论输运动力学微分方程组，得到了描述组分在柱后浓度分布规律的基本流出曲线方程，并通过数值解方法模拟谱图对各输运参量与流出曲线特征的关系加以讨论。

色谱柱分离过程弛豫理论——流出曲线的动力学本质

在分析型线性色谱中，流出曲线一般表现为拖尾的形式，这种现象可以采用多种机理加以解释。模仿动力学弛豫理论的假设条件，认为溶质在柱过程中的迁移以跃迁形式完成，得到了浓度分布曲线的数学表达式。分别探讨跃迁次数、两相间跃迁速率及溶质在流动相中的轴向跃迁对峰形的影响。

带电溶质在电色谱中柱内富集方法的研究——基本理论模型和实验验证

在电色谱 (CEC)中引入场增强进样技术 ,并与HPLC柱内富集技术结合以使带电溶质得到更好的富集效果 .理论研究表明 ,采用较高电阻率的样品溶剂 ,及匹配适当的有机调节剂强度有利于带电溶质在CEC中的柱内富集 .以碱性药物普罗帕酮为实验样品 ,采用水 ( φ =40 % ) -乙腈 ( φ =60 % )为样品溶剂 ,水 ( φ =15 % ) -乙腈 ( φ =85 % ) - Tris ( 2mmol/L) -TEA( 0 .6mmol/L ,pH 7.60 )为运行缓冲溶液时 ,达到了 17,0 0 0倍以上的富集效果 .从理论和实验研究的角度说明了CZE与HPLC机制结合的CEC进样方法用于样品柱内富集的可行性 。

多维液相色谱-质谱用于酶解猪血蛋白中活性肽的研究

以强阳离子交换柱(SCX)为一维色谱柱,反相柱(RP)为二维色谱柱,采用在线捕集接口形式,通过10通阀连接一、二维色谱柱,构建了二维液相色谱分离系统。将该系统用于酶解猪血蛋白中对血管紧缩素I转移酶(ACE)具有活性抑制作用的肽进行分离、鉴定,共检测出104个组分。收集一维馏分,离线注入LC-MS,鉴定出其中含有SAL、DKF、ESF、STVL及FESF 5个小肽。

电喷雾离子源中样品离子化能量转移理论的初探

电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI)不仅可以用于小分子的检测,也能够用于蛋白质、多肽等大分子的研究。本文通过对离子化过程的系统分析,提出了基于能量最低原理的离子化过程能量转移理论。样品分子在由液相转移到气相形成离子化气体的过程中受到静电力、分子间的范德华力等多种力的作用。样品的离子化是多种力共同作用的结果,在不同的离子化阶段,不同形式的力的作用也不尽相同。电荷在样品表面蒸发和多电荷离子的形成之间存在竞争。对不同结构的分子,分子形态、构象改变导致的两相间转移Gibbs自由能变化不同,可能导致离子蒸发、大分子形成多电荷离子、产生链弹射等行为。离子化能量转移理论不仅能够对已有的3种理论加以简化统一,也可以说明溶剂、电解质离子等在离子化过程中的作用,为优化不同结构与形态样品的质谱检测、了解离子化的真实过程提供了一种可能的依据。

离子对电色谱法分离机理的理论探讨

离子对电色谱是离子对高效液相色谱与电泳模式的复合体 ,兼具两种方法的特点 ;作者基于计量模型的基本假设 ,并考虑溶质在电色谱过程中的输运机制 ,通过对溶质在柱过程中涉及的多种平衡过程进行考察 ,得到了可以说明溶质迁移速率随离子对试剂浓度和各种相互作用之间关系的理论表达式 ;以中性溶质和简单带电溶质为例 ,对理论迁移方程进行简化 ,结果表明带电溶质在离子对电色谱中的迁移过程同时受色谱机理、离子对作用和电泳分离机理的影响 ,因此离子对电色谱对样品溶质应有更好的选择性 。

混合固定相电色谱中溶质的输运特征

以离子交换和反相固定相构成的混合固定相电色谱中 ,溶质迁移在受到疏水、离子交换作用的同时 ,对于带电溶质而言 ,还受到电泳迁移的影响。根据离子独立迁移原理 ,结合色谱过程中的多种相互作用 ,得到了描述溶质表观迁移速率与其各形态迁移速率、各种相互作用之间相互关系的理论表达式 ;讨论了混合模式电色谱中流动相的 pH及其中的有机调节剂浓度、混合固定相配比等对电渗流的影响及不同形态溶质在柱内的输运特征。结果表明 ,在电色谱中采用混合固定相可以在较大的 pH和有机调节剂浓度范围内得到较强且稳定的电渗流。pH通过改变溶质的形态影响分离 ;有机调节剂对中性溶质的影响满足一般反相电色谱中的规律 ;竞争试剂对带电溶质分离的影响较大 ,它的加入可以有效地改善峰形 ,但是由于电泳作用的调节 。

氧化石墨烯修饰多孔复合涂层超长开管液相色谱柱的制备与评价

采用原位聚合法在毛细管柱（3 m×25μm i.d.）内壁制备粗糙结构的聚氯甲基苯乙烯二乙烯基苯涂层,并将氧化石墨烯以共价键合的方式固定在涂层表面,制备成氧化石墨烯修饰多孔复合涂层超长开管毛细管液相色谱柱。通过扫描电镜、透射电镜、拉曼光谱等手段对固定相的结构进行表征,证实聚氯甲基苯乙烯二乙烯基苯涂层具有球形分散结构,而片状的氧化石墨烯均匀覆盖在聚合物层表面。球状的聚合物层及氧化石墨烯的覆盖极大地提高了色谱柱的相比及样品容量,乙腈-水为流动相可分离烷基苯、中性多环芳烃、酸性和碱性化合物,乙腈-0.02 mol/L醋酸铵为流动相可实现4种核酸碱基样品的分离。制备的色谱柱具有良好的重复性和稳定性,测试的日内、日间、柱间重复性（n=6）相对标准偏差（RSD）均在0.3%~2.0%范围内。

蛋白质组研究中分离新技术与新方法

对于蛋白质组的研究离不开分析技术的支撑。由于样品及其基质的复杂性,为了实现蛋白质的高通量、高灵敏度、快速分析鉴定,必须发展与之匹配的新技术与新方法。多维高效液相色谱/毛细管电泳技术,部分弥补了传统2DPAGE的不足,近年来,在蛋白质分离鉴定方面取得了最令人瞩目的成绩。本文分别从多维液相色谱分离技术、多维毛细管电泳蛋白质分离平台、微柱液相-毛细管电泳联用技术、极端pH蛋白质的分离分析和蛋白质的在线富集技术等方面对蛋白质组学研究中在新技术与新方法方面近期取得的成果加以系统阐述。

复杂电渗泵系统的输液特征

基于对电渗泵中压强产生原理的讨论,对新兴的复杂串、并联电渗泵系统的流体输液特征加以研究.在多级串联电渗泵系统中,可以通过增加电渗泵的级数或操作电压来提高泵系统产生的压强,但是单一流路的输液能力有限.而在多级并联电渗泵系统中,输液量也可以通过增加电渗泵的级数或操作电压得到提高.在这一体系中,尽管输液量的叠加有利于其在更为广泛的领域中应用,但是因Joule热产生的电场强度与电渗流速度线性关系的偏离也使得其线性范围变小,不利于操作条件的控制.

中性溶质在电色谱进样过程中的自富集作用

从理论上探讨了溶质在柱头产生的自富集作用过程 ,说明了进样时间及流动相组成对富集效果的影响规律 ,并以安息香和美芬妥因两种药物为例对理论加以验证 .结果表明 ,较好地控制实验条件 ,在基本不影响柱效的情况下 。

新型微填充柱－毛细管柱二维色谱系统的理论研究（Ⅱ）──双柱条件对柱效的影响

从色谱动力学角度探讨了改变微填充柱－毛细管柱二维色谱系统中双柱条件对柱效的影响规律，进一步证实了短填充柱接长毛细管柱及高预柱柱温、快预柱载气线速有利于提高双柱系统柱效的结论；同时，通过对主柱柱温、载气线速及柱间分流比的讨论，从理论和实验上也证实了相对较低的主柱柱温、较慢主柱线速以及稍大的分流比有益于柱效利用率的提高．

电色谱中中性溶质柱内富集研究

中性溶质在毛细管电色谱中的富集可以通过调节有机调节剂在运行缓冲溶液和进样区段中的浓度及适当增加进样长度来实现 ,富集作用主要由两种过程控制 ,即进样过程中的自富集作用和运行过程中的一般输运富集作用。采用弛豫理论的研究方法得到了描述富集效果与操作条件关系的理论表达式 ,结果表明 :随进样长度的增加 ,可以有效提高富集效果 ;进样长度对柱效的影响也与有机调节剂的浓度有关 ,当其在两区段中的浓度差别较大时 ,适当加长进样时间并不会对柱效产生太大的影响。对安息香和美芬妥因两种药物的实验研究达到了超过 1 0 0倍的富集效果。

色谱累加进样分离实验条件的研究

在采用反相液相色谱或亲和色谱完成蛋白质等大分子分离时，根据溶质保留值随溶剂梯度变化曲线上突变点的差别，可以通过累加进样分离法进行样品制备或直接柱内富集分析，但这一方法并非在任意条件下、对任何样品都适用。该文根据不同形式的保留值方程从理论上探讨了样品保留值与进样时间差、梯度洗脱速率等实验条件之间的关系；结果表明：两次进样的出峰时间差与进样时间间隔成正比关系，也与其在等度情况下的容量因子有关。样品中的两种组分在间隔进样时的流出时间差主要由两组分的容量因子决定，当样品中存在两种以上保留性能相近组分时，若保证指定的分离度，进样时间间隔存在一极大值，超出该范围。

气相色谱过程动力学研究——柱压降对色谱流出曲线的影响

本文在色谱质量平衡模型基础上,考虑到气相色谱过程中柱压降与载气线速的关系,建立了考虑柱压降的气液分配色谱质量平衡模型.通过数学变换的方法,得到了流出曲线一级矩及二级、三级中心矩的数学表达式.理论和实验均表明:溶质的保留时间,流出峰半峰宽与柱前压倒数近似呈线性关系;柱压降对柱效及峰形对称性也有影响.

新型微填充柱－毛细管柱二维色谱系统过程的动力学研究

从色谱动力学角度对新型微填充柱－毛细管柱二维色谱系统过程中双柱条件与流出曲线及柱效之间的依赖关系加以系统研究。结果表明：由于双柱条件之间存在关联，双柱系统流出曲线特征与单柱系统存在一定的差异，流出曲线一阶矩和二、三阶中心矩以及双柱系统的柱效皆由预柱和主柱条件综合确定。