四个上海地方猪肉品质比较分析

为建立上海地方名猪肉质评价基础数据,对嘉定梅山猪、崇明沙乌头猪、金山枫泾猪和浦东白猪的背最长肌进行肉质性状、质构、氨基酸含量等指标进行检测分析。肉质性状检测结果显示:金山枫泾猪锁水能力显著高于其他3个品种(P<0.05),但嫩度最差;梅山猪肉色较好,肌内脂肪含量显著高于金山枫泾猪、崇明沙乌头猪(P<0.05)。质构指标测定结果显示:4个品种各有千秋,但就硬度和弹性指标来看,金山枫泾猪略好于其他3个品种;梅山猪的黏附性、凝聚力最低。氨基酸含量检测结果显示:梅山猪氨基酸总量最高,显著高于金山枫泾猪和浦东白猪(P<0.05);崇明沙乌头猪鲜味氨基酸含量最高。

番茄中77种农药残留检测及膳食暴露风险评估

目的分析上海市地产番茄的农药残留情况,评估其在一般人群和4~6岁儿童中的膳食暴露风险。方法采集上海市9个区86个生产种植主体的111份地产番茄样品,采用气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法对77种农药残留进行检测,并采用确定性评估模型对检出的农药残留进行膳食暴露风险评估。结果在检测的111份番茄样品中,57份样品检出农药残留,整体检出率为51.35%,合格率为100%。共检出14种农药,以腐霉利、啶酰菌胺和霜霉威等为代表的杀菌剂为主,检出占比为64.29%。一般人群和4~6岁儿童的慢性膳食摄入风险分别为0.00124%~0.53251%和0.00266%~1.14138%,急性膳食摄入风险分别为0.04837%~4.26422%和0.17818%~15.59091%,均小于100%,膳食暴露风险处于可接受的范围。结论上海市地产番茄的农药残留膳食暴露风险较低,不会对消费者产生健康危害。本研究可为上海市番茄生产的用药指导和质量安全监管提供数据支撑及参考依据。

上海市地产芹菜中农药残留慢性膳食暴露风险评估

为了解上海市地产芹菜的农药残留情况及慢性膳食摄入风险水平,对2017-2022年采集的500份上海市地产芹菜样品中82种农药残留进行检测,并利用@Risk7.6软件,对芹菜的农药残留情况和慢性膳食暴露风险进行分析,以向各级监管部门提供后续芹菜质量安全监测的参考依据。结果表明,500份芹菜样品的农药残留总体检出率为31.4%,合格率为99.0%;共检出29种农药残留,烯酰吗啉、啶虫脒、腐霉利、吡虫啉、多菌灵和噻虫嗪的检出率较高;检出5份不合格样品,超标农药为噻虫嗪、灭蝇胺、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯和苯醚甲环唑。在检出的样品中,82.8%的检出农药未在芹菜上登记,51.7%的农药暂未制定在芹菜中的最大残留限量标准,52.9%的样品同时检出2种及以上的农药残留。在慢性膳食暴露风险评估中,高检出率农药的平均风险值为0.00218~0.0416,均远小于1,表明居民通过食用上海市地产芹菜摄入农药残留的慢性风险处于可接受的水平,但有关部门仍需加强未登记农药的监测,从而进一步保障芹菜的质量安全。

分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中7种链格孢霉毒素的含量

目的建立分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法快速、准确地同时检测水果中7种链格孢霉毒素的方法。方法试样用酸化乙腈提取,无水硫酸镁除水,氯化钠盐析,上层清液经C_(18)与石墨化碳黑分散固相萃取净化后,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定,基质匹配标准溶液外标法定量。结果7种链格孢霉毒素在0.005~0.500mg/L范围内线性关系好(r^(2)>0.99),检出限为0.005mg/kg,定量限为0.01mg/kg,回收率在77.30%~114.34%之间,批内相对标准偏差为0.65%~14.81%,批间相对标准偏差为0.03%~18.59%。结论该方法简单、高效,精密度及准确度高,适用于水果中7种链格孢霉毒素的测定。

高效液相色谱法同时测定畜禽产品中9种呈味核苷酸方法的建立和应用

本研究建立了一种快速检测不同畜禽产品中9种呈味核苷酸的方法,同时比较了上海地区不同畜禽肉、不同猪种间呈味核苷酸种类和含量的差异。样品经5%高氯酸溶液提取净化后,以0.04 mol/L的磷酸盐缓冲液作为流动相,经过C_(18)色谱柱分离9种呈味核苷酸,柱温35℃,进样量10μL,高效液相色谱仪紫外检测器检测,在波长254 nm下采用外标法进行定量。本方法可在40 min内实现畜禽产品中9种呈味核苷酸的分离;9种呈味核苷酸在0.2~100μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(R^(2))均大于0.999;检出限为1~6 mg/kg,定量限为2~20 mg/kg;样品加标回收率在80.0%~97.6%,重复性试验结果的变异系数均小于9.3%。上述结果表明,本研究建立的方法操作简便、重复性好、检测效率高。采用所建方法对上海地区3种不同畜禽肉、4种地方猪种、1种地方杂交培育猪种和1种三元猪中9种呈味核苷酸含量进行检测,结果表明,所测3种畜禽肉样品中肌苷酸含量远高于其他呈味核苷酸含量,是畜禽肉样品中最主要的呈味物质;所测不同品种猪肉样品中,肌苷酸含量最高,平均值为1.3 mg/g,且所有猪种中肌苷酸的滋味活性值均大于1,表明肌苷酸是主要鲜味物质。从核苷酸检测结果来看,上海地区地方猪种的鲜味要高于地方杂交培育猪种和三元猪。

水产品及养殖环境重金属污染现状及快检技术研究进展

水产品由于含有丰富的营养成分受到广大市民的喜爱,然而近几年,国内水产品中重金属含量超标事件时有发生,使得重金属污染问题成为制约水产品质量安全的重要因素之一。水产品中重金属主要来源于生活污水、工业产品及污染、农业生产中产生的污染等。本文简述国内水产品重金属污染情况,指出水产品中重金属污染不仅取决于水产品自身的重金属富集能力,还与养殖环境中水质、底泥和饲料等因素有关。同时本文梳理我国现有的水产品、渔业用水中重金属限量标准及常用的重金属快速检测方法,以期为后续水产品重金属检测提供参考。

镰形扇头蜱唾液腺cDNA文库的构建

构建了镰形扇头蜱唾液腺 c DNA表达文库。用 Trizol试剂提取镰形扇头蜱唾液腺总 RNA,经反转录合成 c DNA第 1链 ,应用 L D- PCR扩增方法 ,合成双链 c DNA。用 Sfi 内切酶修饰此双链 c DNA,使形成两端分别带有 Sfi A和Sfi B的粘末端。经 CHROMA SPIN- 4 0 0柱纯化 ,收集 4 0 0 bp以上的双链 c DNA片段 ,将其连接于带有 Sfi A和 Sfi B末端的λ Tripl Ex2噬菌体载体 ,经体外包装后 ,以 XL1 - Blue为受体菌构建 c DNA表达文库。经测定 ,库容量为7.0 8× 1 0 5,重组率为 95 .2 %。扩增后的文库滴度为 1 .4 5× 1 0 9pfu/ m L。随机挑取 2 0个克隆转化到质粒 p Tripl Ex2 ,经抽质粒、测序得到

上海市草莓品质分级评价方法初探

为维护消费者权益、提高优质草莓产品的辨识度及市场竞争力、保障草莓产业健康发展,现对上海市草莓产业的生产面积、种植规模、产量、品种等情况进行调查,对国内外草莓品质评价和分级标准现状进行分析,并从特征品质指标收集、特征品质指标分析测定、分级关键指标及阈值的确定、品种间特征性指标筛选、地域间特征性指标筛选和分级实施方法等方面入手,总结出一套草莓品质分级评价研究方法,以期为上海市草莓产业发展和草莓品质评价提供借鉴和参考。

国内外牛肉标准的现状对比及建议

牛肉作为重要的肉类消费品,其质量标准对食品安全和市场竞争力至关重要。本文在质量分级、理化指标和污染物控制、微生物限量、产品认证4个方面比较了国内与国外主要牛肉生产国的牛肉质量标准,发现我国的牛肉分级标准相对简单,接受度较低;检测方法和产品认证上与国际存在差异;相关标准需进一步完善。从而提出了我国牛肉质量标准在细化分级、完善检测方法、加强认证体系等方面的建议,以提高我国牛肉在国内外市场的竞争力和消费者信任度。

RT-PCR方法检测上海地区猪轮状病毒

建立了检测猪轮状病毒的RT-PCR方法,特异性强,敏感性达到10 pg。用所建立的RT-PCR方法对上海地区散养户的临床腹泻猪和规模化猪场健康猪的200份粪样进行检测。结果显示,157份健康猪样品中检出阳性样品30份,阳性率平均为19.1%,其中仔猪阳性率为6.5%(3/46),保育猪阳性率为23.1%(12/52),育肥猪阳性率为23.5%(15/59);临床腹泻猪样品43份,检出阳性样品15份,阳性率为34.9%。

犬细小病毒PCR检测方法的建立及其临床应用

针对犬细小病毒(CPV)特异保守的VP2基因设计一对引物,预扩增片段大小244 bp。通过摸索试验和特异性、敏感性试验,建立了对犬细小病毒进行快速检测的PCR方法,最低能检测出13 pg的CPV核酸模板,初步对13例疑似病料检测,阳性检出率为84.61%,结果表明建立的PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于CPV的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。

上海及周边地区散养猪主要病毒病的流行状况调查

采用PCR方法对上海及周边地区散养临床发病猪进行主要病毒病的病原学检测,主要包括猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型。2005年检测病死猪病料97份,4种病的阳性率分别为33.33%、23.81%、35.90%、40.00%;2006年检测357份,4种病的阳性率分别为15.91%、33.33%、10.53%、23.61%;2007年检测1050份,4种病的阳性率分别为13.92%、35.20%、7.78%、20.57%。2005年-2007年的病例中均有不同程度的混合感染,混合感染率分别为3.09%、4.48%、3.62%,表明这些病原在上海及周边地区的散养猪中普遍存在,成为猪病防疫中不可忽视的一个环节。

J亚群禽白血病多发性肿瘤的病理改变与PCR检测

两个规模化商品蛋鸡场发病鸡群临床解剖显示:脚部和翅膀有血管瘤、肌肉组织内出现纤维肉瘤,肿大的肝、脾出现髓细胞瘤;经组织病理学观察符合J亚群禽白血病(ALV-J)的病理学特征。针对ALV-J保守序列P27基因设计特异引物,建立PCR方法,从出现病理改变的各组织脏器、各多发性肿瘤中以及血液中均检测到ALV-J,证实该病为以髓细胞瘤、血管瘤和纤维肉瘤为主的多发性肿瘤传染病。对扩增产物序列进行测定后,与原型株序列进行比较,核苷酸同源性为98.27%,从分子水平上证明为J亚群禽白血病,用PCR检测进一步验证J亚群禽白血病毒的感染机制和引起鸡群的病理改变。

上海及新疆地区猪戊型肝炎病毒开放阅读码框架2序列的克隆与分析

通过已建立的动物戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）RT-nPCR方法,检测上海地区和新疆地区猪群样品。扩增HEV开放读码框架2（open reading frame 2,ORF2）保守区,产物为507 bp。经克隆、测序,获得20株上海株、3株新疆株序列,采用分子生物学软件与47株已知HEV进行同源性、进化关系分析。结果23株序列从同源性比对和进化关系分析均属HEVⅣ型,上海株间507 bp的核苷酸同源性为94.1%~100.0%,与上海猪源（DQ450072）、日本人源Japan1（AB369690）亲缘关系近;3株新疆株507 bp间的核苷酸同源性为86.1%~98.2%,与新疆猪源China SW1（AY594199）、中国人源T1株（AJ272108）亲缘关系近;上海株与新疆株间的核苷酸同源性为82.6%~100.0%,提示上海株与新疆株间存在差异。23株HEV在时间和地域关系分析,提示不同年份的新疆株存在差异,同年份不同猪场的新疆株进化关系存在差异,不同年份、不同区县的上海株进化关系也存在差异。

动物戊型肝炎病毒(HEV)RT-nPCR检测方法的建立及应用

根据戊型肝炎病毒(HEV)的4个基因亚型,寻找其保守序列ORF2,成功设计了一套以Ⅰ、Ⅳ型为主兼顾Ⅱ、Ⅲ型的通用简并引物,摸索条件,建立检测动物戊型肝炎病毒反转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)的方法,扩增片段为507 bp。该方法检测所需时间为5 h,灵敏度可达10 pg,特异性强、重复性好;经优化研制了动物戊型肝炎病毒RT-nPCR检测试剂盒,保存期半年以上,该试剂盒可用于动物粪便、胆汁HEV RNA的检测。

2015年上海地区猪链球菌的检测与分析

对2015年上海地区猪屠宰场、猪养殖场、临床病死猪开展猪链球菌的分离检测，主要包括对猪唾液、猪鼻拭子、猪场空气样本、扁桃体、肺脏等共363份进行细菌分离和PCR鉴定，共分离到猪链球菌43株，对这43株细菌开展mrp、orf2、sly、gdh、gapdh、epf、fbps7种主要毒力因子检测，通过对病原的分析，了解上海地区猪链球菌病的疫情动态和趋势，为防控猪链球菌病提供依据。

PCR检测上海地区猪痢疾短螺旋体、大肠毛状短螺旋体和胞内劳森菌

2014年10月至2015年10月，从上海市动物疫病预防控制中心门诊、上海地区规模化猪场、屠宰场等采集的回肠、粪便及肛门拭子共254份样本，结合临床表现、病理剖检进行初步鉴定，并通过建立的猪痢疾短螺旋体、大肠毛状短螺旋体和胞内劳森菌多重PCR方法进行鉴定。检测结果显示：猪痢疾短螺旋体阳性7份，大肠毛状短螺旋体阳性为O，胞内劳森菌阳性33份；阳性率分别为2．75％，0，13．0％。结果表明目前上海地区猪痢疾短螺旋体和胞内劳森菌均存在不同程度的感染和流行，这两种病原均可造成严重的经济损失，应当引起足够重视，检测结果可在制定本地区猪腹泻病的防控策略中作为参考。通过胞内劳森菌套式PCR方法检测，结果发现共有36份阳性，阳性率为14．2％。

养殖场中猪痢疾病原感染情况调查

由猪痢疾短螺旋体引起的猪痢疾,以出血性腹泻为主要特征,是一种十分严重的疾病。为了解该病的感染情况,采集16个养殖场中粪便和肛门拭子134份样本进行荧光PCR检测,25份阳性,阳性率18.66%。134份样本中有102份为腹泻症状,检测结果表明腹泻样本和非腹泻样本的阳性率分别为22,55%和6.25%,样本中2~10周龄、11~20周龄的猪痢疾短螺旋体的阳性数分别为15例和10例,阳性率分别为11.19%、7.46%,对腹泻的样本除检测猪痢疾短螺旋体外,还用金标法检测轮状病毒、流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒,后两者有不同程度的感染。猪群中10周龄以下的猪感染率较10周龄以上的猪高,这可能与用药和机体抵抗力有关。