埃索美拉唑联合EGFR抑制剂AG1478对胃癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响

目的:探讨埃索美拉唑联合表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478对胃癌细胞增殖、迁移、凋亡、自噬的影响与分子机制。方法:实验分为空白对照组、埃索美拉唑组、AG1478组和埃索美拉唑联合AG1478组,采用CCK-8法、EdU增殖实验、Transwell、划痕实验、流式细胞术、细胞免疫荧光法分别检测各组人胃癌AGS、SGC-7901细胞活力、增殖、迁移、凋亡和自噬变化。Western blotting检测EGFR、c-MYC、P53、cleaved-PARP、LC3B、PI3K、AKT、P-AKT蛋白的表达情况。结果:AG1478抑制胃癌细胞活力和EGFR表达呈浓度依赖性。埃索美拉唑和AG1478能够明显降低胃癌细胞活力、抑制其增殖和迁移,诱导细胞凋亡和自噬(P<0.05),且两者联合有协同作用(P<0.05)。埃索美拉唑和AG1478均能降低AGS和SGC-7901细胞PI3K、AKT、P-AKT蛋白的表达(P<0.05),两者联合对降低P-AKT的表达有协同作用(P<0.05)。结论:埃索美拉唑联合EGFR抑制剂AG1478对胃癌细胞增殖、迁移有抑制作用,且二者协同诱导细胞凋亡和自噬,两者联合可能是一种潜在的个体化治疗策略。

互联网平台上CBL联合PBL教学法在妇产科住院医师规范化培训中的应用效果

目的探讨互联网平台上以案例为基础的教学法(CBL)和以问题为导向的教学法(PBL)在妇产科住院医师规范化培训(以下简称“住培”)中的应用效果。方法将2022年10月至2023年9月在郑州大学第三附属医院妇产科轮转的研究生住培学员79名,采用随机数表法分为两组:教改组40名、对照组39名。教改组为互联网平台上CBL结合PBL方案教学,对照组为互联网平台传统教学。对比两组学员的理论考核成绩、临床操作技能成绩并进行教学满意度的问卷调查,包括学习兴趣、逻辑能力、自学能力、适应临床能力、相关学科知识、基础理论掌握、基本操作能力、沟通能力、协作能力9个方面。结果教改组学员的理论考核成绩和临床操作技能成绩优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);教改组在提升学习兴趣、增强逻辑能力、提高自学能力、适应临床能力、拓展相关学科知识、掌握基础理论知识、提高基本操作能力、沟通及协作能力方面的满意度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论互联网平台上CBL联合PBL教学法能提高妇产科住院医生规范化培训的教学效果,激发学习兴趣,培养学员自学能力、发现并解决问题能力、临床思维等多方面能力,值得推广。

腹腔热灌注顺铂联合卡培他滨治疗晚期胃癌腹腔积液

目的:探讨顺铂热化疗对人胃癌细胞的毒性增效作用,观察腹腔热灌注顺铂联合卡培他滨治疗胃癌腹腔积液的疗效。方法:MTT法检测42℃时顺铂对胃癌细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。观察腹腔热灌注顺铂联合卡培他滨治疗46例晚期胃癌腹腔积液患者的疗效及不良反应。结果:42℃热疗可显著增强顺铂对胃癌细胞的生长抑制率与细胞凋亡率。热灌注顺铂联合卡培他滨治疗胃癌腹腔积液的有效率为69.6%(32/46),不良反应轻微。血清CEA治疗后显著下降,且与疗效相关。结论:热疗能显著增强胃癌细胞顺铂毒性作用,热灌注顺铂联合卡培他滨是晚期老年胃癌腹腔积液安全有效的治疗方法。

晚期胃癌血清可溶性E-钙粘连蛋白的表达及其意义

目的观察晚期胃癌化疗前后血清可溶性E2钙粘连蛋白(sEC)的浓度变化并探讨其临床意义。方法用酶联免疫吸附方法检测40例晚期胃癌初治患者接受FOLFOX4方案化疗前和化疗后第8周的血清sEC浓度,分析化疗前后血清sEC浓度及其变化与疗效的关系。结果 40例患者获CR2例,PR 12例,SD 13例,PD 13例。获有效组(CR+PR)患者化疗后的血清sEC浓度为(2082.36±590.32)ng/ml,显著低于化疗前的(2674.50±687.89)ng/ml(P<0.05);获SD和PD组患者化疗后血清sEC浓度较化疗前均显著升高(P<0.05);获SD和PD组患者化疗前基线sEC水平显著低于有效组(P<0.05)。结论化疗后血清sEC浓度下降可能与晚期胃癌FOLFOX4方案化疗疗效呈正相关,化疗前sEC浓度高的疗效好。

老年胃癌化疗前后血清可溶性E-钙黏连蛋白检测的意义

目的探讨血清可溶性E-钙黏连蛋白(sEC)在老年胃癌患者化疗前后的表达的临床意义。方法检测晚期老年胃癌患者化疗前及第8周的血清中sEC、CEA、CA19-9的水平。分析其表达变化与化疗疗效的关系。结果化疗后客观缓解(CR+PR)组化疗后sEC水平较化疗前显著下降,无效组(SD+PD)化疗后sEC水平较化疗前显著升高(P<0.01)。两组化疗前基线sEC水平存在显著差异。结论化疗后血清sEC水平下降与晚期胃癌含奥沙利铂方案化疗有效性相关,化疗前sEC高水平预示较好疗效。

E型钙黏附蛋白和多药耐药蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的:探讨E型钙黏附蛋白(E-cadherin)和多药耐药蛋白(P-gp)在乳腺浸润性导管癌组织及MCF-7细胞中的表达及其意义。方法:收集68例乳腺浸润性导管癌组织标本,应用免疫组化检测E-cadherin和P-gp蛋白的表达。用紫杉醇诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡,构建E-cadherin慢病毒干扰质粒,转染MCF-7细胞,应用RT-PCR检测E-cadherin和P-gpmRNA表达。结果:E-cadherin和P-gp蛋白在乳腺浸润性导管癌中阳性表达率分别为42.6%和54.4%,两者表达存在显著正相关。E-cadherin的表达与TNM分期、分化程度显著相关。乳腺癌MCF-7细胞凋亡时,E-cadherinmRNA和P-gpmRNA表达均显著增加。RNA干扰后,E-cadherinmRNA表达显著下降,P-gpmRNA表达无变化。结论:E-cadherin和P-gp可能共同参与了乳腺浸润性导管癌的发生和乳腺癌细胞凋亡过程,其分子调控机制还需进一步研究。

E型钙黏蛋白对胃癌AGS细胞增殖、侵袭和基因表达谱的影响

目的观察E型钙黏蛋白(E-cadherin)对胃癌AGS细胞增殖、侵袭、迁移及顺铂(DDP)化疗敏感性的影响,筛选E-cadherin可能调控的下游基因与机制。方法培养胃癌AGS细胞(对照组)和E-cadherin过表达的AGS细胞(E-cadherin过表达组)至对数生长期后,采用CCK-8方法检测2组细胞活力,采用集落形成实验检测细胞增殖能力,采用Transwell方法检测细胞侵袭和迁移能力,采用基因芯片比较分析E-cadherin过表达前后细胞基因表达谱变化,筛选差异表达基因,用生物信息学方法对差异表达基因进行基因本体(GO)注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果与对照组比较,E-cadherin过表达组细胞活力下降更为显著(F组间=101.674,P<0.001;F组内=9.712,P=0.001;F交互=9.712,P=0.001),细胞集落数量减少(t=11.452,P<0.001),迁移和侵袭细胞数量减少(细胞迁移:t=3.994,P=0.016;细胞侵袭:t=2.971,P=0.041);在DDP作用下,与对照组比较,E-cadherin过表达组细胞活力下降更为显著(F组间=24.312,P<0.001;F组内=327.222,P<0.001;F交互=14.445,P<0.001),细胞迁移和侵袭细胞数量减少(细胞迁移:t=4.253,P=0.013;细胞侵袭:t=3.944,P=0.017);E-cadherin过表达后,共筛选出差异表达基因3882个,包括552个lncRNA、272个circRNA和3058个mRNA;GO注释显示,差异表达基因主要富集在GTP酶活性的正向调节、细胞外基质生成、血管生成等生物学过程;KEGG通路富集分析显示,差异表达基因主要富集在细胞外基质受体相互作用、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、补体与凝血级联通路等。结论E-cadherin表达通过调节基因组变化抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭,为胃癌个体化治疗策略研究提供了分子基础。

EGFR表达抑制对胃癌AGS细胞生物学行为及化疗敏感性的影响

目的:观察表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)表达抑制对胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期及化疗药物敏感性的影响。方法:设计3条EGFR-siRNA,转染胃癌AGS细胞,CCK-8方法测定细胞增殖,Transwell方法检测细胞侵袭和转移能力,流式细胞术测定细胞凋亡与周期,RT-PCR方法检测EGFR mRNA表达,Western blot方法检测EGFR、ERK、p-ERK、AKT和p-AKT蛋白表达。结果:EGFR干扰能有效抑制胃癌AGS细胞中EGFR的基因和蛋白表达水平(P<0.05)。与对照组、阴性siRNA转染组相比,EGFR-siRNA转染组AGS细胞增殖抑制显著增加,迁移、侵袭能力显著下降,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),对顺铂、多柔比星、紫杉醇的化疗敏感性显著增加(P<0.05)。EGFR表达抑制后,处于S期的细胞比例明显减少,G_2/M期细胞比例明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFR表达抑制后,AKT和p-AKT表达下调。结论:抑制EGFR表达可抑制胃癌AGS细胞增殖,降低细胞迁移和侵袭能力,增加细胞对顺铂、多柔比星、紫杉醇的化疗敏感性,其机制可能与AKT、p-AKT的表达下降有关。

吉非替尼对于化疗失败的晚期肺腺癌的疗效及生存观察

目的:观察吉非替尼在化疗失败的晚期肺腺癌中的疗效、生存时间及影响因素。方法:收集21例初始化疗失败的转移性肺腺癌,应用吉非替尼250 mg口服,每日1次,直至出现有客观证据的病情进展,或出现不可耐受的不良反应。用Kaplan-Meier法拟定生存曲线,采用Log rank检验分析生存因素。结果:21例患者中CR3例(14.3%),PR例8(38.1%),SD 3例(14.3%),PD 7例(33.3%)。客观缓解率为52.4%,疾病控制率为66.7%。中位无进展生存时间(PFS)为6个月,中位生存时间(OS)为8个月。1年生存率为33.3%(7/21),2年生存率为9.5%(2/21)。好的PS评分与生存期延长显著相关(P<0.01)。结论:吉非替尼对既往化疗失败的晚期肺腺癌疗效好,能有效改善生存时间,体力状态评分与吉非替尼治疗的生存时间相关。

胃癌组织中E-cadherin和血清中可溶性E-cadherin的表达

目的分析胃癌组织中E-cadherin蛋白表达与血清中可溶性E-cadherin表达的关系。方法应用免疫组化法观察E-cadherin在胃癌组织中的表达,应用ELISA方法检测可溶性E-cadherin在胃癌患者血清中的表达。结果 E-cadherin蛋白的表达与年龄、病理分级有关(P<0.05),而与性别、临床分期、原发肿瘤部位无关(P>0.05);血清可溶性E-cadherin表达与年龄、病理分级、性别、临床分期、原发肿瘤部位均无关(P>0.05)。血清可溶性E-cadherin水平与E-cadherin蛋白表达无明显关联(P>0.05)。结论胃癌组织中E-cadherin蛋白表达与血清中可溶性E-cadherin表达无密切关系,可独立作为诊断辅助参考指标。

胃癌患者组织与血清CEA水平的关系及临床意义

目的探讨可手术切除胃癌患者中组织与血清CEA表达的关系及临床意义。方法应用电化学发光法检测53例行胃癌根治术患者手术前后血清CEA、CA19-9水平,用免疫组织化学方法检测胃癌组织CEA表达情况,分析其表达相关性及与临床病理学参数的关系。结果胃癌组织中CEA阳性表达率为71.7%,血清CEA阳性表达率为20.8%,组织CEA表达强度与血清CEA水平呈正相关(r=0.319,P<0.05)。组织CEA表达水平与胃癌的分化程度、TNM分期相关(均P<0.05),而与年龄、性别、淋巴结转移无关(均P>0.05)。胃癌患者术前血清CA19-9阳性表达率为15.1%,血清CEA与CA19-9表达无相关性(P>0.05)。血清CEA和CA19-9表达水平与年龄、性别、分化程度、TNM分期、淋巴结转移无关(均P>0.05)。较术前相比,患者术后血清CEA、CA19-9均下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论胃癌组织CEA与血清CEA表达呈正相关,两者联合使用可能更有助于评估可手术切除胃癌患者的预后情况。

晚期胰腺癌的化疗进展

晚期胰腺癌的治疗是当前肿瘤治疗的难点之一，以吉西他滨（gemcitabine，Gem）为基础的化疗被认为是目前晚期胰腺癌的一线标准治疗。对随机对照临床研究进行的荟萃分析表明，与最佳支持治疗相比，患者的生存质量及生存时间均得到明显改善。有证据支持以Gem为基础的联合方案较单药更有生存优势。然而，这对临床决策中如何选择治疗方案，是否一线选择联合化疗，选择什么联合方案才能使患者最大获益，还不能提供充分依据。本文结合新的临床证据针对上述问题进行综述。

慢病毒介导E型钙黏附蛋白表达抑制对胃癌SGC-7901细胞5-氟尿嘧啶作用的影响

目的观察慢病毒介导的基因干扰对胃癌SGC-7901细胞中E型钙黏附蛋白(E-cadherin)表达抑制效果,及E-cadherin基因抑制对5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用的影响。方法设计E-cadherin基因干扰序列,构建慢病毒载体,MTT法测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,RT-PCR方法测定E-cadherin、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax) m RNA表达,Western blot法测定E-cadherin蛋白表达。结果慢病毒介导的E-cadherin干扰能有效抑制胃癌SGC-7901细胞中E-cadherin的基因和蛋白表达水平(P <0. 05)。E-cadherin表达被抑制后,胃癌SGC-7901细胞对5-Fu增殖抑制显著下降,感染前后半数抑制浓度(IC50)分别为1. 27 mg·L^(-1)和2. 35 mg·L^(-1),细胞凋亡率的显著下降(P <0. 05)。E-cadherin表达被抑制后,Bcl-2 m RNA表达增高,Bax m RNA表达下降。5-Fu诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡时,Bcl-2 m RNA表达增高,Bax m RNA表达下降。结论慢病毒介导的E-cadherin基因干扰能有效抑制E-cadherin在胃癌SGC-7901细胞中的表达,并降低细胞对5-Fu作用的敏感性,其机制可能与Bcl-2、Bax基因表达改变有关。

热灌注顺铂治疗晚期卵巢癌恶性腹腔积液的临床疗效

目的探讨热疗联合顺铂对人卵巢癌细胞的毒性增效作用及治疗卵巢癌恶性腹腔积液的疗效。方法 MTT法研究常温及42℃不同作用时间下温热联合顺铂对卵巢癌细胞敏感株SKOV3的生长抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。观察腹腔热灌注顺铂治疗36例晚期卵巢癌腹腔积液的疗效及不良反应。结果 42℃热疗显著增强顺铂对卵巢癌细胞敏感株SKOV3的生长抑制,42℃热疗60min联合顺铂化疗显著增加SK-OV3细胞凋亡率。热灌注顺铂治疗卵巢癌腹腔积液的有效率为61.1%(22/36),不良反应轻微。结论热疗能显著增强顺铂的卵巢癌细胞毒性作用,热灌注顺铂是晚期老年卵巢癌患者安全有效的治疗方法。

血清骨桥蛋白、癌胚抗原及CK18的表达对胃癌的诊断价值

目的:测定胃癌患者血清中骨桥蛋白(OPN)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白18(CK18)的表达情况,探讨其在胃癌诊断中的意义。方法:选择80例胃癌患者作为胃癌组,80名健康体检者作为对照组,观察胃癌组和对照组血清OPN、CEA和CK18含量,血清OPN和CEA、CK18诊断胃癌的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积,血清OPN、CEA和CK18含量和胃癌病理特征的关系。结果:胃癌组患者血清OPN、CEA和CK18含量均高于对照组(P<0.05)。血清OPN诊断胃癌的ROC曲线下面积大于血清CEA和CK18,两两联合指标诊断胃癌的ROC曲线下面积大于单独指标,三者联合诊断胃癌的ROC曲线下面积最大。随着联合指标的增多,诊断胃癌的灵敏度升高。结论:胃癌患者血清OPN、CEA和CK18水平升高,多指标联合检测诊断胃癌的灵敏度比较高。

食管鳞癌中clusterin的糖基化修饰和表达定位改变

目的:通过分析clusterin的糖基化翻译后修饰状态和定位改变,探讨clusterin在食管鳞癌发生过程中可能的分子机制。方法:对23例食管鳞癌组织及其配对正常食管上皮标本,采用蛋白去糖基化和免疫印迹方法分析不同clusterin蛋白异构体的糖基化修饰状态;采用免疫组化方法分析食管鳞癌组织clusterin异构体定位改变。结果:通常成熟型clusterin在还原状态下相对分子质量为40 000,是一种糖基化的蛋白质,定位于正常食管上皮基底膜下食管黏膜层的疏松结缔组织中并经食管腺分泌到食管黏膜表面和血浆中。23例食管鳞癌组织中clusterin蛋白糖基化修饰均异常,未成熟的clusterin前体和核型clusterin聚集在癌细胞内,而糖化的成熟型clusterin在食管黏膜基质层减少并消失。结论:食管鳞癌中clusterin蛋白的去糖基化修饰及其定位改变可能与肿瘤发生发展密切相关。

胃腺癌组织中SLP-2的表达及其对SGC7901细胞增殖能力的影响

目的:探讨胃腺癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及沉默SLP-2对胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响。方法:采用免疫组化法检测45例胃腺癌患者的癌组织、配对癌旁正常胃黏膜组织中SLP-2蛋白的表达情况,分析其与临床病理特征的关系;将SLP-2siRNA转染SGC7901细胞,采用MTT法和流式细胞术检测转染后细胞的增殖状况及细胞周期。结果:SLP-2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率(68.9%,31/45)高于癌旁正常组织(26.7%,12/45)(χ2=15.429,P<0.001)。胃腺癌组织中SLP-2的表达与淋巴结转移及TNM分期密切相关(校正χ2=4.784,5.318,P均<0.05)。SLP-2siRNA转染SGC7901细胞后,细胞增殖活性降低;G1细胞期增多,S期细胞减少(F=14.459,11.825,P均<0.05)。结论:SLP-2参与了胃腺癌的发生、发展。