枯草芽孢杆菌对黄姑鱼免疫机能的影响

分别在饲料中添加浓度为0(B0组)、1.0×101(1B1组)、5.0×101(1B5组)、1.0×101(2B10组)cfu/kg饲料的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),测定投喂相应饲料前和投喂后的第7、14、21、28 d以及停止投喂枯草芽孢杆菌后的第7、14d黄姑鱼(Nibea albiflora)的血液白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活性和肠上皮内淋巴细胞(iIEL)的变化。结果显示:3种浓度的芽孢杆菌均能显著提高黄姑鱼白细胞吞噬活性、溶菌酶活性,其中以5.0×101(1B5组)、1.0×1012cfu/kg(B10组)2组效果更佳;3种浓度中,只有5.0×101(1B5组)和1.0×1012cfu/kg(B10组)浓度的枯草芽孢杆菌能显著增加黄姑鱼肠上皮内淋巴细胞(iIEL)的相对数量。本研究表明,枯草芽孢杆菌对黄姑鱼的免疫机能有促进作用。

文蛤抗菌物质的粗提及活性检测

为了分离纯化得到文蛤体内的抗菌活性蛋白,以灭活的副溶血弧菌诱导的方法,通过紫外分光光度计法测定其粗提品的蛋白质含量,并进行抗菌活性检测,同时利用硫酸铵沉淀法对粗提物进一步纯化、SDS-PAGE电泳检测纯度。结果显示,文蛤经副溶血弧菌诱导后,产生的抗菌物质在短时间内达到高峰,随后逐渐下降,大约在4h时对大肠杆菌抑制率最高;诱导4h时抑制率与对照相比无显著差异(P>0.05)。在经过硫酸铵沉淀后,SDS-PAGE电泳显示条带较多;进行Sephadex G-50凝胶过滤层析的最佳条件为洗脱流速0.2ml/min、样品浓度3.0mg/ml。

温度、盐度和体重对美国红鱼幼鱼呼吸和排泄的影响

研究了不同温度、盐度及体重对美国红鱼幼鱼呼吸和排泄的影响,结果表明,温度、盐度和体重对试验鱼耗氧率、排氨率影响显著（P〈0.05）。耗氧率随温度的升高而增大并呈指数相关。10-30℃时,排氨率和O/N比随温度升高而明显升高,并且排氨率与温度呈幂函数相关。呼吸Q10处于正常水平,而排泄Q10较低。当盐度10-40时,耗氧率和O/N比先降后升再降,排氨率先降后升;试验鱼耗氧率和排氨率均随体重的增加而下降,呈幂函数相关,但O/N比变化不显著。

中草药对4种南美白对虾致病菌的抑制效果筛选

采用体外抑菌法从23味中草药中筛选抑制南美白对虾致病弧菌的中草药。结果表明:23味中草药对4种南美白对虾致病弧菌均有不同程度的抑菌作用,五倍子、诃子、黄芩和大黄对4种致病弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)较为显著。其对南美白对虾副溶血弧菌的最小抑菌浓度分别为0.06、0.036、0.98和0.98mg/ml;对鳗弧菌的最小抑菌浓度分别为0.24、0.49、0.98和1.95mg/ml;其对需钠弧菌的最小抑菌浓度分别为0.001、0.004、0.49和1.95mg/ml。五倍子、诃子、黄芩和大黄可有效抑制4种南美白对虾致病弧菌。

基于卵黄抗体的副溶血弧菌间接ELISA快速检测方法的建立

本文主要研究了以水产致病性哈氏弧菌为抗原,免疫SPF蛋鸡,制备特异性卵黄抗体,从抗体的提取、纯化等方面进行了进一步的优化研究;建立基于Ig Y的快速、准确、定量的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原菌浓度的技术;建立基于Ig Y的间接ELISA测定抗原浓度的技术方法,确定抗原包被浓度、一抗Ig Y和酶标二抗最适稀释倍数,抗原包被条件的选择,底物的最佳反应时间等间接ELISA的实验条件。建立了基于Ig Y的间接ELISA测定哈氏弧菌的方法,试验的最佳反应条件为:抗原最适工作浓度浓度为1×108cfu/ml,包被4℃过夜;一抗Ig Y稀释度分别为1:28;购买的兔抗鸡Ig Y-HRP酶标抗体作1:20000稀释;选择底物的最佳反应时间为20min。

精制抗副溶血弧菌卵黄抗体的制备与纯化

用灭活浓度为108CFU/ml的副溶血弧菌悬液,加入等体积的弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂,充分乳化,免疫健康海兰蛋鸡,每10d加强免疫1次,第3次加强免疫后1周开始收集鸡蛋。鸡蛋在除去蛋白后用蒸馏水漂洗得到纯卵黄液,应用饱和硫酸铵溶液沉淀法制备粗体的卵黄抗体,再应用Sephadex G-200凝胶层析柱进一步纯化,所得样品经SDSPAGE电泳检测,证实获得精制抗副溶血弧菌卵黄抗体。

副溶血弧菌TDH对大黄鱼的免疫保护效果

本试验以大黄鱼为研究对象,探讨副溶血弧菌TDH对其免疫保护效果。设VPtdh注射免疫处理组和PBS注射对照组,每组做3个重复。免疫处理组每尾鱼腹腔注射0.1ml接种2mg/ml VPtdh,对照组注射相同剂量的灭菌生理盐水,每组鱼接种100尾。试验前和免疫注射第7、14、21和28天,测定抗体水平和相对免疫保护率。结果表明,接种VPtdh后抗体水平较对照组有显著提高,在21d达到峰值;免疫28d后,相对免疫保护率达70.4%。证实副溶血弧菌TDH对大黄鱼有较好的免疫保护效果。

S弯D形矢量喷管参数化设计及气动特性研究

为了满足战机对垂直/短距起降能力的要求,基于曲率控制方法对具有D形出口的S弯喷管进行参数化设计,进而可实现喷管尾段的大角度偏转。随后对不同偏转角、落压比以及设计参数的S弯D形矢量喷管气动特性进行数值模拟,对比并分析了喷管的气动特性。计算结果显示:无偏转条件下,随着落压比π从1.5增大至3.5,喷管流量系数先增大后平稳,在π=2.5时达到最大值,推力系数先增大后减小,且推力方向为飞行器产生一定的抬头力矩;落压比恒定时,随着偏转角度从0°增大至90°,喷管流量系数、推力系数下降,矢量超前角由负值不断增大至+6°左右;设计参数中预留偏转角对喷管气动性能影响较大,而S弯中心线控制系数对气动性能影响较小。本文提出的S弯D形喷管具有较好的气动性能,小偏转角度下矢量角变化趋势较为一致,亦可通过出口段偏转实现发动机推力的大角度矢量偏转。

副溶血弧菌早期快速检测试纸条的建立与应用

病害问题已成为我国水产养殖业发展的瓶颈因素.本课题利用免疫学原理,以副溶血弧菌为研究工具,采用全菌苗、外膜蛋白(OMP)和耐热性溶血素(TDH)为免疫原制备卵黄抗体,比较其特异性差异,研制出灵敏性高、特异性强和稳定性高的副溶血弧菌快速检测试纸条,并在海水养殖区进行应用示范.这将为开展海水养殖动物致病性弧菌的早期快速检测和防控,以及海产品食品质量安全控制提供技术支持;为海水养殖动物弧菌病的防治奠定基础.