白鲢和鳙鱼的随机扩增多态DNA分析

根据鱼类外周血细胞都有核的特点， 采用从冷冻和低渗双重处理分离的细胞核提取基因组ＤＮＡ． 以此法获得的白鲢和鳙鱼的基因组ＤＮＡ为模板， 和Ｏｐｅｒｏｎ 公司生产的ＯＰＮ 和ＯＰＭ 两个组共４０ 个随机引物， 对这两种鱼进行了随机扩增多态ＤＮＡ （ＲＡＰＤ） 分析； 确定了对这两种鱼基因组相关区域可进行随机ＰＣＲ扩增的有效引物， 特别是哪些可产生种群内或群体的ＲＡＰＤ 遗传标记， 即可产生个体特异性和群体特异性ＲＡＰＤ带谱的引物． 讨论了ＲＡＰＤ遗传分子标记在鱼类遗传， 特别是遗传多样性研究， 和鱼类种质资源评估和管理中的应用前景问题．

长江鲢遗传多样性的随机扩增多态DNA分析

运用４０个１０碱基随机引物对长江中游鲢的遗传多样性进行了随机扩增多态ＤＮＡ （ＲＡＰＤ）分析。所用引物中，能在鲢不同个体基因组中扩增出多态ＤＮＡ带的有１０个，占总引物数 的 ２５％．据ＲＡＰＤ带型分析，所取长江鲢自然群体的 １８条样品中，每两个体相比较的遗 传相似度在０．９２８５至０．９７８８之间，平均值为０．９５４３；遗传变异度则在０．０２１２至０．０７１５之 间，平均值为０．０４７２５；群体Ｓｈａｎｎｏｎ表型多样性指数（Ｈｏ）为８．８６１５，Ｓｈａｎｎｏｎ多样性值（Ｈ）为０．０６２４。 讨论了这些数据所反映的长江鲢遗传多样性和鱼类种质资源评价问题。

螅状独缩虫(Cachesium polypinum)遗传多样性的RAPD分析

用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对武汉的汉口 (CP_1)、汉阳 (CP_2 )和武昌 (CP_3)三个地区缘毛类的螅状独缩虫 (Cachesiumpolypinum)进行了遗传多样性分析。结果表明 :这种动物存在广泛的变异 ,三个地域群体之间的遗传相似度为 0 .6 52 2～ 0 .7385(平均值为 0 .6 92 1) ,各群体之间遗传相似度大小依次为 :CP_2—CP_3>CP_1—CP_2 >CP_1—CP_3。本文对这些变异与环境的关系和以RAPD技术研究缘毛类等动物遗传多样性的意义作了分析与讨论。

草鱼的βHCG基因同类物及其染色体定位

本研究以^(?)s标记的人类绒毛膜促性腺激素(humgn chorionic gonadotropin)β链(βHCG)的克隆基因(cDNA)为探针,分別与人类、草鱼(Cteaopharynogodon idellus)和枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)的总DNA进行点杂交,以~3H标记的同一探针与草鱼中期染色体作原位杂交,结果表明:草鱼基因组中存在βHCG基因的同类物,这一同类物的基因座位在草鱼m组一染色体(可能是第4号染色体)一个臂的末端。本文对所得结果的意义进行了讨论。

中国仓鼠与草鱼体细胞融合的初步研究

以仙台病毒作融合处理,在所观察的分裂相中,有0.5—1％的细胞为含两种动物染色体的新型细胞——鼠/鱼杂种细胞。

双壳纲动物核糖体RNA 185-ITS1序列及其在分子系统发育研究中的应用

测定了双壳纲不同科、属、种及种内共11个个体的核糖体RNA 18S-ITS1序列。结果表明,该序列在种间存在很高的多态性,长度从558bp到784bp不等,碱基差异百分比在10.7％～61.7％之间,ITS1序列同源性很低,有片段的插入与缺失。种间18S部分序列碱基差异百分比在0.9％～23.7％之间,变化主要是碱基的转换。用邻接法(NJ)构建了8个种的18S部分序列(约240bp)的系统发育树,与传统形态学分类结果相符。马氏珠母贝(Pinctada martensi)4个不同地域个体间的序列差异百分比在0.6％～1.9％之间。分析指出:18S基因可以作为双壳纲动物高阶元系统发育的分子标记;ITS1序列种间变化很大,可以应用于该纲物种的分类及鉴别,在亲缘关系相近种及种内变异相对较小,但核苷酸变异位点信息量丰富,可用于属内种间、亚种和群体间的遗传多样性研究。

野生马氏珠母贝子一代的遗传多样性

分析了海南省三亚与广西省北海两地野生贝群体内交配所得子代两群体 (SS、BB)和群体间交配(SS♀ ×BB♂ →BS)所得子代群体 (BS)各 8个个体的遗传多样性。筛选的 2 0个含 1 0碱基的随机引物中 ,其中 1 4个产生稳定的可重复的多态扩增结果 ,共检测出 1 2 4个位点。用修正的Shannon表型多态性指数量化三个群体的遗传多态度 ,SS、BB、BS三群体的多态度分别为 0 2 47,0 2 3 7,0 2 61。SS与BB ,SS与BS ,BB与BS三群体间的遗传相似度分别为 87 2 4% ,80 3 9% ,83 90 %。

马氏珠母贝遗传多样性的RAPD分析

采用 OPM组 2 0个碱基随机引物对海南三亚 (SY) ,海南洋浦港 (YP) ,广西涠洲岛 (WZ)的 3个天然群体和广东雷州人工养殖群体 (L Z)的马氏珠母贝进行了 RAPD分析 .其群体内的平均遗传相似度 (similarity,S)分别是 0 .5 86 6 ,0 .6 5 14,0 .6 6 6 6 ,0 .715 8,由低到高依次为 SY<YP<WZ<L Z;群体内的遗传变异度 (variability,V)分别是 0 .4134 ,0 .34 86 ,0 .3334 ,0 .2 842 ,大小由高到低依次为 SY>YP>WZ>L Z.结果表示 :天然群体的遗传多样性大于养殖群体的遗传多样性 .

马氏珠母贝与解氏珠母贝的随机扩增多态DNA分析

用 OPM组 2 0种碱基随机引物对采自海南洋浦的马氏珠母贝 (Pinctada martensii)和解氏珠母贝(P.chemmitri)天然群体进行 RAPD分析 ,其中 6种引物扩增有效。这 6种引物对马氏珠母贝和解氏珠母贝的总扩增带数分别为 5 2条和 5 8条。每一引物的扩增带数为 3～ 16条 ,同一引物对两种贝类的扩增带数不同 (OPM19除外 ) ,对两贝类的扩增带型也有较大差异。群体内的各个个体 (实验个体为 10个 ) RAPD扩增带谱全部呈多态 ,表明在同一群体中 ,各个体存在着明显的个体特征带。由于样品数量及引物数均少 ,2种贝类各自种群的共同特征尚未能确定。

近江牡蛎受精细胞学研究

用醋酸──地衣红染色的方法对近江牡蛎人工授精的卵子减数分裂和受精过程进行了详细的细胞学观察．精子入卵前，卵子处于第一次减数分裂的前期（胚泡期），精子入卵后，胚泡消失，然后进行两次减数分裂，在海水温度为２８．８℃的情况下，授精后３３ｍｉｎ和４５ｍｉｎ，绝大部分受精卵已排出第一极体和第二极体，雄原核可在第一极体排出后及第二极体排出前任何时期内形成，雌雄原核以联合的方式将两组染色体合并，授精后１ｈ，大部分卵子完成第一次卵裂．在２５℃和２６℃授精的情况下，观察到了较多的多精入卵的现象．卵子发育的非同步性现象非常明显．

热启动PCR快速制备地高辛标记探针

介绍了一种在热启动ＰＣＲ中，以Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ部分代替ｄＴＴＰ，从少量基因组ＤＮＡ中快速制备大量的地高辛标记的探针的方法，此探针灵敏度达０．０３ｐｇ，并只和相关的ＤＮＡ特异杂交。

利用三种分子标记研究缘毛类纤毛虫的系统发育地位

为了探讨缘毛类纤毛虫的系统发育地位 ,利用RAPD方法得到了 9种缘毛类纤毛虫、 1种四膜虫和1种喇叭虫的 3个随机引物的电泳带谱 ;测定了 7种缘毛类纤毛虫rRNA基因中的间隔区 1(ITS1)和小亚基核糖体核糖核酸 (SSrRNA)基因序列 ,并构建了相应的系统树。在比较和分析RAPD、ITS1和SSrRNA基因序列在缘毛类纤毛虫系统发育研究中的适用范围的基础上 ,以SSrRNA基因序列为分子标记研究了缘毛类纤毛虫系统发育地位 ,结果表明 :①缘毛亚纲是单系的 ,作为寡膜纲中一个亚纲的分类地位是合理的 ;②缘毛类纤毛虫可能是寡膜纲中较高等的一个类群。

长江鳙遗传多样性的研究

运用40 个10 碱基随机引物对长江中游鳙(Aristchthysnobilis)的遗传多样性进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析. 所用引物中,有10 个能对鳙不同个体扩增出多态DNA 带,占总引物数的25% . 据所取长江中游自然繁殖的18条鳙样品的RAPD谱带的分析结果表明,鳙任意两个体间的遗传相似度在0.938 6～0.985 7之间,平均值为0.966 1;遗传变异度则在0.014 3～0.061 4 之间,平均值为0.043 9;所分析样本的Shannon 表型多样性指数(Ho)为7.285 8,Shannon 多样性值(H)为0.053 2. 人工繁殖鳙的遗传变异度和Shannon 表型多样性指数均明显低于长江自然繁殖群体.

罗氏沼虾遗传多样性的RAPD研究

采用 RAPD技术 ,对 2 0世纪 70年代从马来西亚引进的 7对罗氏沼虾后代的养殖群体 (简称 NY)和90年代从新加坡引进的天然群体的 F1与养殖群体交配繁殖的后代 (简称 NX)的遗传多样性进行了研究 .用OPM组随机引物对两个群体的基因组 DNA进行分析的结果表明 ,扩增的 DNA片段大小在 0 .1～ 1.5 kb之间 .NY群体内的平均遗传相似度 (similarity,S)为 0 .8819,NX群体内的平均遗传相似度 (S)为 0 .5 85 7.他们的遗传变异度 (variability,V)分别是 0 .1181和 0 .4143.NY群体的变异度明显小于 NX群体 .这可能与 NY群体长时期的近亲间或在小群体内繁殖导致种群退化有关 .

大鲵精子入卵过程的扫描电镜观察

采用扫描电镜观察了大鲵精子的形状，受精过程中卵壳膜的变化，及精子入卵的过程．人工催产的精子头部具有棒状和辣椒状两种形状．卵壳膜随着受精时间的变化而出现皱褶、沟与嵴，受精完毕，皱褶消失．大鲵属于多精入卵，精、卵相遇６０ｓ，精子接触卵膜，授精７５ｓ精子头部一半进入卵内．授精９０ｓ精子头部和颈部完全进入卵内，但精子尾部留在卵膜外面；授精２ｍｉｎ，受精完毕．

不同地区鲢鱼人工繁殖群体遗传多样性比较研究

对湖北荆州和广西昭平的两个链鱼 (Hypophthalmichtysmolitrix)人工繁殖群体进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析。结果表明 ,鲢鱼两个人繁群体内个体间的遗传相似度分别为 0 9715和 0 96 6 5,Shannon表型多样性指数分别为 6 2 6 9和 7 86 6。

合浦珠母贝受精细胞学观察

用醋酸－地衣红染色制片的方法对合浦珠母贝卵子减数分裂和受精过程进行了详细的细胞学观察。精子入卵前，卵子停留于第一次减数分裂中期。精子入卵后，卵子开始成熟分裂，在海水温度２２℃的条件下，授精后２２ｍｉｎ及３９ｍｉｎ绝大部分卵子分别完成第一次减数分裂和第二次砬数分裂，排出第一极体和第二极体，雌雄原核分别形成，其染色体逐渐凝集，形成两组染色体，最后在卵裂的赤道板上联合，７１ｍｉｎ后。

用染色体原位杂交技术定位猪βHCG基因同类物于14q^(11)-q^(16)

本研究以点渍法和原位杂交技术为主要方法,以人类绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Go-nadotropin)β链的克隆基因为探针,开展猪的基因定位研究。证明猪的基因组中存在βHCG基因同类物,并将其定位于染色体14q^(11)-q^(16).本文还对一些相关问题进行了讨论。

同步化技术在草鱼染色体显带中的应用及草鱼核型的初步分析

对草鱼细胞进行同步化处理,并在DNA复制的早期和晚期分别掺入BrdU,制备的染色体标本置于CaCl_2溶液中温浴同时用紫外线照射,然后用Giemsa染色即可分别显示出G带和R带。标本中的部分晚前期和早中期分裂相具有高分辨染色体显带特征。用这一技术对草鱼每条染色体进行识别和分析,提出了初步的草鱼核型,发现了四对草鱼染色体具有随体。

中华乌塘鳢染色体核型研究

中华乌塘鳢染色体核型研究沈亦平，王孝举，陈晓汉，马文涛，刘汀，张锡元（武汉大学生命科学学院，武汉，４３００７２）（广西海洋研究所养殖室，北海，５３６０００）关键词中华乌塘鳢，染色体，核型中国法分类号Ｑ９５９．４，Ｑ３４３·２鱼类染色体核型研究是开展鱼...