利用新型红酵母苯丙氨酸解氨酶制备低苯丙氨酸酪蛋白

【目的】挖掘高活性、高稳定性的苯丙氨酸解氨酶(EC 4.3.1.24;penylalanine ammonia-lyase,PAL),为后续在制备无(低)苯丙氨酸特膳食品的应用奠定基础。【方法】从胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)和双倒卵形红酵母(Rhodotorula diobovata)中克隆到基因RmPAL和RdPAL,并通过生物信息学分析两个酶的序列和结构特征;在大肠杆菌中异源表达纯化RmPAL和RdPAL蛋白,测定最适反应条件和底物特异性;通过高效液相色谱和苯丙氨酸试剂盒测定了RmPAL和RdPAL转化酸解酪蛋白(casein acid hydrolysate,CAH)中苯丙氨酸(L-phenylalanine,L-Phe)的能力。【结果】RmPAL和RdPAL是真菌来源的PAL,分别由3个结构域组成:MIO结构域(MIO domain)、核心结构域(core domain)和屏蔽结构域(shielding domain),活性中心具有催化氨基酸Tyr和底物特异性特征氨基酸His;RmPAL和RdPAL在溶液中均以四聚体形式存在,两个酶的最适pH和最适温度均为8.9和50℃,且具有较宽泛的pH和温度稳定性,优于黏红酵母来源的商用PAL酶;此外,两种酶均能催化L-Phe和酪氨酸(L-tyrosine,L-Tyr)反应,且对L-Phe的催化效率较高,约为L-Tyr的5倍,脱除酸解酪蛋白中L-Phe的转化率分别为88%和93%。【结论】RmPAL和RdPAL具有较强稳定性和L-Phe水解偏好性,可从食源蛋白中有效去除L-Phe。

基于计算设计的GH11家族木聚糖酶CDBFV的热稳定性改造及潜在机制研究

【目的】瘤胃真菌Neocallimastix patriciarum GH11家族木聚糖酶CDBFV在饲料、食品等领域具有良好应用前景,提高其热稳定性对其生产应用十分重要。【方法】使用分子动力学模拟、机器学习等策略设计潜在CDBFV热稳定性突变体,在大肠杆菌和毕赤酵母中进行异源表达纯化,测定最适反应条件、比酶活和85℃孵育3 min后相对剩余活力,通过结构分析明确热稳定性提高机制。【结果】位于CDBFV N端基序~(36)GNNS~(39)具有较高柔性,对其改造设计的单突变体N37P和N38V在85℃孵育3 min后,相对活力分别降低至70.3%和55.1%,较野生型(48.7%)提升了21.6%和6.5%;进而,在相对活力提升显著的N37P基础上叠加已报道优势突变体N88G,构建双突变体N37P/N88G,其相对活力达到了73.4%,较野生型提高了24.7%;此外,将N37P/N88G在毕赤酵母中进行了分泌表达,在85℃处理3 min后,相对活力达到了88.8%;结构分析表明,N37P突变的引入使得CDBFV形成了新的氢键相互作用,降低活性位点附近柔性,并干预了糖基化形成,进而提高了热稳定性。【结论】成功得到了高耐热双突变体N37P/N88G,为提高GH11家族木聚糖酶的热稳定性改造提供了新的思路和方法,有望推动CDBFV在饲料工业等高温环境下的广泛应用。

特定电磁波治疗仪联合鹿瓜多肽治疗老年性腰腿痛的疗效观察

目的观察特定电磁波治疗仪联合鹿瓜多肽治疗老年性腰腿痛的治疗效果。方法将129例老年性腰腿痛患者随机分为A、B、C3组,每组43人。A组:用特定电磁波治疗仪照射治疗,每次30 min,2次/日,15天一疗程;B组:肌注鹿瓜多肽治疗,每次8mg,1次/日,15天为一疗程;C组:用特定电磁波治疗仪照射联合鹿瓜多肽肌注治疗,特定电磁波治疗仪照射,每次30 min,2次/日,鹿瓜多肽肌注每次8mg,1次/日;15天为一疗程。每组患者均在治疗前及2个疗程结束后进行VAS疼痛评分。结果 A组VAS疼痛评分治疗前(5.32±0.82)分,治疗后(4.27±0.76)分,差异具有统计学意义(P<0.05);B组VAS疼痛评分治疗前为(5.41±0.75)分,治疗后为(4.15±0.91)分,差异具有统计学意义(P<0.05);C组VAS疼痛评分治疗前为(5.61±0.96)分,治疗后为(2.21±0.46)分,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论特定电磁波治疗仪照射联合鹿瓜多肽肌注治疗老年性腰腿痛疗效更好。

叙事护理模式对妊娠糖尿病产妇分娩的影响

目的 分析叙事护理模式对妊娠糖尿病产妇分娩的影响。方法 选取我院收治的56例妊娠糖尿病产妇作为研究对象,将其按照随机数表法分为对照组(28例,使用常规方法护理)和观察组(28例,使用叙事护理模式)。对两组的护理效果进行分析。结果 两组患者在接受护理后均取得一定效果,但观察组在采用叙事护理模式后,其血糖控制情况、自我管理评分、饮食行为情况、治疗依从性、分娩情况、妊娠结局均优于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 在妊娠糖尿病产妇护理过程中,采用叙事护理模式能取得较佳的效果,可有效控制患者的血糖水平,提升其自我管理能力,促进其合理饮食,从而提升其治疗依从性,促进其良好分娩,改善妊娠结局。

复方丹参滴丸和单硝酸异山梨酯缓释片对不稳定性心绞痛的疗效比较

目的观察复方丹参滴丸和单硝酸异山梨酯缓释片联合应用对不稳定性心绞痛的临床疗效,并进行比较。方法将92例不稳定性心绞痛患者随机分为观察组和对照组,观察组在支持治疗基础上给予复方丹参滴丸和单硝酸异山梨酯缓释片联合使用,对照组仅给予临床常规支持治疗,治疗两个月后对两组患者的临床治疗效果进行比较。结果复方丹参滴丸和单硝酸异山梨酯缓释片联合应用治疗不稳定性心绞痛疗效优于对照组(P<0.05)。结论复方丹参滴丸联合单硝酸异山梨酯缓释片治疗不稳定性心绞痛,临床治疗效果满意。

一种基于拍卖理论的移动Agent资源分配模型

描述了 1种以区间值为价格的移动 Agent资源底价密封拍卖模型 。

我国农村土地信托流转模式的构建

本文在总结国内外土地信托流转的研究现状和分析农村土地信托流转比较优势的基础上,从现行政策、法律依据及农村土地信托流转的实践基础和条件,对我国开展农村土地信托流转的可行性作了探析。并通过对益阳市和绍兴市土地信托流转试点的研究,分析了农村土地信托流转的运行机制和实施困境。从而综合农村土地信托流转中各当事人的权利与义务、土地信托的收益分配与风险承担机制以及相应的配套政策与措施等因素,提出了符合中国国情的农村土地信托流转模式。

老年性高血压患者左心功能不全康复训练效果观察

由于人口的老龄化,老年性高血压发病率也在逐步升高。随着高血压病程的进展,其心功能也发生变化,由心功能代偿开始逐渐出现左心功能不全,在这过程中由于心脏舒张功能和收缩功能的减退,一方面使组织、器官供血减少,肺和外周组织器官淤血,患者出现乏力,气急等不适,运动耐量下降。另一方面使心室率代偿性增快,心肌耗氧量增加,血压升高。而长期的高血压引起左心室排血阻力增高,

踝臂指数对冠状动脉狭窄程度预测价值的临床分析

目的本研究目的是通过与冠状动脉造影和心脏CT冠脉成像结果的相关性分析,评价踝臂指数(ABI)对临床冠心病病人危险程度预测的意义。方法收集曾经做过冠状动脉造影或心脏CT冠脉成像的病人76例,运用Gensini积分系统,将各组病人冠状动脉病变程度进行评分。并对其进行踝臂指数测量,分析踝臂指数与冠状动脉病变程度的相关性。结果三支病变组ABI(0.81±0.18),与正常组ABI(1.07±0.16,P<0.01)和单支病变组ABI(0.98±0.12,P<0.05)之间有显著性差异,两支病变组ABI(0.87±0.20)明显低于正常组ABI(1.07±0.16),有显著差异,P<0.05。病人ABI与Gensini评分呈明显负相关。结论 ABI是一种简单易行、无创的检查方法,对冠心病病人有较好的预测价值。

德氏乳杆菌保加利亚亚种冷冻干燥活力影响因素的研究

研究了复原脱脂乳中添加生长因子与中和剂对德氏乳杆菌保加利亚亚种Lb18生长的影响,添加1%生长因子和1%碳酸钙可使Lb18的对数生长期延长,活菌数达109cfu/mL以上。研究了菌龄、冻干保护剂组成和冻干前预处理等因素对Lb18冷冻干燥存活率和活力的影响。最佳收获菌龄为4.5h,具有较好的冷冻干燥抗性;保护剂实验表明,3%复原脱脂乳、3%乳糖、3%甘油组成的冻干保护剂的冻干存活率达到68.9%,具有较快的产酸能力;确定在42℃预处理1h,Lb18的存活率可达75.9%。根据以上优化条件制备得到的冻干发酵剂使复原脱脂乳发生凝乳所需要的时间为4.5h,基本可以满足酸乳工业生产的要求。研究结果对于高活力酸奶发酵剂的开发和应用具有一定的指导和应用价值。

微机与一种主动发送式智能仪表的通信算法

为了解决工业控制中微机与仪表的通信问题,以冰箱环境模拟试验室温度监控系统为背景,给出了一种通过RS232方式、利用VB的MSComm控件实现的微机与主动发送式智能仪表的通信算法,并详细叙述了该算法所需的数据结构和数据采集及处理的具体流程。该算法已在实践中得到广泛应用。

一种基于网络的多服务器冰箱抽样测试系统

针对冰箱企业中存在多个抽样室的情况 ,本文提出了 1种基于网络的多服务器抽样测试系统的设计方案 ,并给出了实现方法。该系统为企业类似测试系统的应用提供了

工业建设项目地下水污染防控研究

地下水资源污染防控管理重在预防,随着污染源特征的变化,对地下水污染问题的防控对策也存在差异化。结合我国地下水污染防控治理规划要求,因地制宜的建立工业类建设项目地下水污染防控体系就显得尤为必要。

《天使A》中电影语言的意蕴

《天使A》中的安吉拉是善、爱与美的化身,在她对迷失自我的安德烈的拯救中,展示安吉拉拯救的力量和安德烈在人性回归途中洒下的泪水。这部黑白影片在运用电影语言方面有独特的特点。影片在人性回归中表达出深刻哲理意蕴。

海达·高布乐的酒神梦

1890年，挪威伟大的“现代戏剧之父”亨利克·易卜生的四幕剧《海达·高布乐》出版。1891年，这部戏剧在德国、丹麦、挪威公演。毫无疑问，易卜生的这部象征主义戏剧并不是虚无缥缈没有根基的浮萍，其中依然蕴含着丰富的心理现实与社会现实问题；他的这部象征主义戏剧也完全没有脱离社会问题的轨道。而是在批判现实的基础上借助象征的羽翼飞向对人性的深层探寻与对生命的本质追求。因此易卜生的象征剧是现实与象征的紧密结合，水乳交融。

基督的复活——莎士比亚剧作对人性恶的探索

莎士比亚作为一个世界级的戏剧大师，其戏剧是深刻思想与精湛艺术的完美结合，这已是一个举世公认的真理。莎士比亚以戏剧作为自己的人生舞台，一生在不断思索人性，探索人生，纵观其全部著作，俨然是一个丰富多彩无与伦比的大千世界。所以我们在研究莎士比亚的时候，也应该把它作为一个整体来看待，来思考。在莎士比亚的《奥瑟罗》、《辛白林》和《冬天的故事》中都出现了相似的三角关系。苔丝狄蒙娜、奥瑟罗和凯西奥是一组，伊摩琴、普修莫斯和埃契摩是一组，赫美温妮、列昂特斯和波力克希尼斯是一组。这儿部戏剧都是借助了婚姻中的夫妻关系来探讨人性中的恶、嫉妒这一共同的主题。这几部戏剧中存在的内部承继关系足以抵消我们的疑惑，正如莎士比亚在《冬天的故事》中借时间老人所说，“我既有能力推翻一切世间的习俗，又何必俯就古往今来规则的束缚？”所以在莎士比亚身上，我们看到的是他站在整个人类的高度来思考来写作，他不把艺术规则奉为至宝，他所追求的是对人类有益的艺术，为此甚至忽视对艺术规则的遵守。

青海联通“三个合作”见成效

位于高寒缺氧、地广人稀、经济发展相对滞后地区的青海联通人在市场有限、竞争激烈的环境中，发扬高原人特别能吃苦、特别能忍耐、特别能战斗的“牦牛精神”，不断强化竞争意识、风险意识和效益意识，广开思路、拓宽市场，实施低成本扩张。在c网放号、数据业务、长途业务、无线寻呼、互联网业务稳步增长的同时，G网放号较去年翻了一番，业务收入较去年同期增长60％，使2002年成为公司有史以来业务发展最快、收入增幅最高的一年。

乳腺癌组织中VEGF-D、MMP-2及MMP-9的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子D（VEGF-D）表达的临床意义。方法采用免疫组化法,对60例乳腺癌组织及60例正常组织中MMP-2、MMP-9及VEGF-D表达情况进行检测。结果 60例乳腺癌组织中,MMP-2、MMP-9阳性表达率分别为61.67%、56.67%,VEGF-D阳性表达率为61.67%。MMP-2、MMP-9及VEGF-D阳性表达率Ⅲ-Ⅳ期者显著高于Ⅰ-Ⅱ期者;低分化者显著高于高、中分化者;有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者;且MMP-2与VEGF-D表达,MMP-9与VEGF-D表达均呈正相关性。结论低分化、Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌患者高表达MMP-2、MMP-9与VEGF-D,MMPs与VEGF-D表达呈正相关性,可通过阻断VEGF-D及MMPs活性控制、治疗乳腺癌。