一种蛹虫草萃取物胶囊的免疫功能研究

目的研究蛹虫草萃取物胶囊的免疫功能调节作用。方法SPF级昆明种雌性小鼠共240只,随机分为4个剂量组,开展6个实验。实验组为高、中、低对应1.06、0.35、0.18 g·kg^(-1)剂量,经口给予(相当人体推荐量的30、10、5倍)受试物,溶剂对照组经口给予蒸馏水,依据《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》进行免疫功能评价。结果与溶剂对照组比较,迟发型变态反应实验高、中剂量组显著增强(P<0.05);体液免疫血清溶血素测定高、低剂量组显著增强(P<0.05);抗体生成细胞检测中、低剂量组显著增强(P<0.05);单核-巨噬细胞小鼠碳廓清试验高剂量组显著增强(P<0.05)。结论该配方具有免疫功能调节作用,值得深入研究。

花生引种试验

为更好地挖掘花生增产潜力,丰富新疆生产建设兵团第六师垦区农业种植结构,引进高产、优质花生新品种6个,以鲁花11号为对照,开展品种比较试验,筛选适宜当地种植的花生品种。通过对参试品种的生育期、农艺性状、抗逆性调查及产量测定,结果表明:6个引进的花生品种均能较好适应当地气候环境,其中秋乐花177、潍花8号较对照品种鲁花11号增产14.88%~15.26%,表现出高产优质特性,可在当地推广种植。

神经酰胺通过JNK-c-Jun信号通路诱导胶质瘤细胞自噬性死亡

目的探讨神经酰胺对大鼠脑胶质瘤细胞C6自噬性死亡的影响及其作用机制。方法不同浓度神经酰胺作用于C6细胞后,用MTT法检测细胞的存活率,流式法检测细胞凋亡的改变;Western blotting及电镜的方法观察细胞自噬水平的改变,以及JNK及其下游靶分子c-Jun的磷酸化水平变化;最后进一步借助JNK特异性抑制剂SP600125抑制JNK的活性,观察其对神经酰胺诱导的细胞自噬情况的影响。结果与对照组相比,神经酰胺作用24 h后,C6细胞存活率明显降低,且具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,神经酰胺作用24 h后,C6细胞死亡明显升高且具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),但其中凋亡性死亡比例较低;神经酰胺作用后细胞内自噬小体数目,LC3B/LC3A的比值,Beclin-1的表达水平,以及JNK和c-Jun磷酸化水平都显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);提前给予JNK特异性抑制剂SP600125抑制JNK的活性后,显著阻断神经酰胺诱导的细胞自噬。结论神经酰胺可诱导胶质瘤细胞C6发生自噬性死亡,其诱导胶质瘤细胞发生自噬的机制可能与激活JNK信号通路有关。

神经酰胺通过JNK/c-Jun信号通路诱导胶质瘤细胞自噬性死亡

目的探讨神经酰胺对胶质瘤细胞87-MG和U251自噬性死亡的作用及机制。方法采用MTT和流式细胞的方法检测不同浓度神经酰胺刺激87-MG和U251细胞后细胞存活和凋亡的改变;电镜和Western blotting技术检测自噬和JNK/c-Jun信号通路的改变,JNK药理性抑制剂SP600125特异性抑制JNK通路,观察其对神经酰胺诱导自噬死亡的影响。结果神经酰胺刺激24 h后,87-MG和U251存活呈现时间依赖性下降(P<0.05);相应的细胞死亡数目剂量依赖性升高(P<0.05),但凋亡性死亡比例较低;神经酰胺刺激后镜下观察到的自噬小体计数,LC3B/LC3A和Beclin-1的表达以及JNK/c-Jun的磷酸化程度都增加(P<0.05)。提前给予SP600125抑制JNK信号通路的活性后,可以阻断神经酰胺诱导的细胞自噬性死亡(P<0.05)。结论神经酰胺可诱导胶质瘤细胞87-MG和U251出现自噬性死亡,机制可能与JNK信号通路的活化有关。

防晒化妆品抵抗UVA和UVB能力评价研究

以抵抗UVA和UVB能力为检测指标,采用体外紫外分光光度法,利用紫外线照射评价市售防晒霜、防晒液、粉底(液)、粉饼和眼霜的防晒功效和光稳定性,并研究随涂抹时间其防晒功效的变化情况。

两种增加骨密度功能保健食品的功效研究

目的对2种以碳酸钙、氨基酸葡萄糖、硫酸软骨素为主要组分但不同配比的增加骨密度类保健食品的功效进行验证,从配方角度进行分析评价。方法采用相当于人体推荐剂量的5、10、30倍浓度分别将氨糖软骨素片(0.33、0.67、2.00 g/kg)及骨密度强化胶囊(0.25、0.5、1.5 g/kg)掺入饲料给予大鼠90 d,同时分别设置与30倍剂量组钙含量相同的碳酸钙对照组。测定大鼠体质量、股骨质量、股骨密度及股骨钙含量等指标,对比配方及结果进行分析和讨论。结果股骨质量,增加骨密度胶囊10、30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);股骨中点骨密度,增加骨密度胶囊30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片30倍剂量组与碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);股骨远心端骨密度,增加骨密度胶囊10、30倍剂量组与相应碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片10、30倍剂量组与相应碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);股骨钙含量,增加骨密度胶囊30倍剂量组与相应碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05)。氨糖软骨素片10倍、30倍剂量组与30倍碳酸钙组比较差异无统计学意义(P>0.05);饲料钙含量,低钙饲料实测钙含量为1.2 mg/g。结论2种配方的保健食品均具有增加骨密度功效,氨糖软骨素片较增加骨密度胶囊配方更合理。

一种芦荟成分为主保健食品通便功效的动物试验研究

目的评价以芦荟全叶冻干粉、小麦膳食纤维、苹果醋粉等为主要成分的保健食品通便功能。方法按卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中润肠通便功能检验方法开展实验。经口给予小鼠3.0、1.0、0.5 g/kg体质量(相当人体推荐量的30、10、5倍)剂量的受试物15 d,采用不同剂量的复方地芬诺酯制备肠蠕动抑制模型和便秘模型。测定肠蠕动抑制模型小鼠小肠墨汁推进率、便秘小鼠排便时间、排粪便粒数和粪便重量。结果各剂量组小鼠各周体质量、体质量增加值未见明显变化;受试物低、中剂量组的小肠推进速度、第一粒黑便排出时间、6 h排黑便粒数和黑便总重量与模型对照组比较变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05);受试物高剂量组的小肠墨汁推进率和墨汁推进转换值则有明显增加,第一粒黑便排出时间提前,6 h排黑便粒数和黑便总重量有明显增加,与模型对照组比较,统计学分析差异有统计学意义(P<0.05)。结论根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版),该受试物具有通便功能。

二氢卟吩e4甘氨酸酰胺对小鼠S180移植肉瘤的光动力学效应

目的探讨630 nm及661 nm激光激发不同剂量的二氢卟吩e4甘氨酸酰胺(e4),对荷S180肉瘤小鼠的光动力学效应。方法昆明小鼠54只单侧腋下接种S180肉瘤,待肿瘤长至直径为6～8 mm时,随机分为空白对照组和PDT组。PDT组又分设e4 5 mg/kg和10 mg/kg两剂量组。小鼠尾静脉注射光敏剂后3 h,分别用630 nm或661 nm激光以150 mW/cm^2的功率密度垂直照射瘤体20 min,即能量密度180 J/cm^2,光斑直径1.5 cm。照光1周后取瘤组织称重并计算抑瘤率。结果630 nm和661 nm激光照射组均表现出光动力抑瘤效果。经630 nm激光照射,e4 5 mg/kg和10 mg/kg组的抑瘤率分别为35.5%和39.0%,两者差异无显著性意义(P>0.05)。而经661 nm激光照射,e4 5 mg/kg和10 mg/kg组的抑瘤率分别为50.49%及61.18%,两者差异有显著性意义(P<0.01)。而在同一e4浓度下,波长661 nm组较630 nm组的抑瘤率高(P<0.01)。结论二氢卟吩e4甘氨酸酰胺-PDT对小鼠S180肉瘤有明确的抑瘤作用,且661 nm激光的动力学抑瘤效应大于630 nm激光。

MGMT与脑胶质瘤相关性的实验研究

目的:通过分析探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化与MGMT蛋白表达的情况,以期为脑胶质瘤的临床个体化治疗提供一定的理论基础。方法:收集45例脑胶质瘤和11例正常脑组织石蜡标本,采用免疫组化方法分别检测MGMT在56例标本中的表达情况,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测45例脑胶质瘤中MGMT基因启动子甲基化情况。结果:脑胶质瘤组织与正常脑组织中MGMT的表达差异有统计学意义。不同级别胶质瘤之间的MGMT表达差异无统计学意义。胶质瘤中MGMT的表达与患者的性别及年龄之间的差异无统计学意义。胶质瘤中MGMT蛋白表达与MGMT基因启动子甲基化存在负相关。不同级别脑胶质瘤中MGMT基因启动子甲基化的表达差异无统计学意义。结论:MGMT的表达与肿瘤的恶性程度无相关性,但与烷化剂耐药有关。临床上为患者制订个性化治疗方案时,不能单独考虑性别、年龄的因素。使用烷化剂化疗前测定肿瘤细胞的MGMT活性具有一定的指导意义。

HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕块成纤维细胞增殖能力及其超微结构的影响

目的观察血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)-光动力学疗法(photodynamie therapy,PDT)对兔耳增生性瘢痕块中成纤维细胞增殖能力及细胞超微结构的影响。方法建立兔耳增生性瘢痕模型后,将24个瘢痕块随机分为HMME-PDT治疗组和对照组(n=12)。造模后28 d取材行银染色,计算瘢痕成纤维细胞核内AgNORs颗粒数,并在透射电镜下观察细胞超微结构改变,分析HMME-PDT对瘢痕的影响。结果HMME-PDT治疗后,银染成纤维细胞核内AgNORs颗粒数显著下降,细胞内粗面内质网萎缩且数量减少;核糖体脱颗粒、解聚;线粒体肿胀,嵴溶解;并出现部分细胞凋亡现象。结论在瘢痕形成早期,HMME-PDT能够抑制兔耳瘢痕成纤维细胞的增殖能力,破坏前胶原蛋白合成的场所,减少胶原蛋白的合成与分泌,并能诱导部分成纤维细胞进入凋亡途径,HMME-PDT有可能成为瘢痕防治的有效方法。

两品系小鼠局部淋巴结试验结果比较

目的分析比较BALB/c和CBA小鼠局部淋巴结试验结果。方法将已知致敏性的4种化学物(2,4-二硝基氯苯、丁子香酚、己基肉桂醛和异丙醇)和未知致敏性的3种化妆品对BALB/c和CBA小鼠连续染毒3d,第5天腹腔注射示踪剂BrdU,第6天分离颌下淋巴结制取单细胞悬液,用ELISA试盒检测细胞增殖。结果2,4-二硝基氯苯、丁子香酚、己基肉桂醛和3号烫发剂两品系结果均呈致敏阳性,3种化学物EC1.6值分别为0.08%(极强)、4.02%(中)、6.68%(中)(BALB/c)和0.07%(极强)、6.08%(中)、8.89%(中)(CBA);异丙醇、1和2号化妆品两品系结果均为致敏阴性,SI均小于1.6。结论两品系小鼠局部淋巴结试验结果较一致,BALB/c可替代CBA小鼠应用于化学物和化妆品的致敏性评价。

不同参数HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕的生物效应

目的观察不同参数的血卟啉单甲醚-光动力学疗法(HMME-PDT)对兔耳增生性瘢痕的生物学效应,为临床应用HMME—PDT防治增生性瘢痕提供实验依据。方法建立兔耳增生性瘢痕模型后,将150个增生性瘢痕块随机分为HMME-PDT治疗组和对照组。PDT治疗组给予HMME10mg/kg,分别在给药后即刻、30 min、1和3h行半导体激光照射,波长630nm,能量密度分别为5、10和20 J/cm^2。观察瘢痕生长情况,术后28d取材行常规HE染色,计算各组瘢痕增生指数,分析HMME-PDT对瘢痕的影响。结果静脉注射HMME 10mg/kg后,以功率密度为20 mW/cm^2,能量密度为5J/cm^2的半导体激光在给药后即刻和30min照光时能对瘢痕增生块产生抑制效应,其中以时间间隔为30min时的作用更加显著,而能量密度为20J/cm^2的激光照射瘢痕增生指数仍然较高,甚至超过空白对照组。结论HMME—PDT对兔耳增生性瘢痕的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、给药后至照光的时间间隔和能量密度密切相关。

大鼠性别及血清保存条件对生化检测结果的影响研究

目的研究大鼠不同性别、血清样本放置条件及时间对生化检验结果的影响。方法 80只大鼠编号后一次性取静脉血,放置30min后离心,每只鼠血清分成8份。首次(1h)检测后,所有血清至于-80℃冰箱保存,一份于1、2、4、7、11、23、40d时间点重复解冻、检测后复存于-80℃冰箱;其余七份分别于以上时间点单次解冻、检测后丢弃;检测项目均为谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)。结果雄性、雌性大鼠血清样本-80℃冰箱保存至40d 9个生化指标均与1h差异无统计学意义;雌性大鼠血清样本保存-80℃在1d、2d、4d、7d 4个时间点重复解冻,部分生化指标逐步显示差异有统计学意义,且随解冻次数及保存时间的增加,差异具有统计学意义的生化指标项数增加,第4次(7d)解冻后ALT、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第5次(11d)解冻ALT、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第6次(23d)解冻ALT、CREA、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05);第7次(40d)解冻ALT、AST、UREA、CREA、TG、GLU、TP、ALB指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。其余指标与1h测定结果比较无显著差异(P>0.05)。雄性大鼠血清样本保存-80℃重复解冻1~5次9个生化指标均与1h测定结果比较差异无统计学意义,第6次(23d)解冻TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(P<0.05);第7次(40d)解冻TG、TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(均P<0.05),其余指标与1h测定结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同性别大鼠血清-80℃条件下保存40d以内单次解冻后测定以及在大鼠血清解冻3次以内对生化指标测定值无影响;但重复解冻4次以上部分生化指标有显著差异,且不同性别大鼠血清指标差异情况不同,血清样本放置条件及时间及解冻次数会对大鼠生化检测指标造成影响。

中药紫菀AFLP技术参数的优化与分析

目的：探讨影响紫菀扩增片断长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP）的各种因素,建立并优化紫菀AFLP反应体系,为研究紫菀分子品质性状的技术平台奠定基础。方法：CTAB法提取紫菀基因组DNA,分别用一步法和两步法进行酶切与连接,分别进行预扩增、选扩后,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测。结果：本研究建立了适用于紫菀的AFLP体系：用乙醇沉淀DNA,建立的模板不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂,可被限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切;确定两步法进行酶切、连接,酶切时间为37℃3h,连接时间为16℃过夜,缓冲液选用NEB公司Buffer2;选择性扩增后的银染显色在10℃以下。结论：本研究建立的反应体系适用于紫菀基因组DNA的AFLP研究。

大鼠经皮电阻试验在化妆品安全性评价中的应用

目的探讨大鼠经皮电阻试验在化妆品皮肤腐蚀性/刺激性评价中的应用。方法依照我国《化妆品安全技术觃范》(2015版)中体外皮肤腐蚀性大鼠经皮电阻试验方法,分别以Wistar大鼠和SD大鼠对7种化学品和5种化妆品进行皮肤腐蚀性检测,考察该方法在化妆品成品检验中的可行性。结果两品系大鼠经皮电阻试验判定7种化学品和5种化妆品结论一致,方法灱敏性100%,特异性75%,两品系大鼠判定结果均将异丙醇和十二烷基磺酸钠(20%)判定为假阳性。结论大鼠经皮电阻试验方法可用于化妆品及其原料皮肤腐蚀性的初筛。

一种体外皮肤腐蚀性试验替代方法的建立

目的建立皮肤腐蚀性的体外检测方法—大鼠经皮电阻试验(TER),优化OECD指南标准TG 430大鼠经皮电阻方法结果判定标准,并评价该方法作为替代方法用于评估化妆品原料的皮肤腐蚀性检测可行性。方法参照经合组织(OECD)化学品检测指南中TG 430体外皮肤腐蚀性大鼠经皮电阻试验的流程,使用Wistar大鼠对16种参考化学物质进行皮肤腐蚀性检测,设定不同的判定标准方案,通过对比筛选出最优的判定标准方案;并在5个实验室间进行11种参考物质的结果比对。结果改良后的TER结果判定方案结论与参考化学物质的实际腐蚀性结果具一致性(Kappa值0.64),改良方案B的特异性为66.7%,敏感性为100%,效能最高;实验室间比对结论差异无显著性(P>0.05),实验室间对11种参考物质的判定一致率为72.7%。结论经改良的大鼠经皮电阻试验可较好的筛选化学物质的腐蚀性,有望在我国的替代毒理学及化学物质安全性评价中发挥重要的作用。

HPLC法测定罗氟司特片中的有关物质

目的建立高效液相色谱法测定罗氟司特片的有关物质。方法采用Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,0.005 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为250nm。结果罗氟司特及各杂质在相应的浓度范围内,峰面积与浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999。结论建立的方法快速、灵敏、准确,适用于罗氟司特片中的有关物质测定。

浅析兵团采棉机运行模式

从兵团采棉机的功能特点、发展现状及运行维护等方面,分析了采棉机运行维护存在的问题,探讨了未来采棉机运行模式的发展方向。

竹红菌乙素脂质体对鸡肉垂皮肤光动力效应的初步研究

目的:观察竹红菌乙素(HB)脂质体对鸡肉垂皮肤的光动力效应。方法:莱亨鸡14只,分为对照组、单纯照光组、单纯给药组和光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)组。PDT组分为0.25和0.5mg·kg-1组,每个肉垂划出两个直径1cm的圆形区域,分别照射10和20min,功率密度为100mW·cm-2,即照光剂量为60和120J·cm-2。莱亨鸡静脉注入光敏剂后,立即用532nm激光照射,之后每天进行大体观察,并于d3和d14取材,HE染色,光镜下观察。结果:HB脂质体剂量为0.25和0.5mg·kg-1时,均可引起鸡肉垂表皮层破溃结痂,约14d痂退后明显褪色,病理表现为真皮浅层毛细血管的闭锁,表皮细胞增生,两组无明显差别;激光能量密度为60J·cm-2组表皮损伤的程度要明显弱于120J·cm-2,但均产生明显的褪色效果。结论:HB脂质体对鸡肉垂真皮浅层毛细血管网具有较好的破坏作用,但对正常表皮也产生可逆性损伤。

两品系大鼠经皮电阻试验结果的比较

目的分析比较Wistar大鼠和SD大鼠大鼠经皮电阻试验(TER)结果。方法参照OECD化学品安全性评价指南和我国《化妆品安全技术规范》中的体外皮肤腐蚀性大鼠经皮电阻试验的流程,分别使用Wistar大鼠和SD大鼠对12种参考化学物质进行皮肤腐蚀性检测,对比分析两个品系两种不同判定标准判定的腐蚀性结果。结果两品系大鼠使用OECD指南方法对12种参考化学物质皮肤腐蚀性判定结论一致,灵敏性均为50%,特异性均为100%;在使用《化妆品安全技术规范》判定皮肤腐蚀性时,两品系大鼠对4-甲硫基-苯甲醛腐蚀性判定结论不一致,其余11种参考物质判定均一致,Wistar大鼠灵敏性100%,特异性83.3%,SD大鼠灵敏性和特异性均为100%。结论两品系大鼠经皮电阻试验结果基本一致,SD大鼠更适合应用于大鼠经皮电阻试验的检测。