中印南瓜自交系田间耐热特性鉴定研究

随着我国平均气温逐年的升高,高温发生时间前移,持续时间延长,南瓜定植之后极易遭受高温胁迫。建立南瓜田间早期耐热性鉴定方法,对品种进行耐热性评价筛选,是缓解高温热害胁迫经济有效的措施。本试验以中国南瓜×印度南瓜自交系为试验材料,在自然高温环境下,通过比较植株两叶一心期、五叶一心期、团棵期和伸蔓期4个时期的单株叶片萎蔫程度,计算株系热害指数,经过多重比较,确定南瓜热胁迫的敏感时期,建立南瓜田间早期耐热鉴定方法。利用供试材料的单瓜种子数目,检验田间评价的准确性。结果表明,南瓜团棵期的热害指数变异系数最大,是南瓜植株对高温胁迫的敏感时期。利用田间热害指数和单瓜种子数目2个指标可综合判断中印南瓜自交系的耐热特性。

南瓜类胡萝卜素高通量提取检测体系建立及应用

为了建立南瓜类胡萝卜素高通量提取检测体系,以南瓜果肉为试材,通过单因素试验和L27(313)正交试验,确定和优化南瓜类胡萝卜素提取的最佳提取液、提取温度和料液比。结果表明,乙醇是提取南瓜类胡萝卜素的最佳提取液,在55℃条件下,以料液比1:28,浸提90 min,类胡萝卜素的得率显著高[(7.56±0.14) mg/100 g]。在南瓜类胡萝卜素的提取条件中,提取温度对提取效果影响最大,料液比×提取时间和提取时间×温度的互作次之。利用高通量提取检测体系比较分析23份不同类型南瓜材料类胡萝卜素含量,发现印度南瓜‘贝栗4号’和中国南瓜×印度南瓜远缘杂种自交系20F8的类胡萝卜素含量分别为(31.40±0.35) mg/100g和(24.72±0.72) mg/100 g,显著高于其他供试南瓜材料,具有显著的营养利用价值。试验获得的南瓜类葫芦卜素高效检测体系,省事省力,结果准确,可提高南瓜营养品质育种效率。

南瓜淀粉组分高效检测体系建立及应用

旨在建立高效的南瓜淀粉组分检测技术,以期提高定向育种和合理开发南瓜新品种的效率。根据双波长比色原理,利用提纯的南瓜直链淀粉和支链淀粉,通过等吸收点作图法,确定南瓜淀粉组分测定波长和参比波长。通过单因素比较试验,确定双波长测定南瓜淀粉组分的200μL反应体系。最后比较不同类型的南瓜淀粉组分含量,筛选极端材料。结果表明,直链淀粉的测定波长为616 nm、参比波长为472 nm,南瓜支链淀粉的测定波长为545 nm、参比波长为725 nm。建立南瓜直链淀粉和支链淀粉回归方程,直链淀粉浓度在0.0125~1 mg/mL、支链淀粉浓度在0.025~2 mg/mL范围内,线性关系良好(R2>0.9900)。96孔板200μL反应体系为待测液20μL、醋酸盐缓冲反应液(pH 3.5)90μL、12倍碘液稀释液90μL。供试23份南瓜材料的直链淀粉含量在0.52~26.68 mg/g果肉鲜重,支链淀粉含量在0.03~76.13 mg/g果肉鲜重,淀粉总量在0.55~101.61 mg/g果肉鲜重。以10和15 mg/g果肉鲜重、35和45 mg/g果肉鲜重、55和65 mg/g果肉鲜重,可以分别初步评价供试南瓜直链淀粉、支链淀粉和总淀粉含量低、中、高的情况。中印南瓜自交系比供试中国南瓜和印度南瓜的淀粉组分含量均高,最终筛选到7个中印南瓜自交系,用以淀粉定向育种潜力大。该试验获得的南瓜淀粉组分高效检测体系,对提高南瓜淀粉育种效率,行之有效。

家蚕微粒子病的图像识别技术研究

用计算机图像识别技术来检测微粒子病 ,以替代人工镜检。对拍摄的原始图像用直方图均衡化法进行对比度增强的处理 ;用快速二维 Ostu阈值化法进行二值化 ,实现了微粒子与背景的分离 ;用形态筛选法去掉了大量噪声及小杂质 ,实现了微粒子与杂质的初步分离 ;提取了周长、面积、圆度、凹度、内角极值、形状规则度 6个特征 ,对微粒子进行分层识别。对 4 3幅含微粒子的图像进行识别试验 ,识别完全正确率为 72 .0 9% ,识别有效率为86.0 5% ,漏判率为 1 3 .95%。

189例小儿高热惊厥的紧急处理

高热是小儿惊厥最常见的原因，多由上呼吸道感染引起，是儿科常见急症，必须紧急处理。迅速控制惊厥与降低体温是关键，迅速建立静脉通道是抢救成功的重要环节。

基于去噪的熵算子边界检测法

图像的熵用来刻划图像的平滑性或均匀性 在图像的局部窗口中计算时 ,如果窗口中存在边界 ,则窗口中的图像不均匀 ,其灰度变化急剧 ,计算出的熵小 ;反之熵大 设定熵的阈值 ,即可判断是否存在边界 由于熵算子对噪声很敏感 ,直接用它进行边界检测 ,效果很差 文中针对这一缺陷 ,提出将熵算子与去噪相结合的边界检测法 ,如果计算出的熵大于阈值 ,要判断是噪声的出现所引起 ,还是边界的出现所引起 ,这样 ,边检测边界边去噪声 用该方法对信噪比较低的图像进行实验 。

72例中毒型痢疾的抢救及护理

细菌性痢疾是夏秋季最常见传染病之一,我院1985～1994年间共收治1080例,其中中毒型细菌性痢疾(简称毒痢)72例,占6.67%.毒痢是细菌性痢疾的一个临床类型,除有发热、腹痛、腹泻、粘液脓血便等急性菌痢的通常表现外,还有起病急、发展快、微循环障碍、中枢神经系统症状,可因循环、呼吸衰竭、脑水肿等而死亡.为了提高治愈率,降低死亡率,我们将所遇72例抢救护理体会报告如下.1 资料分析1.1 一般资料 本组患者72例,男40例,女32例,男女之比1.25:1.年龄:最大65岁,最小1.5岁,15岁以下者38例,占52.78%,60岁以上者8例占11.11%.1.2 主要症状及分型 15岁以上者34例,出现腹泻者34例,脓血便21例,呕吐16例,惊厥2例,昏迷4例;15岁以下者38例,出现腹泻者35例,脓血便24例,呕吐17例,惊厥12例,昏迷10例.72例中毒型痢疾中,15岁以上者中,休克型30例,脑水肿型2例,混合型2例;15岁以下者中,休克型17例,脑水肿型12例,混合型9例.

特素联合化疗治疗恶性肿瘤毒副作用的观察及护理

特素是我国近年来临床应用的抗肿瘤药新药.它是从紫杉醇树皮中分离提取的具有抗肿瘤活性的二萜类天然化合物.该药能在癌细胞分裂时与细胞微管蛋白结合,促使细胞中微管稳定和聚合,阻断细胞有丝分裂,从而抑制肿瘤生长.联合其他常用抗肿瘤药可进一步提高疗效.我科1999年1月～2001年3月使用特素联合阿霉素或顺铂治疗恶性肿瘤22例,现将其治疗期间毒副作用的观察及护理体会报告如下:

中印南瓜远缘杂交种自交系耐热性评价

以母本中国南瓜(Cucurbita moschata Duch.)MO和父本印度南瓜(Cucurbita maxima Duch.)MA为对照,通过测定热胁迫前后植株叶片的相对电导率(E)、计算伤害率(RI)以及正向超亲优势PHA值和负向超亲优势NHA值,对36个中(MO)×印(MA)南瓜远缘杂交新种质的F5和F6自交系进行耐热性评价。结果显示,RI对材料耐热性差异区分度高,与植株耐热表型结果吻合,与植物耐热性负相关,可直观评价中印南瓜远缘杂种后代耐热性。供试南瓜材料在热处理之后,相对电导率(E)均升高,表明热处理破坏了叶片细胞膜;不同材料之间相对电导率增加幅度不同,表明材料间细胞膜热稳定性存在差异。中国南瓜MO比印度南瓜MA耐热性强,其RI值分别为0.24±0.10和0.65±0.29。以MO和MA的RI值为阈值,共筛选到16个耐热株系(PHA值为-8.3%^-87.5%,平均值为-54.1%,PHA绝对值越大,正向超亲优势越明显),14个不耐热株系(NHA值为3%~40%,平均值为24.3%),及6个耐热性介于亲本之间的株系。供试材料整体上的耐热性呈两级分化,耐热性增强效果明显。F4的耐热性存在分离,18SH和18SE的后代耐热性增强,18SF耐热性减弱。以RI值0.15为阈值,筛选到13个表现出超亲优势的耐热株系,包括源于18SH的10个F5株系,2个源于18SE的F5株系和1个源于18FB的F6株系。筛选的耐热优系,为培育适宜越夏栽培的耐热印度南瓜新品种提供有价值的亲本。

瓠瓜耐湿涝相关根系性状遗传规律及分子标记筛选

以耐湿涝瓠瓜材料JZS和不耐湿涝材料T2002及其杂交F2群体为材料,选择湿涝条件下不定根数目作为耐湿涝鉴定指标,分析瓠瓜耐湿涝特性遗传规律,并采用集团混合分离分析法筛选相关分子标记。结果表明,瓠瓜亲本JZS的耐湿涝特性由1对显性单基因控制,F1的不定根数目比耐湿涝亲本JZS增多,表现出超亲优势。在600个RAPD和100对瓠瓜SSR引物中,共有18个引物(14个RAPD和4对SSR)在双亲中显示多态性。最终筛选到瓠瓜SSR引物S87/88,在双亲及基因池间稳定扩增出片段大小为230 bp的差异条带。通过F2153个单株验证,确定表型调查耐湿涝结果与分子标记S87/88鉴定结果相关性极显著(相关系数0.78),利用Mapmaker 3.0软件对分子标记与表型结果进行连锁分析,S87/88与瓠瓜耐湿涝相关的不定根数目基因的连锁距离为8.8 cM,为进一步利用分子辅助育种加速耐湿涝瓠瓜新品种的选育提供有效标记。

大豆胚芽尖再生体系的建立

以‘西豆3号’等3个大豆品种为材料,以胚芽尖为外植体,研究种子萌发时间、植物生长调节剂对不定芽分化的影响以及生长调节剂对不定芽生根的影响,建立高效再生体系.结果表明种子在1/2MS培养基上萌发24h后,将胚芽尖接种在BM+5mg/LBA培养基上培养24h,然后转入BM+0.4mg/LBA+0.4mg/LIBA培养基诱导不定芽,出芽率达64.91%～68.89%;将长3～5cm的不定芽在BM+0.5mg/LBA+1.5mg/LIBA培养基中培养7d后,转入BM基本培养基中生根,生根率达22.22%～26.32%.

瓜类异属间嫁接亲和/不亲和组合形成过程中特异蛋白的产生

以西瓜品种8424和甜瓜品种甬甜3号作为接穗,以印度南瓜A(TLZ-B2-1-24,亲和)和印度南瓜B(Z079-1-2-17,不亲和)为砧木,配置瓜类异属间嫁接亲和/不亲和组合,利用SDS-PAGE技术,分析了瓜类异属间嫁接亲和组合(西瓜/印度南瓜A和甜瓜/印度南瓜A),以及嫁接不亲和组合(西瓜/印度南瓜B和甜瓜/印度南瓜B),在不同发育时期的全蛋白变化,分离分析了嫁接亲和/不亲和过程中产生的特异蛋白。结果表明:瓜类异属间嫁接亲和过程中,接穗(西瓜和甜瓜)组织蛋白和愈伤蛋白保持完整,砧木印度南瓜A的39 kDa愈伤特异蛋白在嫁接第10天后降解消失。瓜类异属间嫁接不亲和过程中,嫁接体的接穗部分出现了特异蛋白(西瓜36 kDa,甜瓜28 kDa);砧木印度南瓜B在愈伤期间,自身组织严重降解,38 kDa的愈伤蛋白在嫁接体-印度南瓜B部分降解消失。这些由瓜类异属间嫁接亲和特性引起的接穗与砧木蛋白质谱带的变化结果,首次揭示了嫁接亲和特性在蛋白质水平上发生的作用机理。

甬砧系列葫芦类型砧木品种分子指纹图谱构建

以市售同类型砧木品种神通力和京欣砧1号为对照,对甬砧系列葫芦类型砧木品种甬砧1号、甬砧3号、甬砧4号和甬砧5号进行RAPD和SSR分子指纹图谱构建。在104个RAPD、240对甜瓜SSR和100对瓠瓜SSR中,共筛选到7个RAPD引物、2对甜瓜SSR引物和5对瓠瓜SSR引物,在6份砧木材料中稳定扩增出18个多态性位点。3种分子标记揭示供试砧木材料的多态性比例分别为0.98%、0.48%和1.54%。通过合并相同赋值的差异引物和位点,得到由9个差异引物产生的13个多态性位点构成的甬砧系列分子指纹图谱。该图谱出现概率为1/115736040000,能够有效区分甬砧系列及其对照,起到品种鉴定与保护作用。

展望二十一世纪的护理

一、护理面临的全球问题 (一)人口增长与人口趋势 从70年代起全球人口呈现缓慢上升的趋势.到2000年时年增长率为1.5％,到2020年为1％。不过有3/4的人口居住在发展中国家.而成为实现人人健康目标的一大障碍。中国就包括世界青少年人口的20％.

瓠瓜类型砧木重组近交系(RIL)遗传作图群体耐湿涝表型性状分析

以耐湿涝瓠瓜类型砧木材料JZS与不耐湿涝瓠瓜材料T2002为亲本,利用单粒播种传代至F4代,构建包含101个家系的重组近交系(RIL)。对双亲和群体进行湿涝处理后,观测植株第1张真叶黄化破损情况,统计地下根数、不定根数以及子叶节以上/下不定根突起数等5个瓠瓜耐湿涝表型性状,用SPSS软件分析表型性状在双亲和群体中的差异显著性。结果表明,合并子叶以上不定根数和子叶以下不定根数2个性状为不定根突起1个性状后,4个耐湿涝表型性状(第1张真叶黄化破损情况、地下根数、不定根数、不定根突起数)在双亲中差异显著;群体在不定根数和不定根突点2个性状中表现超亲优势。地下根数、不定根数和不定根突起在群体中符合正态分布,第1张真叶黄化破损情况表现负偏态。最后对表型性状可能存在的遗传规律进行分析。

瓠瓜类型砧木遗传作图群体双亲多态性分析

以耐湿涝瓠瓜类型砧木材料JZS与不耐湿涝材料T2002为遗传作图双亲,利用随机扩增多态性DNA（random amplification polymorphicDNA,简称RAPD）法与瓠瓜及其他近源瓜类简单重复序列（simple sequence repeat,简称SSR）进行多态性分析。从供试1 678个RAPD、SSR标记中共筛选到26个多态性引物,其中包括14个RAPD、4个瓠瓜SSR、2个甜瓜SSR、5个黄瓜SSR、1个南瓜SSR,扩增出28个多态性位点。几种标记多态性检测效率不同,瓠瓜SSR引物揭示,双亲多态性比例最高（0.47%）,其次是RAPD（0.38%）,近源瓜类SSR选择效率最低,仅有0.14%0.15%。结果表明,尽管瓠瓜作图亲本表型差异大,但分子标记结果显示亲本遗传背景相近;甜瓜、黄瓜和南瓜与瓠瓜亲缘关系远,具有种属特异性的SSR引物在瓠瓜亲本JZS、T2002多态性分析中通用性不高。为了提高分子标记多态性分析效率,绘制高密度遗传图谱,下一步应尽快开展基于基因组测序技术检测单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,简称SNP）位点的研究。

芥菜种质资源分子聚类分析

为了明确宁波市农业科学研究院芥菜种质资源的遗传多样性,利用随机扩增多态性DNA(RAPD)和简单重复序列(SSR)分子标记对41份芥菜种质进行聚类分析。8个RAPD和10个SSR差异引物在供试材料中共扩增出30个多态性位点,两种标记的多态性比例分别为3.04%和3.90%。聚类分析将供试材料分为9种类型,材料间遗传相似系数为0.31～1.00,同类型之间差异小,不同类型之间差异大。育种时应尽量选择不同类型、遗传相似度低的芥菜相互配组,提高育种效率。

葫芦耐热性遗传规律分析

利用耐热葫芦(L1和L3)与不耐热葫芦(L6和L4)配置2组正反杂交F_1和F_2代,采集相对发芽率(ΔG)、相对发芽指数(ΔGI)和相对电导率(ΔEC)耐热表型数据,通过SPSS软件均数比较功能分析葫芦耐热性遗传规律。结果表明:2个组合的正反杂交F_1代耐热性无差异,均表现为不耐热,表明葫芦耐热性遗传不具有母性遗传特质,为隐性遗传。通过卡方检测分析2个组合正反杂交F_2代群体单株耐热性分离比例,表明葫芦耐热性在F_2代符合1∶3分离比,为1对单基因控制。

番茄质体转化载体pTom-GFPaadA的构建

采用Pri mStar HS DNA聚合酶从番茄基因组DNA中扩增出了质体的trnI-trnA基因序列.序列分析结果表明,所克隆的基因与GenBank公布的序列完全相同,与烟草的trnI-trnA基因序列同源性高达94%.将该片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn∷gfp-aadA∷TpsbA表达盒的番茄质体定点转化载体pTom-GFPaadA,酶切鉴定表明,所构建的载体符合预期设计.