人T细胞亚群的微量全血染色法

本研究建立了人T细胞亚群的微量全血染色法,观察了红细胞溶解液、血细胞与OKT McAb共育时间、洗液及OKT McAb用量等因素对染色率的影响。本法只需0.4ml全血即可得到CD_3、CD_4、CD_8亚群的百分率,同时避免了传统的Ficoll分离法用血量多、淋巴细胞部分选择性丢失等缺点。

急性甲型肝炎T细胞亚群的变化

应用流式细胞仪和OKT McAb分析了30例急性甲型肝炎外周血T细胞亚群变化,并观察其中5例的动态变化。结果表明,病程极期患者CD_4亚群百分率明显降低;CD_6亚群百分率升高;CD_4/CD__8比值明显降低。这些变化可能与HAV侵害淋巴系统及应激性免疫调动有关。

透明质酸在疾病中改变的研究进展

透明质酸是结缔组织基质的重要成份,具有维持组织形态、体积和保持抗压缩性及张力等物理效应。其参与形成蛋白聚糖多聚体,现已证实,透明质酸是反映肝内皮细胞功能和肝硬化的有实用价值的新指标。本文就透明质酸在肝病中的变化与检测恶性肿瘤的价值作一综述。

流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群

用EPICS C型流式细胞仪分析微量全血法染色的T淋巴细胞亚群,关键是分辨、抓准淋巴细胞群;用Bitmap划好分析区;用阴性对照组调好LGFL的PMT和Gain后,应相对固定之,保证分析条件相一致;选好荧光二抗;尽早分析样品。

雷公藤内酯醇减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞活化与抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路相关

目的通过体内外实验,观察雷公藤内酯醇(TPL)减少放射性肺纤维化中肌成纤维细胞(MFBs)活化与TGF-β1/ERK/Smad3通路的相关性。方法以TGF-β1刺激成纤维细胞建立体外MFBs活化模型,C57BL/6小鼠胸部照射形成体内MFBs活化、放射性肺纤维化模型。MFBs活化状态通过检测小鼠成纤维细胞中α-SMA(RT-PCR、Western blot方法)和ColⅠ(RT-PCR、ELISA方法)的表达,通路活性采用Western blot法检测p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平。ERK siRNA及Smad3 siRNA观察ERK、Smad3在MFBs活化中的地位。结果 TGF-β1激活p-ERK/p-Smad3(Ser208)及p-Smad3(Ser423),诱导成纤维细胞表达α-SMA,活化为MFBs,合成Col I明显增多;使用ERK siRNA及Smad3 siRNA确定了ERK及Smad3均参与α-SMA、ColⅠ的表达,其中ERK可能通过磷酸化Smad3连接区(Ser208)起相关作用。小鼠胸部照射可致肺组织中p-ERK、p-Smad3(Ser208)、p-Smad3(Ser423)的水平上调,α-SMA表达增加,显示多量MFBs活化。TPL对体内和体外实验中ERK、Smad3(Ser208)、Smad3(Ser423)的磷酸化活化均有明显抑制作用,可明显下调α-SMA表达及ColⅠ合成,减少MFBs的活化。结论 TPL可通过抑制TGF-β1/ERK/Smad3通路,减少肺部照射后MFBs活化,从而抑制放射性肺纤维化进展。

甘草次酸减轻放射性炎症反应的作用机制研究

目的:探讨甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)减轻放射性炎症的作用机制。方法:以4Gy X线照射小鼠巨噬细胞RAW264.7为辐射诱导炎症的细胞模型,采用ELISA法检测细胞上清液中的促炎症因子水平,RT-PCR法检测促炎症因子的mRNA表达水平,cell-based ELISA法检测细胞内磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)蛋白表达,凝胶电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测活化蛋白-1(AP-1)的DNA结合活性,荧光酶标仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生,细胞色素C还原法检测细胞内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶的活性。结果:甘草次酸通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内促炎症因子IL-6、IL-1β的mRNA表达而降低其分泌。甘草次酸抑制p38MAPK磷酸化及下游转录因子AP-1的DNA结合活性。并通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内NADPH氧化酶活性而减少ROS的产生。结论:甘草次酸可能通过抑制NADPH氧化酶/ROS/p38MAPK信号通路而抑制电离辐射诱导的炎症反应。

原发性肝细胞癌患者外周血T细胞亚群、自然杀伤细胞、抗体依赖细胞毒效应改变及其临床意义

作者应用单克隆抗体荧光标记流式细胞仪分析系统、微量脱氢酶释放法对121例原发性肝细胞癌(HCC)病人外周血T细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、抗体依赖细胞毒(ADCC)活性、淋巴细胞转化率和花环形成率进行了测定,HCC病人T细胞亚群有明显变化,Th细胞减少和Ts细胞增加NK、ADCC活性和淋转率有程度不同降低。宿主免疫功能变化同病期、肿瘤扩散转移密切相关。Th/Ts比值变化能够敏感反映病人免疫功能状态,是临床观测免疫功能变化的敏感指标。

急性病毒性肝炎患者血清透明质酸含量变化的初步观察

透明质酸(HA)由体内各组织的间质细胞合成,广泛存在于细胞外基质中。在体内,HA 可从基质中释出,经淋巴系统进入血液循环。近年发现,肝窦内质细胞是摄取分解血清 HA 的场所。目前有报道,在肝脏受损时,特别是肝硬化时,血清 HA 升高。本文应用血清 HA 放射分析法。

诱骗受体3在HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者中的表达及意义

目的探讨诱骗受体3(DcR3)在乙型肝炎病毒(HBV)e抗原(HBeAg)阴性的慢性乙型肝炎(CHB)患者中的表达及意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测80例血清HBeAg阴性的CHB患者和96名正常人血清DcR3;全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT);聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA。结果 HBeAg阴性的CHB患者血清DcR3水平[1.58(0.48～3.23)ng/mL]明显高于正常对照组[0.83(0.16～2.32)ng/mL,P<0.000 1)]。HBeAg阴性的CHB患者血清DcR3水平与HBV DNA和ALT水平呈正相关(r=0.704、0.732,P均<0.000 1)。结论 DcR3在HBeAg阴性的CHB患者中高表达,并与HBV DNA和ALT强相关,具有潜在的作为HBeAg阴性CHB患者诊断、治疗观测的新指标的应用价值。

DcR3和Ki-67在胃癌的表达及临床意义

目的 探讨诱捕受体 3(Dc R3)蛋白和细胞核增殖抗原 (Ki- 6 7)在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。 方法 采用免疫组织化学 SP法检测 98例胃癌组织和 5 6例癌旁正常胃组织中 Dc R3和Ki- 6 7的表达 ,分析其与多种临床病理特征之间的关系。 结果 (1 ) 98例胃癌组织中 Dc R3和 Ki- 6 7阳性表达率分别为 5 5 .1 % (5 4 / 98)、6 8.4 % (6 7/ 98)。5 6例癌旁正常胃组织未发现 Dc R3和 Ki- 6 7的阳性表达。 (2 ) Dc R3的表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移及 TNM分期显著正相关 (P<0 .0 1 ) ,与患者性别、年龄、肿瘤部位及浸润深度等无相关性 (P>0 .0 5 )。 (3) Ki- 6 7的表达与胃癌的分化程度、浸润深度 (P<0 .0 1 )及 TNM分期 (P<0 .0 5 )显著相关 ,与患者性别、年龄、肿瘤部位及淋巴结转移等无相关性 (P>0 .0 5 )。 (4 ) Dc R3和 Ki- 6 7的表达显著正相关 (P<0 .0 1 )。 结论 (1 ) Dc R3在胃癌组织中具有较高的表达率。 (2 ) Dc R3和 Ki- 6 7的异常表达可促进胃癌的发生发展 ,其蛋白检测可作为判断胃癌分化、浸润、转移。

IL-33敲除促进弓形虫感染小鼠腹腔巨噬细胞的M1偏移

目的研究IL-33敲除(IL-33^(-/-))对小鼠急性弓形虫感染腹腔巨噬细胞(pMφ)极化的影响,探讨IL-33^(-/-)在弓形虫感染免疫应答中的作用。方法收集C57BL/6IL-33^(-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠pMφ,各分为弓形虫感染组和未感染组,比较各组pMφ感染率、细胞因子及表面分子表达水平的变化。结果 IL-33^(-/-)小鼠pMφ弓形虫感染30 min后的感染率低于WT小鼠(t=-2.49,P<0.05);IL-33^(-/-)小鼠感染组pMφM1型标志物NO(t=29.71,P<0.05)、MHCⅡ(t=19.05,P<0.05)、TLR4(t=8.34,P<0.05)表达高于WT小鼠感染组,而M2型标志物CD206表达低于WT小鼠感染组(t=-3.34,P<0.05);感染组小鼠pMφNO、IL-10、TNF-α、MHCⅡ类分子及CD86的表达高于各自未感染对照组;IL-33敲除和弓形虫感染对IL-33^(-/-)与WT小鼠pMφMHCⅡ(F=5.25,P<0.05)、TLR2(F=14.88,P<0.05)分子的表达有交互作用。结论在急性弓形虫感染早期,IL-33敲除驱动小鼠pMφ向M1方向极化,促进pMφ抗感染。

DcR3双抗体夹心ELISA法的建立及其在原发性肝癌中的应用前景

目的:建立一种新的双抗体夹心ELISA法,以检测血清中DcR3抗原的浓度,辅助诊断原发性肝癌。方法:探索建立DcR3双抗体夹心ELISA法最适反应条件。结果:所建立方法线性范围广、灵敏度较高、精密度较好、回收率较高,批间和批内变异系数均<10%。对50例正常对照组的检测结果进行统计学分析,确定参考值范围为1.59～60.71ng/mL(x±2s)。原发性肝癌组同正常对照组血清DcR3抗原水平差异有显著性(P<0.01)。结论:该法是一种较好的定量测定血清DcR3抗原的ELISA法,它可以为原发性肝癌患者的诊断提供一种新的辅助指标。

胃癌组织中诱捕受体3蛋白的表达及临床意义

目的探讨诱捕受体3(decoy receptor3,DcR3)蛋白在胃癌组织中的表达及其与各临床病理因素的关系,评价DcR3在胃癌预后判断中的意义。方法采用免疫组化SP法检测98例胃癌组织和56例癌旁正常胃组织中DcR3的表达,分析其与多种临床病理因素及预后之间的关系。结果胃癌组织中DcR3阳性表达率为55.1%(54/98),其中高分化组阳性表达率为39.0%,明显低于低分化组的79.5%(P=0.00),癌旁正常胃组织中无阳性表达;DcR3表达与胃癌淋巴结转移和TNM分期呈显著正相关(P=0.00),与患者性别、年龄、肿瘤部位及浸润深度等临床因素无相关性(P>0.05);DcR3阴性表达组的5年生存率为61.3%,明显高于阳性表达组的29.6%(P=0.002)。多因素分析显示,DcR3表达不是胃癌术后独立的预后因素。结论DcR3在胃癌组织中具有较高的表达率,其表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关。DcR3高表达提示预后不良。

电力调度监控一体化系统的告警信息优化策略研究

现代化的国网企业对于电力系统进行相应的一体化调度工作,有利于实现对电力的控制与监督的工作,在进行开展监控信号时需要以对电力进行全面监控为重要前提基础,继而在全局上掌握网络的实际运行情况。利用监控及时发现电力系统中出现的问题,及时进行解决。相关的电力操作人员需要保证信号的准确性,有利于对于电力进行高效调控。

透明质酸的定量分析及其在生物医学中的价值

透明质酸是由葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖组成的重复二糖直链大分子。它的定量分析主要分为直接比色法、分离分析法、酶消化法、利用透明质酸结合蛋白放射分析法和酶联免疫测定法等。测定血清中透明质酸对肝硬化和慢性活动性肝炎的诊断、判断肝、肾移植患者的排异反应等有着重要的价值。

透明质酸——一个“古老”多糖分子的新意

透明质酸(hyaluronic acid简称HA)是由葡萄糖醛酸(GlcUA)和N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)以β1→3和β1→4糖苷键连接起来的重复二糖直链高分子聚合体。

小鼠高能X射线放射性皮炎动物模型的建立

目的探讨高能X射线单次照射,建立小鼠放射性皮炎模型的可行性及实用性。方法16只8周龄C57BL/6雌性小鼠,随机分为照射组和对照组,每组各8只。采用6MVX射线,照射组小鼠的右后肢接受单次照射30Gy。小鼠放射性皮炎的分级标准采用根据脱毛面积和皮损情况自制的评分标准。结果小鼠右后肢照射后28天全部存活,照射组和对照射的放射性皮炎评分分别为2.75±0.38和1.00±0.00,两组具有显著性差异(P<0.001)。结论应用电子直线加速器产生的高能X射线单次照射小鼠后肢所建立的小鼠放射性皮炎模型过程简单,模型可靠。

电力系统调度运行危险点及控制策略

现如今,社会各行各业均取得了较大的发展,对电能的需求量呈逐年递增的趋势。为了保证各行各业能够正常生产,电力企业需要加大对电力系统运行的管理力度。电力调度是电力系统工作过程中的关键环节,电力调度的情况对电力系统能否安全、稳定地运行有着重要的影响。为此,电力企业需要对电力系统调度过程予以更多的重视。对电力系统调度运行危险点进行说明,并且对相关控制策略进行阐述,希望为电力系统调度工作提供可供参考的建议。

老年肝病患者血清透明质酸检测的临床意义

对86例老年肝病患者血清透明质酸(HA)的变化进行观察表明,肝硬变患者HA水平最高,平均856.34±386.97μg/L,其次为急性黄疸型肝炎(620.36±456.87μg/L)、慢性活动性肝炎(314.43±286.24μg/L),以上三组均较正常人(57.83±21.70μg/L)明显升高(P<0.05及0.01)。早期肝硬变较慢性活动性肝炎明显升高,对诊断有帮助,HA升高与Ⅲ型前胶原肽和总胆红素呈正相关,与白蛋白及白/球比值呈负相关,其升高与肝脏损害程度一致,故可作为判断肝损害程度及预后的指标。

游离循环DNA以及联合应用直肠指诊和经直肠超声检查诊断前列腺癌的临床价值

目的探讨游离循环DNA(cf-DNA)以及联合应用直肠指诊(DRE)和经直肠超声(TRUS)检查对前列腺癌的诊断价值。方法对93例可疑前列腺癌患者进行DRE、cf-DNA、TRUS检查并与术后病理结果对照,比较三种检查方法单独应用、两者联合应用及三者联合应用对前列腺癌的诊断价值。结果前列腺癌、前列腺良性病变和对照组血清cf-DNA的浓度分别是中位数1223.2ng/ml、153.2ng/ml和118.3ng/ml,三者依次减低,差异有统计学意义(P<0.001);cf-DNA+TRUS+DRE的联合检测方法的敏感性为90.6%,均高于cf-DNA、TRUS和DRE,差异有统计学意义(P<0.05);联合检测特异性也高于cf-DNA、TRUS和DRE,差异有统计学意义(P<0.05),但与TRUS特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合应用DRE、cf-DNA、TRUS对提高前列腺癌的诊断具有重要临床价值。