尖尾芋石油醚部位化学成分及其乳腺癌细胞毒活性研究

研究天南星科海芋属植物尖尾芋Alocasia cucullata(Lour.)Schott石油醚部位化学成分。采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离纯化,运用波谱学技术进行结构鉴定。采用CCK-8法测试化合物对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞及小鼠乳腺癌4T1细胞的体外细胞毒活性。从尖尾芋根茎石油醚部位中分离得到15个化合物,分别为对羟基苯甲醛(1)、苯甲酸(2)、香草酸乙酯(3)、没食子酸乙酯(4)、7-羟基香豆素(5)、肉豆蔻酸甲酯(6)、角鲨烯(7)、齐墩果酸(8)、熊果酸(9)、香紫苏醇(10)、香紫苏内酯(11)、原儿茶醛(12)、原儿茶酸(13)、二十八烷醇(14)和没食子酸(15),化合物2~15为海芋属首次分离得到,所有化合物均为尖尾芋首次分离得到。乳腺癌细胞毒活性研究显示:化合物4、8和9对3种乳腺癌细胞均有一定的抑制作用。

基于化学成分药理作用及网络药理学的海芋质量标志物预测分析

天南星科海芋属植物海芋Alocasia macrorrhiza(L.)Schott具有清热解毒、消肿散结的功效。近年来发现海芋具有良好的药理活性,但关于海芋的药效物质基础及质量控制研究较少。该文通过查阅文献及多个数据库,总结海芋化学成分及药理作用并利用网络药理学确立海芋的成分-靶点-通路网络,从海芋传统药性、药效、化学成分有效性等方面对海芋质量标志物(Q-marker)进行初步预测,总结出海芋素B(alocasin B)、海芋素D(alocasin D)、海芋素E(alocasin E)、海芋素A(alocasin A)、hyrtiosulawesine等11个活性成分作为海芋潜在的质量标志物,可为海芋的深入研究与开发利用提供理论依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学探究尖尾芋抗乳腺癌作用机制

本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术、网络药理学策略探究尖尾芋石油醚部位抗乳腺癌药效物质基础及作用机制,并通过4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型验证尖尾芋石油醚部位(petroleum ether fraction of Alocasia cucullata,EAC)体内抗乳腺癌作用及机制。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS数据获取EAC化学成分41个,包括11种芳香类成分、8种萜类成分、5种生物碱类成分、4种脂肪酸类成分、2种香豆素类成分和11种其他类成分;基于鉴定出的化合物通过网络药理学得到556个潜在作用靶点;蛋白互作网络(PPI)分析发现MAPK1、Bcl-2等10个核心靶点,富集分析发现核心靶点可能通过MAPK、PI3K-Akt等细胞凋亡相关信号通路发挥抗乳腺癌作用,并通过分子对接技术验证了毛地黄毒苷配基等活性成分与细胞凋亡相关蛋白pERK、Bcl-2、Bax具有良好的结合能力。抗乳腺癌活性研究结果表明与模型对照组比较,EAC低、中、高剂量组肿瘤生长趋势渐缓,肿瘤质量减少,抑瘤率逐渐增加;EAC中、高剂量组脾脏指数有显著性差异,EAC低剂量组脾脏指数效果不显著(P<0.05);HE染色观察到给药组肿瘤组织中细胞排列疏松,轮廓不清晰。ELISA法检测小鼠血清,发现EAC高、中剂量组、5-氟尿嘧啶阳性对照组的IL-1β、TNF-α含量均降低。动物验证实验结果表明不同浓度EAC均能下调MAPKs信号通路中p-ERK蛋白的表达(P<0.01),而对ERK、JNK、p-38、p-JNK、p-p38蛋白水平无显著性差异;EAC能显著升高小鼠乳腺癌组织中Bax/Bcl-2蛋白水平和基因表达水平。综上,尖尾芋石油醚部位能下调p-ERK蛋白水平,促进癌细胞凋亡从而抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学探讨尖尾芋抗乳腺癌药效物质及作用机制

目的利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探讨尖尾芋抗乳腺癌物质基础及作用机制。方法结合MassBank等数据库及现有文献研究,鉴定尖尾芋醇提物的化学成分,通过TCMSP、GeneCards等数据库筛选尖尾芋抗乳腺癌的作用靶点,使用STRING数据库和Cytoscape 3.9.0构建关键靶点蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络;通过DAVID数据库对关键靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)功能与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路富集分析,最后借助Cytoscape 3.9.0构建“成分-基因-通路”互作网络图。结果从尖尾芋醇提物中共鉴定18个成分,包括生物碱类(1,3,10,12)、苯丙素类(2,8,18)、黄酮类(6,7,9,11,15)等;基于鉴定出的化合物通过网络药理学得到429个潜在作用靶点;PPI分析发现PIK3CA、PIK3R1、MAPK1等10个核心靶点,富集分析发现核心靶点可能通过调控癌症通路发挥抗乳腺癌作用,“成分-基因-通路”互作网络图显示生物碱类成分小檗碱及黄酮类成分山柰酚、木犀草素可能是尖尾芋醇提物发挥药效的主要活性成分,其机制与凋亡相关。结论本研究初步探究了尖尾芋醇提物抗乳腺癌活性成分为生物碱及黄酮类成分,其作用机制与细胞凋亡相关,为进一步开展尖尾芋醇提物抗乳腺癌的药效物质基础及作用机制研究提供了新的思路和线索。

黄连、吴茱萸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的配比研究

目的探讨黄连、吴茱萸不同配比的水提物(CREF)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长和凋亡的影响,找出两药的最佳配比。方法采用MTT比色法观察不同配比的CREF对SGC-7901细胞生长的影响。应用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞线粒体膜电位的变化。结果 1 mg/ml不同配比的CREF作用SGC-7901细胞24 h和48 h后,对细胞生长有明显抑制作用(P<0.05),且细胞的抑制率与黄连的剂量呈正比。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析结果显示,以1 mg/mL不同配比的CREF 1∶6、2∶5、3∶4、4∶3、5∶2、6∶1(黄连:吴茱萸)作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(8.50±1.59)%、(9.90±1.01)%、(17.15±1.68)%、(21.55±1.97)%、(34.10±1.06)%和(34.40±1.02)%,与对照组(1.69±1.91)%比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。JC-1染色检测结果显示,不同配比的CREF作用于SGC-7901细胞6 h后,绿/红荧光比值显著降低,细胞线粒体膜电位下降。结论 CREF能明显抑制SGC-7901细胞生长并可诱导其凋亡,黄连:吴茱萸最佳配比为6∶1。

黄连配伍吴茱萸后生物碱类成分的含量变化

目的:考察黄连与吴茱萸不同配伍比例对小檗碱、巴马汀、药根碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的影响。方法:在优化的RP-HPLC条件下进行分析,比较色谱图。结果:左金丸中吴茱萸碱的溶出率比反左金丸及吴茱萸单煎时均显著升高,吴茱萸次碱在水提物中不能检出;黄连生物碱的相对峰面积随吴茱萸比例的增加呈线性下降。结论:吴茱萸可使黄连中生物碱的溶出率下降;左金丸配伍(黄连∶吴茱萸=6∶1)有利于吴茱萸碱的溶出。

左金丸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的研究

目的:探讨左金丸水提物(WEZP)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法:观察不同浓度的WEZP对SGC-7901的生长抑制情况,MTT比色法检测细胞活力,Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:1mg/mL、5mg/mL、10mg/mL的WEZP作用SGC-7901细胞24h后,细胞存活率显著降低,且与时间、剂量呈依赖关系。Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析,各剂量WEZP作用SGC-7901细胞24h后,细胞凋亡率分别为(8.96±0.88)%、(18.40±0.60)%和(29.90±0.58)%,与对照组(2.66±1.33)%比较差异均有统计学意义。结论:WEZP对SGC-7901生长有明显的抑制作用并可诱导SGC-7901的凋亡。

左金丸与反左金丸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的比较

目的比较左金丸(Zuojin Pill,ZP)和反左金丸(Retro-zuojin Pill,RZP)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法采用MTT比色法观ZP与RZP对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;Hoechst33258染色观察细胞形态学变化。结果0.1mg/mlZP与RZP分别作用SGC-7901细胞后,均能抑制细胞活性,且与时间呈依赖关系。0.1、0.5和1.0mg/mlRZP作用SGC-7901细胞48h,细胞凋亡率为(5.52±0.54)%、(6.91±2.31)%、(8.50±1.02)%,0.1、0.5和1.0mg/ml的ZP对细胞的凋亡率分别为(11.60±1.24)%、(21.80±0.28)%、(36.40±1.59)%,与对照组(1.69±1.91)%比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。结论左金丸和反左金丸对SGC-7901生长都有明显的抑制作用并可诱导SGC-7901的凋亡,同一浓度的ZP和RZP作用SGC-7901相同时间,ZP的作用效果更为明显。

丹参多糖对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱导小鼠肝炎的保护作用

目的探讨丹参多糖Salvia miltiorrhiza polysaccharides(SMPS)对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱导小鼠肝炎模型的影响。方法昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、SMPS高剂量组(300 mg/kg)、SMPS中剂量组(200 mg/kg)与SMPS低剂量组(100 mg/kg)。用尾静脉注射痤疮丙酸杆菌和脂多糖方法构建小鼠肝炎模型,比较SMPS对模型小鼠脏器系数、血清转氨酶及白三烯LTB4和LTC4的影响;检测肝组织匀浆中肿瘤坏死因子α、白介素1β的含量。结果 SMPS可显著改善肝炎小鼠的胸腺、肝脏、脾脏系数,降低血清中ALT、AST、LTB4和LTC4的活性以及肝组织匀浆中TNF-α、IL-1β的含量。结论 SMPS对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱导小鼠肝炎有显著的保护作用。

西医院校中药药理学教学现状与改革探索

本文基于中药药理学教学本身的特点,结合西医院校背景下中药药理的教学现状,分析该课程教学中存在的问题,并从教学方法和考核方法等方面提出几点改革的措施,从突出重点,注重中西医理论的联系;提高教师专业素质,采用多样性教学;多介绍中药药理研究新进展;注重实际运用,突破传统考试模式4个方面提高西医院校的中药药理学教学的效果。

含羞草水提物对人子宫癌Hela细胞凋亡及mcl-1与bim蛋白表达基因表达的影响

目的观察含羞草水提物(WEMP)对人子宫癌细胞(Hela)生长的抑制和凋亡诱导效果及其对mcl-1和bim表达的影响。方法采用MTT比色法观察不同浓度的WEMP对Hela的生长抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot方法检测WEMP对人胃癌细胞Hela中mcl-1、bim蛋白表达的影响。结果 WEMP作用Hela细胞24 h后,细胞存活率显著降低(P<0.05),且与时间、剂量呈依赖关系。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析,250,500,1000,2000,4000mg/L WEMP作用Hela细胞24 h,Sub-G1期细胞比率分别为(11.60±0.85)%,(15.95±0.64)%,(18.20±1.41)%、(17.5±0.14)%和(18.10±0.57)%,与对照组(7.4±0.84)%比较差异均有统计学意义(P﹤0.01)。WEMP可降低Hela细胞mcl-1基因表达和增加bim基因表达。结论 WEMP对Hela生长有明显的抑制作用并可诱导Hela的凋亡,mcl-1基因表达降低和bim基因表达增加可能是其凋亡机制之一。

大孔吸附树脂法及离子交换层析柱法精制纯化丹参多糖的研究

目的:对中药丹参中多糖成分进行提取、分离、精制和纯化研究。方法:丹参药材经过水提醇沉得到粗多糖(SMP)。采用大孔树脂法及离子交换层析柱法精制纯化粗多糖,综合比较D-101、AB-8、DB-301及MG-1等4种大孔吸附树脂对粗多糖的分离纯化效果,进一步以DEAE-52离子交换层析法对过AB-8柱制备得到的粗多糖进行分离精制。结果:粗多糖中总多糖含量为40.35%,蛋白质含量为8.96%,经4种大孔树脂初步纯化后发现AB-8、DB-301型的树脂效率高,纯化后多糖含量分别可达78.72%、80.45%。总多糖经DEAE-52离子交换树脂进一步分离得到SMP1、SMP2、SMP3三个组分。结论:AB-8、DB-301型大孔吸附树脂及DEAE-52型树脂可应用于丹参多糖的精制纯化。

丹参多糖对免疫抑制小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

目的研究丹参多糖Salvia miltiorrhiza polysaccharides(SMPS)对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫功能的调节作用。方法将KM小鼠随机分为空白对照组、模型组、香菇多糖片(10 mg.kg-1)阳性组,丹参多糖高剂量组(300 mg.kg-1)、丹参多糖中剂量组(200 mg.kg-1)和丹参多糖低剂量组(100 mg.kg-1),在经腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫功能抑制模型后,进行碳粒廓清实验,并计算脏器指数、吞噬指数和吞噬系数,观察丹参多糖对CY诱导的免疫低下小鼠相关免疫脏器及网状内皮系统吞噬功能的影响。结果丹参多糖能显著上调CY诱导的免疫低下小鼠的脾指数、胸腺指数、碳粒廓清指数K及吞噬指数α。结论丹参多糖能提高环磷酰胺诱导免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能。

无患子的研究进展

无患子是一种具有广泛利用价值的植物。该文对无患子的生物学特性、化学成分、药理研究、分离提取纯化技术等方面的研究现状进行总结,以期为无患子的综合开发利用提供参考。

鸡骨草防治大鼠脂肪肝的实验研究

目的:探讨鸡骨草对脂肪肝大鼠血脂代谢及其肝脏病理、肝窦内皮细胞窗孔形态学的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组(7.2 mg/kg)、绞股蓝组(16.2 mg/kg)及鸡骨草高、中、低剂量组(40、20、10 g/kg),高脂饲料喂养3 w建立脂肪肝模型后,各药物组给予药物灌胃3 w并继续给予高脂饲料。第43天采血测转氨酶和血脂四项,并取肝组织作病理切片,光镜下观察肝组织,或在体灌注后取肝组织固定,经处理后在扫描电镜下观察肝窦窗孔变化。结果:鸡骨草高剂量能降低高脂模型大鼠血清中AST、ALT、TC、TG、LDL-C并升高HDL-C含量,在光镜和扫描电镜下亦观察到其肝组织形态以及LSEC窗孔恢复趋向正常,中剂量作用稍弱,低剂量效果不明显。结论:鸡骨草可调节高脂模型大鼠血脂水平,并改善肝脏组织的病理变化,具有降脂、保肝作用,能在一定程度上防治脂肪肝。

五岭龙胆化学成分及其抗炎活性研究

研究五岭龙胆(Gentiana davidii Franch.)的化学成分及其体外抗炎活性。综合应用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离技术,对五岭龙胆70%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位进行系统分离纯化,并结合化合物理化性质、波谱数据及与文献数据比对等进行结构鉴定,从中共分离鉴定15个化合物,分别为熊果酸(1)、乌发醇(2)、ursaldehyde(3)、28-norurs-12-en-3β-ol(4)、齐墩果酸(5)、β-amyrin-n-nonyl ether(6)、vanillyl glycol(7)、β-谷甾醇(8)、β-胡萝卜苷(9)和anemarrhenoside B(10)、正二十六烷(11)、正三十一烷醇(12)、1,5-bisβ-D-glucopyranosyloxy-2-(3′,3′-dimethylallyl)benzene(13)、2,4-二叔丁基苯酚(14)和2,2′-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)(15)。化合物7、14和15为龙胆属首次分离得到,所有化合物均为五岭龙胆首次分离得到。对化合物1~15进行抗炎活性筛选发现,与模型组比较,化合物1、5和9对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞释放的NO有显著抑制作用。

五岭龙胆石油醚提取物GC-MS分析及生物活性研究

目的分析五岭龙胆石油醚提取物(PEG)的化学成分,并初步探讨其抗菌、抗炎作用。方法运用气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪分析鉴定PEG的化学成分;打孔法测定其对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌的抑菌活性,微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);建立脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型,给予地塞米松及PEG,检测细胞上清液中NO的含量。结果从PEG中检测出88种成分,鉴定了其中53种,主要为脂肪酸类、角鲨烯等成分;对金黄色葡萄球菌抑菌作用最强,其次为铜绿假单胞菌、大肠杆菌、白色念珠菌,MIC在7.9~31.3 mg/mL。PEG能显著降低脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞炎症中NO的释放。结论PEG主要含有脂肪酸类、角鲨烯等成分,具有较强的抑菌、抗炎作用,其抗菌和抗炎物质基础可能与亚麻酸、亚油酸有关。

中药藤黄药理作用研究进展

综述了中药藤黄的化学成分、药理作用和临床应用方面的研究资料。藤黄中的藤黄酸GA和C-2异构体EGA对人癌细胞有一定的抑制作用,从而孕育着新药开发和综合使用的前景。

中药鉴定学实验教学内容改革的研究

面向中药现代化的进程,中药鉴定学实验教学的目的,要结合其课程特点和社会对专业的需求,培养出知识结构合理、全面的中药鉴定人才,而本课程实验内容作为实验教学的重要环节,应在提高学生实际操作能力和分析、解决问题的能力,培养出综合素质人才上发挥作用。通过对中药鉴定学实验教学现状分析,从实验内容角度进行改革。运用基础性实验和综合设计性实验内容,发挥学生的主观能动性,提高其解决实际问题的能力,从而提高其综合能力。

钩藤碱对甲基苯丙胺依赖斑马鱼大脑神经递质含量以及TH、NR2B和GluR2/3表达的影响

目的探讨钩藤碱对甲基苯丙胺诱导的斑马鱼条件性位置偏爱（CPP）的影响.方法天然偏爱测定（d1～3）合格的斑马鱼腹腔注射甲基苯丙胺（40mg·kg^-1,d4、6、8）或等体积鱼用生理盐水（d5、7）后,立即进行CPP训练;治疗组在每次给予甲基苯丙胺12h后,给予钩藤碱（50、100mg·kg^-1）和MK801治疗;于d9测试斑马鱼的CPP效应,测量斑马鱼脑中多巴胺、5-羟色胺、谷氨酸和γ-氨基丁酸含量以及酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）、N甲基D天冬氨酸受体亚型2B（N-methyl-D-aspartate receptor2B,NR2B）和α氨基羟甲基异恶唑丙酸受体亚型（glutamate receptor2/3,GluR2/3）蛋白表达.结果钩藤碱（100mg·kg^-1）治疗显著减少甲基苯丙胺依赖斑马鱼在伴药箱中的活动时间和运动距离（P 〈0.01）,下调大脑多巴胺、5-羟色胺、谷氨酸含量以及TH、NR2B和GluR2/3蛋白表达（P〈0.01）.结论钩藤碱抗斑马鱼甲基苯丙胺依赖的形成与抑制神经递质释放以及下调TH、NR2B和GluR2/3蛋白表达密切相关.