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基于非标记分析方法应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢细胞膜蛋白
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作者 刘雅雯 梁雄顺 +3 位作者 胡绪乔 刘小倩 徐万娜 洪文旭 《新发传染病电子杂志》 2024年第2期34-40,共7页
目的 探讨应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱(Orbitrap fusion lumos)三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢(Chinese hamster overy,CHO)细胞的全蛋白质组和膜蛋白质组的非标记(label-free)分析方法,并评价其应用效果,为研究膜蛋白相... 目的 探讨应用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱(Orbitrap fusion lumos)三合一高分辨质谱仪鉴定中国仓鼠卵巢(Chinese hamster overy,CHO)细胞的全蛋白质组和膜蛋白质组的非标记(label-free)分析方法,并评价其应用效果,为研究膜蛋白相关传染病的发生机制提供方法学基础。方法 贴壁培养中国仓鼠卵巢细胞,提取、富集和酶解处于对数生长期细胞的全蛋白和膜蛋白,用高效液相色谱仪联用四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一高分辨质谱仪对酶解后的多肽进行分析,利用Maxquant软件和Uniprot数据库进行搜库及鉴定,最后对鉴定膜蛋白进行基因本体论(gene ontology,GO)功能分类。结果 全蛋白组一共检测出14 300个肽段,搜库得到2708个蛋白,其中可信蛋白2002个(FDR<1%且特异性肽段>1);膜蛋白组一共检测出13 179个肽段,搜库得到2594个蛋白,其中可信蛋白1873个。在鉴定的全蛋白组和膜蛋白组中定量结果前20的蛋白中,全蛋白组中与膜相关的蛋白有4个,占比20%;膜蛋白组中与膜相关的蛋白有10个,占比50%。在膜蛋白组中,GO功能分类表明分子功能上主要涉及结合和催化活性,在生物学进程上主要涉及细胞进程、代谢过程等。结论 膜蛋白组中与膜相关的蛋白显著高于本实验的全蛋白组,基于非标记分析方法应用Orbitrap fusion lumos的分析技术是鉴定细胞膜蛋白的有效方法。 展开更多
关键词 中国仓鼠卵巢细胞 膜蛋白质 非标记方法 四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱高分辨质谱仪
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深圳市售不同类别水果果肉中酚酸含量的差异分析
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作者 谭洪兴 严俊安 +5 位作者 刘小倩 唐增煦 徐万娜 王竹 徐维盛 洪文旭 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期914-922,共9页
目的 检测深圳市售多种水果中的酚酸类化合物,探究不同类别水果中酚酸的差异。方法 将采集的75种水果分为柑橘类、瓜果类、核果类、浆果类、热带水果和仁果类,利用高效液相色谱-串联质谱法检测其中酚酸类化合物,Kruskal-Wallis H法检验... 目的 检测深圳市售多种水果中的酚酸类化合物,探究不同类别水果中酚酸的差异。方法 将采集的75种水果分为柑橘类、瓜果类、核果类、浆果类、热带水果和仁果类,利用高效液相色谱-串联质谱法检测其中酚酸类化合物,Kruskal-Wallis H法检验不同类别水果酚酸的差异,Mann-Whitney U检验南北方水果中的酚酸含量差异,Spearman法对水果中的化合物进行相关性分析。结果 75种水果酚酸总和为0.22~485.97 mg/kg FW,各类水果酚酸总和的中位数由高到低次序为仁果类(76.17 mg/kg FW)>柑橘类(37.86 mg/kg FW)>浆果类(28.08 mg/kg FW)>热带水果(22.56 mg/kg FW)>核果类(20.70 mg/kg FW)>瓜果类(1.62 mg/kg FW)。各类水果间除了龙胆酸、对-香豆酸的含量差异无统计学意义外,其他成分在不同类别水果间存在一定的差异(P<0.05)。南北水果中的酚酸只有绿原酸、香草酸和对羟基苯甲酸3种组分差异有统计学意义(P<0.05)。仁果类水果中的酚酸化合物间存在着较多、较强的相关,其次是柑橘类和瓜果类水果,热带水果、核果类、浆果类水果中酚酸化合物的相关性则较少。所有水果中的酚酸化合物,只有芥子酸和阿魏酸有较强的正相关(r=0.736,P<0.01)。结论 6类水果间的绿原酸、原儿茶酸、阿魏酸、没食子酸、香草酸、咖啡酸、芥子酸、水杨酸、对羟基苯甲酸及酚酸总和存在一定的差异,水果中酚酸化合物间存在着一定的相关关系。 展开更多
关键词 水果 酚酸 高效液相色谱-串联质谱
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高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中13种酚酸 被引量:1
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作者 严俊安 谭洪兴 +5 位作者 唐增煦 刘小倩 徐万娜 王竹 徐维盛 洪文旭 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期790-796,共7页
目的 建立高效液相色谱-串联质谱法检测水果中13种酚酸(绿原酸、原儿茶酸、阿魏酸、对-香豆酸、没食子酸、龙胆酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、芥子酸、迷迭香酸、水杨酸、对羟基苯甲酸)的方法。方法 使用甲醇超声提取水果中的游离型酚酸... 目的 建立高效液相色谱-串联质谱法检测水果中13种酚酸(绿原酸、原儿茶酸、阿魏酸、对-香豆酸、没食子酸、龙胆酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、芥子酸、迷迭香酸、水杨酸、对羟基苯甲酸)的方法。方法 使用甲醇超声提取水果中的游离型酚酸,离心残渣中的结合型酚酸经碱水解释放后以乙酸乙酯提取,合并2种提取液,浓缩后于高效液相色谱-串联质谱中检测分析。以Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,3.5μm)进行分离,多反应监测模式。结果 13种化合物标准品在10 min内达到完全分离,线性相关系数(R^(2))均大于0.998,检出限为0.172~3.471 ng/mL。前处理方法经优化,苹果、草莓、橙和水蜜桃4种水果的方法回收率为80.0%~119.4%,精密度在7.00%以内(n=6)。4类12种水果的酚酸含量有较大差异,同一类别的水果其酚酸组成没有表现出一致性。结论 本方法灵敏度、精密度和准确度良好,适用于多种水果中游离型和结合型酚酸类化合物的含量测定。 展开更多
关键词 水果 酚酸 高效液相色谱-串联质谱
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