成都地区SD大鼠参考值范围的探讨(一)——体重和主要脏器正常参考值

目的:建立本室实验动物正常生理数据的历史性对照,是评价毒理学重要的基础工作之一。方法:收集整理了本实验室近1年来30d喂养试验320只SD大鼠的相关数据,用PEMS软件统计了体重、进食量、食物利用率和脏器系数等的均值和95%的上下限值。结果:在本室饲养条件下,离乳鼠喂养30d后,雌雄鼠体重分别为185.0g±12.0g和232.1g±19.1g,雌雄鼠在30d内总增重分别为158.7g±19.8g,114.6±11.2g;雌雄鼠的食物利用率分别为36.6%±9.8和28.6%±6.2,体重及脏器等指标在雌雄鼠间均存在明显差异(P<0.05)。结论:该参考值在评价毒理学工作具有实际应用价值。

不同剂量尿烷诱发A/J系小鼠肺肿瘤

本研究用 5周龄敏感系A/J系小鼠一次尿烷不同剂量腹腔注射 (10 0、5 0、2 5、12 .5mg/kg) ,染毒 15wk后 ,观察肿瘤发生、发展及病理形态特征。结果发现 ,光镜下 ,A/J系小鼠发瘤危险增加的最低剂量为 2 5mg/kg(P <0 .0 5 ) ;发瘤数和发瘤率均呈明显剂量反应关系 ,发瘤面积亦随剂量增大而增加。肿瘤的病理分型主要为腺瘤和乳头状瘤 ,腺瘤占肿瘤总数的78 8% (41/ 5 2 ) ,乳头状瘤占肿瘤总数的 17% (9/ 5 2 ) ,表明尿烷诱发A/J系小鼠主要以腺瘤为主。一阶段诱发肿瘤模型肿瘤恶变率非常低 ,仅占肿瘤总数 1 2 % (1/ 5 2 )。

新药轻灵-盐酸西部曲明的致畸试验

目的 为保证新药轻灵 盐酸西布曲明 (Ql sibutramine)的临床用药安全 ,评价其生殖毒性 ,进行了大鼠致畸试验。方法 :设 3个剂量组 :0 .5 0mg/ (kg·d) ,3.16mg/ (kg·d)和 2 0mg/ (kg·d) ,最高剂量相当于临床拟用量的 14 .8倍 ,另设溶剂对照组和阳性对照组。于孕期 6～ 15d经口给予受试物 ,检查对孕鼠和胎鼠的毒性和致畸性。结果 :3个轻灵 盐酸西布曲明剂量组均未诱发畸形 ,也不影响受精卵着床和胚胎存活 ,但中、高剂量组孕鼠呈现一定的毒性反应 (摄食量减少和体重增长缓慢 ) ,胎鼠平均体重和身长也降低。结论 :轻灵 盐酸西布曲明无致畸性 ,但有一定的母体毒性及发育毒性。

PCR和限制性内切酶法快速检测C57BL/6Job小鼠基因型

目的 :探讨快速检测C57BL/6Job小鼠基因型方法。C57BL/6Job小鼠是一种ob基因突变种 ,ob基因的点突变导致小鼠遗传性肥胖。该品系广泛用于肥胖及有关疾病研究。方法与结果 :本文用PCR及限制性内切酶法快速 ,准确地检测出C57BL/6J小鼠同窝仔鼠的三种基因型 :野生型 (+/+) ,杂合体型 (ob/+)和突变型 (ob/ob)。结论 :该法只需很少的生物材料 ,即一小段小鼠尾巴 ,适用任何年龄的小鼠 ,对于该品系小鼠的育种、肥胖机理和肥胖预防的研究很有实用意义。

图像分析系统在研究生毕业课题中的应用浅析

为增加研究生对计算机图像分析系统的认识 ,扩大该分析仪应用范围 ,更好地培养研究生和为科研服务 ,作者深入浅出介绍了图像分析原理和适用范围 ,就该系统在研究生毕业课题中的应用进行了初步分析。并针对研究生毕业课题常涉及的资料类型 ,总结了具有实用价值的图像分析技巧。同时 ,还分析了研究生课题资料中影响图像分析的因素。

壬基酚对雌性SD大鼠早期性发育的影响

目的 壬基酚是一种典型的环境雌激素 ,大量应用于塑料、橡胶等行业。本实验旨在探索其对雌性大鼠早期性发育的影响。方法 按照美国NTP(NationalToxicologyProgram)方法对妊娠SD大鼠进行壬基酚口服染毒 (0 1%、0 5 %和 1 0 %)。称量F1代出生重、40日龄子宫重 ,取子宫、卵巢固定 ,统计初 /次级卵泡数 ,检测细胞增殖核抗原(PCNA)及雌激素受体 (ER)。结果 染毒组F1代出生重都低于对照组 (P均 <0 0 1) ;40日龄 (体重修正 )子宫重明显大于对照组 (P均 <0 0 1) ;初级和次级卵泡总数也显著多于对照组 (P均 <0 0 1) ;各组F1代性别比例均为 1∶1;0 1%和 1 0 %壬基酚组卵巢PCNA灰度值明显低于对照组 (P <0 0 1和 <0 0 5 ) ;对照组和染毒组子宫ER灰度值差异不明显 (P均 >0 0 5 )。结论 壬基酚能诱导卵泡和子宫的早期发育。

大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间质干细胞的诱导分化作用

目的 探讨大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间质干细胞的诱导分化作用。方法 从大鼠骨髓中分离培养间质干细胞并传至第 4代 ,诱导前 2 4h加 1 0ng/ml碱性成纤维生长因子 (bFGF)入培养液中以促分裂 ,再以正常脊髓、损伤后 5d及损伤后 40d脊髓匀浆上清液作诱导剂 ,然后观察细胞形态的变化 ,并采用免疫组织化学法 ,对诱导后第 4d的细胞进行神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)和胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)表达的检测。结果 诱导后第 4d的部分细胞不仅在形态上表现为神经元样 ,而且呈NSE及NF阳性表达 ,GFAP阴性。

子宫营养试验检测对-壬基酚的雌激素样活性

目的 :检测对 -壬基酚 (p- NP)的雌激素样活性。方法 :采用子宫营养试验 ,以使此法作为我国筛查环境内分泌干扰物 (EEDs)的常规方法。未成年 SD雌性大鼠 (2 1d～ 2 2 d) 10 0只 ,分为 p- NP 6 0 m g/ kg、 12 0 m g/ kg和 2 4 0 m g/ kg3个剂量组 ,溶剂对照组 (花生油 )和阳性对照组 (苯甲酸雌二醇 ,E2 B) 0 .4 m g/ kg,每天一次灌胃给药 ,连续给 3d和 7d。于末次给药的第 2 4 h处死动物 ,取子宫。结果 :3d和 7d两个时段 ,E2 B、 p- NP 12 0 mg/ kg和 2 4 0 mg/ kg 2个剂量组子宫湿重、子宫 /体重比、平滑肌厚度和宫腔上皮高度与溶剂对照组相比均增高 (P<0 .0 1) ,且有明显的剂量效应关系。给 p- NP7d的未成年 SD雌性大鼠阴道开口时间提前。结论 :p- NP具有弱雌激素样活性 ,3d幼雌

敌敌畏、乐果和马拉硫磷诱导HepG2细胞DNA损伤的实验研究

目的:评价敌敌畏(dichlorvos,DDVP)、乐果(dimethoate,DM)和马拉硫磷(malathion,Mal)3种常用有机磷农药单独及两两组合下诱导HepG2细胞DNA损伤效应,并阐明联合作用模式。方法:3种有机磷农药分别单独染毒HepG2细胞4h,联合效应研究采用析因设计分别在高剂量水平和低剂量水平下将3种农药两两混合染毒,同时设溶剂对照(DMSO作用4h)和阳性对照(0.5μmol/ml重铬酸钾染毒2h),染毒结束后进行彗星试验,采集图像并用CASP软件分析,选择尾部DNA百分比、彗星尾长(tail length,TL)和Olive尾矩(Olive tail moment,OTM)表示DNA损伤强度。结果:3种有机磷农药单独作用时,较高剂量组的尾部DNA百分比、TL和OTM均显著高于对照组(P<0.01);析因分析联合效应结果表明,较低剂量水平下,DDVP与DM之间无交互作用(P>0.05),DDVP与Mal之间以及DM与Mal之间存在交互作用(P<0.01),交互方式均为协同;在较高剂量水平,3种农药两两间均存在交互作用(P<0.05),交互方式均为拮抗。结论:敌敌畏、乐果和马拉硫磷单独及两两联合作用均可致DNA损伤,在低剂量和高剂量水平下,存在不同的联合作用模式。

姜黄素联合低浓度长春新碱抑制肝癌细胞系生长的实验研究

目的:研究姜黄素联合低浓度长春新碱对肝癌细胞系HepG2的生长抑制情况及可能机制。方法:实验设对照组(仅加培养基)、姜黄素组(20μmol/L)、长春新碱组(0.5、1、2、4μg/ml)及联合用药组(20μmol/L姜黄素+1μg/ml),各组作用HepG2细胞24 h后,采用细胞计数法测定细胞增殖情况,克隆形成实验检测各处理组的长期效应,DAPI染色测定细胞的死亡方式,线粒体膜电位检测细胞的线粒体损伤情况,流式细胞术检测细胞DNA含量及细胞周期阻滞,RT-PCR检测LRP、MDR1和P21 mRNA表达的变化。结果:与对照组和单独给药组比较,姜黄素联合长春新碱组经24 h处理后,明显抑制HepG2细胞增殖能力(P<0.05);克隆形成实验显示联合作用组明显抑制细胞集落形成能力;DAPI染色显示联合用药组凋亡细胞明显增加(P<0.01),线粒体膜电位测定显示联合用药组膜电位减低可能与凋亡率增加相关;流式细胞术测定联合用药组G2/M期阻滞显著增加(P<0.05);RT-PCR检测到LRP、MDR1 mRNA的表达降低(均P<0.05),而P21 mRNA的表达升高(P<0.05)。结论:姜黄素联合低浓度长春新碱町以显著抑制HepG2生长,为化疗新方案提供了一定依据。

成都市小学生肥胖状况分析

目的 分析小学生肥胖状况特点 ,为儿童营养干预措施的制定提供理论依据。方法 采用体格测量方法和身高标准体重法 ,分析 2 0 0 2年成都市小学生的肥胖状况。结果 城市男生的肥胖率为 8.1 %～ 2 6 .2 % ,女生为 4 .9%～ 1 5 .2 % ;郊区男生肥胖率为 3 .4 %～1 5 .0 % ,女生为 2 .9%～ 8.6 %。肥胖率存在明显的年龄特点 ,不论男女 ,9～ 1 2岁各年龄组的肥胖率均显著高于 6～ 8岁各年龄组学生。结论 小学生肥胖的高发年龄为 9～ 1 2岁 ,应抓住小学生肥胖的关键年龄阶段进行预防和控制。

对-壬基酚对MCF-7人类乳腺癌细胞雌激素受体表达的影响

目的 观察对 -壬基酚 (p- NP)对 MCF- 7人类乳腺癌细胞株雌激素受体 (ER)及 ERαm RNA表达的影响 ,探讨其雌激素样活性。方法 以 RPMI 16 4 0培养液 (含 10 %小牛血清 )对 MCF- 7细胞进行半开放式贴壁培养 ,试验前以 DMEM(不含酚红 )培养液洗涤细胞 ,以含 3% C/D胎牛血清的 DMEM(不含酚红 )培养液继续培养 3d。试验设溶剂对照、阳性对照和 p- NP 5个浓度组 ,采用免疫组织化学法和定量 RT- PCR法分别对 MCF- 7细胞 ER蛋白和 ERαm RNA表达情况进行分析。结果 1× 10 - 5m ol/L p- NP作用于 MCF- 7细胞 2 4 h下调 ER蛋白表达 ;1× 10 - 6 mol/L～ 1× 10 - 5m ol/L p- NP作用于 MCF- 7细胞 2 h和 2 4 h下调 ERαm RNA表达。p- NP各浓度组均表现出 ER蛋白和 ERαm RNA表达随 p- NP作用于 MCF- 7细胞时间的延长而进一步下降的趋势。结论 p- NP可模拟雌激素下调 MCF- 7细胞 ER蛋白和 ERαm RNA表达 。

双酚A和对-壬基酚雌激素受体的竞争性结合

目的 用雌激素受体竞争性结合试验检测双酚A(BPA)、对 -壬基酚 (p -NP)的雌激素样活性。 方法 将SD大鼠进行人工卵巢去除术 ,饥饿受体 14d后提取子宫胞浆雌激素受体 (ER) ,受体蛋白定量 ,作雌二醇 (E2 )非标记配体饱和分析 ,以确定E2 的IC50 。随后进行BPA和 p -NP的竞争性取代实验 ,观察BPA ,p -NP是否能与3 H -E2竞争性结合大鼠子宫胞浆ER。结果 E2 的IC50 是 1× 10 -9mol/L ,BPA、p -NP的IC50 分别为 2 0 8× 10 -5mol/L和2 6 6R10 -5mol/L ,BPA、p -NP的相对结合亲和力系数 (RBA)分别为 0 0 0 4 8和 0 0 0 38,BPA与ER的结合能力稍高于 p -NP。 结论 BPA和 p

新云三七对化学性肝损伤保护作用的功能评价

目的 :评价新云三七速溶粉对大鼠化学性肝损伤的保护作用。方法 :按《保健食品功能评价程序和检验方法》,将雄性 Wistar大鼠随机分为三个受试物剂量组 (1.2 5 g/kg、 3.75 g/kg和 7.5 g/kg)及肝损伤模型对照组、阴性对照组进行试验 ,连续 30日按 2 % (v/w)灌胃给予受试物后 ,测定血生化指标 ,进行肝组织病理切片检查并辅以酶组织化学检查。结果 :高剂量组动物血清 AL T水平较模型对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ,肝细胞坏死较模型对照组明显减轻 (P<0 .0 5 ) ,膜酶 5 - N 、 ATPase、 SDH、 NADPH活性均较模型对照组高 (P<0 .0 5 )。结论

上-下法替代实验与Horn’s法测定LD_(50)的试验研究

[目的]探讨急性毒性试验替代法之一—上-下法的优、缺点,寻找最佳的实验条件及具体实施过程中可能存在的问题。[方法]采用上-下法与Horn’s法分别测定11种农药制剂急性经口LD50和95%可信区间(CI),比较两种方法获得的急性毒性分级和试验所用动物数量。[结果]上-下法所得LD50相近,毒性分级与Horn’s法基本一致;但上.下法试验使用动物减少了64.7%。[结论]上-下法在测定毒作用发生在48h内的农药急性经口LD50具有明显优势,在国内是值得推广的急性替代方法之一。