酒用糯高粱萌发期抗旱性鉴定及评价

为鉴定糯高粱种质资源的抗旱性,建立抗旱评价体系、筛选抗旱指标,首先以4份糯高粱种质为材料,利用6个浓度的聚乙二醇(PEG-6000)溶液模拟干旱胁迫,测定其发芽率和出苗率,确定糯高粱萌发期模拟干旱胁迫的最适浓度。然后在150 g/L PEG-6000溶液干旱胁迫条件下,以根长、芽长、芽鲜重、芽干重、根干重、发芽指标、发芽势、发芽率、萌发指数、出苗率等9个指标为鉴定指标,通过主成分分析、频数分析、关联分析、聚类分析和多元逐步回归分析等方法,对64份糯高粱材料进行综合评价和抗旱等级划分,并对其抗旱指标进行筛选。研究结果表明,干旱胁迫对糯高粱萌发期各指标有极显著影响,对出苗率、芽鲜重和根长的影响较大,而发芽势、发芽率和萌发指数受干旱胁迫的影响较小。通过各指标的综合评价,以D值为主要评价方法,筛选得到高抗旱型材料2份、抗旱型17份、中间型材料21份、敏感型材料16份、极敏感型8份。其中,抗旱性较强的材料分别为R16和R20,可作为糯高粱抗旱育种的基础材料。芽干重、发芽率、萌发指数、出苗率可作为糯高粱萌发期简单、有效的抗旱性评价指标。

小麦TaMICU1-6A基因的克隆、生物信息学及表达分析

为了探讨线粒体稳态调节蛋白TaMICU1基因在小麦生长发育中的功能,以小麦中国春为材料,对其TaMICU1-6A基因进行克隆、生物信息学分析、表达分析研究,结果表明,小麦TaMICU1-6A基因全长为1 398 bp,编码465个氨基酸,定位于线粒体,具有2个EF-hand家族的保守结构域,启动子含3种激素响应元件、3种光响应相关反应元件、1个缺氧特异性诱导相关元件;多重序列比对发现,其与野生二粒小麦、乌拉尔图小麦、小麦中的同源蛋白或同源基因的亲缘关系比较近。RT-PCR结果表明,TaMICU1-6A基因具有组织特异性,不同非生物胁迫、不同激素处理下在根、茎、叶中的表达水平不同。黑暗处理下,TaMICU1-6A基因在根、茎、叶中的表达水平均在6 h时达到最低;低温处理下,TaMICU1-6A基因在根、茎中的表达水平呈先降后升的趋势;在赤霉素处理下,TaMICU1-6A基因在叶片中的表达水平在6 h时达到最高。综上所述,推测TaMICU1-6A基因通过激素介导的信号途径参与不同的非生物胁迫。期待本研究结果可为进一步探讨小麦TaMICU1基因在逆境下的生物学功能提供一定的参考价值。

小麦抗病种质贵农775中抗白粉病基因的RAPD标记

运用RAPD技术 ,采用分离群体分组分析法 (BSA)进行了小麦种质贵农 775抗白粉病基因连锁的分子标记研究 ,其中有一个引物S2 0 18在抗病亲本贵农 775和抗病材料中扩增出了特异的DNA片段 ,而在感病材料和感病亲本丰产 3号中没有扩增出同样的DNA片段。此片段长度约为 880bp。用F2 分离群体 (10 6株植株 )进行遗传连锁性分析 ,引物S2 0 18880 扩增出的特异DNA片段与贵农 775抗白粉病基因紧密连锁 ,遗传距离为 8 9cM。此连锁标记还经其他相关后代材料的检测证实了其可靠性。

部分引进优质小麦高分子量谷蛋白亚基的组成研究

通过 SDS- PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析了从国内外引进的 2 3个优质小麦材料的高分子量谷蛋白亚基组成。研究表明 ,大多数品系 (种 )都具有优质亚基 :5 +10 ,其中还有 1个品系具有 5 +12优质新亚基。在所分析的材料中 ,还出现了一些少见的特殊亚基 :6 +7+8、6 * +8、4+5 +12、2 +12 +5 +10。本文对利用引进优质小麦材料改良我省小麦品质的策略进行了分析和讨论。

利用特异PCR引物进行分子标记辅助选择的研究

利用与抗白粉病基因相连锁的RAPD分子标记和控制1Dy10基因序列的特异PCR引物对贵农775的杂交组合后代进行了分子标记辅助选择。在50株F2植株中,初步筛选到具有抗白粉病基因标记和5+10亚基特异标记的9株;有抗白粉病基因标记和2+12亚基特异标记的24株;有抗白粉病基因标记,同时具有5+10亚基和2+12亚基特异标记的5株。本研究说明分子标记是检测抗病基因和辅助选择育种的有效手段。

贵州省区试小麦品系遗传多样性的SSR标记研究

采用微卫星分子标记(SSR)对贵州省2001～2003年参加省和高海拔区试的30个小麦品系的遗传多样性进行了研究.结果表明,12对引物共检测到37个等位位点,每对引物等位位点数为1～8个,平均为3.08个.聚类分析表明, 品种间遗传相似系数(GS)变异范围为0.048～0.346,平均值为0.197,SSR标记能将全部品系区分开来,30个小麦品系可分为5类.研究表明SSR分子标记在鉴别品种和品种遗传多样性方面具有重要作用.

贵农001中抗白粉病基因的RAPD标记研究

运用RAPD技术,采用分离群体分组分析法(BSA)对小麦种质贵农001中的抗白粉病基因进行了分子标记研究。结果表明,引物S2018可在抗病亲本贵农001和抗病单株中扩增出特异的DNA片段,而在感病材料和感病亲本龙96-6239中不能扩增出同样的DNA片段,该特异DNA片段分子长度约为900bp。用F2分离群体(110株植株)进行遗传连锁性分析,引物S2018扩增的特异DNA片段与贵农001抗白粉病基因相连锁,其遗传距离为1.7 cM。该标记的获得为将贵农001中抗白粉病基因向其它小麦育种材料的转移提供了有效的选择手段。

节-硬-偏八倍体的核型研究

通过核型研究 ,分析了节 -硬 -偏八倍体的遗传组成。结果表明 ,节 -硬 -偏八倍体中有A、B、D、MV 4个染色体组 ,说明节 -硬 -偏八倍体为节节麦、硬粒小麦与偏凸山羊草所合成的八倍体新物种。节 -硬 -偏八倍体的育成为创造新种质资源 ,丰富小麦的遗传背景提供了有效途径。

偏凸山羊草的核型和C-带研究

通过对偏凸山羊草的核型和 C-带分析研究表明 ,偏凸山羊草的 D染色体组与节节麦的 D染色体组很相似 ,其可能来自于节节麦 ;Mv染色体组臂比较大 ,有 2对普通小麦所没有的近端着丝粒染色体 ,且所显

中国春与光稃野燕麦杂种核型分析

中国春（Ｃｈｉｎｅｓｅｓｐｒｉｎｇ２ｎ＝６ｘ＝４２）与光稃野燕麦（ＡｖｅｎａｆａｔｕａＬ．２ｎ＝６ｘ＝４２）杂交成功。中国春穗较小，无芒，叶片较窄，而中国春与光稃野燕麦的杂种稳形较大，有短芒，籽粒饱满，且叶片宽大近似于野燕麦，表现优势很强。进行根尖细胞核型分析，发现大部分为单体（２ｎ＝２０Ⅱ＋１Ⅰ＝４１），在其中仅看到极少数二体和缺体，比例不到１％。杂种中有２对普通小麦所没有的近端着丝点染色体。核型分析结果证明了中国春与光稃野燕麦杂种的真实性。

普通小麦与偏凸山羊草代换系的细胞学和RAPD鉴定

为了解偏凸山羊草与普通小麦杂种后代抗白粉病种质BC5-2的遗传组成,对其进行了细胞学和RAPD鉴定。结果表明,BC5-2根尖细胞染色体数目为2n=42,花粉母细胞减数分裂中期(PMC M)染色体构型为2n=21。经核型和C-分带分析初步证明BC5-2为偏凸山羊草的双代换系,其中一对为偏凸山羊草的2MV染色体,另一对为6MV染色体,在BC5-2中被代换的小麦染色体是1B和6A染色体。对BC5-2及其亲本进行RAPD分析,在100个随机引物中有2个引物在BC5-2中扩增出偏凸山羊草的特异DNA带,它们分别记为S2011550、S20031000,进一步证明BC5-2是一个普通小麦与偏凸山羊草的双代换系。

贵州省区试小麦品系Glu-1位点的PCR研究

本文利用SDSPAGE电泳方法鉴定了2001～2003年参加省区试的18份小麦品系的高分子量麦谷蛋白亚基组成,并根据GluDly位点的基因序列设计的一对引物,通过PCR技术对这些小麦品系的基因组DNA进行扩增,可以准确鉴别亚基组成为2+12和5+10的不同小麦品系。同时,用不同亚基组成亲本的杂交后代进行扩增,可以从F2后代群体中选择含有5+10亚基的单株,为分子标记辅助选择在小麦品质育种中的应用提供了基础。

利用ISSR分子标记选择烟草GDH88株系的研究

利用ISSR分子标记技术,对烟草(k 326×8611)×(Corker 176×红大)组合的247个双单倍体植株进行了辅助选择。通过研究,筛选到3个多态性较好、扩增稳定的ISSR引物用于双单倍体植株的选择;从247个双单倍体植株中选择到47个具有k 326和红花大金元主要标记片段的单株,再进一步通过大田观察、鉴定和配合力分析,最后获得优良的GDH 88株系。利用ISSR分子标记技术和系统选育方法相结合,可以选育得到优良的烟草品系,有利于烟草育种效率的提高。

野生大燕麦和偏凸山羊草后代的遗传研究

为了证明野生大燕麦和偏凸山羊草杂种的真实性 ,了解二者间的亲缘关系及染色体的传递情况 ,对其后代进行了细胞遗传学和同工酶的电泳分析。结果表明 ,偏凸山羊草和野生大燕麦的杂种F1完全不育 ,其花粉母细胞观察为 2 8个单价体 ;用节燕 1号与杂种F1进行复交 ,得到的复交F1代花粉母细胞减数分裂不正常 ,出现较多单价体 ,数目在 7～ 17个之间。复交F1自交后代的根尖染色体数在 4 2～ 54之间 ,其酯酶和淀粉酶同工酶酶谱比较结果表明 ,自交后代具有偏凸山羊草和节燕 1号的遗传物质。通过本研究初步证明了野生大燕麦和偏凸山羊草杂种的真实性。

用AFLP标记来自偏凸山羊草的抗条锈病新基因YrG775

目的研究小麦抗病种质贵农775对条中32条锈病菌的抗性基因的数量、来源,对于抗条锈病新基因的寻找、已知抗性基因的合理使用均有重大意义。方法对西农97148×贵农775的杂交F2后代人工接种条中32条锈病菌进行抗性鉴定,并根据抗性鉴定结果划分抗感病池用AFLP技术寻找其连锁标记。结果根据抗感病单株分离比例确定贵农775的抗病性由两对抗条锈病基因控制。从128个AFLP引物组合中筛选到与其中一个抗病基因YrG775紧密连锁的多态性标记M8P15290bp,该标记仅能在原始亲本偏凸山羊草中检测到。结论由于来源于偏凸山羊草的抗条锈病基因Yr17苗期不抗条中32条锈病菌,综合抗性鉴定和分子生物学试验结果,可以推断YrG775很可能是一个来自偏凸山羊草并与已知抗条锈病基因不同的新基因。

提莫菲维小麦与葡萄牙野燕麦远缘杂交后代的SRAP分析

采用SRAP技术分析提莫菲维小麦与葡萄牙野燕麦远缘杂交后代的真实性及其特点。结果表明,22对SRAP引物中,20对引物在双亲间扩增出多态性条带,其多态性比率为73.81%。me4-em1、me3-em5、me4-em3和me3-em3四对引物在提莫菲维小麦与葡萄牙野燕麦杂交F3株系中扩增出双亲特异带,表明该F3株系具有双亲的遗传物质,该F3株系是提莫菲维小麦和葡萄牙野燕麦成功属间杂交的真实杂种后代。在F3株系的扩增结果中部分双亲带型消失,并且提莫菲维小麦消失的带数远少于野燕麦的;同时有非父母标记新带型出现。杂种后代DNA序列的这种变化可能有利于新形成异源多倍体小麦的快速进化、遗传协调和遗传稳定性。

硬粒小麦-偏凸山羊草六倍体的核型分析

硬粒小麦 -偏凸山羊草六倍体类型 (简称硬偏麦六倍体类型 )来源于硬粒小麦 ( T.durum Dest,2 n=4 x=2 8,AABB)与偏凸山羊草 ( Ae.ventricosa,2 n=4 x=2 8,DDMv Mv)杂交并自然加倍的八倍体类型 ,其染色体组成还不清楚。为了研究硬偏麦六倍体的染色体组成 ,用中国春 ( AABBDD)与之杂交 ,对杂种 F1 花粉母细胞进行减数分裂染色体配对分析 ,观察到大多数花粉母细胞有 1 4对二价体和 1 4个单价体。进一步观察偏凸山羊草、中国春、硬偏麦六倍体类型以及杂种 F1 的体细胞核型 ,发现在硬偏麦六倍体类型和杂种 F1 中含有与偏凸山羊草 Mv染色体组相似臂比和相似着丝粒位置的染色体。进而初步判断 ,硬偏麦六倍体类型的染色体组成大致是 AABBMv Mv,而硬偏麦六倍体类型与中国春的杂种 F1 染色体组成是 AABBDMv。

小麦抗白粉病基因Pm13和Pm21的多重PCR检测

为了促进小麦抗白粉病基因聚合体材料在小麦育种及生产中的应用,利用与抗白粉病基因Pm21和Pm13连锁的特异标记,在含有抗白粉病基因Pm21和Pm13的杂交F4代群体中随机挑选114个单株分别进行单一和多重PCR检测。结果表明,多重与单一PCR检测结果一致,在114个供试单株中,有5株具有Pm21,74株具有Pm13的特异标记,其中4个单株同时具有Pm21和Pm13的特异标记。与抗白粉病基因Pm21和Pm13连锁的特异标记可以用于对Pm21和Pm13的多重PCR检测,更加快速地检测出含有抗病基因Pm21和Pm13的累加体,有效应用于辅助选择育种。

烟草RNA提取方法的优化及冰盒储存时间的探讨

烟草作为一个模式植物在分子生物学研究中发挥着重要的作用，其总RNA的提取是后续分子生物学研究的前提和关键之一。针对过柱型的RNA提取试剂盒在有效的清除烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的同时，影响了RNA产量和浓度，以及远距离携带液氮取材困难的问题，设置不同提取方法和冰盒不同储运时间处理，对天根RNA simple总RNA提取试剂盒进行了优化，并对冰盒贮存烟叶时间与RNA提取质量的关系进行了探讨。结果表明：优化试剂盒法获得了高浓度高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测，利用该方法提取的烟草总RNA，条带清晰、无拖尾现象，28S与18S 的比例约为2∶1。紫外吸收值的测定表明，所提取的烟草总RNA的A 260/A 280的值在1．8～1．9，浓度显著高于原方法；而冰盒能在5 h内保证所取样品RNA 的完整性，适宜于短途运输储存。

远缘杂交后代材料的高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

以一个远缘杂交后代材料的89个株系为试材,用SDS-PAGE电泳方法鉴定分析了这些株系的高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)组成。结果表明,在后代材料中亚基组成类型极其丰富。在Glu-A1、Glu-B1和Glu-D1三个位点上分别检测到3,6和9种不同的亚基类型,3位点结合共出现30种组成类型。其中,在Glu-A1位点上,1亚基出现频率最高,为57.31%;在Glu-B1位点上7+8和7+9亚基出现频率较高,分别为44.94%和34.83%;Glu-D1位点上的变异类型最丰富,其中被世界公认的优质亚基5+10出现频率最高,达38.20%,另外,还存在一些其它新的亚基组合类型。由此看来利用远缘杂交改良我国小麦品质有一定的优势。