前列腺癌组织bcl-2、p53、P504S及34βE12蛋白的表达水平

目的研究前列腺癌(prostate carcinoma,Pca)组织bcl-2、p53、P504S及34βE12蛋白的表达水平,及其与前列腺癌发生发展的关系。方法应用SP法,检测54例前列腺癌标本的bcl-2、p53、P504S及34βE12蛋白的表达水平;并与20例良性前列腺增生标本进行对照。结果前列腺癌组织中bcl-2及p53蛋白表达的阳性率分别为44.4%和33.3%,均高于良性前列腺增生的阳性率(25.0%和15.0%),但差异无统计学意义(P>0.05)。在前列腺癌中,低分化组bcl-2的表达水平明显高于高及中分化组(P<0.05),临床分期D期明显高于B及C期(P<0.05);p53的表达水平在上述各组及各期之间均无统计学差异(P>0.05);P504S在54例前列腺癌均呈阳性表达,相反34βE12均呈阴性表达。结论在前列腺癌鉴别诊断中,P504S能区别良性腺体和癌,bcl-2及P504S蛋白在前列腺癌的异常表达,可能与前列腺癌的发生发展及预后有关,检测bcl-2、P504S及34βE12蛋白表达水平对前列腺癌的诊断及鉴别诊断具有重要价值。

乳腺癌细胞核的形态定量分析

目的 测定乳腺癌及乳腺不典型增生细胞核面积 ,周长 ,直径 ,圆度 ,长短轴比五项参数的变化及其在乳腺癌及癌前病变诊断中的意义。方法 按照乳腺癌及乳腺不典型增生的不同分级进行分组 ,应用计算机辅助图像分析技术测定实验组及对照组中细胞核的上述五项参数 ,统计分析各组间的差异。结果 实验表明 ,不典型增生及乳腺癌各组的细胞核面积 ,周长 ,直径 ,圆度四项参数均大于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,长短轴比无显著性差异。实验组中不典型增生Ⅰ、Ⅱ级间 ,核面积、周长和直径三项参数均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。乳腺癌三个分级间 ,其细胞核周长和直径在Ⅰ、Ⅱ级间 ,Ⅱ、Ⅲ级间均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。核面积及圆度在Ⅱ、Ⅲ级间均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 细胞核面积、周长、直径及圆度在乳腺癌及乳腺不典型增生时都明显增大。这四项参数对乳腺癌及乳腺不典型增生的诊断有一定的参考价值 ,不典型增生Ⅲ级是真正的癌前病变 ,与乳腺癌的发生有密切关系。

胃癌、癌前病变组织中p53蛋白表达的临床意义

目的 探讨胃癌及癌前病变组织中p5 3蛋白表达的临床意义。方法 采用间接免疫荧光标记染色和流式细胞术 ,检测并比较 10例正常胃粘膜、13例浅表性胃炎、10例肠上皮化生、11例不典型增生及 16例胃癌组织中 p5 3蛋白的表达水平。以DNA指数、增殖指数 (PI)、荧光指数 (FI)为分析指标。结果 胃癌、不典型增生及肠上皮化生的FI值分别为 1.86 6± 0 .0 96、1.14 3± 0 .0 6 0、1.0 5 0± 0 .0 74,与正常胃粘膜 ( 0 .6 0 2± 0 .0 77)比较 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,与浅表性胃炎 ( 0 .898± 0 .0 5 2 )比较 ,也有显著性差异 (P <0 .0 5 )。胃癌组织的FI值高于不典型增生及肠上皮化生 (P <0 .0 5 )。不典型增生组织 p5 3蛋白阳性率为 2 5 .0 %( 2 /8) ,胃癌为 6 8.4% ( 13/19) ,在不典型增生及胃癌组织中 ,其异倍体的FI值、PI值和p5 3蛋白阳性率与二倍体者比较 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 胃癌组织 p5 3蛋白的表达水平高于癌前病变及正常胃粘膜组织 ;随病变向恶性转化 ,p5 3蛋白表达水平、PI值及异倍体率均增高。因此 ,检测 p5 3蛋白表达水平对胃癌的诊断具有一定意义。

前列腺癌细胞核的形态定量图像分析

目的 测定前列腺癌及前列腺增生细胞核面积、周长、直径、圆度、长短轴比五项参数的变化及其在前列腺癌及前列腺增生病变诊断中的意义。方法 应用计算机图像分析技术测定前列腺良性增生、前列腺导管 腺泡不典型增生及前列腺癌细胞核的上述五项参数 ,统计分析各组间的差异。结果 实验表明 ,前列腺癌各组的细胞核面积、周长、直径、圆度四项参数均大于前列腺良性增生 (P <0 .0 5 ) ,长短轴比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 细胞核面积、周长、直径及圆度均值及标准差呈逐渐递增趋势 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。这四项参数对前列腺癌及前列腺增生的诊断有一定的参考价值。前列腺导管 腺泡不典型增生是真正的癌前病变 。

幽门螺杆菌感染及PCNA表达与胃腺癌的相关性研究

目的 :探讨幽门螺杆菌感染及PCNA表达与胃癌发生的关系。方法 :对 183例手术切除或胃镜活检标本采用简易快速尿素酶反应检测HP感染情况 ,免疫组化采用SP法检测PCNA的表达强度。结果 :慢性浅表性胃炎 ,慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、中重度不典型增生及胃癌的HP感染与PCNA表达的强度不同 ,均呈递增趋势 ,同时在慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生及中重度不典型增生组中 ,HP阳性患者PCNA表达显著高于HP阴性患者 ,两者比较差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论 :HP感染的胃粘膜处于高增殖状态 。

前列腺癌bcl-2及p53蛋白表达水平的研究

为了研究前列腺癌bcl 2及 p5 3蛋白的表达水平及其与前列腺癌发生发展的关系 ,应用LSAB法检测了 2 8例前列腺癌患者的bcl 2及 p5 3蛋白的表达水平。结果显示 ,bcl 2及p5 3蛋白表达的阳性率分别为 4 2 .9%、2 8.6 % ,均高于良性前列腺增生的阳性率 ,但无统计学差异 (P >0 .0 5 )。在前列腺癌中 ,低分化组bcl 2的表达水平明显高于高及中分化组 (P <0 .0 5 ) ,临床分期D期明显高于B及C期 (P <0 .0 5 ) ;p5 3的表达水平在上述各组及各期之间均无统计学差异 (P >0 .0 5 )。提示前列腺癌bcl 2蛋白的表达异常增高 ,可能与前列腺癌的发生发展有关 ,检测bcl

Wnt信号通路在乳腺癌中的作用

目的探讨乳腺癌中Wnt信号通路关键因子β-catenin的突变和表达及靶基因cyclinD1、c-myc的表达及意义。方法应用免疫组化SP法检测119例乳腺癌,72例乳腺增生症和40例正常乳腺组织中β-catenin、cyclinD1、c-myc的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。应用PCR和基因测序的方法检测44例乳腺癌β-catenin外显子3的突变情况,同时应用免疫组化SP法检测其β-catenin的表达。结果40例正常乳腺组织中β-catenin在细胞膜中强表达,cyclinD1及c-myc阴性表达。乳腺癌β-catenin异常表达率明显高于乳腺增生症,组间比较差异有显著性(78.15%vs44.44%,P<0.01),乳腺癌cyclinD1、c-myc阳性表达率高于乳腺增生症(57.98%vs33.33%;56.30%vs27.78%,均P<0.01)。β-catenin异常表达、cyclinD1的过表达与淋巴结转移相关,c-myc的过表达与肿瘤大小和淋巴结转移相关。β-catenin的异常表达与cyclinD1的表达相关,而与c-myc的表达无关。44例乳腺癌组织中未检测到β-catenin基因外显子3的突变,β-catenin的异常表达率为77.30%。结论β-catenin异常表达是乳腺癌发生发展过程中的重要因子,这个过程可能是通过激活cyclinD1实现的。β-catenin异常表达和cyclinD1、c-myc过表达可作为评估乳腺癌转移预后、指导治疗的指标。乳腺癌组织中细胞内β-catenin异常积聚不是由β-catenin基因突变所致,可能存在其他机制。

孕酮调节乳腺癌耐药蛋白的机制研究

目的:探讨孕酮调控乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的机制。方法:通过米托蒽醌(MX)诱导或基因转染的方法,作用于孕酮受体(PR)阳性的T47D和PR阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞系,建立由BCRP启动子或巨细胞病毒(CMV)启动子启动表达BCRP的4种耐药细胞系T47D/MX、T47D/CMV-BCRP、MDA-MB-231/MX和MDA-MB-231/CMV-BCRP,将孕酮加入耐药细胞的培养液中,通过RT-PCR、Western blotting及MX外排实验观察其对不同耐药细胞系BCRP表达的影响。结果:孕酮可以剂量依赖方式明显上调PR阳性的乳腺癌细胞系T47D/MX中BCRP mRNA和蛋白的表达,细胞中MX的荧光强度明显减弱。而对照组T47D/CMV-BCRP、MDA-MB-231/MX和MDA-MB-231/CMV-BCRP细胞系,各组处理前后相比,BCRP的表达量无明显变化。结论:孕酮可能通过PR的介导与BCRP启动子上游调控序列中的孕激素反应元件(PRE)结合,激活BCRP基因的启动子而增强BCRP mRNA的转录,正性调节BCRP蛋白的表达和功能。

围生儿死亡108例临床病理分析

目的探讨围生儿的死亡原因及其与胎盘病理改变的关系。方法选择2000年1月～2012年12月北京天坛医院及佑安医院围生期死亡的尸检标本108例作为研究对象,其中包括胎死宫内76例及新生儿死亡32例,分析各器官及胎盘脐带的HE切片,观察胎盘脐带的病理改变。结果先天性宫内缺氧窒息和先天畸形均为胎死宫内及新生儿死亡的主要原因,其中在胎死宫内及新生儿死亡中先天性宫内缺氧窒息分别占63.2%和78.1%,先天畸形分别占36.8%和21.9%。绒毛间质纤维化、细胞滋养细胞明显、干绒毛血管硬化、干绒毛闭塞性动脉内膜炎、绒毛膜羊膜炎及羊膜胎粪污染多见于胎死宫内的胎盘,与新生儿死亡胎盘情况的差异有统计学意义(P<0.05);在胎死宫内的胎盘中,绒毛合体细胞结节增多、细胞滋养细胞明显、干绒毛血管硬化及干绒毛闭塞性动脉内膜炎在因宫内缺氧窒息死亡胎盘和因畸形死亡胎盘间,差异有统计学意义(P<0.05);绒毛膜羊膜炎多见于因畸形死亡胎盘中,镜下可见到脐血管病变。结论围生儿尸检对于明确死因有重要价值,胎盘脐带的病理检查可为寻找死因提供证据。

宫颈鳞状细胞癌细胞核的形态定量分析

目的测定宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(cervicalintraepithelialneoplasm,CIN)细胞核面积、周长、直径、圆度、长短轴比五项参数的变化及其宫颈癌及癌前病变诊断中的意义。方法按照宫颈癌及CIN的不同分级进行分组,应用计算机辅助图像分析技术测定实验组及对照组中细胞核的上述五项参数,统计分析各组间的差异。结果CIN各组及宫颈癌各组的细胞核面积、周长、直径、圆度四项参数均大于正常对照组(P<0.05)。长短轴比无显著差异。实验组中,CINⅠ级、Ⅱ级间,核面积、周长和直径三项参数均有显著性差异(P<0.05)。宫颈癌三个分级间,其细胞核周长和直径在Ⅰ、Ⅱ级间,Ⅱ、Ⅲ级间均有显著性差异(P<0.05)。核面积级圆度在Ⅱ、Ⅲ级间均有显著性差异(P<0.05)。结论细胞核面积、周长、直径及圆度在宫颈癌及CIN时都有显著增大。这些参数对宫颈癌及CIN的诊断有一定的参考价值。CINⅢ级是真正的癌前病变,与宫颈癌的发生发展有密切关系。

膀胱癌等位基因缺失研究

目的了解膀胱癌克隆演变(clonal evolution)过程中的遗传学机制。方法分别利用4个位于染色体9p21区和17p13区上具有多态性的微卫星标记物,分析了18位膀胱癌病人原发癌及相应转移灶中等位基因的缺失或保留方式。利用显微切割技术在保存的石蜡包埋组织中获取基因组DNA。结果在原发癌和转移灶中总的等位基因缺失频率均为89%(16/18),而在原发癌中D9S161的缺失频率为86%,D9S171为67%,IFNA71%,TP5380%;在转移灶中各位点缺失频率分别为100%(D9S161),67%(D9S171),71%(IFNA),80%(TP53)。18例病例中,16例(89%)在原发癌及相应转移灶中所有位点均表现为相同的等位基因缺失或保留模式,而另外2例(11%)则显示不一致的等位基因缺失。这2例在原发癌灶表现为等位基因保留而在相应转移灶则为缺失。结论膀胱癌在原发癌及相应转移灶遗传组成上有相当一致性;当转移癌的原发癌不能确定来源时,这些位点的杂合性缺失(LOH)可作为膀胱癌的标志物。

前列腺癌演进过程中的等位基因失衡

目的了解前列腺癌克隆演变(clonal evolution)过程中的遗传学机制。方法采用激光显微切割技术从保存的石蜡包埋组织中获取基因组DNA;利用6个位于染色体8p12-21、8p22、17q21上的具有多态性的微卫星标记,对25例患者原发癌及相应转移灶中等位基因的缺失或保留进行分析。结果在24例信息病例中,14例(58%)在原发癌及相应转移灶中所有位点均表现为相同的等位基因缺失或保留模式,而另外10例(42%)则显示不一致的等位基因缺失。10例中有8例原发癌表现为等位基因保留,而在相应转移灶则为缺失,另外2例在一个或一个以上的位点表现为不同的等位基因缺失模式。结论前列腺癌在原发癌及相应转移灶遗传组成上的差异可能与其内在异质性、整体遗传不稳定性及克隆差异有关。

食管鳞状细胞癌染色体13q12-13杂合性丢失

目的分析食管鳞状细胞癌(ESCC)在13号染色体长臂1213区(13q1213)上的等位基因杂合性丢失(LOH),以期寻找13q1213区上可能存在的与ESCC有关肿瘤抑制基因(TSG)的缺失区域。方法用8个位于13q1213区的微卫星标志物,对56例ESCC患者进行PCRLOH分析,56例ESCC患者包括34例有上消化道癌家族史,22例无上消化道癌家族史。结果56例ESCC患者中,48例(86%)显示一个或更多位点LOH;并发现一个LOH高频率区,位于位点D13S267和D13S219之间,物理距离仅有2.83Mb;在位点D13S1242有上消化道癌家族史组LOH为68%,明显高于无上消化道癌家族史组的18%,(P=0.003);在位点D13S289有上消化道癌家族史组LOH为82%,明显高于无上消化道癌家族史组的31%(P=0.008),有显著意义。结论研究提示染色体13q1213的LOH可能在食管癌发生发展中起重要作用,在染色体13q1213区上,可能存在一个或多个与ESCC发生发展有关肿瘤抑制基因(TSG)。

用流式细胞术检测胃癌p53蛋白的表达

目的 :检测并比较胃癌及癌前病变 p5 3蛋白表达水平 ,探讨p5 3蛋白在胃癌发病中的意义。 方法 :采用间接免疫荧光标记 ,流式细胞术分析。以DNA指数、增殖指数、荧光指数为分析指标。结果 :胃癌、不典型增生及肠上皮化生的荧光指数 (FI)值与正常胃粘膜相比差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ,前三者与浅表性胃炎相比差异也都有显著性 (P <0 0 5 )。不同病变间的比较 ,可见胃癌FI高于不典型增生及肠上皮化生 (P <0 0 5 )。不典型增生 p5 3蛋白阳性率为 2 7% ,胃癌为 6 8% ,在不典型增生及胃癌病例中 ,其异倍体的FI值、增殖指数 (PI)值和 p5 3蛋白阳性率与二倍体者相比差异都有显著性 (P <0 0 5 )。 结论 :胃癌组织 p5 3蛋白的表达水平高于癌前病变及正常胃粘膜组织 ,随病变向恶性转化 ,p5 3蛋白、PI及异倍体率均增高。检测 p5

食管鳞状细胞癌染色体13q11-12杂合性丢失

目的分析食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)在13号染色体长臂11-12区(13q11-12)上的等位基因杂合性丢失(LOH),以期寻找13q11-12区上可能存在的与食管鳞状细胞癌有关肿瘤抑制基因的缺失区域。方法用9个位于13q11-12区的微卫星标志物,对56例ESCC患者组织切片激光显微切割后,进行PCR-LOH分析;56例ESCC患者包括34例有上消化道癌家族史,22例无上消化道癌家族史。结果56例ESCC患者中,49例(87.5%)显示一个或更多位点LOH;并发现一个LOH高频率区,位于位点D13S787和D13S221之间,物理距离仅有1.83 Mb;在位点D13S1236有上消化道癌家族史组LOH为89%,明显高于无上消化道癌家族史组53%(P=0.031<0.05),差异有显著性意义。结论研究提示染色体13q11-12的LOH可能在食管癌发生、发展中起重要作用;在染色体13q11-12区上,可能存在一个或多个与ESCC发生发展有关的肿瘤抑制基因(TSG)。

浅谈冷冻技术在临床的应用

随着现代科技的迅速发展,许多先进的科学技术成果应用到医学上。近年来,冷冻技术已发展成为一门新兴的独立学科,并经过临床的不断探索和发展,已逐步深入到脏器的诊断与治疗中。神经外科、心血管外科、显微外科以及断肢再移植和脏器移植需要供给血液及各种血制品。

原发性胃恶性淋巴瘤临床病理分析

原发性胃恶性淋巴瘤临床病理分析李光，王全红，徐妙生，王永华胃原发性恶性淋巴瘤因无特异的临床表现，不易早期诊断。据文献报告胃恶性淋巴瘤的５年生存率已超过５０％［１，２］。因此，提高其正确诊断至关重要。现将我院自１９６７年２月至１９９１年１２月，共收治的...

托瑞米芬逆转乳腺癌耐药蛋白介导的多药耐药机制

目的探讨托瑞米芬逆转乳腺癌耐药蛋白（BCRP）介导的多药耐药机制。方法通过基因扩增，构建分别由BCRP启动子和巨细胞病毒（CMV）启动子启动表达BCRP的重组质粒pcDNA3-Pmmoter-BCRP和作为对照的质粒pcDNA3-CMV-BCRP，将其分别转染雌激素受体Ⅸ（ERa）阳性的MCF-7和ERα阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞系，建立由BCRP启动子和CMV启动子启动表达BCRP的4种耐药细胞系MCF-7／Promoter-BCRP、MCF-7／CMV-BCRP、MDA-MB-231／Promoter-BCRP和MDA—MB-231／CMV-BCRP。在耐药细胞培养基中加入托瑞米芬，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot、外排实验以及细胞毒性实验观察托瑞米芬对不同细胞系的耐药逆转效果。结果与空白对照组（未加药物）相比，托瑞米芬以剂量依赖方式抑制BCRP mRNA的表达，0．1、1和10μmol／L托瑞米芬处理组MCF-7／Promoter—BCRP细胞中BCRP mRNA的表达水平分别下调29．5％（P〈0．05）、68．1％（P〈0．01）和97．4％（P〈0．01）；MCF-7／Promoter—BCRP细胞经托瑞米芬和17β-雌二醇联合处理后，细胞中BCRPmRNA的相对表达水平为64．2％±1．3％，明显高于托瑞米芬单独处理组（3．8％±0．2％，P〈0．01）。托瑞米芬对各组细胞系中BCRP蛋白表达的调控作用与mRNA相似。经托瑞米芬处理后，MCF-7／Promoter-BCRP细胞内米托蒽醌的荧光强度显著增强，外排米托蒽醌的能力降低了47．3％（P〈0．05）；经托瑞米芬和17β-雌二醇联合处理后，MCF-7／Promoter—BCRP细胞内米托蒽醌的荧光强度明显低于托瑞米芬单独处理组，外排米托蒽醌的能力升高了61．5％。托瑞米芬可有效逆转MCF-7／Promoter—BCRP细胞对米托蒽醌的耐药性。上述作用在MCF-7／CMV-BCRP、MDA—MB-231／Promoter-BCRP和MDA—MB-231／CMV-BCRP细胞中未能体现。结论托瑞米芬可能通过ERot的介导与BCRP启动子上游调控序列中的ERE结合，负性调节BCRP的表达，抑制BCRP蛋白的功能，在体外有效逆转BCRP介导的多药耐药。