2006-2008年江苏地区不同宿主感染空肠弯曲菌及其耐药性

目的检测2006-2008年江苏地区鸡、水禽、奶牛、丹顶鹤、猪、实验猴等标本感染空肠弯曲菌及其耐药性。方法采用APICampy System进行生化与分类鉴定,结合弯曲菌多重PCR检测方法对来自江苏地区的禽、牛、猪、猴3 010份标本,检测分离株及其耐药性。结果共检测样本3010份,402份空肠弯曲菌阳性,阳性率13.36%,其中家禽样阳性率15.83%(258/1630);水禽10.40%(52/500);奶牛7.65%(39/510);猪18.75%(30/160);猴15.00%(15/100);丹顶鹤12.50%(10/80);糜鹿0%(0/30)。选择不同宿主来源的108株对10大类27种抗生素高度敏感率的是:氯霉素100%、阿莫西林99.07%、阿米卡星92.59%、头孢噻肟91.67%、阿齐霉素90.74%;高度耐药率的是:头孢哌酮99.07%、复方新诺明99.07%、头孢孟多99.07%、磺胺甲基异噁唑97.22%、头孢拉丁91.67%。结果显示,108株分离株的耐药主要集中在9耐～20耐,占85.19%,猪分离株的多重耐药性较其它宿主来源分离株严重。结论江苏地区空肠弯曲菌的流行和耐药状况呈现多样化和复杂化,不同宿主来源分离株耐药性和多重耐药性存在差异。

气相色谱法测定出口龙虾中氯霉素残留量的研究

用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素,然后将乙酸乙酯蒸发至干,用正己烷净化再用乙酸乙酯提取氯霉素并进行无水硫酸钠脱水,经C-18小柱净化、硅烷化后用带有微池电子捕获器的气相色谱仪进行测定,外标法定量。

气相色谱法测定出口龙虾中氯霉素残留量的研究

用乙酸乙脂提取试样中的氯霉素,然后将乙酸乙脂蒸发至干,用正已烷净化, 再用乙酸乙脂提取氯霉素并进行无水硫酸钠脱水,经C-18小柱净化,硅烷化后用带有微池 电子捕获器的气相色谱仪进行测定,外标法定量。

肠衣中氯霉素残留量检测的研究

研究了应用酶联免疫反应方法 (ELISA) ,检测进出境肠衣中氯霉素残留量的制样和运用德国R -Biopharm公司的氯霉素残留测定试剂盒测定氯霉素残留量的具体操作方法及注意事项 ,可将氯霉素检测下限达到 0 1μg/kg。

分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定肉制品中残留的扑草净、禾草丹

以乙腈为萃取溶剂,采用乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)固相分散净化技术,以气相色谱-质谱(GC-MS)在选择离子监测模式下测定肉制品中残留的扑草净、禾草丹2种除草剂。方法的线性范围为0.05～10mg/L,相关系数均为0.9999,检出限(S/N=10)均达到0.01mg/kg,在三个浓度水平(0.01、0.05、0.1mg/kg扑草净、禾草丹)进行精密度和回收率试验,所得相对标准偏差在3.3%～6.4%之间,回收率在83%～101%之间。

克伦特罗残留量的检测方法

研究了应用酶免疫反应(ELISA)方法检测肉品中克伦特罗(Clenbuterol)残留量的制样和运用德国R-Biopharm公司克伦特罗残留测定试剂盒测定的具体操作方法及注意事项,可将克伦特罗检测下限达到0.1μg/kg。

斑点叉尾鮰中一种病原菌的分离与鉴定

目的未知病菌对江苏地区斑点叉尾鮰的养殖业造成了巨大的危害,本文对该地区某养殖场病鱼中分离的细菌进行了鉴定及微生物学特性研究。方法采用VIA培养基分离优势菌株;采用回归感染实验确认病原菌;采用形态学观察、生理生化特征测定、细菌特异性引物PCR扩增检测及细菌基因测序分析鉴定细菌;采用药敏实验测定它对部分抗生素的敏感性。结果从病鱼症状及菌株的培养特性、形态特征与嗜麦芽寡养单胞菌感染斑点叉尾鮰症状十分相似,病鱼有典型的肠套叠和肝脏变性现象。分离菌株为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阴性、硝酸还原阴性,不发酵糖类,无动力。最初判为嗜麦芽寡养单胞菌,而经过VITEK2生化及16S rRNA基因系统发育进化显示,与不动杆菌16S rRNA核苷酸同源性最高,为98.7%～99.8%,该菌株为约翰逊不动杆菌。结论分离出的约翰逊不动杆菌grp2580083能导致斑点叉尾鮰患病,症状与嗜麦芽寡养单胞菌感染具有类似性,对渔业养殖造成影响。

抗无色孔雀石绿抗体的制备及鉴定

目的:本文利用本实验室合成的人工抗原制备抗无色孔雀石绿抗体,其中包含多克隆抗体和单克隆抗体两种形式,并进行相关鉴定,为建立免疫分析法检测无色孔雀石绿打下基础。方法:以无色孔雀石绿-卵清蛋白偶联物为免疫原免疫新西兰大白兔,经1次基础免疫和4次加强免疫,收集抗血清,采用饱和硫酸铵法进行纯化,获得了抗无色孔雀石绿多克隆抗体。同时免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,通过细胞融合,杂交瘤筛选,克隆和扩大培养,成功筛选出一株稳定分泌特异性抗无色孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果:间接ELISA法检测抗无色孔雀石绿多克隆抗体效价达1:2×105。获得的抗无色孔雀石绿单克隆抗体效价为32,0000,亲和常数为3.25×108L/mol,亚类类型为IgG2a。间接竞争ELISA结果显示,抗无色孔雀石绿单克隆抗体的半数抑制浓度IC50为23.9μg/L,最低检出限为1.1μg/L。交叉反应结果表明,单克隆抗体的特异性较好,与孔雀石绿的交叉反应率为24.33%,与其他结构类似物基本无交叉。结论:本文制备的抗体可用于建立无色孔雀石绿的免疫分析方法,经过进一步技术开发,可以形成试纸条、酶免试剂盒和生物传感器等产品,具有广阔的应用前景。

烟花制品运输危险性定级试验热通量实验研究

根据联合国《关于危险货物运输的建议书——试验和标准手册》的要求,文章从旋转升空、火箭及礼花弹等类别中选取典型样品作为试验样品,分别利用理论计算法和直接测量法对样品的热通量进行测试。实验结果表明:(1)对于稳定燃烧的烟花制品,文章所阐述的直接测量方法与理论计算法所得数值吻合性较好;(2)文章研究的热通量测量方法是有效的。

孔雀石绿及其代谢物检测方法研究进展

孔雀石绿（Malachite green，MG）属三苯甲烷类染料，化学名称为四甲基代二氨基三苯甲烷，结构见图1。在水产养殖中，孔雀石绿主要用来抗真菌感染和杀灭寄生虫，一般用于鱼类防治水霉病、烂鳃病以及寄生虫等。因其价格低廉、疗效显著，曾在水产养殖业中广泛应用。孔雀石绿进入水生动物体内后．会快速代谢成脂溶性的无色孔雀石绿（Leucomalachite green，LMG），结构见图2。

丹顶鹤空肠弯曲菌感染情况调查

对江苏省盐城国家级珍禽自然保护区丹顶鹤中空肠弯曲菌带菌情况进行监测,共采集泄殖腔标本80份,采用国标法,并用API Campy System进行了生化与分类鉴定,结合弯曲菌多重PCR检测方法,共检出弯曲菌17株,阳性率为21.67%,其中空肠弯曲菌10株。结果表明,丹顶鹤弯曲菌的感染与年龄有关,未成年丹顶鹤弯曲菌阳性率极显著地高于成年丹顶鹤;同时对部分菌株用琼脂扩散法进行药敏试验。

妇女卫生用品棒状杆菌污染监测状况

除了白喉棒状杆菌之外,常见的棒状杆菌有溃疡棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、化脓棒状杆菌、溶血棒状杆菌等多种,可以寄生于人或动物的鼻腔、咽喉部、外耳道、眼结膜、外阴部和皮肤等处.

气相色谱法测定肉品中氯霉素残留量的研究

用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素,然后将乙酸乙酯蒸发至干,用正己烷净化再用乙酸乙酯提取氯霉 素并进行无水硫酸钠脱水,经C-18小柱净化、硅烷化后用带有微池电子捕获器的气相色谱仪进行测定,外标 法定量。

2种基因分型法在牛结核病流行病学调查中的应用

为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)和数目可变串联重复序列结核分枝杆菌散在分布重复单元(VNTR-MIRU)基因分型法用于国内牛分枝杆菌的基因分型,初步了解盐城地区牛分枝杆菌基因型种类、分布以及2种方法在当地应用的可行性。收集盐城和其他地区分离的31株牛分枝杆菌分离株,分别采用Spoligotyping和VNTR-MIRU对这些分离株进行基因分型,比较2种方法的分型效果,评价其在牛分枝杆菌基因分型中的应用。结果:使用Spoligotyping方法,31株牛分枝杆菌呈现出3种基因型;使用VNTR-MIRU方法,31株分离株呈现6种基因型;当2种方法联合使用时,可以分为7种基因型,其中的1个菌株具有独特的基因型,而2株盐城地区分离株显示其与其他地区的牛分枝杆菌同样存在主要的流行型为BCG家族,未发现其基因独特性。将Spoligotyping和VNTR-MIRU联合使用,可有效提高牛结核病的分子流行病学调查和病原学的监测效果。

免疫分析法检测无色孔雀石绿研究 Ⅰ人工抗原的合成

目的用免疫分析法检测水产品中无色孔雀石绿残留,研究无色孔雀石绿人工抗原的制备及其鉴定。方法用混酸法对无色孔雀石绿进行衍生化,连接上氨基基团,再经重氮化法与载体蛋白相结合,制备人工抗原。结果对无色孔雀石绿中间合成产物的液质联用分析结果表明,氨基产物中,无色孔雀石绿占51.83%,单氨基加成的无色孔雀石绿产物占40.48%,二氨基加成的无色孔雀石绿产物占7.69%。采用紫外法和Bradford法测定,人工抗原中无色孔雀石绿与载体蛋白的结合比为18∶1～23∶1。结论合成的人工抗原属于高质量的人工抗原。