低温与无水胁迫下凡纳滨对虾肌肉品质劣变标记蛋白识别

【目的】探明凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)保活流通过程中低温和无水双重胁迫诱导肌肉品质劣变与差异表达蛋白之间的相关性,识别品质劣变的潜在标记蛋白。【方法】在模拟的海水环境中[溶解氧质量浓度为7.2 mg/L,温度控制在(12±1)℃]观察对虾在低温和无水胁迫下的生理反应,通过串联质谱标签蛋白质组学方法,分析环境胁迫导致的肝胰腺蛋白质组显著差异性变化,并将其与肌肉品质进行相关性分析。【结果】与正常对照组相比,低温组和低温+无水组分别鉴定了33和44个显著差异蛋白质(DEPs),这些蛋白质大多在溶酶体、糖酵解或糖异生、黏附等通路显著富集(P<0.05),同时胰蛋白酶-1、二肽基肽酶显著上调(P<0.05),而磷酸丙糖异构酶和醛脱氢酶显著下调(P<0.05)。此外,颜色和质构指标的变化与微管蛋白、凝溶胶蛋白、层黏连蛋白、内源性蛋白酶和代谢酶表达水平显著相关。【结论】本研究初次探明肝胰腺DEPs与肌肉品质间的内在联系,识别的典型DEPs可作为品质劣变的潜在标志蛋白,为监测无水运输期间凡纳滨对虾肌肉品质劣变提供分子靶标。

冷藏凡纳滨对虾肌肉软化的生化特性及生物标记物

【目的】探究冷藏凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)质构品质劣变生化变化特性并识别生物标记物。【方法】测定凡纳滨对虾4℃冷藏期间肌肉质构参数,检测肌肉组织中糖原与乳酸含量、ATP水平,以及Ca^(2+)-ATP酶、酸性与碱性磷酸酶(ACP、AKP)活性,分析无氧代谢特征和磷酸化调控酶活性动态变化,解析各指标间相互联系。【结果与结论】4℃冷藏期间对虾质构指标迅速下降,冷藏72 h后硬度显著下降至(2947±113)g(P<0.05),肌原纤维小片化指数(MFI)与质构指标呈显著负相关(P<0.01);新鲜对虾冷藏24 h后磷酸果糖激酶(PFK)活性显著下降至(20.82±0.38)U/mg(P<0.05),且PFK活性与糖酵解各指标相关性最强,其调控的糖酵解是触发和加速肌肉快速软化的关键前期生化事件;ATP含量调控磷酸酶和Ca^(2+)-ATP酶活性,ACP活性和AKP活性在冷藏96 h显著上升至(16.39±1.17)U/mg和(0.86±0.05)U/mg(P<0.05),Ca^(2+)-ATP酶活性24 h后降至(0.50±0.01)U/mg(P<0.05)。随时间延长,Ca^(2+)-ATP酶活性下降诱导内质网释放Ca^(2+)诱导磷酸酶开启去磷酸化进程,蛋白质降解信号暴露被泛素化标记,肌原纤维蛋白进而被降解;相关性分析结合生化基本原理初步判定,Ca^(2+)-ATP酶为质构劣化的生物标记物。

4种提取方法对对虾肌原纤维蛋白提取率、空间结构和热稳定性的影响

【目的】获取提取率高且结构完整的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肌原纤维蛋白。【方法】通过0.5 mol/L KCl、53 kHz超声辅助0.5 mol/L KCl、53 kHz超声辅助质量分数5%十二烷基硫酸钠(SDS)和RIPA裂解液这4种提取方法提取对虾肌原纤维蛋白,以肌原纤维蛋白提取率和结构完整性为评价指标,采用光谱学和凝胶电泳生化,评价四种提取方法对对虾肌原纤维蛋白提取率、空间结构和热稳定性的影响。【结果】53 kHz超声辅助0.5 mol/L KCl、0.5 mol/L KCl、53 kHz超声辅助5%SDS和RIPA裂解液4种方法所得提取率分别为(87.99±3.08)%、(53.76±3.90)%、(75.59±0.95)%和(95.46±4.49)%。53 kHz超声辅助0.5 mol/L KCl提取的蛋白中肌钙蛋白和原肌球蛋白蛋白丰度较高,0.5 mol/L KCl和53 kHz超声辅助质量分数5%SDS提取的肌球蛋白重链和肌动蛋白蛋白丰度较高;相较于0.5 mol/L KCl,超声辅助提取可最大限度保持肌原纤维蛋白天然结构,α-螺旋结构保留完好;0.5 mol/L KCl提取可较好维持肌原纤维蛋白的酰胺Ⅰ带结构。RIPA裂解液提取对肌原纤维蛋白二级结构有明显破坏,热稳定性仅为原蛋白的(60.63±4.46)%。【结论】综合提取率、空间结构和热稳定性结果,采用53 kHz超声辅助5%SDS提取可获得质量最佳的凡纳滨对虾肌原纤维。本研究可为后续深入解析冷藏对虾品质劣变和开发高效控制技术提供高质量的肌原纤维蛋白。

国内水飞蓟资源利用现状与展望

从产业化的角度,本着资源高效综合利用的原则,对水飞蓟植物资源引种国内后种籽的主要化学成分及利用价值进行了概述,对其利用现状及存在问题进行了分析,针对目前利用中存在的问题从技术角度提出了几点建议,并对其发展趋势进行了预测和展望。

降温及生态冰温条件对凡纳滨对虾无水存活时间的影响

【目的】确定凡纳滨对虾无水存活流通的关键工艺参数。【方法】通过观察明确休眠临界温度,计时测定,确定降温程序、氧气含量及生态冰温保藏温度对存活时间的影响。【结果】凡纳滨对虾生态冰温区为-2~10℃。设定4种降温方式,其梯度降温均为≥18、18~15、15~10℃等3个区段,第Ⅰ种方式对应区段的降温速率为4、1、0.5℃/h,第Ⅱ种为4、2、0.5℃/h,第Ⅲ种为4、1、1℃/h,第Ⅳ种为4、4、4℃/h。第Ⅰ种方式下的存活时间(12.48±0.56)h,显著大于第Ⅱ种(8.75±0.77)h、第Ⅲ种(8.29±0.58)h和第Ⅳ种(6.19±0.62)h(P<0.05)。在99.9%氧气含量且维持生态冰温5℃的无水条件下可使存活时间进一步延至(23.82±0.77)h,之后常温新鲜海水中5 min可复苏至鲜活状态,成活率在98.5%以上。【结论】通过调整降温及生态冰温条件可显著延长凡纳滨对虾无水存活时间。

响应曲面法在鸡骨架蛋白酶解工艺中的应用

采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和复合蛋白酶水解鸡骨架蛋白制备富含氨基酸、生物寡肽的水解液,确定了酶解的前处理条件、理想用酶及适宜添加量。结果表明,理想用酶为复合蛋白酶,其适宜添加量为2400UP/g蛋白。采用响应面(RSM)法对复合蛋白酶酶水解条件进行了优化,最终确定复合酶的酶解条件为:[S]=2.8%(蛋白),T=54.0℃,起始pH=7.0,在优化条件下水解5h时的水解度(DH)=42.39%,较常规法水解度提高了约8%～10%,氨基酸分析表明,酶解液中富含各种必需氨基酸和生物寡肽。

鸡骨架蛋白酶解制备肉味香精反应底物的研究

选用复合蛋白酶对鸡骨架蛋白进行酶解，运用响应曲面法对酶解工艺进行优化。最优工艺为：酶浓度1800UP／g蛋白，底物浓度2．8％蛋白，温度54℃，起始pH7．0，在优化条件下水解5h后体系氮回收率86．48％，水解度（DH）42．39％，较优化前水解度提高了8％～10％。酶解液鲜味浓郁，口感醇厚；氨基酸分析表明酶解液含有17种氨基酸（色氨酸未计），总量达2．627g／100mL酶解液，游离态和肽结合态氨基酸分别占总氨基酸的44．08％和55．92％，在总氨基酸中必需氨基酸（EAA）／总氨基酸（TAA）为43．05％，可作为关拉德热反应制备肉味香精的优质底物。

超临界CO_2萃取水飞蓟油工艺研究

以特种油料植物水飞蓟种籽为材料,以超临界CO2为溶剂在容量为1L的萃取釜中对水飞蓟油进行萃取。考察了萃取压力、温度、时间等因素对萃取效率的影响,在单因素实验的基础上运用响应曲面法(RSM)考察了因素间的交互作用,并对萃取工艺参数进行了优化。

不同预处理对马铃薯片浸渍速率及感官品质的影响

采用理化测定和感官评定相结合的方法考察了烫漂、冷冻、微波干燥、烫漂+冷冻四种预处理方式对马铃薯片在麦芽糊精溶液中的浸渍速率及感官品质的影响。结果表明,以45%的糊精溶液为浸渍液,在45℃下进行浸渍,烫漂+冷冻的预处理方式浸渍速率最大,在30min时即已达最大浸渍量的80%,基本满足工艺要求;经此处理浸渍后的薯片外形平整饱满,色泽浅黄半透明,质感厚实。烫漂+冷冻的预处理方式可作为马铃薯脆片加工中浸渍工序的最佳预处理措施。

湛江对虾产业现状、困境与发展建议

对虾产业是湛江的支柱和特色产业,已形成较为明显的规模效应,但在新的国内外市场竞争环境下,其产业优势面临着诸多挑战。以系统的视角在分析对虾产业发展现状的基础上,从企业内部结构和外部运营环境全面剖析制约产业发展的若干关键问题,进而提出以协同创新的理念推进企业科技、管理和服务的集成创新,以在质量、成本、品牌等方面提升产品核心竞争力,同时通过创新和完善政府、银行、行业协会等企业外部机构的服务职能,营造公平竞争的市场环境和宽松便捷的金融环境,将产品核心竞争力进一步提升为产业核心竞争力,全面振兴湛江民营经济。

蛹虫草抑菌活性研究开发现状与发展趋势

食源性致病菌的绿色控制是目前食品安全面临的难题和瓶颈。本文就蛹虫草抑菌活性的研究与开发现状进行了综述,并就发展趋势进行了分析,以便为蛹虫草资源抑菌活性的基础研究和在食源性致病菌绿色控制方面的开发利用提供参考。

酒精性脑损伤的突触机制及其修复策略述评

酒精性痴呆日益成为严峻的医学和社会问题,整体机制不明是目前酒精性脑损伤干预和治疗的瓶颈。突触作为神经元之间递质释放与跨膜信息传递及整合的核心结构,对于学习记忆等脑的高级功能具有决定性作用。本文基于突触传递的神经生物学基础,围绕酒精分子胁迫下突触传递过程和效率的变化,分别从突触形态结构、物质基础、信号转导等层面,系统评述了酒精性脑损伤的突触机制及其修复策略,以期为酒精性脑损伤的深入研究和益智类保健食品开发提供思路借鉴。

南美白对虾肠道微生物宏基因组提取方法的比较

为获得高质量南美白对虾肠道微生物宏基因组模板,采用传统CTAB法、试剂盒和仪器法提取南美白对虾(Penaeus Vanmamei,P.vannamei)肠道微生物宏基因组,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法和V3区16S rDNA扩增检测所得基因组的完整性、得率、纯度和目的片段质量。结果表明3种方法提取得到的DNA结构均较完整,但得率和纯度差别较大,传统CTAB法提取的DNA得率和纯度均试剂盒和仪器法高,试剂盒和仪器法受糖和盐类污染较高,3种方法提取的宏基因组均可特异扩增出V3区保守片段。综合比较得知传统CTAB法提取P.Vanmamei肠道微生物基因组在完整性、得率和纯度方面优于其他两种方法,可为后续分子生物学分析提供良好基因组模板。

水飞蓟油水代法提取工艺主要影响因素的筛选

水代法提油是一种新型绿色提油工艺,但提油率影响因素众多,本研究旨在运用数理统计方法对影响水代法提油过程的诸多因素进行快速筛选。实验表明,对提油有正效应,且影响显著性由大到小的四个因素依次为:超声时间>水代温度>水代时间>离心速度。本研究为进一步优化水飞蓟油水代法提取工艺奠定了基础。

纳豆芽孢杆菌抗菌脂肽提取工艺优化

以麸皮和豆粕的混合培养基发酵产抗菌脂肽是目前抗菌脂肽较大规模制备的主要工艺,但产率受提取过程中多因素的影响。运用数理统计工具Box-Behnken对影响芽孢杆菌抗菌脂肽提取的主要影响因素进行定量评价和优化。试验得出最佳提取条件为80%甲醇水溶液、料液比1∶5(m∶V)、浸提时间180min、浸提pH 6.0,在此参数下抗菌脂肽的提取量为72.49g/kg,比优化前的59.14g/kg提高了22.57%。

中国酱油菌株AS 3.951的改良现状与思考

菌种作为酱油酿造的基础和核心,其性能的持续改良贯穿于发酵过程的始终。对比国内外酱油菌种米曲霉的改良现状,分析了国内酱油菌种AS 3.951在性能改良中存在的主要问题,探讨了其产生的主要原因,并提出了相应的解决措施,最后对我国酱油菌种技术的改良趋势和发展前景作了展望。

生态冰温无水保活对凡纳滨对虾活力及肌肉品质的影响

【目的】探讨生态冰温无水保活过程对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)活力和肌肉品质的影响。【方法】模拟无水保活流通中充氧(体积分数99.5%)作业环境,结合生态冰温休眠温度(12±1)℃条件,分析生态冰温无水保活对凡纳滨对虾机体存活情况和肌肉感官、质构、理化和营养参数变化。【结果】活力分析显示,无水保活进程显著影响对虾存活率,9 h内可基本维持在95%以内,之后快速降低,至12 h存活率为0,半数存活时间为10.46 h。随保活时间延长,对虾肌肉色泽加深,风味成分中烃类和含硫化合物逐渐增加;硬度、弹性、咀嚼性、胶黏性随时间的延长而下降,复苏后虽有明显恢复,但仍较正常对照组分别下降了5.48%、32.14%、35.35%、14.39%;无水保活9 h可使肌肉持水力、蛋白质、脂肪、水分和游离氨基酸总量分别下降至(75.77±1.32)%、(18.98±0.44)g/100g、(0.75±0.01)g/100g、(74.75±1.14)g/100g和(122.65±4.86)mg/100g(P<0.05)。【结论】生态冰温无水保活不会对凡纳滨对虾食用品质造成恶劣影响,但其营养价值有一定程度的下降。

冷藏温度下凡纳滨对虾组织黑变与内源多酚氧化酶活性相关性研究

[目的]探索凡纳滨对虾在冷藏过程中多酚氧化酶(PPO)活性变化程度与对虾黑变之间的相关性,明确关键控制点。[方法]通过感官鉴定、光电色差和分光光度测定凡纳滨对虾冷藏过程中的黑变规律,据此研究PPO活性变化与凡纳滨对虾黑变之间的相关性。[结果]试验表明,同一时间内凡纳滨对虾不同组织部位的PPO活性有明显差异,头部最高,腹部次之,最后是尾部。相关性分析表明,在冷藏过程中凡纳滨对虾黑变度与PPO活性变化均趋于上升,黑变度的变化规律与PPO的活性变化趋势呈显著正相关,头部、腹部、尾部的相关系数分别达到0.987 3、0.971 6、0.973 2,定量证明PPO活性变化是引起凡纳滨对虾黑变的主要因素。[结论]研究可为凡纳滨对虾冷藏期间的黑变控制提供理论依据。

四种食源肽对光老化皮肤氧化与炎症系统的影响

为研究四种食源肽经口摄入后对光老化皮肤中氧化和炎症系统的影响,将SPF级SD大鼠均分为空白对照组、紫外辐照组和肽干预组. 4种肽分别配制为0. 3、0. 9、1. 5 g/L的含肽水溶液,作为唯一水源行低、中、高剂量经口自由摄入.所有动物背部局部区域均行脱毛处理,之后除正常对照组外,所有其他组的大鼠均连续紫外辐照至模型组呈现典型光老化表观特征,然后取背部裸露部位皮肤制备组织匀浆液,并检测其中MDA含量及SOD、CAT和GSH-PX活力,酶联免疫吸附法检测IL-1β和TGF-β含量.结果表明:与正常对照组相比,模型组MDA、IL-1β、IL-6含量显著升高(P <0. 05),IL-2与TGF-β含量显著降低(P <0. 05),SOD、CAT、GSH-PX活力均显著下降(P <0. 05);与模型组相比,4种肽均能调节皮肤组织氧化和炎症状态,且总体呈剂量依赖性关系,但不同肽之间效果差异较大,以样品2中剂量组效果最佳,能显著提高光老化SD大鼠皮肤中抗氧化酶活性,降低脂质过氧化,改善免疫抑制和细胞微环境,可作为拮抗皮肤光老化的食品基料.

曲霉原生质体的制备与非对称灭活

为提高菌丝原生质体的释放量和活力,分别考查了碳源、菌龄、渗透压稳定剂、酶浓度、酶解时间及再生培养基种类对Aspergillus oryzaeHN3042和Aspergillus niger CICC2377原生质体释放和再生的影响,并研究了两个亲本原生质体的非对称灭活参数.确定了亲本原生质体的适宜制备参数.结果表明,以MPY液体培养基为菌丝培养基、0.7mol/L NaCl复合0.4mol/L山梨醇为渗透压稳定剂、以高渗豆汁固体培养基为再生培养基,原生质体有30%以上的再生率.通过非对称灭活曲线确定Aspergillus oryzae HN3042原生质体于15W紫光灯垂直距离13cm处照射15min,Aspergillus niger CICC2377原生质体于65℃水浴10min,可使亲本原生质体临界失活.