黄芪甲苷对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的:旨在探究黄芪甲苷(ASI)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤的抑制作用,并阐明其机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞,进行分组:正常对照组:低糖(葡萄糖浓度5.5mmol/L)环境下培养;高糖组:高糖(葡萄糖浓度25mmol/L)环境下培养;ASI各组:分别在高糖培养基内加入不同浓度ASI(包括25、50、100、200μg/ml),在处理后0、1、12、24、48、96h观察,采用TUNEL法和caspase3检测各组细胞凋亡情况,采用ELISA法检测TGF-β1和HGF蛋白含量,采用Western blot检测磷酸化p-38、磷酸化ERK和磷酸化JNK浓度。此外,另在同样高糖培养基内加入p38抑制剂SB202190,1、12、24h观察细胞凋亡情况。最后,取同样高糖环境培养细胞,依次加入HGF50、100、200μg/ml,24h后检测细胞内磷酸化p38蛋白水平。结果:ASI(25～200μg/ml)可抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,其抑制作用呈现剂量依赖性与时间依赖性。ASI同样可抑制高糖诱导的TGF-β1蛋白表达和p38MAPK信号通路活性。此外ASI可提高肾小管上皮细胞内HGF浓度;HGF可对p38MAPK信号通路产生抑制作用。结论:ASI抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与ASI促进HGF分泌,阻断p38MAPK信号通路,进而抑制细胞凋亡以及TGF-β1的表达有关。ASI可能有助于糖尿病肾病的治疗。

肾损伤分子-1:早期肾小管损伤与修复的生物学标记

急、慢性肾脏病是临床常见病,其长期预后多数取决于肾小管间质损伤的严重程度[1,2]。急性肾小管损伤可以引起急性肾衰竭及一系列临床综合征,导致死亡率和住院率升高,并给患者家庭及社会带来沉重的经济负担。

小反刍兽疫病毒N基因在昆虫细胞中的表达

为了研发小反刍兽疫病毒ELISA检测试剂盒中替代全病毒的抗原物质,参照GenBank公布的小反刍兽疫疫苗株Nigeria75/1的全基因组序列(GenBank登录号:X74443),人工合成表达核蛋白的N基因开放阅读框序列,通过PCR扩增、经引物设计引入的EcoRⅠ和KpnⅠ特异性酶切位点,将N基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,阳性重组质粒命名为pFastBacHTA-PPRV-N,测序结果显示N基因片段长度为1 578bp。将该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-PPRV-N,将该重组穿梭质粒在脂质体介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blot分析表明该蛋白得到表达产物,具有与抗体反应的活性,大小约为61.3ku。

小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用

针对小反刍兽疫病毒核蛋白制备特异性的单克隆抗体,并对其进行生物学特性鉴定和初步应用。以纯化的Bacmid-PPRV-N重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的致敏脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG作用下融合,获得单克隆抗体,并通过染色体技术等方法研究其生物学特性,将其作为竞争单抗,Bacmid-PPRV-N重组蛋白作为检测抗原建立竞争ELISA检测方法。结果表明:经克隆和间接ELISA筛选,获得了2株能稳定分泌抗小反刍兽疫病毒N蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5B11和3H10-3B8。生物学特性鉴定试验表明:5B11和3H10-3B8抗体类型和亚类均为IgG2b;5B11单抗腹水的效价达1∶819 200,3H10-3B8达1∶12 800;血清学试验证明2株单抗均能与Bacmid-PPRV-N重组蛋白抗原结合,具有高度的特异性;相加ELISA试验结果显示,5B11和3H10-3B8 2株单克隆抗体分别识别N蛋白上不同的抗原位点;2株杂交瘤细胞的染色体均为99～104。应用建立的c-ELISA检测方法对222份血清样品进行PPRV抗体的检测,与参考试剂盒比较得到98.20%的符合率。本研究获得了2株能稳定分泌抗PPRV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以单抗5B11作为竞争抗体建立了PPRV的c-ELISA检测方法。

黄芪注射液治疗慢性肾脏病基础上急性肾损伤的临床研究

目的:探讨黄芪注射液治疗慢性肾脏病基础上急性肾损伤的临床疗效,为治疗该症寻找最佳途径。方法:采用单中心、前瞻性、随机对照研究。将符合纳入标准的96例患者,随机分为对照组和黄芪治疗组,对照组予口服包醛氧化淀粉,碳酸氢钠,生理盐水静脉滴注治疗;黄芪治疗组在常规治疗的基础上,生理盐水加黄芪注射液20ml静脉滴注治疗,每日液体量与对照组相同,维持治疗28d。观察治疗前后肾功能、尿蛋白、血常规、血脂、C反应蛋白、尿微量蛋白等变化,对比两组患者临床短期预后。结果:两组患者基础的24h尿蛋白、尿NAG、血清白蛋白、血脂、血红蛋白、eGFR等指标差异无统计学意义;治疗后,黄芪治疗组血清肌酐、血胱抑素C、C反应蛋白、尿白蛋白和尿IgG较对照组显著降低(P<0.01)。且黄芪治疗组治疗后血清肌酐、血胱抑素C、C反应蛋白、尿白蛋白和尿IgG均显著低于治疗前基础值(P<0.01)。而对照组治疗前后各指标差异无统计学意义。结论:在基础治疗上加用黄芪注射液治疗慢性肾脏病基础上急性肾损伤疗效显著,值得临床推广使用。

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因的克隆表达及抗体制备

本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列(NC-002190),设计出主要结构蛋白基因的相应引物,从厦门发病的对虾中,提取DNA,以此为模板,利用PCR扩增目的基因.再将目的基因分别与pGEX-6p1载体和pET-28a载体连接,构建重组表达载体pGEX-IV、pET-IV,重组子经酶切和测序鉴定后导入表达型大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,大小约为62KDa和41KDa,与预测大小一致.将pET-IV表达重组蛋白经纯化,免疫小鼠,W estern免疫印迹反应结果表明其抗体均可与pGEX-IV和pET-IV表达的蛋白发生特异性反应.本研究的结果为对虾IHHNV的快速检测及其免疫提供了研究基础.

黄芪甲苷抑制转化生长因子β1诱导肾小管上皮细胞凋亡的实验研究

目的:探讨黄芪甲苷(AS-IV)抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞凋亡的机制。方法:体外采用TGF-β1(10 ng/m1)刺激人近端小管上皮细胞(HK-2),采用不同浓度的AS-IV(50μg/rl、100μg/ml、200μg/ml)进行干预治疗24h收集细胞。体内建立小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和治疗组(AS-IV组)。采用单侧(右)输尿管结扎建立UUO模型,Sham组仅游离输尿管但不结扎,AS-IV组连续7天给予AS-Ⅳ[20mg/(kg·d)]灌胃,UUO组和Sham给予等剂量溶剂灌胃,术后第14天采集肾脏组织。TUNEL法检测凋亡,CCK法观察细胞活性,Western印迹检测TGF-β1和被切割的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)表达,并观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化情况。结果:AS-Ⅳ改善UUO诱导的肾组织TGF-β1表达及细胞凋亡(P<0.01),抑制TCF-β1诱导的HK-2细胞活性下降及细胞凋亡,200μg/mlAS-Ⅳ作用最明显(P<0.01)。体内体外实验均可见,AS-IV减少caspase 3活化,抑制JNK MAPK磷酸化。结论:AS-IV可抑制TGF-β1的表达及其诱导的肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与JNK MAPK通路有关。

凡纳滨对虾桃拉综合征病毒主要结构蛋白基因的克隆及原核表达

根据GenBank中桃拉病毒的全基因组序列,分别设计扩增该病毒主要结构蛋白基因vp1、vp2、vp3的相应引物,以发病的凡纳滨对虾中提取的总RNA为模板,利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增,分别获得分子量为1 164、849、507bp的基因片段,与预期一致.再将目的基因与pET-28a载体连接,分别构建重组表达载体pET-VP1、pET-VP2和pET-VP3,重组子经酶切和测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测.SDS-PAGE电泳的结果表明,在37℃下,0.5mmol/dm3的IPTG诱导表达的重组蛋白均以包涵体的形式存在,重组蛋白VP1、VP2、VP3的大小分别为48、36、24KDa.本研究的结果为制备桃拉病毒主要结构蛋白的特异性抗体,进而研制桃拉病毒快速检测试剂盒奠定了基础.

尿液肾损伤分子-1和肝型脂肪酸结合蛋白预测梗阻性肾病的长期预后

目的随访梗阻性肾病患者肾功能的变化,评价尿液肾损伤分子-1(uKIM-1)和肝型脂肪酸结合蛋白(uL-FABP)预测肾脏预后的价值。方法入选30例梗阻性肾病患者,前瞻性收集所有患者行经尿道输尿管置管扩张术解除梗阻前、后的尿液标本,采用酶联免疫吸附试验检测uKIM-1、uL-FABP水平。随访1年,评估uKIM-1、uL-FABP在梗阻性肾病肾脏预后判断中的应用价值。结果 uKIM-1(r=0.497)、uL-FABP(r=0.552)与血清肌酐(sCr)均呈正相关(P值均<0.01)。Kaplan-Meier生存曲线分析示,经尿道输尿管置管扩张术后72h,uKIM-1>156.00pg/mg·Cr、uL-FABP>223.60ng/mg·Cr均与不良肾脏预后呈正相关(P值均<0.01)。结论 uL-FABP和uKIM-1在梗阻性肾病肾脏预后的判断中有良好的准确性,可作为梗阻性肾病预后不佳的早期筛查指标。

牛白细胞黏附缺陷病液相基因芯片检测方法的建立

从福建某奶牛场200头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位碱基由A变为G而引起牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)设计特异性野生型和突变型引物,建立液相基因芯片检测方法用于牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的检测,结果检出2头母牛为BLAD携带者,检出率为0.67%,没有发现患病牛。结果证明建立的液相基因芯片检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛BLAD有害基因的新方法。

尿液肾损伤分子1:预测梗阻性肾病肾脏预后的生物学标志物

目的:探讨尿液肾损伤分子1(uKIM-1)、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白分子(uNGAL)在梗阻性肾病所致急性肾损伤(AKI)诊断中的价值,评价其在预测肾脏预后中的价值。方法:收集30例梗阻性肾病患者解除梗阻前后不同时相的尿液标本,应用ELISA方法检测uKIM-1、uNGAL水平,进行分析、比较。随访1年,评估uKIM-1、uNGAL在梗阻性肾病肾脏预后判断中的应用价值。结果:发生AKI的患者uKIM-1和uNGAL水平显著升高,uKIM-1、uNGAL与血清肌酐成正相关,曲线下面积(AUC)分别为0.943和0.900。肾脏预后差的患者术后72h uKIM-1水平显著升高。ROC曲线分析uKIM-1在肾脏预后判断中的AUC为0.912,敏感度85.7%,特异度84.6%。Kaplan-Meier生存曲线分析示出现术后72h尿KIM-1>156.00 pg/(mg·Cr),与不良预后呈明显相关性。结论:uKIM-1、uNGAL对诊断梗阻性肾病所致AKI有较高的准确性,术后72h uKIM-1有助梗阻性肾病肾脏预后的判断。

普伐他汀对慢性肾脏病患者肾功能及尿蛋白作用的临床研究

目的:研究普伐他汀对慢性肾脏病患者(CKD)肾功能及尿蛋白的影响,探讨其在CKD患者中应用的价值。方法:符合入选标准的48例临床诊断CKD的患者,在给与CKD常规治疗的基础上随机分组为普伐他汀组(n=25)和对照组(n=23)。普伐他汀组加用普伐他汀20 mg每晚,维持治疗48周。于治疗前、治疗后4周、12周、24周、36周及48周监测患者血肌酐、血脂、尿蛋白等情况,评估肾小球滤过率。结果:普伐他汀组与对照组在年龄、性别、蛋白尿、肾功能等基线水平的差异无统计学意义。治疗后,普伐他汀组血胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白均较对照组有所下降,36周后组间达到统计学差异(P<0.05)。普伐他汀组24 h尿蛋白在治疗8周后与对照组差异存在统计学意义(P<0.05),48周后普伐他汀组尿蛋白较对照组下降52.3%。两组高敏C反应蛋白均呈下降趋势,普伐他汀组更为显著。两组估算肾小球率过滤(eGFR)的改变差异无统计学意义。结论:普伐他汀可能可有效改善CKD患者的血脂情况,减少蛋白尿,抑制炎症反应,延缓CKD进展。

浅析泰州旅游经济的发展

进入21世纪,中国经济高速发展。旅游经济作出巨大贡献。泰州拥有得天独厚的丰富旅游资源以及天人合一的人文气息,近年来旅游业取得长足的进步。以泰州旅游经济的发展现状,存在的问题为研究对象,应用产业经济学原理,分析泰州旅游经济的发展状况,由此提出泰州旅游经济的发展途径,并对泰州旅游经济的发展前景进行展望。全面分析泰州旅游经济的发展现状,不仅有利于实现泰州旅游产品的品牌化,促进泰州旅游经济产业不断升级优化,而且对其他城市也有一定的影响作用和借鉴价值。

《中国好声音》为什么走红?

浙江卫视近期推出的《中国好声音》得到一片叫好声，节目不仅得到国家广电部表扬，而且预计以5200万元投入将实现4.5亿元的收入。真是“好声音等于好生意”。该档节目是近年来少有的能够真正实现政府满意和群众满意的高度统一电视娱乐节目。从市场学角度看，一档节目好卖、收视率高必然是有市场、符合了受众的需求。电视节目这个产品的特点是对于观众来说“购买（即收看）”的价格是一样的。

对金融创新相关问题的思考

文章阐述了金融创新的基本问题,分析了金融创新的动因、主要内容和金融创新效应,并提出了改善我国金融创新的一些建议和对策.

我国商业银行绩效管理探析

文章阐述了商业银行绩效管理的基本含义,分析了商业银行绩效管理的基本原则,并提出了改善我国商业银行绩效管理现状的一些建议和对策。

荷叶山楂杜仲叶复配提取物对大鼠脂质代谢的协同调控作用

通过与单一植物提取物相比,探究荷叶、山楂、杜仲叶复配提取物协同血脂调节作用及其机制。采用超临界萃取技术得到荷叶、山楂、杜仲叶以及复配提取物,对高脂饲养的Wistar大鼠进行灌胃,并进行肝脏形态学观察和脂质代谢基因表达水平检测。结果表明,与单一提取物组和高脂模型组相比,复配提取物显著降低大鼠体质量(P<0.05),同时显著改善大鼠血脂代谢(P<0.05)。肝脏苏木精-伊红染色结果显示复配干预组肝组织中脂滴空泡显著减少,与高脂模型组和单一提取物组相比,复配干预组大鼠肝脏组织中细胞形态具有更明显改善。分子检测结果显示,与单一提取物相比,复配提取物能够显著提高大鼠肝脏PPARα和CYP7A1表达水平(P<0.05),降低小肠中NPC1L1表达水平(P<0.05)和显著升高ABCG5表达水平(P<0.05)。综上所述,荷叶、山楂、杜仲叶复配提取物可有效调控大鼠脂质代谢水平,其调节机制通过上调PPARα/CYP7A1基因表达,同时在小肠层面降低NPC1L1和升高ABCG5,达到降低血脂的作用,与单一提取物相比,复配具有显著协同调控功能。

吲哚布芬联合氯吡格雷治疗不稳定型心绞痛疗效观察

目的探讨吲哚布芬联合氯吡格雷治疗不稳定型心绞痛的临床疗效。方法对入选的68例患者随机分为观察组和对照组各34例,观察组给予吲哚布芬和氯吡格雷,对照组给予阿司匹林和氯吡格雷,进行4周的观察。对两组治疗前后的心绞痛次数与持续时间、临床疗效、安全性进行比较。结果与治疗前相比心绞痛发作次数和持续时间均有明显下降(P<0.05),两组间临床疗效比较无明显差异(P>0.05),观察组的安全性明显优于对照组。结论吲哚布芬与氯吡格雷联合使用治疗不稳定型心绞痛临床疗效与阿司匹林联用氯吡格雷相当,具有更好的安全性。

高压臭氧大自血灌注治疗脑血管疾病临床研究

目的探讨医用高压臭氧大自血灌注疗法治疗脑血管疾病的效果。方法回顾性分析2009年1月～2010年1月收治的121例急性脑梗塞患者的临床资料,并且随机分成两组,均给予高压臭氧大自血灌注治疗,治疗组61例,对照组60例,治疗2个疗程后观察治疗效果。结果治疗组治疗有效率高于对照组(P>0.05)。结论高压臭氧大自血灌注治疗脑血管疾病疗效显著,应早期应用。

老年患者糖尿病末梢神经病变的临床观察

目的:探讨前列地尔治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效。方法:选取我院2007年6月-2010年6月收治的老年糖尿病神经病变患者66例,随机平均分为2组,即治疗组和观察组,对照组采用654-2,治疗组采用前列地尔注射液,观察对比2组的疗效。结果:治疗4周后,治疗组33例病患中显效19例,有效11例,总有效率为90.9%;对照组33例病患中显效17例,有效8例,总有效率为75.8%。结论:前列地尔注射液治疗糖尿病神经病变具有良好的效果,且耐受性较好,但是大剂量使用时会产生副作用,在临床治疗中应该注意。