厚朴丸对小鼠胃肠活动的影响

目的:观察厚朴丸对小鼠胃排空和小肠推进运动的影响。方法:利用胃复安和阿托品造成小鼠胃排空亢进和胃排空抑制模型,利用新斯的明和肾上腺素造成小鼠小肠推进亢进和小肠推进抑制模型,观察厚朴丸对正常、亢进及抑制状态下小鼠胃肠活动的影响。结果:厚朴丸抑制正常小鼠胃排空和胃复安所致小鼠胃排空加快,能加强阿托品所致小鼠胃排空的抑制作用;对正常小鼠小肠推进和新斯的明所致小鼠小肠推进亢进也有抑制作用,但对肾上腺素所致小鼠小肠推进抑制无明显影响。结论:厚朴丸具有抑制正常和亢进状态的小鼠胃排空和小肠推进的作用,与临床用于止泻相符合。

生态因素对药用植物有效成分的影响

自古以来中医是重视使用“地道药材”的。这是历代经验的总结,也合乎现代生态学的原理。药用植物的有效成分除决定于物种的遗传特性,生态环境对物种亦起重要作用。早在19世纪,达尔文就发现生长在寒冷气候条件下的乌头(Aconitum napellus)无毒,而生长在温暖气候条件下的地中海地区就变为有毒了。本文试把生态因素对药用植物有效成分的影响加以综述。

左金丸和反左金对大鼠胃粘膜保护机制的比较研究

【目的】比较左金丸(m_(黄连):m_(吴茱萸)=6:1)和反左金(m_(黄连):m_(吴茱萸)=1:6)对胃分泌和粘液屏障的影响。【方法】采用Shay氏大鼠幽门结扎模型,大鼠分为生理盐水对照组,左金丸1.4g/kg、2.8g/kg组以及反左金1.4g/kg、2.8g/kg组,分别从十二指肠给药,观察各组大鼠的胃分泌和粘液合成的变化。【结果】1.4g/kg、2.8g/kg左金丸和反左金都能抑制胃液分泌、降低总酸排出量及胃蛋白酶活性,且随着剂量增加药效更明显;左金丸和反左金都能增加胃壁结合粘液含量,对胃液中粘液成分也有增加的趋势。【结论】左金丸和反左金可能通过影响胃分泌和粘液合成来保护胃粘膜。

黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移的影响

目的筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位。方法以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药。IEC-6细胞接种于6孔板并培养24 h,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各受试药,24 h后观察细胞迁移情况;并进一步观察具有促进细胞迁移的有效部位对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致细胞迁移抑制的影响。结果 50 mg.L-1的黄芪糖复合物或白术糖复合物能促进细胞迁移(P<0.01);黄芪、白术的正丁醇萃取物、醇沉上清液、大孔树脂吸附后醇洗脱部位对细胞迁移均无明显影响;2.5 mmol.L-1的DFMO能抑制细胞迁移(P<0.01),加入DFMO同时加入100 mg.L-1黄芪糖复合物或200 mg.L-1白术糖复合物能使细胞迁移恢复至接近正常水平。结论黄芪糖复合物和白术糖复合物能促进IEC-6细胞迁移,还能使DFMO所致的细胞迁移抑制恢复至接近正常水平。

脾阳虚大鼠模型建立及理中汤疗效观察

目的建立适用于中医"证"研究及中药药理学研究的脾阳虚大鼠模型。方法给予大鼠每日游泳、隔日注射利血平、隔日灌胃番泻叶3周,以建立脾阳虚模型,第4周～第6周灌胃温阳健脾方药理中汤,以其治疗结果验证造模效果。结果造模期间模型大鼠出现活动减少、嗜卧、畏冷蜷缩、便溏,毛色枯槁不荣等脾阳虚症状,与正常大鼠相比,体温、体重、摄食量、尿D-木糖排泄率等均有显著性差异,但病理切片未发现明显差异;6周后理中汤组与正常组比较各指标差异无显著性,但自然恢复组与正常组比较差异有显著性。结论利血平合劳倦过度/寒凉泄下法建立的脾阳虚大鼠模型一般症状和生化指标都与脾阳虚患者临床表现基本相符,用此法建立的脾阳虚大鼠模型可为脾阳虚"证"本质研究及相关方药研究提供参考。

白术糖复合物对IEC-6细胞分化及绒毛蛋白表达的影响

目的:观察白术糖复合物对小肠隐窝细胞(IEC-6)细胞分化及分化标志物之一绒毛蛋白(villin)表达的影响。方法:IEC-6细胞分为空白对照组、阳性对照药胃泌素组(250μg/L)、白术糖复合物组(62.5、125、250、500、1000 mg/L),经相应处理后。光镜下观察细胞大体形态;透射电镜下观察细胞超微结构;RT-PCR法检测villin mRNA表达;免疫荧光法检测villin蛋白表达。结果:①给药7 d,光镜下空白对照组细胞处于幼稚状态;胃泌素和白术糖复合物组细胞处于分化状态;②给药20 d,电镜下空白对照组胞核较大,常染色质比例较高,细胞边缘仅见少量微绒毛;胃泌素和白术糖复合物组胞核较小,常/异染色质比例协调,细胞边缘生成大量微绒毛;③给药6 h,空白对照组细胞villin mRNA表达非常少,胃泌素组和白术糖复合物组villin mRNA表达均明显高于空白对照组;④给药7 d,免疫荧光检测发现空白对照组细胞仅有很少villin蛋白表达;胃泌素组表达非常强烈;白术糖复合物组表达稍弱于胃泌素组,但有特异性绒毛蛋白聚集点。结论:白术糖复合物有通过上调IEC-6细胞绒毛蛋白表达及分布而促其分化的作用。

“左金丸”与“反左金”的药效学反应比较研究

目的 :研究左金丸与反左金寒热对药配伍的意义 ,并探索建立大鼠寒热胃黏膜损伤模型。方法 :通过灌胃无水乙醇和冰NaOH建立模型 ,研究比较左金丸和反左金对黏膜损伤的防治作用。结果 :左金丸能明显减轻热模型中大鼠的急性胃黏膜损伤 (P <0 0 0 1) ,而反左金则无此效。反左金在寒模型中则体现出与左金丸相当的药效 (P均 <0 0 0 1)。结论 :左金丸与反左金的不同药效反应不仅体现了证治药动学 ,而且反证了寒热证胃黏膜损伤模型造模的成功。

连黛片抗大鼠胃癌及对p21ras、c-erbB2、Rb和p53蛋白表达的影响

目的:观察连黛片抗胃癌作用及其机理。方法:以 N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱发大鼠胃及十二指肠癌,连黛片灌胃给药,病检及免疫组化法观察药效。结果:连黛片组大鼠癌的发生率为5.6%,低于空白组的38.9%(P<0.05)。病理学计量分析显示,病理损伤程度连黛片组大鼠低于空白组(P<0.05)。空白组8只大鼠胃病变组织中发现p21ras5只和 c-erbB2 3只蛋白呈阳性表达,连黛片组7只大鼠上述蛋白表达均呈阴性。两组所有标本的 Rb 和 p53表达均呈阴性。结论:连黛片具有降低 MNNG诱发胃及十二指肠癌发生的作用,能减轻病理损伤,其作用机理似与抑制 ras 和 c-erbB2过表达有关,但对 Rb 缺失无保护作用,p53可能不是 MNNG 致大鼠胃癌的靶基因。

鸟氨酸脱羧酶表达水平与溃疡性结肠炎病变时相的关系

【目的】观察鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达水平与不同时相溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠病理变化的关系。【方法】Wistar大鼠60只,随机分为正常组(12只),模型1、2、3组(各16只),以90 mg/kg三硝基苯磺酸(TNBS)结肠注射复制UC模型,分别于实验第10、20、30天处死模型1、2、3组大鼠,正常组于第30天处死;分别对各组大鼠结肠进行大体和组织病理学评分,并采用免疫组化法检测结肠ODC的表达。【结果】随着实验周期的延长,模型大鼠结肠病变从急性炎症、组织坏死向慢性炎症、溃疡修复进展,ODC在正常结肠粘膜低表达,在溃疡形成、组织坏死阶段的表达略高于正常组,在溃疡修复、细胞大量增生时ODC表达明显增强,在病灶修复处于稳定阶段时ODC表达有所回落。【结论】不同时相UC模型大鼠结肠ODC表达变化特点与结肠病理变化特点相符。

黄连厚朴丸对实验性胃黏膜损伤、腹泻和呕吐的影响

目的:观察黄连厚朴丸对实验性胃黏膜损伤、腹泻和呕吐的影响。方法:采用盐酸乙醇、氢氧化钠、吲哚美辛致大鼠急性胃黏膜损伤模型、小鼠番泻叶致泻模型和家鸽呕吐模型。结果:黄连厚朴丸不同剂量均有抗盐酸乙醇、氢氧化钠、吲哚美辛致大鼠胃黏膜损伤的作用;促进小鼠小肠水分吸收,明显减少番泻叶致小鼠腹泻的湿粪数;并能明显减少硫酸铜致家鸽呕吐次数。结论:黄连厚朴丸有保护胃黏膜损伤、止泻和止呕作用。

黄连生物碱在小鼠胃粘膜的动态分布

目的：探讨连香胶囊主要成分黄连生物碱的小鼠胃粘膜的动态分布规律。方法：采用薄层色谱法鉴定小鼠给药后胃粘膜中的生物碱成分，并用紫外分光光度法定量测定不同剂量、不同给药时间胃粘膜的生物碱含量。结果：给药后１５ ｍｉｎ，胃粘膜生物碱浓度达到高峰，之后缓慢降低。给药剂量在４００ ｍｇ·ｋｇ－ １ 以下时，胃粘膜吸附药量随给药剂量的增大而增加，两者之间有良好的线性关系（Ｐ＜ ０．０１），当给药剂量大于４００ ｍｇ·ｋｇ－ １ 时，胃粘膜吸附药量不再增加。按一级动力学计算，生物碱在胃粘膜的半衰期Ｔ１／２ 为１９４ ｍｉｎ。结论：黄连生物碱在小鼠胃粘膜吸收迅速，清除则较慢，生物碱的吸附量与给药剂量在５０～４００ ｍｇ·ｋｇ－１ 范围内有良好的正相关性。

加味左金丸抑制大鼠基础及胃泌素诱导泌酸的作用

在大鼠活体胃灌流模型上观察加味左金九的制酸作用。结果表明，该方明显抑制基础泌酸，效价与剂量有关，４ｇ／ｋｇ剂量抑制率８３．６％，优于生理盐水空白组和阳性药雷尼替丁组（Ｐ＜０．０５～０．０１）。此外还抑制五肽胃泌素诱导泌酸，抑制率５３％。提示加味左金丸具有抑制基础和胃泌素诱导泌酸的作用。

紧密连接蛋白occludin和claudin-1在大鼠溃疡性结肠炎的表达

【目的】观察溃疡性结肠炎模型大鼠紧密连接蛋白occludin、claudin-1表达情况及其与结肠病变的关系。【方法】采用三硝基苯磺酸(TNBS)复制大鼠溃疡性结肠炎模型,于实验周期的第10、20、30天分3组(即模型1、2、3组)处死大鼠,另设正常对照组,以大鼠结肠occludin、claudin-1表达(免疫荧光法)、结肠大体和病理评分为主要检测指标。【结果】随着实验周期延长,模型组结肠大体和病理平均评分逐渐降低,occludin表达平均评分先降低后回升,但均低于正常组;occludin表达与其结肠大体和病理评分均呈负相关(P<0.05)。claudin-1表达平均评分呈降低→上升→再降低,但均与正常组比较接近;claudin-1表达与其大体和病理均无显著相关性(P>0.05)。【结论】溃疡性结肠炎大鼠occludin表达降低,且与其结肠病变呈负相关;occludin表达改变比claudin-1更显著。

四君子汤提取物对大鼠胃肠活动的影响

目的 :在胃肠测压模型上观察四君子汤不同剂溶提取物的作用。方法 :用全消化道压力测定系统 ,通过测压导管置于麻醉大鼠胃、十二指肠 ,实时监测胃肠收缩活动 ,计算机记录收缩曲线 ,以曲线下峰面积大小来表示收缩活动的强弱。从十二指肠下端给予试药 ,观察给药前后胃、十二指肠收缩运动的变化情况。结果 :四君子汤提取物 (水煎液、水提醇溶物、总多糖 ,以及正丁醇、乙酸乙酯萃取部位、非正丁醇部位 )对胃、十二指肠收缩活均表现抑制作用。水煎液对胃活动的抑制作用较强 ,而对十二指肠活动的抑制作用则较弱。从乙酸乙酯萃取物进一步分离出的EA 2对大鼠十二指肠活动有明显的兴奋作用 ,但对胃活动无影响。结论

小肠上皮细胞迁移过程中膜电位检测方法的建立及应用

目的用流式细胞仪建立检测小肠上皮细胞(IEC-6)膜电位(membrane potential,Em)的方法,为细胞迁移过程病理生理及药理研究检测膜电位提供参考。方法在划痕法细胞迁移模型上,采用细胞膜电位荧光探针DiBAC4(3)预先负载到IEC-6细胞,应用流式细胞仪测定细胞膜电位。结果①细胞迁移实验显示,外源性多胺(精脒,SPD)可促进细胞迁移,多胺合成抑制剂DFMO可抑制细胞迁移;②当负载到细胞的DiBAC4(3)浓度为1μmol·L-1,孵育时间为10min时,IEC-6细胞在流式细胞仪上呈现最大荧光强度;③空白组细胞平均荧光强度为712.05±19.73,SPD组和DFMO组平均荧光强度分别为406.07±46.54和1030.15±87.63,与空白组比较差异均有显著性,表明SPD组Em增加,DFMO组Em降低。结论建立的流式细胞仪检测细胞膜电位方法,适用于多胺介导的IEC-6细胞迁移过程细胞膜电位的检测,也可为其它单层贴壁细胞在生理和病理状态下检测细胞膜电位变化提供参考。

不同中医证型的吞酸证食管压力测定临床分析

以食管压力测定的方法研究吞酸证的病理变化及中医证型特点。对 4 7例吞酸证进行辨证分型 ,肝胃不和型占 4 8.9% ;脾虚型占 12 .8% ;肝郁脾虚型占 38.3%。结果吞酸证食管动力异常以低动力出现率最高 ;高动力出现率最低 ,且都出现在肝胃不和型 ;动力不协调主要出现在肝郁脾虚型和脾虚型。提示吞酸证的病理机制与食管动力改变有关。食管动力异常以低动力为主 ,个别实证患者有高动力的表现 ,动力不协调主要出现在有脾虚表现的证型 。

左金丸配伍和提取方法对化学成分的影响

采用薄层层析和紫外吸收光谱测定方法,比较黄连与吴茱萸用量配伍比例及提取方法对其化学成分的影响。结果表明黄连与吴茱萸6:1与1:1配伍比例并未引起药物化学性质的变化,在6:1配伍比例中黄连主要有效成分小檗碱的浓度明显增高;传统水提法较醇提法可获得较高浓度的吴茱萸生物碱。

加味左金丸抗胃粘膜损伤作用的实验研究

加味左金丸系左金丸加一味理气止痛中药组成,已往实验证实其有明显抑制胃液分泌、减少胃酸流量和抗溃疡作用。本文进一步报道其抗胃粘膜急性损伤的作用。实验动物取SD系雄性大白鼠,体重170—230g。加味左金丸水提液取饮片水煎,浓缩成含生药1kg/L。

四君子汤提取物对番泻叶致小鼠腹泻的影响

目的 :筛选四君子汤止泻作用的成分。方法 :分别用不同的溶剂 (水、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿 )从四君子汤中提取药物成分 (部位 ) ,灌胃给药 ,以番泻叶浸出液造模 ,观察 4h内小鼠排湿便数。结果 :四君子汤正丁醇提取部位对小鼠番泻叶致泻有抑制作用 ,在 0 3 4g/kg以下表现有一定的量效关系。 结论 :四君子汤中有止泻作用的成分存在于正丁醇提取物中。

厚朴丸方中单味药药效学研究

目的 :观察厚朴丸方中两种单味药厚朴和干姜的止泻、镇痛和利胆作用。方法 :番泻叶致小鼠腹泻模型 ,冰乙酸致小鼠扭体模型 ,大鼠胆汁分泌法。结果 :厚朴和干姜均有止泻和镇痛作用 ,干姜还能增加大鼠胆汁分泌。厚朴起效剂量 0 .0 75 g～ 0 .3 g/kg ,达到 5 0 %抑制率的剂量 0 .3 4g～ 0 .63 g/kg ;干姜起效剂量 0 .15g～ 0 .6g/kg ,达到 5 0 %抑制率的剂量 0 .17g～ 0 .92 g/kg ,促进胆汁分泌给药 3 0～ 180分钟均有明显效果。结论 :与厚朴丸全方的药效结果相似 ,方中的单味药厚朴和干姜CO2 超临界提取物具有明显的止泻。