Axin基因对人肾母细胞瘤细胞生物学特性的影响

目的:研究Axin基因对人肾母细胞瘤细胞G401生物学特性的影响为人肾母细胞瘤的分子病理机制及治疗、预后提供基础研究依据。方法:采用基因工程的方法构建含Axin基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,稳定转染G401细胞,建立高表达的G401细胞系。用MTT实验、克隆形成能力实验、侵袭能力实验三种方法检测Axin基因对G401细胞生物学特性的影响。结果:重组载体pIRES2-EGFP-Axin经PCR和双酶切鉴定结果显示:在约2500bp大小处出现一条特异性条带,转染G401细胞后,经Western blotting结果显示:Axin蛋白在G401细胞中成功表达,同时,转染了pIRES2-EGFP-Axin质粒的G401细胞生长速度显著减慢(P<0.05);G401细胞的克隆形成能力和侵袭力均显著降低(P<0.05)。结论:我们成功构建了重组真核表达载体PIRES2–EGRP–Axin,且通过Western blotting检测筛选获得稳定转染的G401细胞系,最后Axin体外实验对G401细胞生物学特性影响表明:Axin基因与肾母细胞瘤的发生发展有一定关系。

儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中lncRNA GAS5水平变化的临床意义

目的:探究儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)水平变化的临床意义。方法:收集淋巴瘤患儿(81例)及健康儿童(52例)的血液样本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组样本血液中的lncRNA GAS5含量。分析不同临床分期儿童淋巴瘤化疗有效和无效患儿血液中lncRNA GAS5表达及凝血功能在化疗前后的变化差异。淋巴瘤患儿血液中lncRNA GAS5水平与凝血指标的相关性利用皮尔森(Pearson)相关性分析。结果:患儿组lncRNA GAS5水平与凝血指标均显著高于对照组(P<0.01);淋巴瘤Ⅰ-Ⅱ期(n=45)与Ⅲ-Ⅳ期(n=36)患儿的lncRNA GAS5水平以及凝血功能间无统计学差异(P>0.05);化疗有效患儿(n=60)化疗后凝血指标及lncRNA GAS5水平与化疗前相比均显著降低(P<0.01);而化疗无效患儿组凝血指标lncRNA GAS5水平化疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。lncRNA GAS5水平分别与PT(r^(2)=0.792)、APTT(r^(2)=0.776)和FIB含量(r^(2)=0.750)呈正相关(P<0.001)。结论:血液中lncRNA GAS5水平可能是反映淋巴瘤患儿化疗疗效和血栓发生风险的潜在标志物。

儿童横纹肌肉瘤的上皮和神经内分泌标志物

目的:探讨上皮和神经内分泌标志物细胞角蛋白(cytokeratin,CK)、突触素(synaptophysin,Syn)和嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CgA)在儿童横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)中的表达及临床病理意义。方法:回顾性分析56例RMS的临床特征、组织学形态,应用免疫组织化学的方法检测CK,Syn,CgA在各型RMS组织中的表达,结合随访结果进行分析。结果:52例患儿中,男38例,女18例,年龄24 d^9岁(平均3岁11个月)。发生部位:以泌尿生殖道最为常见(16/56,28.6%)。镜下:56例中,诊断胚胎性RMS(epithelioid rhabdomyosarcoma,ERMS)32例、腺泡状RMS(alveolar rhabdomyosarcoma,ARMS)19例、梭形细胞RMS(spindle cell rhabdomyosarcoma,SCRMS)5例。免疫表型:41.1%(23/56)表达广谱CK,43.1%(22/51)表达Syn,22.4%(11/49)表达CgA;其中,Syn和CgA的表达方式呈局灶性,并且有22%的病例同时表达二者;9%的病例同时表达CK和Syn或CgA。结论:各种类型的RMS中均可不同程度地表达上皮和神经内分泌标志物,提示可使用这一组标志物诊断和鉴别诊断RMS与神经内分泌肿瘤及其他小圆形细胞肿瘤。

Axin2在肾母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的分析Axin2在正常肾组织和肾母细胞瘤组织中的表达，探讨Axin2在肾母细胞瘤发病机制中的作用。方法采用免疫组化sP法检测20例肾母细胞瘤组织、10例正常。肾组织中Axin2蛋白的表达情况，对相关数据进行统计学分析。结果Axin2在正常肾组织和。肾母细胞瘤组织中均有阳性表达。在肾母细胞瘤组织中：2—12岁患者瘤组织中Axin2阳性表达率为62．5％（5／8），13～51岁患者瘤组织中Axin2阳性表达率为100％（12／12），二者比较差异有统计学意义（P〈0．05）；Ⅰ-Ⅱ期13例，Axin2阳性表达率为100％（13／13），Ⅲ-Ⅳ期7例，Axin2阳性表达率为57．1％（4／7），二者比较差异有统计学意义（P〈0，05）。结论Axin2在正常肾组织和肾母细胞瘤组织中均有明显表达，其表达与患者的年龄、TNM分期、恶性程度有关，与性别无关。Axin2可能与肾母细胞瘤的发生发展有一定的关系。

儿童脂肪母细胞瘤的超声检查特征与诊断价值

目的探讨儿童脂肪母细胞瘤(LB)的超声检查表现特征,以期提高超声检查对本病的诊断准确率。方法选取我院经手术病理证实的脂肪母细胞瘤,且术前临床及超声检查资料完整的患儿33例,分析其超声检查表现特征。结果33例脂肪母细胞瘤中,局限型25例,弥漫型8例。肿块最常位于四肢,发病率为45.5%,其次是躯干部及颈部。术前超声检查确诊脂肪母细胞瘤19例,超声检查误诊率为42.4%,6例诊断为脂肪瘤,6例仅描述超声声像图特征表现,1例诊断为静脉畸形,1例诊断为淋巴管畸形。局限型内部血流以Adler 0~I级为主,弥漫型以II级为主。结论儿童脂肪母细胞瘤的超声检查表现具有一定特征性,超声检查可以清晰显示肿瘤的血供信息及与周围组织的解剖关系,为临床诊治提供重要信息。

PHOX2B在儿童神经母细胞瘤病理诊断中的价值

目的:观察PHOX2B在儿童神经母细胞瘤(NB)中的表达并探讨其在NB及其他儿童肿瘤中的鉴别诊断价值。方法:病例系列研究,回顾性分析2014年1月至2021年12月西安市儿童医院和空军军医大学第一附属医院病理科诊断的NB、副神经节瘤及其他儿童小圆细胞肿瘤病例资料,免疫组织化学染色观察PHOX2B的表达情况。不同类型肿瘤中PHOX2B阳性率的比较采用χ^(2)检验。NB不同临床病理特征间,PHOX2B表达量比较采用单因素方差分析。NB和副神经节瘤中PHOX2B表达量的比较采用独立样本t检验。结果:NB 104例,其他肿瘤180例,包括9例副神经节瘤和171例其他儿童小圆细胞肿瘤。104例NB均弥漫表达PHOX2B。无节细胞样分化的神经母细胞呈强阳性表达,有节细胞样分化的神经母细胞染色强弱不定,施万细胞呈阴性反应。其中,93例分化差型及未分化型的神经母细胞呈均质弥漫强阳性着色,11例分化型神经母细胞呈异质性阳性染色模式。180例其他肿瘤中,9例副神经节瘤异质性表达PHOX2B,其他小圆细胞肿瘤均为阴性。PHOX2B在NB中的敏感度为100%(104/104),特异度为95.0%(171/180),阳性预测值为92.0%(104/113),阴性预测值为100%(171/171)。结论:当肿瘤以小圆细胞为组织学特征时,PHOX2B对NB及其他形态相似的肿瘤具有良好的鉴别诊断价值。PHOX2B染色模式的不同有助于NB和副神经节瘤的鉴别:均质强阳性染色模式是分化差型和未分化型NB的特点,异质性表达更常见于分化型NB和副神经节瘤。

维生素D受体在胆道闭锁患儿肝内胆管上皮细胞中的表达及意义

目的探讨肝内胆管上皮细胞(IBDECs)中维生素D受体(VDR)在胆道闭锁(BA)中可能发挥的作用及临床意义。方法回顾性分析2015年1月至2019年12月在西安交通大学第二附属医院和西安交通大学附属儿童医院接受肝门空肠吻合术(Kasai术)治疗的38例BA患儿IBDECs中VDR的表达水平, 免疫组织化学检测VDR在BA患儿IBDECs中的蛋白表达水平, 以胆总管囊肿患儿IBDECs中VDR表达水平为对照;用Masson染色法观察肝组织纤维化程度;并分析BA患儿IBDECs中VDR的表达水平与手术时肝纤维化程度及Kasai术后难治性胆管炎发生率和自体肝生存时间之间的相关性。通过聚肌胞苷酸[Poly(I∶C)]模拟dsRNA病毒感染, 体外干预人肝内胆管上皮细胞(HiBECs), 观察其对HiBECs活性和凋亡的影响及对HiBECs中VDR表达水平的影响。采用独立样本t检验比较两组样本之间的差异;采用χ2检验或Fisher′s确切概率法分析VDR与BA患儿临床病理常数的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同VDR表达水平组BA患儿Kasai术后自体肝生存时间的差异。结果共38例BA患儿纳入本研究, 其中23例IBDECs中VDR蛋白水平无显著降低, 15例VDR蛋白水平显著降低。与IBDECs中VDR表达水平无明显降低的BA患儿相比, 显著降低者肝纤维化程度更严重(P<0.001), Kasai术后发生难治性胆管炎的比率更高(P=0.017)。与对照组相比, IBDECs中VDR表达水平显著下降的BA患儿自体肝生存时间更短(P=0.030)。Poly (I∶C)可引起BA患儿HiBECs的凋亡率增加(P<0.000 1)、细胞活性降低(P<0.05);Poly (I∶C)还可引起HiBECs培养基中炎症因子(干扰素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6)分泌增加(P<0.001)。Poly (I∶C)干预可引起BA患儿HiBECs中VDR蛋白的表达水平显著下降(P<0.001)。结论 Poly (I∶C)可引起BA患儿HiBECs损伤及HiBECs中的VDR表达水平下降;IBDECs中VDR表达水平显著下降可能是BA预后不良的标志物。

儿童泌尿系统炎性肌纤维母细胞性肿瘤临床病理学分析

目的探讨儿童泌尿系统炎性肌纤维母细胞性肿瘤的临床病理学特点及鉴别诊断。方法收集4例儿童泌尿系统炎性肌纤维母细胞性肿瘤病例, 观察其临床特征、组织学形态、免疫表型及分子遗传学情况。结果 4例患儿, 男女各2例, 中位年龄6岁。发生于膀胱者2例, 肾脏1例, 输尿管1例。膀胱1例和输尿管1例以纤维组织细胞瘤样形态为主, 肾脏病例大部分呈纤维瘤病样结构, 膀胱的另1例组织学类似结节性筋膜炎。3例间变性淋巴瘤激酶(ALK)呈弥漫胞质阳性;肿瘤细胞表达平滑肌肌动蛋白(SMA, 3/4)和/或结蛋白(2/4)。荧光原位杂交2例检测到ALK基因断裂, 肾脏病例示ROS1断裂。ALK断裂阴性的膀胱病例和肾脏病例分别检测到FN1-ALK和TFG-ROS1融合基因。结论儿童泌尿系统中除了膀胱, 肾脏和输尿管也可发生炎性肌纤维母细胞性肿瘤。诊断需结合患儿临床特点、组织形态、免疫组织化学及分子遗传学特征综合考虑。

白血病病毒整合基因1、NKX2.2在儿童骨外尤文肉瘤病理诊断中的价值

目的探讨白血病病毒整合基因1 (FLI1)、NKX2.2在儿童骨外尤文肉瘤病理诊断及与其他小圆细胞肿瘤鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析西安市儿童医院和空军军医大学西京医院病理科2014年1月至2020年12月诊断的儿童骨外尤文肉瘤及其他小圆细胞肿瘤病例资料, 采用免疫组织化学染色法观察FLI1、NKX2.2的表达情况。结果 1.骨外尤文肉瘤27例;其他小圆细胞肿瘤145例, 包括分化差型及未分化型神经母细胞瘤40例, 横纹肌肉瘤34例, 胚芽为主型肾母细胞瘤30例, 淋巴瘤25例, 恶性横纹肌样瘤10例, 髓系肉瘤2例, 促纤维增生性小圆细胞肿瘤1例, BCOR重排肉瘤1例, CIC重排肉瘤1例, 婴儿黑色素性神经外胚瘤1例。2.FLI1在骨外尤文肉瘤中的敏感性为88.9%(24/27例), 特异性为5.5%(8/145例), 阳性预测值为14.9%(24/161例), 阴性预测值为72.8%(8/11例);NKX2.2在骨外尤文肉瘤中的敏感性为92.6%(25/27例), 特异性为97.9%(142/145例), 阳性预测值为89.3%(25/28例), 阴性预测值为98.6%(142/144例);FLI1和NKX2.2联合检测的敏感性为85.2%, 特异性为97.9%, 阳性预测值为88.5%, 阴性预测值为97.3%。结论 NKX2.2在儿童骨外尤文肉瘤中有较高的敏感性和特异性, 可作为一线抗体用于其诊断和鉴别诊断;FLI1敏感性高, 但特异性差, 可作为一线抗体用于诊断, 但在鉴别诊断时应联合其他抗体以及分子检测, 以免误诊。