中国人群33104例单基因病携带者筛查的多中心研究

目的 通过大规模多中心的多种遗传病携带者筛查,调查中国人群单基因病的流行病学特征以及突变谱,为制定适合中国人群的遗传病预防策略提供依据。方法 本研究在中国的12个临床中心共招募33 104例受检者(16 610例女性),基于高通量测序和多种PCR对223个基因的携带者状态进行检测。结果 197个常染色体基因的合并携带者频率为55.58%,26个X连锁基因的合并携带者频率为1.84%。在16 669例家系中,共检出874对(5.24%)高危夫妇。其中常染色体基因高危夫妇584对(3.50%),X连锁基因高危夫妇306对(1.84%),16对夫妇同时为常染色体基因和X连锁基因高危夫妇。最常检出的常染色体高危基因包括GJB2(常染色体隐性耳聋1A,393对),HBA1/HBA2(α-地中海贫血,36对)和PAH(苯丙酮尿症,14对),SMN1(脊髓性肌萎缩症,14对)。最常检出的X连锁高危基因包括G6PD(G6PD缺乏症,236对),DMD(进行性假肥大性肌营养不良,23对)和FMR1(脆性X综合征,17对)。除外G6PD后的高危夫妇率为3.91%(651/16 669),进一步除外GJB2 c.109G>A位点后,高危夫妇率为1.72%(287/16 669)。理论上严重的单基因病出生缺陷的发病率约为4.35‰(72.5/16 669)。对导致高危夫妇最多的22个基因进行筛查可检出95%以上的高危夫妇,对导致高危夫妇最多的54个基因进行筛查可检出99%以上的高危夫妇。结论 本研究揭示了我国人群中223种单基因病的携带者频率,为中国人群的携带者筛查策略制定和panel设计提供依据。在携带者筛查实践中,针对某些特殊基因或变异位点的遗传咨询可能会面临困难。这些特殊基因或变异需要在检测前告知受检夫妇,并在可能的情况下提供不筛查这些基因或变异的选择。

育龄期人群对扩展性携带者筛查的了解、态度、支付意愿、实施偏好以及影响其接受筛查的关联因素:一项多中心横断面调查研究

背景出生缺陷是全球范围内影响人口健康水平的公共卫生问题,而扩展性携带者筛查(expanded carrier screening,ECS)是预防出生缺陷的有效措施。目的了解我国育龄期人群对扩展性携带者筛查的认知、态度及影响其决策的关联因素。方法本研究为多中心横断面调查研究。2022年8月—2023年9月,通过自制调查问卷对到访全国11家产前诊断机构的育龄期人群进行在线调查,了解调查对象对扩展性携带者筛查的态度、实施偏好、支付意愿,Logistic分析影响其决策的关联因素。结果11家机构共计回收24923份问卷,有效问卷24910份,有效率99.95%。被调查的对象中,54.42%为女性,45.58%为男性,年龄集中在26~35岁区段(19601人,78.69%)。多数(84.75%)调查对象正在备孕(21110人),自身或配偶有不明原因流产史的有6395人(25.67%)。38.99%(9714/24910)的调查对象对扩展性携带者筛查完全不了解,91.36%(22757/24910)的调查对象表示愿意接受扩展性携带者筛查。愿意接受ECS的原因中占比最高的是希望通过ECS了解生育患有遗传病后代的风险,占88.18%(20066/22757);拒绝接受ECS的原因中占比最高的是认为家族中没有遗传病史,无须筛查,占33.91%(730/2153)。60.22%(13704/24910)的调查对象表示希望获知夫妻双方全部的遗传病携带信息。89.64%(20400/24910)的调查对象更偏向高效率的同步筛查模式。80.15%的调查对象认为应在备孕期进行检测,60.37%的调查对象认为应在婚检时进行检测。超过60%的调查对象(15886人,63.77%)表示接受单人1000元以下付费。Logistic回归显示年轻人群,学历越高,夫妇月收入越高,有医疗保险,听说过ECS以及了解ECS的程度越高的育龄人群愿意接受ECS检测(OR>1,P<0.05)。结论育龄人群对扩展性携带者筛查了解有限,部分调查对象对ECS存在误解,但总体态度积极。年轻、高学历、高收入、有医保以及对ECS认知程度好的人群更愿意接受ECS。为了降低隐性遗传病的发生,促使扩展性携带者筛查良性开展,需要对育龄期夫妇进行扩展性携带者筛查和遗传知识科普宣传。

脆性X综合征携带者筛查遗传咨询专家共识

脆性X综合征是遗传性智力障碍和孤独症谱系障碍最常见的单基因病,以X连锁不完全显性方式遗传。大约99%的脆性X综合征为FMR1基因CGG扩增动态突变导致,CGG扩增达到前突变或全突变时,可能出现相应的表型。近年来,脆性X综合征携带者筛查在我国逐渐开展起来,遗传咨询能力相对不足。为了更加规范地进行遗传咨询并提供后续生育指导,单基因病携带者筛查共识专家组、中华医学会医学遗传学分会遗传咨询学组通过多次讨论,对脆性X综合征携带者筛查的适用人群、检测前和检测后的遗传咨询内容形成了共识,并通过德尔菲法形成了推荐意见。

早孕期经腹绒毛活检及细胞遗传学分析在染色体疾病产前诊断中的应用

目的：研究早孕期B超引导下经腹绒毛取材以及绒毛细胞长期培养和染色体制备方法，评价早孕期细胞遗传学分析在产前诊断中的应用价值。方法：回顾分析2001年1月到2005年12月77例早孕期产前细胞遗传学诊断的病例资料。结果：77例平均35．2岁，均为单胎妊娠。取材时间9～13周，平均10．69周，平均取材量为20．6rag，穿刺成功率100％，操作相关的自然流产率为1．3％，因取材不足无法进行产前诊断率为0，母体组织污染率为0。1例培养失败，培养成功率为98．7％，平均培养时间为5～7天，培养过程中细菌污染率为0。发现异常核型5例，限制性胎盘嵌舍体2例。因胎儿受累终止妊娠11例，已分娩正常新生儿27例，继续妊娠者34例。结论：孕9周后行B超引导下经腹绒毛取材是一项安全可行的早孕期介入性产前诊断方法。绒毛细胞长期培养法和染色体制备方法简单、技术稳定、结果可靠，可用于胎儿染色体疾病的产前诊断。

羊水间期细胞荧光原位杂交检测残余风险评估:6125例产前细胞遗传学诊断回顾性分析

目的评估中孕期羊水间期细胞荧光原位杂交(FISH)检测之后漏诊非13、18、21、X、Y染色体的非整倍体异常核型的残余风险,从产前咨询的角度来评价间期FISH检测在产前诊断中的作用。方法对6 125例中孕期羊水传统核型分析的结果进行回顾性分析,假设这些病例均进行间期FISH检测,计算在三大产前诊断指征(孕妇高龄、孕母血清学筛查18-三体或21-三体高风险、妊娠23周前超声发现胎儿有结构异常)情况下间期FISH检测的检出率以及残余风险。结果从2011年1月至2014年9月共有6 125例单胎孕妇行中孕期羊水细胞核型分析,共检出207例(3.38%)异常核型。有161例(77.8%)为涉及13、18、21、X、Y染色体非整倍体的异常核型(包括嵌合体),其间期FISH检测结果为阳性。有46例(22.2%)异常结果是非13、18、21、X、Y染色体的非整倍体,其中包括平衡性结构重排31例(67.4%)、非平衡性结构重排14例(30.4%)、其他染色体非整倍体1例(2.2%)。在这46例异常核型中,有6例涉及21号染色体和1例涉及13号染色体的不平衡性重排的间期FISH检测结果为阳性,其余39例间期FISH检测结果均为阴性。计算间期FISH检测的检出率为81.2%(168/207),间期FISH检测的残余风险为0.65%(39/5957)。结论间期FISH检测是核型分析的有效补充,但不能取代核型,单纯行间期FISH检测进行产前诊断会漏诊约18.8%的染色体异常。在产前遗传咨询时应向病人解释间期FISH的检出率和残余风险,了解间期FISH的优点和局限性,帮助其选择合适的产前诊断手段。

超声检查胎儿脑室增宽的临床意义及预后

脑室增宽（ventriculomegaly，VM）是一个描述性的术语，指脑脊液过多的积聚于脑室系统内，致使脑室系统扩张，其中侧脑室增宽最为常见。它和脑积水不同，后者仅用于脑室增宽且伴有胎儿脑室内压增高的情况，通常会伴有胎儿头围的异常增大。

新生21号染色体部分重复致胎儿唐氏综合征的产前诊断一例并文献复习

目的报道罕见的新生21号染色体部分重复致胎儿唐氏综合征的产前诊断一例,并对相关文献进行复习。临床资料患者29岁,G_1P_0,孕15周超声发现胎儿颈后皱褶厚0.6 cm,孕16周母血清学筛查提示胎儿罹患唐氏综合征的风险为1/110,孕18周行羊膜腔穿刺术。采用DSCR2:21q22探针的羊水间期细胞荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析发现在细胞核中出现3个杂交信号,但羊水细胞染色体核型分析结果为46,XX,21p+。结果孕妇夫妇外周血染色体核型分析未见异常,进一步行羊水中期分裂相FISH分析发现在一条21号染色体的短臂上出现了一个杂交信号。提取羊水细胞DNA行基于微阵列的比较基因组杂交(array-based comparative genomic hybridization,aCGH)分析发现胎儿的21号染色体出现部分重复和部分缺失,包括21q22.12-21q22.3区域11.74 Mb的重复、21q21.1区域1.33 Mb的重复、21q21.3区域1.31 Mb的重复、21q21.1-21q21.2区域1.68 Mb的缺失。孕妇及其家属选择终止妊娠。于孕26周行利凡诺引产,分娩一死女婴,尸检观察女婴外观符合唐氏综合征的临床特征。结论 FISH和aCGH技术是产前诊断新生染色体小片段改变的有效方法。

产前遗传学诊断胎儿重度侧脑室增宽1例及文献复习

目的报道1例胎儿重度侧脑室增宽的产前遗传学诊断病例,并对相关文献进行复习。方法患者30岁,妊娠32周超声检查发现胎儿重度侧脑室增宽,左侧宽17 mm,右侧宽19 mm,未发现其他异常。之前的产前检查均未发现异常。行脐静脉穿刺术,取脐血细胞行染色体核型分析及单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP array)分析。结果脐血细胞染色体核型分析未见异常。SNP array分析结果为arr9q31.3(113,431,222-113,552,613)x3,14q11.2(20,512,609-22,641,623)x1-2,提示在9q31.3位点存在121 kb的重复,约28%的细胞在14q11.2区段有2.129 Mb片段的缺失,胎儿为该片段缺失的嵌合体。进一步行间期细胞荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析证实在13%的细胞中存在该位点的缺失,从而验证了SNP array结果的准确性。向孕妇及其家属进行咨询之后,孕妇及家属选择终止妊娠,于妊娠34周行利凡诺引产,分娩一死女婴,孕妇及家属拒绝尸检。结论超声检查发现胎儿孤立性重度侧脑室增宽,应进行产前遗传学诊断。SNP array分析技术是产前诊断新生染色体小片段改变的有效方法,FISH是对嵌合体进行验证的有效手段。

无创产前检测临床应用相关指南解读

基于游离DNA(cell free DNA,cfDNA)的产前筛查,又称无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)或无创产前筛查(non-invasive prenatal screening,NIPS).1997年,香港中文大学Lo等[1]首次报道在母血中含有cfDNA片段,而在临床上采用cfDNA对胎儿染色体非整倍体进行筛查则始于2011年.2011年之后,基于大规模平行测序(massively parallel sequencing,MPS)的NIPT被迅速应用于产前筛查胎儿21、18和13三体综合征,自2013年以来已快速整合进入产前检查体系.为进一步规范其应用,国内外相关专业团体纷纷提出针对其临床应用的行业指南或专家共识.根据进一步的大样本临床研究数据分析及临床跟踪随访验证,国内外各专业团体也在不断地对NIPT临床应用指南或专家共识进行更新与修订.现结合NIPT在临床应用中遇到的常见问题,结合国内外的指南或专家共识进行阐述.

胎儿NT增厚的临床意义和基于基因组学的遗传诊断路径分析

早孕期超声测量胎儿颈后透明层(nuchal translucency,NT)厚度已广泛用于胎儿唐氏综合征的产前筛查,但NT增厚不仅仅是胎儿唐氏综合征的标记物,除了与胎儿染色体异常相关以外,还和胎儿的染色体微缺失/微重复综合征、胎儿结构异常、某些遗传综合征、胎死宫内等不良妊娠结局密切相关。对于NT增厚的病例,在排除胎儿染色体异常之后,如何建立恰当的诊断流程,给孕妇夫妇提供现实的和准确的关于胎儿预后方面的信息,则是目前母胎医学领域中最具挑战性的问题之一。

唐氏综合征产前筛查指标中位数倍数值中位数监测和质量评价方法的应用分析

目的：采用产前筛查指标中位数倍数值（MoM）中位数（即mMoM）评价质控体系，对各指标mMoM进行监测和必要的修正，以使唐氏综合征产前筛查系统保持在良好的检出率和假阳性率水平。方法：选取北京协和医院产前筛查实验室2009年7月1日至2013年2月28日完成的所有符合入组要求的孕中期三联筛查数据共26415例，在预设监测及修正条件的基础上进行了甲胎蛋白（AFP）、游离人绒毛膜促性腺激素B亚基（F-β-HCG）和非结合雌三醇（uE3）的mMoM时间轴回顾性纵向分析。将上述指标在纵向监测的基础上根据预设条件进行了必要的中位数修正，重新计算分析所有病例的风险评估和筛查整体效率。结果：经过分析和调整，所有指标的mMoM都实现了O．95～1．05的长期稳定，唐氏综合征假阳性率下降1％（5．9％VS4．9％），唐氏综合征检出率（75％）虽然保持不变，但确诊阳性病例呈现整体风险值增高的趋势。结论：基于筛查指标mMoM值的评价质控体系可以灵敏地发现偶发的偏倚因素，并结合预设规则进行中位数的修正，较好地消除了系统误差的持续作用。降低假阳性率、确保检出率水平的稳定，是唐氏综合征产前筛查工作一个有效的质控技术体系。

308例高危妊娠产前诊断CMA技术发现不明确拷贝数变异的结果分析

目的探讨染色体微阵列分析(CMA)在高危妊娠产前诊断中的应用,观察其中临床意义不明的染色体拷贝数变异(VOUS)结果构成及相关特性,分析将该技术广泛应用于产前染色体病诊断临床检测的可行性。方法选择2014年1月1日至2017年6月1日期间于北京协和医院就诊并接受产前诊断,同时进行CMA及核型分析检测的孕妇308例,对其CMA检测的结果进行分类分析并与核型分析相比较,分析其中不明确意义结果的构成以及相关特性。结果所有入组病例中88.0%为各种胎儿结构异常、软指标异常、胎儿生长受限及胎儿水肿。全基因组检测未发现明确染色体拷贝数改变(CNV)或明确多态性改变的病例217例,占70.5%;发现明确致病性染色体数目或片段异常共44例,占14.3%。其中发现染色体非整倍体异常21例,性染色体数目异常6例,染色体致病性CNV结果17例。此外发现不明意义的CNV诊断结果47例,占总病例数的15.3%。其中致病性判读为偏良性的23例,临床意义不明为21例,含符合报告标准的杂合性缺失(LOH)1例,偏致病性的3例。进一步分析各种VOUS病例的片段大小分布及判读依据类型。与核型分析的异常阳性率10.7%比较,全基因染色体芯片诊断明确致病性的染色体异常阳性率为14.2%,诊断阳性率提升3.5%。结论全基因组染色体芯片对于超声发现胎儿结构异常的遗传诊断能力较核型分析有较大的提升,但同时也会有VOUS病例增加遗传咨询的难度。目前国内产前诊断VOUS结果的比例较高,这与本地化数据库不完善,缺乏国内具体的芯片结果判读标准等有关。

胎儿心脏横纹肌瘤的产前超声诊断与系统化评估

目的探讨胎儿心脏横纹肌瘤的产前超声诊断及遗传咨询要点。方法回顾性总结2006年8月至2017年1月在北京协和医院经超声诊断的4例胎儿心脏横纹肌瘤病例的系统超声表现,并结合家族史、其他影像学检查、遗传学及病理检查结果进行分析。结果所有4例胎儿在超声检查时均显示心脏占位性病变,2例为单发实性占位,2例为多发实性占位。2例临床诊断结节性硬化症,其中1例合并肾脏囊性病变,MRI检查无异常发现;1例合并颅内结节并被MRI证实。2例未发现其他系统病变。1例胎儿的直系亲属罹患结节性硬化症,其余3例无明确家族史。经产前咨询后全部病例均选择引产,3例行病理检查并显示典型的心脏横纹肌瘤,1例镜下见多发肾囊肿,1例见多发皮肤结节。结论胎儿心脏横纹肌瘤具有典型的超声表现,在可疑病例中进行有针对性的多系统筛查和家族史搜集,有助于早期发现结节性硬化症的相关表现,条件许可时应行相关遗传学检查以获得明确诊断。

高龄孕妇胎儿唐氏综合征中孕期产前筛查和产前诊断的卫生经济学分析

目的对高龄孕妇胎儿唐氏综合征产前筛查和产前诊断策略行前瞻性卫生经济学分析。方法选择2008年1月到2010年12月期间在本院就诊的、孕周为1 5～20周、自然单胎妊娠的高龄孕妇5404例,对其进行遗传咨询之后由其自行选择行唐氏综合征的母血清学筛查(筛查组)或羊膜腔穿刺术、羊水细胞培养及染色体核型分析(羊穿组)。计算各组胎儿唐氏综合征的发生率,并对两组中胎儿唐氏综合征的检出效率及卫生经济学效益进行对比。结果筛查组共2,107例,以1/270为阳性切割值,共检出胎儿唐氏综合征18例,筛查的检出率、假阳性率、假阴性率以及阳性预测值分别为100%、19.63%、0和4.20%,该组人群中胎儿唐氏综合征的发生率为8.54‰(18/2,107);羊穿组胎儿唐氏综合征的发生率为7.58‰(25/3,297)。采用chi-square检测分析两组之间胎儿唐氏综合征的发生率没有统计学差异(P=0.928)。对两组的费用进行计算,与高龄孕妇全部行羊膜腔穿刺术的方案对比,采用血清学筛查阳性后再行羊膜腔穿刺术的方案可以节省44.9%的总费用。结论在检出高龄孕妇的胎儿唐氏综合征方面,产前筛查的有效性和羊穿组是一致的,但采用血清学筛查阳性后再行羊膜腔穿刺术的方案的效价比高于全部行羊膜腔穿刺术的方案,这对于节省我国十分有限的卫生资源具有重要的现实意义。

限制性胎盘嵌合体对产前诊断的影响

目的探讨限制性胎盘嵌合体(CPM)对产前诊断的影响及产前咨询中存在的问题。方法回顾性分析我院2013年早孕期绒毛活检发现的2例CPM患者的临床资料,结合国内外近年来关于CPM的研究报道,探讨CPM对产前诊断的影响处置方法。结果 2013年,我院行绒毛活检的211例妊娠妇女中,发现2例CPM,发生率为0.9%。2例CPM患者均妊娠至足月,其中1例发生胎儿宫内发育受限,此例患者分娩后经胎盘多点染色体分析,胎盘仍为嵌合状态。2例患者分别因剖宫产史、胎儿宫内窘迫行足月剖宫产,新生儿预后良好。结论 CPM的产前诊断并不困难,但需要良好地咨询及随访,出生后应对胎盘进行细胞遗传学检查。

植入前遗传学研究

人类体内或体外受精(IVF)后植入失败的主要原因是高发的染色体异常,随着体外受精和显微操作技术以及分子生物学和遗传学技术的发展,对人类配子和植入前胚胎的染色体异常的研究越来越深入。现将近年来这方面的资料进行总结。