河南省人源和食源多重耐药致泻大肠埃希氏菌耐药特征与基因组分析

目的了解河南省临床和食品来源中多重耐药的致泻大肠埃希氏菌的耐药性和基因组特征.方法对2017-2022年河南省分离的101株多重耐药致泻大肠埃希氏菌,通过微量肉汤稀释法进行抗生素敏感性实验.基于全基因组测序结果分析其耐药基因、多位点序列分型、质粒类型并基于核心基因组单核苷酸多态性位点(cgSNPs)构建系统发育树.结果101株多重耐药的致泻大肠埃希氏菌对氨苄西林、四环素、萘啶酸的耐药率最高,分别为87.1%、79.2%、64.4%;对头孢噻肟的耐药率为38.6%.全基因组测序数据表明:101株分离株可被分为60种ST型,其中ST10、ST1491、ST38是优势型别;101株分离株共预测出23种质粒类型,其中携带率最高的类型为IncFIB.分离株携带喹诺酮类、氨基糖苷类、βG内酰胺酶类、四环素类等多种耐药基因,其中超广谱βG内酰胺酶基因bla_(CTX-M-14)和bla_(CTX-M-55)上下游遗传环境中均存在插入序列(IS26、IS903B、ISECP1).结论河南省人源和食源多重耐药的致泻大肠埃希氏菌具有较高的遗传多样性,整体耐药水平较高,其bla_(CTX-M)基因的传播可能与插入序列(IS)有关.

2015—2016年河南省食源性疾病沙门氏菌监测情况分析

目的研究2015和2016年河南省食源性疾病患者中沙门氏菌的感染情况、血清型分布、病因性食品来源和耐药趋势。方法从河南省15家哨点医院中,采集符合病例定义的病人5 720份暴露食品信息,从粪便中分离到221株沙门氏菌,进行了血清分型、耐药性研究和相关的病因性食品溯源等研究,并对结果进行了统计分析。结果 221株沙门氏菌血清学以肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和汤卜逊沙门氏菌为主导菌型,且广泛分布于46个血清型,菌型呈现多态性分布;可疑病因性食品的种类以乳与乳制品和肉与肉制品为主;在11种抗生素的药物敏感试验中,沙门氏菌对头孢西丁、头孢噻圬、氯霉素和甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑4种抗生素的敏感率下降(P<0.05),对头孢他啶、氨苄西林、四环素和氨苄西林/舒巴坦的敏感率下降(P<0.01),只有对环丙沙星、萘啶酸和庆大霉素的敏感率下降无统计学意义(P>0.05)。结论相关部门应加强对肉与肉制品的市场监管力度,加大对抗生素药物使用的管理力度,加强沙门氏菌疾病和耐药性的主动监测,减少食源性疾病的发生。

小麦贮藏蛋白的液相色谱分析研究

小麦贮藏蛋白包括醇溶蛋白和麦谷蛋白,这两种蛋白质主要决定了小麦的面筋品质。高效液相色谱法是目前分离和量化贮藏蛋白最有效的方法。建立了麦醇溶蛋白、麦谷蛋白的反相色谱分析方法,研究了柱温、流速、进样体积、洗脱梯度等对小麦贮藏蛋白分离效果的影响,确立了最佳分离条件,为小麦贮藏蛋白的进一步研究提供了条件,也可用于小麦品种的鉴别。

小米馒头营养特性研究

用一定比例的小米粉与面粉混合制成小米馒头,对不同小米粉添加量的小米馒头进行品质评价并测定小米馒头中类胡萝卜素、多酚等营养物质的含量及其抗氧化性。研究结果表明：馒头中小米粉最佳添加量为15%-20%,并且随着小米粉含量增加,小米馒头营养物质及抗氧化性增强。

2022年河南省不同来源耐喹诺酮沙门菌的分子分型及溯源研究

目的 研究2022年河南省耐喹诺酮沙门菌在腹泻患者、食品和环境中的分布以及传播路径,了解该地区耐喹诺酮类抗生素沙门菌的分子流行病学特征。方法 采用微量肉汤稀释法测定抗生素敏感性,对107株分离自临床腹泻患者及303株来源于食品和环境的耐喹诺酮沙门菌进行多位点序列分型,并构建最小生成树。结果 221株耐环丙沙星沙门菌分属27个ST型,ST45(59株)和ST198(56株)为优势ST型,共115株,占耐环丙沙星沙门菌菌株总数的52.04%。325株耐萘啶酸沙门菌分属34个ST型,ST11(152株)和ST198(56株)为优势ST型,共208株,占耐萘啶酸沙门菌菌株总数的64.00%。耐环丙沙星沙门菌7个ST型和耐萘啶酸沙门菌8个ST型,在腹泻患者、食品和环境中均有分布。结论 河南省耐喹诺酮沙门菌存在腹泻患者、食品和环境交叉污染现象,有从食品和环境向人类传播的风险。

夏季谨防食源性及婴儿肉毒中毒

4个月的奶粉喂养儿囡囡圆滚滚、肉乎乎,别提多可爱了,可是随着夏天的到来,囡囡妈妈却时常陷入苦恼。原来囡囡非常抗拒喝水,每次喂水都像喂药一样。怎样让囡囡喜欢上喝水呢?奶奶提议喂蜂蜜水,理由是蜂蜜营养丰富,去火润肠。但婴儿能喝蜂蜜水吗?拿不定主意的囡囡妈妈咨询了我们。我们建议她不要这么做,以免婴儿肉毒中毒。

2018年河南省市售婴幼儿谷类辅助食品微生物污染状况调查

目的了解河南省市售婴幼儿谷类辅助食品卫生状况,为食品安全风险评估及标准制定提供基础数据。方法参照《2018年国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》提供方法进行采样和检测,在河南省共采集婴幼儿谷类辅助食品103份,对其进行肠杆菌科、蜡样芽胞杆菌、单核细胞增生李斯特菌和克罗诺杆菌属污染状况检测,对检测中可疑菌落采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行鉴定。结果 103份样品中肠杆菌科和克罗诺杆菌属检出率分别为0.97%(1/103)和5.83%(6/103),均在婴幼儿即食谷物辅助食品中检出,产地集中在江西省和福建省,采样地点类型均为便利店/零售店,6份克罗诺杆菌属阳性样品中有5份样品标识为≥辅食添加初期。9份样品蜡样芽胞杆菌定量结果在10~10~3 CFU/g范围,检出率为8.74%(9/103),样品产地包括广东省、江西省、福建省、黑龙江省和四川省,采样地点类型均为超市和便利店/零售店,其中有8份是婴幼儿即食谷物辅助食品。结论河南省市售婴幼儿谷类辅助食品尤其是婴幼儿即食谷物辅助食品受到克罗诺杆菌属和蜡样芽胞杆菌污染,且这些阳性产品中大多数标识的适用年龄为≥辅食添加初期,由此带来的食品安全风险较大,建议婴幼儿即食谷物辅助食品添加克罗诺杆菌属和蜡样芽胞杆菌微生物限量,降低由此带来的食品安全隐患。

预包装熟肉制品生产过程微生物污染状况监测及分子溯源分析

目的了解河南省预包装熟肉制品生产加工过程中微生物污染状况,分析污染高风险环节及关键控制点,降低食源性疾病的发生概率。方法样品的采集及检测参照《国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》进行,阳性菌株的血清学分型及分子分型分析参照《国家食源性疾病监测工作手册》进行。结果共监测样品168份,其中环境样品104份(生区4份,熟区100份),检出单核细胞增生李斯特菌8株;熟肉相关样品60份,检出单核细胞增生李斯特菌24株,沙门菌2株。2株沙门菌血清型均为肠炎沙门菌,经XbaⅠ酶切与脉冲场凝胶电泳后获得2种带型,相似度为92.9%。32株单核细胞增生李斯特菌分属6个血清型(1/2a、1/2b、1/2c、4ab、3a和4b),1/2a为优势血清型;经AscⅠ酶切与脉冲场凝胶电泳后获得17种带型,每种带型包括1~10株菌,相似度为55.8%~100.0%。监测生产用水4份,菌落总数和大肠菌群均<1 CFU/mL,均符合国家饮用水标准要求。结论生区环境与食品及食品与食品之间存在交叉污染现象,产品经蒸煮环节后微生物污染可得到有效控制,建议进一步严格产品分区管理,加强地面和操作人员的消毒处理,规定合理的生产加工及保存期限。

河南省市售婴幼儿配方食品中克罗诺杆菌的分子分型及系统发育研究

目的了解河南省市售婴幼儿配方食品中克罗诺杆菌污染情况、分子分型特征及耐药情况,分析不同菌株间的系统发育进化关系。方法采集婴幼儿配方食品227份,按照GB 4789.40—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》方法进行克罗诺杆菌的分离鉴定,并用微量肉汤稀释法和脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离株进行药敏实验和溯源分析,采用16S rRNA和多位点序列分型(MLST)方法进行种属鉴定和系统发育进化分析。结果227份婴幼儿配方食品中检出13株克罗诺杆菌,分别属于阪崎克罗诺杆菌、苏黎世克罗诺杆菌和都柏林克罗诺杆菌。13株克罗诺杆菌药敏结果显示头孢唑啉耐药率达到84.6%(11/13),PFGE分型得到7个带型,MLST共分为6个ST型,其中ST1为优势型别,相同PFGE型的菌株也有相同的MLST型。结论河南省市售婴幼儿配方食品中克罗诺杆菌污染以阪崎克罗诺杆菌为主,种属和基因型具有多样性,系统进化树分析结果显示MLST能够更好地说明种水平之间的亲缘关系。

一起肠炎沙门菌引起食源性疾病暴发的溯源性分析

目的对一起食源性疾病暴发进行病原菌鉴定和溯源性分析,查明事件暴发原因。方法将采集到的食物样本、厨具涂抹样本和粪便标本进行病原菌分离培养,用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)对分离菌株鉴定并进行血清学分型,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行分子分型和同源性分析。同时对分离菌株进行抗生素敏感性实验。结果共检出10株肠炎沙门菌,其中5份来自食物样本,3份来自厨具涂抹样本,2份来自于患者粪便。所有菌株经过聚类分析同源性为100%,且耐药谱相同。结论本次食源性疾病暴发事件是由于肠炎沙门菌引起的。与VITEK 2相比,MALDI-TOFMS检测速度更快,而且可以直接鉴定显色培养基上的沙门菌分离株。从溯源结果显示肠炎沙门菌来自同一克隆群。

河南省市售调理肉制品中食源性致病菌污染状况调查分析

目的了解河南省市售调理肉制品中食源性致病菌污染状况,发现食品安全隐患,为预防控制食源性致病菌引起的疾病提供科学依据。方法在河南省5个市级监测点采集市售调理肉制品,分别进行单核细胞增生李斯特菌、沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌、空肠弯曲菌等4项食源性致病菌的检测,并对检出的沙门菌进行血清学分型,小肠结肠炎耶尔森菌进行毒力基因检测。结果100份调理肉制品的致病菌总检出率为48.00%。共检出食源性致病菌69株,其中单核细胞增生李斯特菌38株,占比最高(55.07%)。14株小肠结肠炎耶尔森菌均携带耐热肠毒素B基因(ystB)。检出的17株沙门菌分属3个血清型,优势血清型为肠炎沙门菌。结论河南省市售调理肉制品中有一定程度的食源性致病菌污染,存在食源性疾病发生的潜在风险。相关部门应进一步加强此类食品的监测与监管力度。

黑米馒头特性的研究

黑米含有丰富的营养物质和矿物质。将黑米粉添加到馒头中做成杂粮馒头,对其进行感官评价和质构检测,得出馒头中最佳的黑米粉添加量为15%~20%。测定黑米馒头中花色苷含量,结果表明：随着黑米粉添加量的增加,黑米馒头中花色苷含量逐渐增加,当黑米粉添加量为25%时,100 g黑米馒头花色苷含量为83 mg。测定黑米馒头的抗氧化性,研究结果表明：黑米馒头具有很好的抗氧化性,并且随着黑米含量的增加,抗氧化性也不断增强,当黑米粉添加量为25%时,黑米馒头DPPH自由基清除率可达76%。

2015-2020年河南省患者来源单核细胞增生李斯特菌流行特征分析

目的分析河南省患者来源单核细胞增生李斯特菌的血清学和分子分型,了解河南省李斯特菌病流行情况,构建患者分离株分子溯源数据库,为李斯特菌病溯源提供实验室依据。方法参照国家食源性疾病监测工作手册,2015年1月至2020年7月河南省单核细胞增生李斯特菌感染病例专项监测从16家哨点医院监测李斯特菌病阳性病例71例,采集阳性病例标本80份进行检测,对获得的阳性菌株71株进行分子分型,参照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准单核细胞增生李斯特菌血清分型方法(SN/T 2521-2010)和单核细胞增生李斯特菌诊断血清使用说明书对获得的80株单核细胞增生李斯特菌进行血清学分型,参照国家食源性疾病分子溯源网络使用手册进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PFGE)聚类分析。结果共监测到71例李斯特菌病阳性病例,其中38例为围产期病例,33例为非围产期病例。80份李斯特菌病阳性病例标本58.75%(47/80)来自围产期病例,20.00%(16/80)来自非围产期有基础病病例;来自于非围产期年龄>1个月~≤5岁、>5~≤60岁和>60岁人群分别为7.50%(6/80)、12.50%(10/80)和1.25%(1/80)。标本类型分为5类,73.75%(59/80)为血液,15.00%(12/80)为脑脊液,粪便、宫腔拭子、痰液各占3.75%(3/80)。对获得的80株单核细胞增生李斯特菌进行血清学分型,分属3个血清型,1/2b型、1/2a型和4b型分别占61.25%(49/80)、35.00%(28/80)和3.75%(3/80);71株单核细胞增生李斯特菌经AscⅠ酶切,获得58种带型,每种带型包括1~4株菌株,相似度为60.8%~100%。GX6A16HA0005、GX6A16HA0011、GX6A16HA0030、GX6A16HA0023、GX6A16HA0029和GX6A16HA0054为优势带型,依次包括4、4、4、3、2和2株菌;GX6A16HA0005带型包括的4株菌分离自2016、2018和2020年,其中2016年(1株)和2018年(1株)均来自濮阳市;GX6A16HA0011带型包括的4株分离自2016、2018和2020年,其中2020年2株均来自洛阳市;GX6A16HA0030带型包括的4株均分离自2018年,分别来自洛阳市、商丘市和郑州市;GX6A16HA0023带型包括的3株菌分离自2017和2018年,其中2017年中1株和2018年1株均来自洛阳市;GX6A16HA0029带型包括的2株菌均分离自2018年,分别来自开封市和濮阳市;GX6A16HA0054带型包括的2株菌均分离自2020年,分别来自平顶山市和安阳市;4株不同血清型菌株PFGE带型相同。结论河南省李斯特菌病病例主要集中在围产期、老幼及免疫力低下人群,感染类型主要是侵袭性感染;流行菌株血清型为1/2a、1/2b和4b,菌株PFGE分型结果呈现多样化,出现跨年度或者同年度不同地区、同年度同地区不同时间带型一致现象;应将多种分型技术联合应用在溯源分析中。

不同烹调方法对食材中矿物质保留因子的影响

研究不同食材在不同的烹调方式下对食材中矿物质元素含量的影响。将食材分别进行浸泡、不同切洗顺序、不同煮制时间、不同炒制温度下的处理,分别记录烹调前后质量,测定烹调前后食材中矿物质元素的含量,并计算相应的保留因子。结果表明:经过不同的处理以及不同的烹调方式,食材中的矿物质元素均有不同程度的损失。浸泡、煮会使食材中矿物质元素损失较多,炒的烹调方式矿物质元素损失相对较少。

河南省市售鸡肉中抗生素残留及大肠埃希菌耐药性研究

目的了解河南省市场零售环节冰/鲜鸡肉中抗生素残留以及大肠埃希菌抗生素敏感性,为食品风险评估提供数据支持。方法2020年5—11月对河南省零售环节采集的60份冰/鲜鸡肉采用高效液相色谱质谱串联法进行抗生素残留试验;鸡肉中分离的300株大肠埃希菌采用微量肉汤稀释法进行抗生素敏感性试验。结果抗生素残留均未检出。300株大肠埃希菌对亚胺培南(IPM)全部敏感,其余14种抗生素耐药率范围为8%~86.33%,耐药率≥50%的抗生素有:四环素(TET)86.33%(259/300),氨苄西林(AMP)69.00%(207/300),氯霉素(CHL)63.33%(190/300),头孢唑啉(CFZ)50.67%(152/300),萘啶酸(NAL)50.00%(150/300)。多重耐药菌(MDRO)检出率高达81.75%(224/274)。地区间耐药率存在显著性差异(χ^(2)=31.331,P<0.05)。耐药菌谱型分散,以四环素(TET)耐药谱占比最高,为8.39%(23/274)。结论2020年河南省市场零售环节鸡肉中抗生素残留符合相关法规。鸡肉源大肠埃希菌呈现高度耐药,MDRO现象普遍,需加强规范禽类饲养环节抗生素的合理使用。

烹饪对蔬菜中营养物质的影响

蔬菜在烹饪过程中其营养物质均会有所变化。主要研究了不同烹饪方式对蔬菜中维生素类以及总黄酮、总酚含量的影响。研究结果表明:烹饪过程中,蔬菜中的维生素类物质含量均会有所降低。总黄酮和总酚在煮制过程中含量逐渐降低,在蒸制和炒制过程中,其呈现先升高后降低的趋势。煮制后蔬菜中VC、VB2保留率较低,炒制后蔬菜中总黄酮、总酚保留率较高。其中150℃~180℃下炒制1~2 min时,蔬菜中营养物质总体保留率较高,是较好地烹饪方式。

2019年河南省市售生禽肉食源性致病菌污染状况分析

目的了解河南省市售生禽肉中食源性致病菌污染状况及相关菌株的耐药性,为预防控制食源性致病菌引起的疾病提供科学依据。方法对河南省郑州市等13个监测点随机采集的207份生禽肉样品分别进行弯曲菌、单核细胞增生李斯特氏菌、致泻大肠埃希氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等4项食源性致病菌的检测,并对检出的单核细胞增生李斯特氏菌、致泻大肠埃希氏菌进行药物敏感试验。结果207份生禽肉样本中检出阳性样本70份,致病菌总检出率为33.82%,其中弯曲菌阳性23份(11.11%),单核细胞增生李斯特氏菌阳性24份(11.59%),致泻大肠埃希氏菌阳性23份(11.11%),小肠结肠炎耶尔森氏菌未检出。96.15%的致泻大肠埃希氏菌菌株均出现不同程度耐药,有7株对10种及10种以上抗生素耐药,占所有耐药株的28.00%,最高出现了对12种抗生素耐药。24株单核细胞增生李斯特氏菌对四环素为100%耐药,其中1株除四环素外对红霉素也耐药,其余23株对除四环素外的其他5种抗生素均敏感。结论河南省生禽肉中致泻大肠埃希氏菌耐药性比较严重,出现了大比例的多重耐药情况,存在食源性疾病发生的潜在风险。

2011-2021年河南省市售食品中蜡样芽胞杆菌污染状况调查

目的 了解2011-2021年河南省市售食品中蜡样芽胞杆菌污染状况。方法 参照相应年度《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》,每年在河南省18个市级监测点采集市售食品,对采集的食品样品开展蜡样芽胞杆菌的定性和定量检测。结果 2011-2021年18个监测点共采集食品样本5 894份,蜡样芽胞杆菌总检出率为12.22%(720/5 894)。2015年检出率最高(18.69%,60/321),2017年检出率最低(5.38%,22/409);速冻米面食品检出率最高(17.65%,3/17),其次为粮食制品(17.31%,36/208);街头摊点采集的食品检出率最高(19.25%,124/644),其次为小吃店(17.03%,94/552);散装食品的检出率(13.37%,472/3 530)高于预包装食品的检出率(10.49%,248/2 364)(P<0.05);夏秋季售卖食品检出率(13.04%,518/3 972)高于冬春季售卖食品的检出率(10.51%,202/1 922)(P<0.05)。632份样品通过稀释培养测数(MPN)法检测,定量结果中位数(P_(50))<0.3 MPN/g(mL);5 178份通过平板计数法检测,P_(50)<10 CFU/g(m L)。结论 近年来河南省市售食品中存在不同程度的蜡样芽胞杆菌污染,尤其是米面制品,相关监管部门应加强食品的安全监测与管理。

河南省食源和人源革兰氏阴性菌耐药特征和分子分型研究

目的掌握河南省食源和人源主要革兰氏阴性菌(GNB)分离株耐药和分子分型特征,为指导抗生素的合理使用和聚集性病例识别提供依据。方法对2021年河南省食品安全风险监测收集到的364株沙门氏菌和致泻性大肠埃希氏菌(DEC)分离株使用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验,使用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)进行分子分型和同源性分析。结果282株沙门氏菌对15种抗生素的耐药率范围为5.32%~83.69%,氨苄西林最高,亚胺培南最低;食源和人源沙门氏菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、庆大霉素、氯霉素、多粘菌素E、阿奇霉素、萘啶酸8种抗生素的耐药率存在统计学差异(P<0.05)。82株DEC耐药率范围为1.22%~64.63%,四环素最高,亚胺培南和多粘菌素E最低;食源和人源DEC对庆大霉素、阿奇霉素、头孢噻肟、头孢唑林、环丙沙星、萘啶酸6种抗生素的耐药率存在统计学差异(P<0.05)。共检出284株多重耐药菌、182种耐药谱;1株全耐药沙门氏菌来源于患者;不同来源沙门氏菌和DEC的多重耐药率存在统计学差异(P<0.05)。沙门氏菌分属23个PFGE型,肠炎沙门氏菌PFGE型为优势带型;DEC存在聚集性,来源于同一地区食品和患者肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC)。结论河南省食源和人源主要GNB呈现高度耐药,多重耐药现象普遍;PFGE基因型呈多样性,EPEC存在地区同源性。

2019-2020年河南省食源性疾病患者诺如病毒感染状况调查

目的 通过对河南省食源性疾病监测哨点医院的诺如病毒散发病例进行分析,了解河南省食源性疾病患者诺如病毒感染状况。方法 选取10家哨点医院,采集符合病例定义的3 987名食源性疾病患者的粪便或呕吐物标本,进行诺如病毒GⅠ和GⅡ双重实时荧光PCR检测,在食源性疾病监测报告系统填报病例信息和标本信息,采用SPSS17.0软件进行数据分析。结果 共采集标本3 987份,诺如病毒阳性率6.35%(253/3 987),其中2019和2020年阳性率分别为4.76%(95/1 996)和7.94%(158/1 991),差异有统计学意义(χ^(2)=16.920,P<0.001)。诺如病毒基因Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅰ型+Ⅱ型阳性率分别为0.38%、4.82%和0.08%。7月份的阳性病例最多(45例),主要临床症状是腹泻(98.42%)、呕吐(36.36%)、发热(28.85%),诺如病毒和非诺如病毒阳性病例在腹痛和恶心症状中所占比例差异有统计学意义(χ^(2)=44.007,P<0.001;χ^(2)=35.884,P<0.001)。1~5岁婴幼儿感染率最高(10.70%)。可疑暴露食品蛋与蛋制品(20.16%)、豆及豆制品(10.00%)、乳与乳制品(7.97%)和水果类及其制品(6.60%)关联病例的诺如病毒阳性率较高。结论 诺如病毒在不同时间段的感染趋势存在一定差异,Ⅱ型是河南省食源性疾病诺如病毒感染的主要基因型。腹泻、呕吐、发热症状的病例占比较高,婴幼儿人群标本中阳性率较高,蛋与蛋制品、豆及豆制品是主要可疑食品。