短时授精对IVF临床结局和新生儿结局的影响

目的:探讨短时授精是否对IVF临床结局和新生儿结局有影响。方法:回顾性分析2019年2月至2020年3月IVF 797周期,通过不同精液条件选择性短时授精(bIVF)384和常规授精(cIVF)413例;和冷冻日期2019年2月至2020年3月单囊胚冻融周期移植(FET)326例,FET-bIVF 149例和FET-cIVF 177例,比较两组的临床结局和新生儿结局。结果:与cIVF相比,虽然受精结局bIVF显著低于cIVF正常受精率、IVF完全不受精比例和IVF低受精比例差异极显著(P<0.01),但无论新鲜周期还是FET,两组的临床结局和新生儿结局差异不显著,包括临床妊娠率(新鲜周期移植51.40%vs 50.69%,P>0.05;FET 69.80%vs 66.67%,P>0.05)、活产率(新鲜周期移植42.99%vs 43.75%,P>0.05;FET 58.39%vs 53.67%,P>0.05)、新生儿畸形风险(新鲜周期移植0.00%vs 2.53%,P>0.05;FET 1.15%vs 2.11%,P>0.05)等。结论:采用选择性短时授精可以有效防止IVF完成不受精或低受精,而且不影响其临床结局和新生儿结局。

不同细胞数的卵裂期胚胎囊胚培养及冻融后单囊胚移植结局

目的:探索卵裂期胚胎细胞数对囊胚发育的影响,以及对冻融后单囊胚移植结局的影响。方法:回顾性选择D3胚胎评分A和B级5754枚行囊胚培养的胚胎,分为三组A组7~9细胞;B组≥10细胞;C组4~6细胞。比较三组的囊胚培养情况。选择177个单囊胚解冻移植周期,按照囊胚来源的D3胚胎评分A和B级分为两组A组7~9细胞和B组≥10细胞,比较冻融后单囊胚移植的结局。结果:三组胚胎囊胚培养结局比较,囊胚形成率、优质囊胚率、D5囊胚形成率和D5优质囊胚率差异极显著(P<0.01),但B组与A组比较,囊胚形成率、优质囊胚率差异不显著(P>0.05),D5囊胚形成率差异极显著(P<0.01),D5优质囊胚率差异显著(P<0.05)。冻融后单囊胚移植,两组D5囊胚比率和临床妊娠率差异不显著(P>0.05),但两组女方年龄差异极显著(P<0.01)。结论:在排除碎片的影响后,囊胚发育与D3胚胎细胞数有关,4~6细胞的囊胚形成率最低,而≥10细胞与7~9细胞相比则无差异;冻融后单囊胚移植虽然≥10细胞与7~9细胞比较临床妊娠率无显著差别,但未排除女方年龄的差异。

昆明小鼠胚胎干细胞建系的初步研究

以昆明小鼠(Mus musculus)为材料,利用超数排卵获得小鼠扩展囊胚、孵化囊胚。为了研究小鼠胚胎干细胞(Mouse Embryonic Stem Cells,mESC)分离和传代的影响因素,设计两个实验:(1)不同孕期(3.5 d或4.5 d)的囊胚对胚胎干细胞分离效率的影响;(2)第5代后,不同传代方法(机械法或酶消化法)对mESC传代的影响。结果显示:在3.5 d孕期时,胚胎为扩展囊胚,在4.5 d时为孵化囊胚,扩展囊胚在贴壁率、原代克隆形成率差异不显著,从在继代培养上显著高于孵化囊胚(P<0.05);第5代后用机械法或胰酶消化法传代对mESC的维持没有明显差别,但从克隆的形态上看,酶消化法优于机械法。最后,本研究从扩展囊胚组中成功获得了一株mESC,该mESC碱性磷酸酶染色呈强阳性,经RT-PCR分析显示表达Oct4、Sox2,核型为正常40XY。

梗阻输卵管同侧卵巢排卵对宫腔内人工授精妊娠结局的影响

目的探讨梗阻输卵管侧卵巢排卵对宫腔内人工授精(IUI)妊娠结局的影响。方法收集2018年3月至2020年8月于江门市中心医院生殖中心诊断为不孕症并接受IUI助孕患者的临床资料,共纳入533例患者,942个周期。根据梗阻输卵管与排卵卵巢的位置关系分为3组:梗阻输卵管同侧卵巢排卵(A组,74个周期);梗阻输卵管对侧卵巢排卵(B组,101个周期);双侧输卵管通畅、任意一侧卵巢排卵(C组,767个周期)。比较3组患者的一般情况(年龄、不孕年限、不孕类型、BMI、基础FSH、基础E 2、AMH、AFC)、周期资料(用药方案、排卵日内膜厚度和形态、精液处理后前向运动精子总数、IUI时机)、妊娠结局(临床妊娠率、异位妊娠率、早期自然流产率、活产率、继续妊娠率)。结果3组患者的年龄、不孕年限、不孕类型、BMI、基础FSH、基础E 2、AMH、AFC等一般情况相比较,差异均无统计学意义(P>0.05);3组患者的用药方案、排卵日内膜厚度和形态、精液处理后前向运动精子总数、IUI时机比较,差异均无统计学意义(P>0.05);A组、B组、C组的临床妊娠率分别为12.16%、13.86%、13.56%,异位妊娠率分别为0.00%、7.14%、2.88%,早期自然流产率分别为22.22%、14.29%、12.50%,活产率分别为9.46%、9.90%、9.78%,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论梗阻输卵管同侧卵巢排卵的患者行IUI术后可获得与通畅输卵管侧卵巢排卵患者相似的妊娠结局。

短时受精精卵共孵育时间对受精率的影响

目的探讨短时受精精卵共孵育时间对受精率的影响。方法170例行体外受精-胚胎移植（IVF—ET）患者常规促排卵，依据精卵共孵育时间分为短时受精组（A组：57例，精卵共孵育2～3h；B组：58例，精卵共孵育4～5h）和常规受精组（C组：55例，精卵共孵育18h）；之后将卵子转移至新鲜培养基中。比较各组的受精率、卵裂率、优胚率、临床妊娠率、胚胎种植率。结果三组受精率分别为63．01％、71．43％和78．72％，各组间的差异有统计学意义（P〈0．05）；C组的卵裂率、优胚率均低于A组和B组；C组与A组的卵裂率[97．05％vs99．25％]、C组与B组的优胚率[37．14％vs44．42％]之间的差异有统计学意义（P〈0．05）；各组间临床妊娠率、胚胎种植率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论短时受精有助于提高卵裂率、优胚率，精印共孵育时间4～5h的受精率较2～3h高。

水牛输卵管上皮细胞无血清培养的研究

以广西沼泽型水牛(Bubalus bubalis)输卵管为材料,比较研究不同取材方法、有无血清及生长因子对水牛输卵管上皮细胞培养的影响。试验采用了三种不同的取材方法。原代用含血清的培养液来培养,传代用添加生长因子的无血清复杂培养液和不添加生长因子的无血清基础培养液结合梯度减量无血清培养法和直接无血清培养法来培养并进行观察。结果表明,水牛输卵管上皮细胞可以在添加生长因子的无血清复杂培养液中生长、并且最长可维持56 d优于基础无血清培养的15 d;刮取法获得的细胞活率为95%优于消化法的70%和剪碎法的83%;细胞冷冻复苏率为83.6%;第5代的染色体数目为48条,这说明细胞依然保持正常的生物学特性和二倍体核型。

体外受精中9号染色体臂间倒位对卵裂期胚胎发育的影响

目的 :探讨9号染色体臂间倒位对卵裂期胚胎发育的影响。方法 :回顾性分析9号染色体臂间倒位不孕夫妇14例共18个治疗周期的119个正常受精卵,与染色体正常不孕夫妇35例共进行35个治疗周期的303个正常受精卵,在发育速度、胚胎评级、Day3胚胎碎片方面的差异。结果 :两组胚胎比较,其发育速度、胚胎评级、Day3碎片方面的各项指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:9号染色体臂间倒位对卵裂期胚胎发育没有产生不良影响。

染色体多态性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局影响的Meta分析

目的系统评价染色体多态性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结果的影响,为提高辅助生殖的成功率提供理论参考。方法检索PubMed,CNKI等相关中英文数据库,筛选纳入染色体多态性对IVF-ET结局影响的文献,采用Revman5.3软件进行荟萃分析。结果最终纳入12项队列研究,共10457个周期。Meta分析结果显示:染色体多态性会降低IVF-ET受精率(RR=0.97,95%CI:0.96~0.98)和优胚率(RR=0.92,95%CI:0.88~0.97);但对卵裂率、植入率、妊娠率、流产率及活产率没有影响(RR=0.99,1.00,0.96,0.99和1.13,95%CI:0.97~1.01,0.93~1.08,0.89~1.03,0.79~1.24和0.95~1.34,均P>0.05)。不同授精方式亚组间分析显示:IVF组染色体多态的患者受精率低于对照组,差异有统计学意义(RR=0.77,95%CI:0.71~0.84,P<0.05);ICSI组受精率与染色体多态性不相关(RR=0.98,95%CI:0.95~1.02,P>0.05)。结论染色体多态性对辅助生殖治疗效果有一定影响,染色体多态性降低了受精率和优质胚胎率。具有染色体变异的不孕夫妇应选择ICSI方案进行助孕治疗。由于所采用研究数量和质量的限制,上述结论需通过更大规模的流行病学调查和研究进一步验证。

激光人工皱缩预处理优质囊胚和非优质囊胚对妊娠结局的影响

目的探讨激光人工皱缩预处理优质囊胚和非优质囊胚对妊娠结局的影响。方法1016例囊胚移植女性患者根据囊胚分级系统分为优质囊胚(A)组758例和非优质囊胚(B)组258例,再根据囊胚玻璃化冷冻前是否行激光人工皱缩,A组分为行激光人工皱缩亚组(A1组,306例)和未行激光人工皱缩亚组(A2组,452例),B组分为行激光人工皱缩亚组(B1组,140例)和未行激光人工皱缩亚组(B2组,118例),比较两组及其亚组妊娠结局相关指标。结果A组临床妊娠率和活产率高于B组(P<0.01)。A1组临床妊娠率和活产率高于A2组(P<0.05)。B1组和B2组妊娠结局相仿(P>0.05)。结论激光人工皱缩预处理可显著提高优质囊胚冷冻复苏后的妊娠结局,而对非优质囊胚则效果不显著。

精子形态可否预测精子其他参数和受精结局

目的：探讨精子形态在辅助生殖治疗中对选择授精方法时有否预测价值和意义。方法回顾性分析2012年6月至2015年2月接受辅助生殖治疗的1951周期患者精液资料，根据《WHO人类精液检查与处理实验室手册》（第五版）精子正常形态率参考值下限为4%，将患者的精子正常形态率分成3组：A组＜1.0%470周期，B组1%-4% 562周期，C组≥4% 919周期，分别采用常规体外受精（IVF）或卵胞浆内单精子注射（ICSI）以及IVF受精失败后补救ICSI（RICSI）授精方式，比较3组精子正常形态与其他精液参数相关性，与授精方式、受精率、优质胚胎率的关系。结果除了顶体酶外，精子浓度、活力、前向运动率、DNA完整率在3组形态间都差异极显著（P＜0.01），而且它们与精子正常形态呈显著的正相关；授精方式上3组的IVF比例分别是72.3%、86.7%、96.8%，ICSI组27.7%、13.3%、3.2%，3组间授精方式差异极显著（P＜0.01），RICSI比例也随着精子正常形态率升高而降低；受精结局上，只有IVF组3组形态间受精率（67.0%、70.0%和79.6%）差异极显著（P＜0.01），且和精子正常形态率趋势一致；胚胎质量反映在不同授精方式上趋势各有不同。结论精子正常形态与其他大部分的精液参数有正相关性，影响IVF的受精率，故在辅助生殖治疗中对授精方式选择有一定指导意义。