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2018—2020年福建地区猪瘟病毒E0基因遗传变异分析
1
作者 戴爱玲 张鑫杰 +4 位作者 林楚云 尹会方 薛少华 刘建奎 杨小燕 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期201-207,共7页
为了了解2018—2020年福建地区猪瘟病毒流行及遗传变异情况,收集福建省不同地区临床发病猪的血液和肺脏、脾脏、淋巴结等组织样本1464份,采用RT-nPCR的方法对样品进行CSFV检测,对部分CSFV阳性样品E0基因进行克隆测序。结果显示,CSFV总... 为了了解2018—2020年福建地区猪瘟病毒流行及遗传变异情况,收集福建省不同地区临床发病猪的血液和肺脏、脾脏、淋巴结等组织样本1464份,采用RT-nPCR的方法对样品进行CSFV检测,对部分CSFV阳性样品E0基因进行克隆测序。结果显示,CSFV总体阳性率为1.9%(29/1464),并获得13株CSFV E0基因序列。同源性分析发现所得13株CSFV E0基因之间的同源性在82.2%-99.7%,其中11株CSFV E0基因与1.1亚型代表毒株HCLV的核苷酸同源性为99.0%~99.9%,与Shimen株的核苷酸同源性94.1%~95.0%;1株与2.1c型参考毒株HNSD-2012核苷酸同源性为98.2%;1株与2.1d亚型毒株CSFV/JPN/2018核苷酸同源性为99.6%。遗传进化分析发现,10株CSFV与HCLV、C-ZJ-2008、Shimen和Brescia处于同一分支,属于1.1亚型;1株CSFV与HNSD-2012等位于同一分支,属于2.1c亚亚型;1株与CSFV/JPN/2018等位于同一分支,属于2.1d亚亚型。氨基酸序列分析发现,13株毒株与HCLV等代表毒株在重要的Rnase活性位点高度保守,其中2株2.1亚型毒株与HCLV毒株相比,其在第35位非关键氨基酸残基上发生由G→E的突变。结果表明福建地区CSFV流行情况趋向多样化,提示仍需加强对CSFV流行及遗传变异的持续监测,为猪瘟的诊断及有效防控奠定基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 RT-nPCR E0基因 遗传变异
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猪细小病毒7型荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:1
2
作者 吕紫欣 张鑫杰 +2 位作者 薛少华 陈瑶 戴爱玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期49-54,共6页
猪细小病毒7型(PPV7)是近年来新发现的一种新型PPV。目前,缺乏更为高效的针对PPV7的检测方法,为了建立能够快速检测PPV7的方法,本研究根据PPV7 NS1基因的保守区序列,设计1对特异性引物及TaqMan探针。经过各反应条件的优化,初步建立了一... 猪细小病毒7型(PPV7)是近年来新发现的一种新型PPV。目前,缺乏更为高效的针对PPV7的检测方法,为了建立能够快速检测PPV7的方法,本研究根据PPV7 NS1基因的保守区序列,设计1对特异性引物及TaqMan探针。经过各反应条件的优化,初步建立了一种便捷、灵敏、能够快速准确检测PPV7的荧光定量PCR(qPCR)方法,并对其特异性、敏感性、稳定性以及与SYBR GreenⅠqPCR检测方法的符合率进行检测与对比。结果显示,该方法除对PPV7的基因组DNA有特异性扩增,对猪伪狂犬病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、日本乙型脑炎病毒及PPV1核酸均无交叉反应,特异性较强。该方法对重组质粒标准品检测限为1.76拷贝/μL,而常规PCR方法检测限为1.76×10^(2)拷贝/μL,表明本研究建立的方法敏感性较高。该方法对不同浓度质粒标准品的组内和组间重复性试验变异系数均小于1.7%,重复性较好。利用本研究建立的qPCR方法和SYBR GreenⅠqPCR方法对采自福建地区的150份样品进行检测,结果显示,两种检测方法的阳性率分别为24.67%(37/150)和6.67%(10/150),二者的总符合率为80.67%(121/150)。表明本研究建立的qPCR方法可以用于临床样品的检测。本研究建立的qPCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性稳定性好,为PPV7的流行病学调查及检测提供了新的技术支撑。 展开更多
关键词 猪细小病毒7型 TAQMAN探针 荧光定量PCR
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肉鸡圆圈病毒3型和A型多杀性巴氏杆菌混合感染的检测与分析
3
作者 庄丽云 雷天宇 +8 位作者 戴婷婷 吴玲玲 朱金玲 廖悦辰 牛群 包银莉 黄翠琴 戴爱玲 郑新添 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期18-23,共6页
为查明福建省龙岩市某鸡场肉鸡消瘦、呼吸困难、病死率升高原因,对发病鸡进行细菌分离鉴定、16S rDNA鉴定、荚膜分型检测、药物敏感试验等分析;以及进行病毒核酸PCR检测、遗传进化分析。结果显示,从病鸡中分离的细菌在血平板上形成圆形... 为查明福建省龙岩市某鸡场肉鸡消瘦、呼吸困难、病死率升高原因,对发病鸡进行细菌分离鉴定、16S rDNA鉴定、荚膜分型检测、药物敏感试验等分析;以及进行病毒核酸PCR检测、遗传进化分析。结果显示,从病鸡中分离的细菌在血平板上形成圆形、微突起、表面光滑、奶油状的菌落;分离菌16S rDNA核苷酸序列与GenBank中公布的多杀性巴氏杆菌的同源性达到99.9%以上,菌株荚膜为A型;该菌对哌拉西林、头孢氨苄、庆大霉素等药物均表现为高度敏感;从病鸡中检测出圆圈病毒3型(GyV3)VP2基因,与GenBank(登录号MK089248)GyV3同源性最高(99.9%)。结果表明,该鸡场发生圆圈病毒3型和A型多杀性巴氏杆菌引起的混合感染病例。 展开更多
关键词 圆圈病毒3型 多杀性巴氏杆菌 混合感染 病原学分析
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猪细小病毒7型VP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
4
作者 吕紫欣 张鑫杰 +3 位作者 薛少华 黄喜荣 刘建奎 戴爱玲 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第14期56-60,共5页
为了表达猪细小病毒7型(PPV7)VP2蛋白(由Cap基因编码)并制备其多克隆抗体,试验从GenBank数据库中下载PPV7 Cap基因序列,选择不同毒株的高频序列作为目的基因序列,使用T4 DNA连接酶将目的基因与pET-32a表达载体连接,将连接产物转化至DH5... 为了表达猪细小病毒7型(PPV7)VP2蛋白(由Cap基因编码)并制备其多克隆抗体,试验从GenBank数据库中下载PPV7 Cap基因序列,选择不同毒株的高频序列作为目的基因序列,使用T4 DNA连接酶将目的基因与pET-32a表达载体连接,将连接产物转化至DH5α感受态细胞中,并使用IPTG对重组菌进行诱导,对表达的重组蛋白进行可溶性分析与纯化并通过Western-blot检测重组蛋白的反应原性,用纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并分别通过间接ELISA方法、Western-blot检测多克隆抗体的效价及其与重组蛋白的反应性。结果表明:诱导后的重组菌在56 ku处出现明显条带,重组蛋白主要以包涵体的形式表达;纯化后的重组蛋白为单一条带,质量浓度为0.46 mg/mL,能与His标签抗体特异性结合;制备的多克隆抗体的效价为1∶51200,能与重组蛋白特异性结合。说明PPV7 VP2蛋白获得了成功表达,该蛋白具有良好的反应原性和免疫原性,所制备的多克隆抗体效价较高。 展开更多
关键词 猪细小病毒7型 VP2蛋白 Cap基因 原核表达 多克隆抗体
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2020—2022年闽粤赣地区PRRSV ORF5基因的分子流行病学调查
5
作者 吕紫欣 张鑫杰 +7 位作者 薛少华 金艳冬 陈林熙 黄喜荣 罗国清 蒙宁 陈瑶 戴爱玲 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期235-242,共8页
【目的】了解闽粤赣地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的分子流行动态,为该疫病的科学防控提供参考。【方法】采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对2020—2022年闽粤赣地区1475份临床猪组织和血清样品进行检测,对PRRSV阳性样品进行ORF5... 【目的】了解闽粤赣地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的分子流行动态,为该疫病的科学防控提供参考。【方法】采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对2020—2022年闽粤赣地区1475份临床猪组织和血清样品进行检测,对PRRSV阳性样品进行ORF5基因扩增和测序,并对ORF5基因的序列进行系统发育分析。【结果】2020、2021、2022年闽粤赣地区发病猪PRRSV的阳性率分别为24.23%(95/392)、27.69%(162/585)、18.07%(90/498),2020—2022年福建、广东、江西地区PRRSV的阳性率分别为23.20%(272/1172)、23.96%(52/217)、26.44%(23/87)。挑选来自不同猪场的86份阳性样品进行PCR扩增,成功获得62株PRRSV ORF5基因序列,并下载GenBank已发布的18株2020—2022年闽粤赣地区PRRSV的ORF5基因序列,与127株PRRSV国内外参考株ORF5基因序列构建系统发育树。系统发育树显示,80株闽粤赣PRRSV分离株均属美洲株。其中,40株分布在谱系1(NADC30-like株、NADC34-like株)上,12株分布在谱系3(GM2-like株、QYYZ-like株)上,7株分布在谱系5(VR2332-like株、BJ-4-like株)上,21株分布在谱系8(JXA1-like株、CH-1a-like株)上。对核苷酸和氨基酸序列的同源性进行分析,结果显示,80株PRRSV ORF5基因编码的核苷酸序列同源性为81.2%~100%,氨基酸序列同源性为78.6%~100%。33株PRRSV ORF5基因编码的GP5蛋白氨基酸序列在中和表位区第39氨基酸残基处存在变异。【结论】2020—2022年闽粤赣地区PRRSV流行株以谱系1为主(50.00%),并存在谱系1、3、5、8的混合流行。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ORF5基因 遗传变异
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抗体监测在规模猪场猪繁殖与呼吸综合征防控中的预警作用
6
作者 黄喜荣 张鑫杰 +5 位作者 薛少华 吕紫欣 邱飞铭 蒙宁 陈瑶 戴爱玲 《福建畜牧兽医》 2024年第3期18-22,共5页
为了揭示猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体水平在免疫猪群与非免疫猪群中的变化规律,本研究选取福建省龙岩市两个规模相似的自繁自养猪场,其中一个场免疫国内某厂家的TJM-F92株,另一个场不进行免疫。试验采用ELISA方法对两个场不同周龄的... 为了揭示猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体水平在免疫猪群与非免疫猪群中的变化规律,本研究选取福建省龙岩市两个规模相似的自繁自养猪场,其中一个场免疫国内某厂家的TJM-F92株,另一个场不进行免疫。试验采用ELISA方法对两个场不同周龄的商品猪进行PRRS抗体检测及分析,通过RT-PCR方法对临床样品中检测到的两株PRRSV的ORF5基因进行测序,并结合参考株进行序列分析。抗体检测结果表明,未免疫场248份血清中PRRS抗体阳性率从4周龄的70.0%下降至10周龄的26.7%,14周龄后抗体阳性率开始上升直至18周龄,保持在97.1%~100%;免疫场170份血清中未免疫的2周龄抗体水平较高,阳性率为100%,免疫后除6周龄、8周龄、10周龄分别为80%、70%、90%,其他周龄均为100%。ORF5基因遗传演化分析表明,免疫场检出毒株为HP-PRRSV,与HP-PRRSV(JXA1、HuN4等)、疫苗株HP-PRRSV TJM-F92等的同源性为70.5%~93.8%,并与JXA1、HuN4等处于同一小分支。未免疫场检出毒株与PRRSV NADC30株同源性为87.2%,属于NADC30-like分支。因此,当发现PRRS抗体阳性率较低、出现个别S/P值高且离散度大时,猪场要立刻采取处理措施预防因PRRSV感染而引起的继发感染。表明抗体定期监测在疫苗免疫场和阳性稳定场PRRS防控上可发挥有效的预警作用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ELISA RT-PCR 监测 预警
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基于全基因组分析2017-2021年福建省猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组特征 被引量:5
7
作者 刘建奎 徐叶 +8 位作者 刘辰 于慧 杨圆 何乐 李佳睿 但惠娟 戴爱玲 杨小燕 魏春华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1579-1589,共11页
通过对福建地区规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)进行病毒分离及全基因组序列分析,从而了解PRRSV流行情况及基因组特征,为猪场防控PRRS提供理论基础。2017—2021年从福建... 通过对福建地区规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)进行病毒分离及全基因组序列分析,从而了解PRRSV流行情况及基因组特征,为猪场防控PRRS提供理论基础。2017—2021年从福建地区规模化猪场采集疑似感染PRRSV的组织病料和血清,进行病毒分离鉴定,采用RT-PCR方法对PRRSV分离株进行全基因组序列扩增,应用DNAstar 7.0软件进行序列分析,使用MEGA 7.0软件邻近法进行遗传演化分析,并利用生物软件SimPlot 3.51和RDP4.10对PRRSV基因组序列进行重组分析。成功分离得到32株PRRSV-2,其全基因组大小为14938~15439 bp(不包括ployA),32株PRRSV之间基因组核苷酸相似性为82.4%~99.4%,与PRRSV-2代表毒株(VR-2332、JXA1、NADC30、QYYZ)和PRRSV-1代表毒株(LV)之间核苷酸相似性分别为81.4%~99%和59.8%~60.6%。分别基于PRRSV全基因组与ORF5基因构建的遗传进化树对32株PRRSV进行分型,结果显示福建省呈现多种谱系毒株并存,两种分型结果符合率为75%(24/32)。PRRSV基因组中Nsp2和ORF5的变异程度最大,Nsp2蛋白存在不同程度的氨基酸(1~155aa)缺失,GP5蛋白主要中和表位发生广泛的变异。32株PRRSV存在较高的重组概率(27/32)且重组模式复杂多样,重组模式有9种:L1+L8、L1+L3、L8+L5、L8+L3、L1(Sublineage1.8+Sublineage1.5)+L8、L1+L5+L8、L1+L3+L8、L1+L3+L5、L1+L3+L5+L8,其中19株以NADC30-like PRRSV为主要亲本,重组方式主要为L1+L8和L1+L8+L3,重组热点主要分布在Nsp1、Nsp2、Nsp9和ORF3基因。综上,福建省主要流行毒株为以NADC30-like PRRSV为主要亲本的重组毒株,对PRRSV进行分型应当以全基因组结果为准。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 病毒分离鉴定 全基因组 遗传变异 基因重组
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菌酶协同发酵饲料对河田鸡生长性能、蛋品质、血清抗氧化和免疫指标的影响 被引量:7
8
作者 周孝琼 戴爱玲 +5 位作者 林东文 冯伟涵 陈飞帆 李晶晶 张秋红 王华 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第16期98-102,114,共6页
为了解河田鸡日粮中添加茶叶渣、银杏叶渣菌酶协同发酵饲料对河田鸡生长性能、蛋品质、血清抗氧化和免疫指标的影响,试验将240只50日龄、平均体重为500 g的河田母鸡随机分为对照组、5%组、10%组(每组4个重复,每个重复20只),对照组饲喂... 为了解河田鸡日粮中添加茶叶渣、银杏叶渣菌酶协同发酵饲料对河田鸡生长性能、蛋品质、血清抗氧化和免疫指标的影响,试验将240只50日龄、平均体重为500 g的河田母鸡随机分为对照组、5%组、10%组(每组4个重复,每个重复20只),对照组饲喂基础日粮,5%组和10%组分别饲喂基础日粮+5%、10%的菌酶协同发酵饲料,60~119日龄检测河田鸡生长性能及血清抗氧化和免疫指标,120~219日龄检测产蛋性能和蛋品质。结果表明:与对照组相比,5%组的料重比显著降低(P<0.05);5%和10%组产蛋率分别提高20.57%和18.43%(P<0.05),料蛋比分别降低20.40%和19.06%(P<0.05),蛋黄重、蛋白高度、哈氏单位显著升高(P<0.05),血清中丙二醛(MDA)浓度及白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)质量浓度显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)及免疫球蛋白G(IgG)和白细胞介素-10(IL-10)质量浓度显著升高(P<0.05)。与10%组比较,5%组的料重比显著降低(P<0.05),蛋形指数、蛋壳厚度、蛋壳强度显著升高(P<0.05),MDA浓度显著升高(P<0.05),IL-10质量浓度显著降低(P<0.05),两组间其他指标差异不显著(P>0.05)。说明河田鸡日粮中添加茶叶渣、银杏叶渣菌酶协同发酵饲料可以提高河田鸡生长性能,改善鸡蛋品质,增强免疫和抗氧化功能,本试验条件下以5%为最佳添加量。 展开更多
关键词 菌酶协同发酵饲料 河田鸡 生长性能 蛋品质 氧化指标 免疫指标
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1株G26P[23]型猪A群轮状病毒的基因组特征 被引量:2
9
作者 魏春华 李佳睿 +6 位作者 杨圆 但惠娟 陈昊宇 祝冰清 戴爱玲 杨小燕 刘建奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期426-432,共7页
目的分析2021年从福建省发生腹泻的猪场分离到的1株G26P[23]新基因型猪轮状病毒RVA/pig/CHN/FJSH01/2021/G26P[23](简称FJSH01)的分子特征。方法利用MARC-145细胞进行RV分离,采用RT-PCR方法对分离株FJSH01的全基因组进行了测定,利用在... 目的分析2021年从福建省发生腹泻的猪场分离到的1株G26P[23]新基因型猪轮状病毒RVA/pig/CHN/FJSH01/2021/G26P[23](简称FJSH01)的分子特征。方法利用MARC-145细胞进行RV分离,采用RT-PCR方法对分离株FJSH01的全基因组进行了测定,利用在线分型工具RotaC v2.0对其基因型进行鉴定,并对其分子遗传特征进行了分析。结果分离株FJSH01的基因型图谱为G26-P[23]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1,即G26P[23]型。分离株FJSH01的VP3、NSP1、NSP3和NSP5基因分别与人源轮状病毒RVA/Human_wt/VNM/30378/2009/G26P[19]、RVA/Human-wt/VNM/NT0077/2007/G4P[6]、Human/LL4260/China/T1和RVA/Human/Ryukyu-1120的核苷酸同源性最高,为96.01%~98.65%,其余7个片段与猪源轮状病毒(PoRV)的核苷酸同源性最高,为95.12%~97.99%,表明分离株FJSH01可能为人源轮状病毒和猪源轮状病毒重配后的病毒株。结论G26P[23]型PoRV为国内首次鉴定,研究结果丰富了PoRV分子流行病学资料,为PoRV预防控制提供理论参考。 展开更多
关键词 猪A群轮状病毒 病毒分离 遗传进化分析
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2016年~2022年福建地区猪流行性腹泻病毒S基因的遗传变异分析 被引量:15
10
作者 李雨琪 许静茹 +12 位作者 郑欣 黄林洁 周娴静 朱智豪 陈芳婷 邓莹滋 蔡思思 靳雨欣 刘璐 董波 戴爱玲 李晓冰 范克伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期84-91,共8页
为了解2016年~2022年福建地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行现状及遗传变异情况,本研究对从福建地区采集的231份疑似猪流行性腹泻(PED)发病仔猪病料样品经RT-PCR进行PEDV的检测,选取不同地区22份PEDV阳性样品经PCR扩增S基因并测序,采用Meg... 为了解2016年~2022年福建地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行现状及遗传变异情况,本研究对从福建地区采集的231份疑似猪流行性腹泻(PED)发病仔猪病料样品经RT-PCR进行PEDV的检测,选取不同地区22份PEDV阳性样品经PCR扩增S基因并测序,采用MegAlign分析PEDV S基因及其编码氨基酸序列的相似性,采用MEGA7.0软件构建其系统发育树,采用MegAlign分析S基因编码氨基酸序列的分子特征,分别利用RDP4、SimPlot、MEGA7.0软件进行S基因的重组分析,并利用BEAST软件进行该基因分歧时间估算。结果显示,福建地区PEDV总阳性率为51.51%(119/231),福建5个不同地区PEDV阳性率为40.00%~63.16%。从22份PEDV阳性样品中获得19条PEDV S基因序列,全长4149 bp~4161 bp,共编码1382 aa~1386 aa,19株PEDV S基因序列及其编码氨基酸序列之间相似性分别为94.4%~100%和93.8%~100%。19株PEDV S基因系统发育分析结果显示,其中18株PEDV属于GIIb亚型,1株属于GIb亚型。S蛋白氨基酸序列分析结果显示,与经典疫苗株CV777相比,18株GIIb亚型PEDV S蛋白的氨基酸序列在aa55~aa56、aa135~aa136和aa155~aa156处存在插入与缺失,具有典型的PEDV变异株的分子特征;其中14株还出现了独特的aa1193缺失。与GII型疫苗株AJ1102相比,19株PEDV S1区氨基酸突变率为60.00%~83.82%,其中18株GIIb亚型PEDV S1区氨基酸突变位点中有10个位于S蛋白重要结构域;基因重组分析结果显示,有3株PEDV S基因存在重组事件,其中FJLY01-2018株由GD-B株和CH-S株重组而来,FJLY02-2018株由CH/HNPJ/2017株和PEDV4-S-3株重组而来,FJLY03-2022株由PEDV-1931-1-Valladolid-Molpeceres株和HUA-M17株重组而来;S基因分歧时间估算结果显示,福建地区GIIa亚型、GIIb亚型、GIa亚型及GIb亚型PEDV的最早分歧时间约为1995年、2009年、2010年和2011年。上述结果表明福建地区PEDV流行率较高,田间流行株基因型具有多样性,且存在重组现象,临床上应予以高度重视。本研究为福建地区PED的流行病学调查及免疫防控提供了参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S基因 遗传变异 基因重组 分歧时间
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规模化猪场猪细小病毒的检测及遗传进化分析 被引量:1
11
作者 何可缘 吴炜姿 +3 位作者 张鑫杰 薛少华 刘建奎 戴爱玲 《龙岩学院学报》 2023年第5期69-74,共6页
为了解广东某规模化猪场猪细小病毒病的感染情况和免疫现状,应用PCR方法对该企业2019年收集的疑似PPV感染的15份流产胎儿的病料组织进行PPV病原检测,对阳性样品进行VP2基因序列分析,同时应用ELISA方法对651份血清样品进行PPV抗体检测。... 为了解广东某规模化猪场猪细小病毒病的感染情况和免疫现状,应用PCR方法对该企业2019年收集的疑似PPV感染的15份流产胎儿的病料组织进行PPV病原检测,对阳性样品进行VP2基因序列分析,同时应用ELISA方法对651份血清样品进行PPV抗体检测。结果显示,PPV病原阳性率为13.34%,同源性分析显示,PPV GD-1株、GD-2株和PPV参考毒株VP2基因核苷酸同源性为97.6%~99.4%;进化树分析显示,PPV GD-1株、GD-2株与3个德国代表株15a株、21a株、27a株亲缘关系最为亲近,处于同一进化分支中。PPV抗体检测结果显示,血清样品抗体总阳性率达89.09%,各年龄阶段猪群抗体阳性率差别较大,阳性率在28.57%~100%之间,其中种公猪和种母猪PPV抗体水平阳性率最高达100%,其次是育肥猪和后备猪分别为97.65%、85.37%,而产房仔猪的抗体阳性率是五个阶段猪群中最低的,仅为28.57%。不同年龄段猪PPV抗体平均值也有所差异,抗体平均值从高至低依次是育肥猪、后备猪、种母猪。产房仔猪PPV母源抗体水平下降速度快,在保育猪到育肥猪这个阶段PPV抗体水平明显上升。结果表明,猪细小病毒VP2基因尽管比较保守,无明显变异,但产房仔猪PPV母源抗体下降快,保育育肥阶段存在PPV的感染风险,所以规模化猪场应重视后备猪猪细小病毒病的免疫防控。 展开更多
关键词 猪细小病毒 抗原和抗体检测 VP2基因序列分析
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闽西南地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染的血清流行病学调查 被引量:17
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作者 戴爱玲 范克伟 +4 位作者 李晓华 赖立新 黄思琼 吴志伟 杨小燕 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期51-55,共5页
为了掌握闽西南地区规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和流行趋势,应用ELISA方法对2012-2014年闽西南地区的859个规模化猪场22324份血清进行PR野毒感染血清学调查。调查结果显示被调查的猪场血清样品总阳性率为21.8%,场阳性率为57.0%;母... 为了掌握闽西南地区规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和流行趋势,应用ELISA方法对2012-2014年闽西南地区的859个规模化猪场22324份血清进行PR野毒感染血清学调查。调查结果显示被调查的猪场血清样品总阳性率为21.8%,场阳性率为57.0%;母猪、公猪、哺乳小猪、保育猪、育肥猪及后备猪的血清样品总阳性率分别为22.0%、23.7%、16.7%、15.6%、19.2%和27.2%,不同阶段的猪群PRVgE抗体阳性率差异显著(P<0.01)。2012年-2014年猪场阳性率分别为46.7%、45.4%和57.0%,血清样品阳性率分别为20.5%、18.4%和25.4%;血清样品阳性率在30%以上的猪场比例逐年上升,分别为14.8%、19.9%和32.2%;不同地区猪场PR野毒感染情况不同。结果表明近年闽西南规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染压力依然很大,猪伪狂犬病的控制与净化形势严峻。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 PRV gE抗体 ELISA 血清学调查
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闽西地区规模化猪场猪瘟抗体水平的监测与分析 被引量:8
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作者 戴爱玲 杨小燕 +1 位作者 李晓华 黄思琼 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第9期37-39,共3页
猪瘟是猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类l6种传染病之一,我国亦将其列为一类传染病,是发生最多、危害最大、流行最广的传染病。多年来我国采用免疫接种为主的防控措施,
关键词 猪瘟病毒 规模化猪场 抗体水平 闽西地区 接触性传染病 世界动物卫生组织 监测 防控措施
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某规模化猪场猪伪狂犬gE和gB抗体的检测与分析 被引量:20
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作者 戴爱玲 凌明发 +2 位作者 黄思琼 李晓华 杨小燕 《安徽农业科学》 CAS 2014年第32期11324-11325,11375,共3页
[目的]了解龙岩市某规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和免疫抗体水平.[方法]采用ELISA法对2010~2013年该场采集的种猪和育肥猪群的血清样品共1 217份进行猪伪狂犬野毒(gE)抗体和免疫(gB)抗体检测.[结果]种猪与育肥猪猪伪狂犬野毒总... [目的]了解龙岩市某规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和免疫抗体水平.[方法]采用ELISA法对2010~2013年该场采集的种猪和育肥猪群的血清样品共1 217份进行猪伪狂犬野毒(gE)抗体和免疫(gB)抗体检测.[结果]种猪与育肥猪猪伪狂犬野毒总样品阳性率分别为13.5%和28.4%,其中60~ 100日龄的育肥猪总样品阳性率为5.2%,100 ~210日龄的总样品阳性率为42.1%;种猪伪狂犬免疫抗体总样品阳性率分别为92.2%,60 ~160日龄的育肥猪猪伪狂犬免疫抗体阳性率呈波动变化,血清样品总阳性率为50%.[结论]该猪场育肥猪群野毒感染率较种猪群高,且100日龄以后的育肥猪群野毒感染率较高,种猪群的免疫抗体水平高于育肥猪群,80~130日龄育肥猪免疫抗体水平较低. 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 ELISA gE/gB抗体
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福建省龙岩市规模化猪场伪狂犬野毒感染的血清学调查 被引量:19
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作者 戴爱玲 李晓华 +2 位作者 黄思琼 励威 杨小燕 《龙岩学院学报》 2011年第2期80-83,共4页
为了掌握龙岩市规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和流行趋势,应用IDEXX的PRV-gE抗体试剂盒,对2007~2009年龙岩市新罗区、连城、上杭、武平、永定、漳平、长汀的规模化猪场进行PR野毒感染血清学调查。结果表明:2007~2009年PRV野毒抗体... 为了掌握龙岩市规模化猪场猪伪狂犬野毒感染状况和流行趋势,应用IDEXX的PRV-gE抗体试剂盒,对2007~2009年龙岩市新罗区、连城、上杭、武平、永定、漳平、长汀的规模化猪场进行PR野毒感染血清学调查。结果表明:2007~2009年PRV野毒抗体样品阳性率分别为19.2、17.2、18.0%,猪场阳性率分别为54、65、64.6%,三年来的样品阳性率和猪场阳性率没有明显的变化,依然存在感染压力。PR野毒感染随季节的变化有一定的规律性,在每年1月到2月期间,猪PR野毒抗体阳性率都会大幅上升,夏秋两季PR感染率在一年中总体较高。种猪群是所有调查猪群中PR野毒抗体阳性率中最高的,是猪场伪狂犬野毒的主要来源,饲养密度大的区域PR野毒抗体阳性率较高。本次调查结果对指导规模化猪场猪伪狂犬病的控制与净化具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 猪伪狂犬 ELISA 抗体监测 PRVg E抗体 血清学调查
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液体培养法与qPCR法对检测猪鼻支原体灵敏度比较
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作者 薛少华 吕紫欣 +3 位作者 张鑫杰 戴爱玲 杨小燕 俞国华 《广东畜牧兽医科技》 2023年第2期74-80,共7页
为了比较《中国药典》已收录但相当耗时的液体培养法和未收录但相对快速的荧光定量PCR(qPCR)法对支原体检测的灵敏度,试验分别在猪鼻支原体生长的对数期(48 h)、稳定期(96 h)和衰亡期(144 h)取样,将样品10倍系列稀释后,使用液体培养法和... 为了比较《中国药典》已收录但相当耗时的液体培养法和未收录但相对快速的荧光定量PCR(qPCR)法对支原体检测的灵敏度,试验分别在猪鼻支原体生长的对数期(48 h)、稳定期(96 h)和衰亡期(144 h)取样,将样品10倍系列稀释后,使用液体培养法和qPCR法对各个稀释度进行检测(两种方法的样品加入体积分别为0.5 mL和5μL),以比较二者的灵敏度。结果显示:在存活支原体占比高的对数期和稳定期,液体培养法比qPCR法的检测灵敏度高约100倍;而在死亡支原体占比大幅增加的衰亡期,结果则相反,qPCR法反而比液体培养法的检测灵敏度高约1 000倍。当把对数期样品高速离心浓缩约100倍后再用qPCR法检测,其检测灵敏度比浓缩之前提高了约100倍。上述结果表明:影响液体培养法和qPCR法相对灵敏度的主要因素是各自体系中不同的样品加入体积和样品中存活支原体的比例,而由于前一因素导致的两种方法灵敏度的差异,可以通过高速离心浓缩的方法缩小,使两种方法的相对灵敏度基本相同。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 液体培养法 qPCR法 检测 灵敏度
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一例母猪混合感染猪圆环病毒3型与近平滑假丝酵母菌的病例报告
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作者 薛少华 吕紫欣 +8 位作者 张鑫杰 魏梅蕊 黄紫芯 林新龙 黄思琼 华贤通 戴爱玲 杨小燕 俞国华 《广东畜牧兽医科技》 2023年第3期80-84,共5页
2022年6月福建省龙岩市某规模化猪场的母猪陆续发病,临床主要表现为病猪的膝关节轻微肿大,不愿久站,甚至站立困难。为查明发病原因,对病猪进行病理剖检,并采集血液和膝关节积液样品,分别用于生猪常见疫病病原体的核酸检测和微生物的分... 2022年6月福建省龙岩市某规模化猪场的母猪陆续发病,临床主要表现为病猪的膝关节轻微肿大,不愿久站,甚至站立困难。为查明发病原因,对病猪进行病理剖检,并采集血液和膝关节积液样品,分别用于生猪常见疫病病原体的核酸检测和微生物的分离培养。结果显示:病理剖检未发现主要脏器的明显病变;血液样品的核酸检测显示,猪圆环病毒3型(Por⁃cine Circovirus type 3,PCV3)为阳性,未检出其它主要病原体;膝关节积液样品的微生物培养产物的显微镜镜检结果显示有酵母样真菌,经培养产物的PCR扩增和DNA测序表明:该酵母样真菌为近平滑假丝酵母菌(Candida parapsilosis)。结论:该病例为猪圆环病毒3型(PCV-3)与近平滑假丝酵母菌的混合感染。根据文献查询,这是世界首例有关近平滑假丝酵母菌导致生猪膝关节深部感染并从膝关节积液中成功分离到近平滑假丝酵母菌的报道。 展开更多
关键词 母猪 猪圆环病毒3型 近平滑假丝酵母菌 混合感染
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规模化猪场脐带血猪瘟病原检测及遗传变异分析 被引量:3
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作者 戴爱玲 刘建奎 +3 位作者 王德永 魏春华 林日丹 杨小燕 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期17-20,25,I0002,共6页
为了了解某规模化猪场母猪猪瘟病毒(CSFV)带毒及病原遗传变异情况,应用荧光定量PCR对117份分娩母猪的脐带血进行猪瘟病原检测,对阳性样品进行CSFV E2基因RT-PCR扩增,研究CSFV遗传变异特性。结果表明,该猪场猪瘟病原阳性率为7.69%(9/117... 为了了解某规模化猪场母猪猪瘟病毒(CSFV)带毒及病原遗传变异情况,应用荧光定量PCR对117份分娩母猪的脐带血进行猪瘟病原检测,对阳性样品进行CSFV E2基因RT-PCR扩增,研究CSFV遗传变异特性。结果表明,该猪场猪瘟病原阳性率为7.69%(9/117),5株CSFVE2基因之间的核苷酸同源性为97.8%~100%,与参考株的同源性为80.0%~97.5%,与C株和HCLV株的同源性分别为95.6%~96.7%、96.4%~97.5%;5株CSFVE2基因推导的氨基酸同源性为97.8%~100%,与参考株之间同源性为83.5%~96.7%,与C株和HCLV株同源性均为95.5%~96.7%。遗传进化树分析表明,5株CSFV E2基因属于1.1亚群,与疫苗株HCLV亲缘性最近;氨基酸变异位点分析表明,5株CSFV E2基因在位于抗原决定区内氨基酸发生较小程度的变异。表明该猪场通过胎盘屏障感染仔猪的猪瘟病毒可能来源疫苗株,这种现象应该引起重视。 展开更多
关键词 脐带血 猪瘟 E2基因 序列分析
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福建龙岩规模化猪场BVDV感染的血清学调查 被引量:10
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作者 戴爱玲 魏春华 +2 位作者 黄思琼 李晓华 杨小燕 《龙岩学院学报》 2013年第2期50-53,共4页
为了解闽西地区规模化猪场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对闽西地区18个猪场送检猪血清进行BVDV感染的血清学调查,同时检测这些猪血清的猪瘟抗体,结果表明:规模化猪场BVDV的感染比较严重,血清阳性率为28.... 为了解闽西地区规模化猪场牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对闽西地区18个猪场送检猪血清进行BVDV感染的血清学调查,同时检测这些猪血清的猪瘟抗体,结果表明:规模化猪场BVDV的感染比较严重,血清阳性率为28.6%,猪场阳性率达到94.4%。种猪、育肥猪、保育猪、哺乳仔猪的BVDV的血清阳性率分别为38.5%、17.3%、2.1%、27.4%,种猪的阳性率明显高于生长猪。BVDV抗体与猪瘟抗体的相关性分析结果表明在猪瘟抗体阳性猪群中的BVDV感染率较高,某些猪瘟抗体阴性猪群中也发现BVDV感染的现象。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 猪瘟病毒 抗体 ELISA 血清学检测
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淄博市216811名新生儿先天性甲状腺功能低下症筛查结果分析 被引量:4
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作者 戴爱玲 王郁 +1 位作者 田峰 王晓文 《中国儿童保健杂志》 CAS 2006年第6期638-640,共3页
【目的】探讨新生儿甲状腺功能低下症(congenital hypothyroism,CH)的发病率和治疗效果。【方法】采用时间分辨免疫荧光分析监测新生儿出生后足跟血的干血滤纸片中甲状腺刺激激素(thyroid-sti mulating hormone,TSH)浓度。【结果】对淄... 【目的】探讨新生儿甲状腺功能低下症(congenital hypothyroism,CH)的发病率和治疗效果。【方法】采用时间分辨免疫荧光分析监测新生儿出生后足跟血的干血滤纸片中甲状腺刺激激素(thyroid-sti mulating hormone,TSH)浓度。【结果】对淄博市216 811名新生儿筛查,确诊CH47例,发病率为1/4 613。【结论】新生儿疾病筛查CH患儿,使之得到早期诊断和治疗,是预防智力低下,提高生存质量,全面提高人口素质的一项重要措施。 展开更多
关键词 先天性甲状腺功能低下 新生儿 发病率
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