大米免疫活性肽在小鼠体内的作用机制

目的:证明前期筛选出的肽GBP1(NSVFRALPVDVVANAYR)在小鼠体内的免疫调节活性。方法:通过动物试验探讨GBP1肽的免疫调节作用机制;利用RNA-Seq技术对GBP1肽处理前后的小鼠脾脏组织进行转录组测序分析,阐释GBP1肽免疫调节作用的分子机制。结果:GBP1肽处理组小鼠脾细胞增殖数趋于正常值水平,肝脏器系数显著降低,血清中IgG含量稳定;终质量分数为25 mg/kg的GBP1肽能够在一定程度上抑制小鼠血清中IL-2、IFN-γ以及TNF-α的分泌;通过转录组分析,从脾脏组织中获得780个差异基因,该基因在机体内涉及与免疫相关的p53信号通路、铁死亡、补体和凝血级联等通路密切相关。结论:GBP1肽可以影响细胞因子的表达,介导信号转导通路,行使免疫调节功能。

金属有机框架材料MIL-101在吸附去除水中有机污染物中的应用进展

金属有机框架材料(MOFs)是一种极具前景的水中污染物吸附材料,其中,拉瓦锡研究所材料(MIL)凭借较好的稳定性和较多的可调节位点在众多MOFs中脱颖而出。与其他MILs相比,MIL-101具有比表面积较大和表面活性位点多的特点,在水中的稳定性高,已成为一种新兴的吸附材料。鉴于此,该文对近年来MIL-101在水中有机污染物去除领域的应用研究进行了综述,主要对MIL-101结构、改性修饰及其在水污染物吸附去除方面的应用及吸附机理进行了介绍。最后对MIL-101吸附材料的应用前景进行了分析和展望。

核桃粕源抗氧化活性肽的酶解制备及活性分析

目的:深度利用核桃粕蛋白。方法:采用分级分离法从核桃粕中提取蛋白质后,分别用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对其进行水解,并比较分析胰蛋白酶酶解物(trypsin hydrolysate,TH)、木瓜蛋白酶酶解物(papain hydrolysate,PH)、中性蛋白酶酶解物(dispase hydrolysate,DH)、碱性蛋白酶酶解物(alcalase hydrolysate,AH)和风味蛋白酶酶解物(flavourzyme hydrolysate,FPH)的抗氧化活性;以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和羟自由基清除率为检测指标分析不同浓度AH的体外抗氧化性;采用LC-MS/MS技术鉴定AH中所有肽的序列,并利用PeptideRanker、BIOPEP-UWM数据库和分子对接工具AutoDock1.5.6筛选潜在的核桃抗氧化活性肽;将上述两条肽分别与Keap1蛋白进行计算机模拟分子对接,并利用斑马鱼胚胎氧化损伤模型,对人工合成的两条抗氧化活性肽的抗氧化活性进行分析。结果:5种酶解物中抗氧化活性较好的AH对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的最佳清除率分别为(71.56±0.75)%,(60.63±0.45)%,(98.63±0.06)%。LC-MS/MS鉴定并通过计算机分析预测得到两条活性最优的肽,即:ALWPF和PLRWPF;两条抗氧化活性肽均能与Keap1蛋白的活性部位结合,其结合能分别为-9.2,-9.6 kJ/mol。ALWPF和PLRWPF肽处理斑马鱼胚胎的安全质量浓度范围分别为0~50,0~30μg/mL。结论:从核桃粕中鉴定出两条抗氧化肽,其对斑马鱼胚胎具有保护作用。

植物源抗菌肽的筛选及其在食品中的应用进展

近年来,随着传统抗生素耐药性问题的加剧和对天然抗菌剂研究兴趣的增加,天然抗菌肽受到了广泛关注。其中植物源抗菌肽具有耐药性低、抗菌谱广和毒性低等特点,还因富含半胱氨酸残基,可形成多个二硫键,从而具有较高的化学稳定性、热稳定性和酶解稳定性等。文章综述了植物源抗菌肽的分类以及从植物源中提取和筛选抗菌肽的方法,重点介绍了植物源抗菌肽在食品领域的潜在应用,并对这些植物源抗菌肽的筛选和未来在食品领域中的应用进行了展望。

苦味肽的苦味机制及脱苦策略研究进展

蛋白质水解过程中形成的苦味肽会导致食品出现苦味,苦味肽从口感角度往往被认为是不受欢迎的成分。然而,有研究表明其中一些苦味肽显示出对人类健康有益的生物活性及有助于缓解慢性疾病的特性。因此,阐明苦味肽的苦味机制对于改善食品口味和生物活性开发利用具有重要意义。前期研究报道提出了Q值、苦味氨基酸、苦味指示基序和空间结构等肽苦味影响因素,但普适的机制尚未得到阐明。酶法或非酶法去苦味策略已在实验室及工业化规模中实施应用,其中酶法因高效、安全而广受关注,具有脱苦能力或潜力的和来源于动物、植物与微生物的酶被研究者不断鉴定并报道。本文较全面地总结苦味肽的研究进展,内容包括苦味肽的来源、生物活性、鉴定方法、苦味机制及酶法/非酶法脱苦方法等,同时归纳总结不同来源的具有脱苦味能力或潜力的酶的共有特性,并展望苦味肽未来研究方向。

蛋白质工程提升糖酶热稳定性研究进展

糖酶是制糖工业中不可或缺的一种酶制剂。天然糖酶在长时间高温转化制糖时难以保持较好的稳定性,制约了其在工业生产中的应用。大量研究表明蛋白质工程手段是提升糖酶热稳定性的重要手段和策略。本文系统地综述利用蛋白质工程手段提高糖酶热稳定性的最新进展,详尽分析蛋白质工程中的定向进化、理性设计和半理性设计策略。同时评估这些策略在提高糖酶热稳定性方面的效果及其潜在的工业应用价值,并指出各策略的优势、不足和面临的挑战。最后提出应结合多种方法策略提高糖酶热稳定性的建议,并展望未来研究的方向,以期实现糖酶热稳定性和酶活性的协同提高。

分子模拟技术在食品领域中的应用研究进展

从食品领域的上游实验室研发到下游工厂生产过程中,有许多问题无法用传统试验方法从宏观上得到解决。分子模拟技术不仅简洁高效、成本低廉,还可以通过对分子行为的分析快速预测或解释试验结果,是连接微观与宏观的重要工具。文章阐述了食品领域分子模拟技术的基本原理,梳理了食品领域分子模拟技术常用的数据库和软件及其特点,综述了近几年分子模拟技术在食品安全、食品加工和贮藏、食品功能因子筛选及其机制研究领域中的应用研究进展。

红莲型水稻细胞质雄性不育花药蛋白质组学初步分析

采用固相pH梯度-SDS PAGE双向电泳对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系(YTA)和保持系(YTB)单核期花粉总蛋白质进行了分离,通过银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。Image Master 2DV5.0软件可识别约1800个蛋白质点,其中差异表达的蛋白质点数为85。将其中16个差异点采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionizaton time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行了肽质指纹图分析,通过采用Mascot软件对MSDB数据库查询,其中9个蛋白质点得到了鉴定。YTA相对于YTB有部分参与碳代谢和淀粉合成的酶缺失或表达量降低,这些蛋白质分别是ADP-葡萄糖磷酸转移酶(AGPase),UDP-葡萄糖醛酸脱羧酶,乙酰辅酶A合成酶和二氢硫辛酸脱氢酶等。其中AGPase是参与淀粉合成的蛋白,与花粉发育密切相关。乙酰辅酶A合成酶和二氢硫辛酸脱氢酶是细胞内合成乙酰辅酶A的重要酶,而乙酰辅酶A是进入TCA循环的重要底物,乙酰辅酶A的缺乏可以导致TCA循环不能顺利进行,从而不能提供小孢子发育所需要的大量能量。YTA相对于YTB部分参与碳水化合物代谢的重要酶缺失或表达量降低,有可能导致因线粒体提供的能量不足,淀粉合成受阻,因而花粉不能正常发育。

利用RAPD技术分析兰属(Cymbidium)品种间的亲缘关系

本文利用RAPD技术来检测兰属 13个品种间的亲缘关系 .通过对 5 5种 10个碱基随机引物的筛选 ,其中 4种引物能得到重复性、稳定性较高扩增产物 ,四种引物共扩增出 93条多态性带 ,多态率为 10 0 % .根据RAPD标记进行邻体聚类分析 ,表明兰属各种间的亲缘关系与形态学分类结果不完全一致 .实验结果认为RAPD技术可用于兰属植物的系统学研究 .图 2表 3参

水稻花粉总蛋白质双向凝胶电泳方法建立及应用

采用石英砂加液氮研磨方法破碎花粉，然后用两种不同的方法提取水稻花粉总蛋白质，之后采用固相pH梯度等电聚焦／SDS-PAGE双向凝胶电泳对红莲型细胞质雄性不育水稻单核期花粉总蛋白质进行了分离。通过银染显色，PDOuest2DE软件可识别约1000-1500个蛋白质点。其中TCA-丙酮提取法更适合提取花粉总蛋白质进行双向凝胶电泳分离，并可获得分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系单核期和二核期花粉总蛋白进行了双向电泳分离，通过比较两个时期花粉蛋白质电泳图谱后发现，二核期的花粉蛋白质较单核期花粉蛋白质数目减少，并且部分蛋白质表达量下降。

红莲型水稻细胞质雄性不育花粉总蛋白质初步比较分析

采用固相pH梯度/SDS-PAGE双向电泳对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系(YTA)和保持系(YTB)二核期花粉总蛋白质进行了分离,通过银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。用PDQuest2DE软件可识别约1500个蛋白质点,其中差异表达的蛋白质点数为120。将其中15个差异点采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionizaton time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行了肽质指纹图分析,通过采用Mascot软件对MSDB数据库查询,其中7个蛋白质点得到了鉴定。YTA相对于YTB有部分参与物质和能量代谢的蛋白质缺失或表达量降低,这些蛋白质分别是水稻线粒体H+-转运ATPase(H+-ATPase)α链、盐诱导型膜联蛋白、线粒体NAD+-依赖型苹果酶和磷酸核糖焦磷酸合成酶等。这些蛋白质的表达下调或缺失可能与线粒体提供能量不足而导致的花粉不能正常发育有关。线粒体电压依赖性阴离子通道(VDAC)这一重要蛋白质在YTA中的上调表达有可能与花粉败育过程中细胞的程序性死亡相关。

水稻花药总蛋白质双向电泳方法的改良与优化(简报)

双向电泳作为蛋白质组学核心技术之一．目前已广泛地应用在植物领域，并且成功应用于水稻代谢和调节等方面的研究。谢锦云等利用溶液法提取温敏核不育水稻花药总蛋白质．利用pH3—10线性胶条分离，经银染显色后检测到约1．000个点。本文通过对传统双向电泳方法进行改良和优化．得到了一种适合于分析水稻花药总蛋白质的双向电泳（two—dimensional electrophoresis．2DE）的方法，第一向采用固相胶条在等电聚焦分离．第二向采用SDS—PAGE分离。

水稻红莲型细胞质雄性不育系小孢子不同发育时期花药总蛋白质比较分析

采用双向凝胶电泳对水稻红莲型细胞质雄性不育的不育系小孢子发育单核期和二核期花药总蛋白进行了分离，通过银染显色，获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱，且单核期和二核期花药总蛋白质在双向电泳胶上分布的图谱十分相似。PDQuest 2DE图像分析软件在等电点（pI）3．0—10．0、分子量（M．W．）9．0—98．0kD之间可识别约1800个蛋白质点。比较分析发现单核期和二核期花药中共有241个差异表达的蛋白质点，其中仅在单核期中表达的点数为125，仅在二核期中表达的为13点；表现为表达量差异的105点，其中在二核期表达下调的点数为70点，表达上调的为33点。还对蛋白质点集中的区域（p14．5—8．0，M．W．25．0—70．0kD）中的41个差异蛋白质点进行了分子量和等电点分析。

胶束毛细管电动色谱法研究兰属品种间的亲缘关系

用胶束毛细管电动色谱技术对兰属植物的种质资源多样性及品种间的亲缘关系进行研究．１３个兰属品种的ＣＥ－ＳＤＳ电泳图谱中，共出现３４个蛋白质标记峰，全部为多态性峰，每个样品均有１～２个主峰．邻体聚类结果与形态学分类结果不完全一致．种间的亲缘关系与传统的形态学分类法一致。

红莲型水稻二核期花粉蛋白质组学分析

采用固相pH梯度等电聚焦/SDS-PAGE对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系、保持系和杂种F1代二核期花粉总蛋白质进行了双向电泳分离,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.对其中15差异点进行了肽质指纹图分析或者LC-MS/MS分析,共有12个点得到鉴定.不育系相对于可育系有部分参与蛋白质缺失或表达量降低,可能与线粒体提供能量不足而导致的花粉不能正常发育有关.

红莲型细胞质雄性不育水稻单核期花粉蛋白差异表达分析

为在孢子发育时期从蛋白质水平更好地理解细胞质雄性不育的分子机理,对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系粤泰A、保持系粤泰B及其F1(红莲优6号)单核期花粉总蛋白质采用固相pH梯度等电聚焦/SDS-PAGE(3～10非线性胶条)进行双向电泳分离,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)或者LC-MS/MS分析对其中15个差异点进行鉴定,并对已鉴定的蛋白质点进行亚细胞定位和功能分析。发现与可育系相比,不育系有部分参与物质和能量代谢、细胞周期、转录、物质转运等的蛋白质缺失或表达量降低。这些蛋白质包括K+/H+协同运输蛋白、锌指蛋白和WD重复蛋白等。这些蛋白质的表达下调或缺失可能与线粒体供能不足而导致的花粉不能正常发育有关。

RAPD 标记在植物分子生物学中的应用

ＲＡＰＤ标记在植物分子生物学中的应用文李叶庆生（华南师范大学生物系广州５１０６３１）遗传标记是遗传物质的特殊的易于识别的表现形式，当前遗传标记主要有四种类型，即形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记．长期以来，作物种质资源鉴定及育种材料的选择通常都是...

水稻二核期花药蛋白质组差异与花粉败育的相关性

对红莲型细胞质雄性不育水稻小孢子发育二核期花药总蛋白质进行双向电泳分离,通过考马斯亮蓝染色,获得分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定12个蛋白质点,液相色谱质谱/质谱联用技术鉴定另外7个蛋白质点,这些蛋白质分别参与糖类物质的合成及代谢(5个点)、蛋白质生物合成及代谢(3个点)、转录(2个点)、次生代谢产物合成(2个点)、信号转导(1个点)、细胞疾病和死亡(1个点)及未知功能蛋白(5个点)。除1个蛋白酶亚基(点9)仅在不育系中表达外,其他18个蛋白质点在不育系中缺失或表达量降低,因而花粉发育过程中糖类及蛋白质的正常积累受到影响,与花粉不能正常发育密切相关。

RAPD条件优化及天麻基因组DNA多态性分析

建立了RAPD扩增条件快速优化程序与方法,并应用于天麻基因组DNA扩增条件的优化及多态性的测定;获得了天麻基因组DNA的RAPD扩增优化条件和DNA指纹图谱;分析了模板DNA、引物、dNTP、TaqDNA聚合酶等的浓度和退火温度对RAPD扩增的影响.结果表明:天麻基因组DNA用引物S1扩增的片段具有更明显的多态性,这种指纹图谱更适合于天麻遗传分化研究;而用引物S12扩增的DNA指纹图谱具有更大的相似性,这种指纹图谱更适合于天麻真伪鉴别.该方法使RAPD扩增条件优化过程实现了程序化和数量化,是获得RAPD优化条件的简便快速、经济实用方法.应用该方法进行RAPD扩增,可获得图谱清晰、稳定可靠的实验结果.

食源性生物活性肽免疫调节功能研究进展

食源性生物活性肽是一种以食源性蛋白为原料,经过水解及分离纯化后得到的具有特殊生物活性的蛋白水解物,其氨基酸残基数目不等且相对分子质量一般较小。食源性免疫活性肽为一类具有抗菌、抗炎以及调节免疫系统功能的生物活性肽,其来源广、活性高,极具研究意义。文章综述了近年来食源性免疫活性肽的研究现状及其对免疫系统的影响,介绍了食源性免疫活性肽的制备方法,并从免疫活性肽功能多样性、构效关系与制备关键技术三方面对食源性免疫活性肽的研究趋势进行了展望。