胆囊神经内分泌瘤1例并文献复习

胆囊神经内分泌瘤属于神经内分泌肿瘤中十分罕见的病变,胆囊神经内分泌肿瘤(neuroendocrine tumor of gallbladder)仅占所有神经内分泌肿瘤的0.5%[1],对于其文献报道目前较少。本文报道1例胆囊神经内分泌瘤,并结合文献探讨该病的临床病理特点。患者,女,48岁,于单位组织体检时,偶然发现胆囊多发息肉样病变并胆囊结石,随即就诊于空军军医大学第一附属医院门诊并以 “胆囊肿物”收入院。

黄精多糖对神经细胞的毒性及抗缺氧性坏死和凋亡作用研究

目的:探讨黄精多糖对体外培养的神经细胞的毒性反应及抗缺氧性坏死和凋亡的保护作用。方法:采用Neurobasal加B27Supplement体外无血清培养、缺氧复氧培养、免疫细胞化学染色、Trypanblue拒染法、Hoechst33342荧光染色法以及AnnexinV/PI双染流式细胞仪测定法观察对体外培养新生大鼠神经细胞的影响。结果:黄精多糖在6mg/ml以内对正常培养的神经细胞无明显毒性作用,在500μg/ml^1.5mg/ml范围内随着浓度增加抗缺氧复氧培养诱导的神经细胞坏死作用增大。黄精多糖在500μg/ml^1.5mg/ml范围内有抗缺氧复氧培养诱导的神经细胞凋亡作用,且随着浓度增加而增大。流式细胞仪测定显示500μg/ml^1.5mg/ml的黄精多糖有抗缺氧性神经细胞坏死作用,1mg/ml^1.5mg/ml范围内有抗缺氧性神经细胞凋亡作用。结论:黄精多糖有抗缺氧性神经细胞坏死和凋亡作用。

川芎嗪干预长春新碱抑制骨髓基质细胞增殖的研究

目的探讨川芎嗪(LH)促进小鼠骨髓基质细胞(BMSC)生长及干预长春新碱(VCR)抑制小鼠BMSC增殖的作用。方法①LH5、10、20、40μg/mL,以及VCR2.5、5、10、15μg/mL分别与BMC共同培养14d,测定细胞增殖。②LH5、10、20、40μg/mL与BMC预培养1h后再分别加入终浓度为5μg/mLVCR继续培养14d,测定细胞增殖。结果LH20、40μg/mL组、VCR10、15μg/mL组OD值与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),LH20、40μg/mL组OD值与LH10μg/mL组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);VCR2.5μg/mL组OD值与VCR15μg/mL组比较差异有统计学意义(P<0.05)。LH10μg/mL+VCR5μg/mL组、LH20μg/mL+VCR5μg/mL组、LH40μg/mL+VCR5μg/mL组OD值与VCR5μg/mL组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);LH20μg/mL+VCR5μg/mL组、LH40μg/mL+VCR5μg/mL组OD值与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论VCR明显抑制BMSC生长;LH可促进BMSC生长且具有干预VCR对BMSC增殖的抑制作用。

人脐血造血细胞体外扩增与表面标志的关系

目的：对脐血造血细胞体外扩增及移植的最佳时机选择进行探讨。方法：使用SCF，rIL－3，rIL－1β和rlL－6长期培养人脐血造血细胞，观察其体外扩增与表面标志的变化。结果：培养14天细胞增殖达高峰，28天下降，但仍为第7天的29．88倍。CD细胞第14天达高峰，28天后仍维持一定水平。HLA－DR+细胞培养14～21天达高峰，第35天仍较高。CD细胞培养第7天显著增多，14～21天达高峰，28天后明显下降。结论：此培养体系能够促进脐血造血细胞增殖、扩增，并维持其存活。14天造血细胞数量最多，状态最佳，适于移植。

低分子肝素抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡

目的:探讨低分子肝素对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的作用机制。方法:应用“neurobasal加B27 supplement”体外培养大鼠大脑皮层神经细胞,并在缺氧条件下使用Hoechst 33342荧光染色法、免疫细胞化学染色法观察低分子肝素对原代神经细胞的抗凋亡作用。结果:在250-500 U/L的浓度范围內,低分子肝素能降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率(P<0.05),并且较BDNF(50μg/L)抗凋亡阳性对照组的凋亡率更低(P<0.05)。低分子肝素(500 U/L)增加缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达(P<0.05),减少Bax蛋白的表达(P<0.01),提高Bcl-2/Bax比值(P<0.01)。低分子肝素500 U/L组的Bcl-2/Bax比值比正常对照组、BDNF抗凋亡阳性对照组和凋亡阳性组都高(P<0.05)。结论:低分子肝素通过上调缺氧神经细胞Bcl-2表达和下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值减少缺氧的神经细胞凋亡。

骨髓基质培养上清作用下脐血造血细胞体外生长与表面标志的关系

目的 探讨骨髓基质细胞培养上清 (SN)协细胞因子对人脐血造血细胞体外生长的影响。方法 使用rIL 3,rI 1β ,rIL 6 ,和SCF等细胞因子或SN或者两者联用长期培养人脐血造血细胞 ,进行细胞增殖和表面标志测定。结果 培养 7d细胞已开始增殖 ,14d达高峰 ,细胞总数在细胞因子组 (1)增加了 134.5倍和SN组 (3)增加 81.5倍 ,两者联用 (2 )增加了 171.3倍 ,2 1d开始下降 ,(3)组下降最明显 ,35d时细胞总数为培养前的 (3)组 2 6 .6 5倍 ,(1)组 5 4 .15倍 ,(2 )仍组有 92 .2 5倍。CD34+ 细胞第 7天已升高 ,14d达高峰 ,(1)、(3)组和 (2 )组分别比培养前增加了 6 8.4 3%、6 9.77%和 82 .4 7% ,2 1d开始减少 ,分别比培养前增加 5 6 .16 %、12 .33%和 71.72 % ;CD33+ 细胞 7天时均显著增加 ,14d达高峰 ,分别比培养前增加了 80 .6 7%、82 .14 %和 6 9.6 9% ,2 1d时维持在 14d水平 ;CD38+细胞 7d时均有显著增加 ,分别比培养前增加了 6 6 .6 5 %、70 .4 2 %和 73.8% ,14～ 2 1d均在该水平维持 ,三组间无显著性差异。结论 骨髓基质细胞培养上清可促进脐血造血细胞的增殖 ,但比细胞因子作用弱 ,两者联用时作用明显强于两者分别使用 ,提示骨髓基质细胞还可产生其它物质刺激造血细胞增殖。

骨髓基质细胞上清对脐血造血细胞体外增殖的作用

目的 :探讨骨髓基质细胞培养上清 (SN)对人脐血造血细胞体外扩增的作用。方法 :使用rIL 3 ,rIL 1β,rIL 6和SCF等细胞因子或SN或者两者联用长期培养人脐血造血细胞 ,进行细胞增殖和造血祖细胞集落测定。结果 :脐血造血细胞培养至 2周时 ,细胞总数在细胞因子组增加了 13 4 .5倍和SN组增加 8.15倍 ,两者联用增加了 171.3倍。培养至第 6周时 ,细胞增加减少 ,以SN组最明显 ,为培养前的 2 6.65倍 ,细胞因子组为 5 4 .15倍 ,两者联用仍有 92 .2 5倍。对脐血造血祖细胞增殖的影响 ,在扩增 2周后 ,CFU产率细胞因子组和SN组比扩增前增殖了 2 5 0 %和 2 17% ,两者联用为 2 79%。扩增至第 3周 ,CFU产率下降 ,以前两组最明显 ,比扩增前分别增殖 15 1%和 14 5 % ,两者联用仍增殖了 2 4 0 %。结论 :骨髓基质细胞培养上清可促进脐血造血细胞的增殖 ,但比细胞因子作用弱 ,两者联用时作用明显强于两者分别使用 。

黄精多糖对新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的影响

目的探讨黄精多糖对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护作用。方法采用“Neurobasal加B27Supplement”体外培养新生大鼠大脑皮层神经细胞,使用Hoechst33342荧光染色、免疫细胞化学染色观察黄精多糖对缺氧复氧性神经细胞凋亡的保护作用。结果缺氧前加入500μg/ml^1.5mg/ml的黄精多糖能显著地降低缺氧复氧培养诱导的神经细胞凋亡率,增加缺氧的神经细胞Bcl-2蛋白的表达,减少Bax蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax比值。而缺氧12h后加入黄精多糖则无明显的抗凋亡作用。结论缺氧前加入黄精多糖可以通过上调缺氧神经细胞Bcl-2表达、下调Bax表达和提高Bcl-2/Bax的比值以避免缺氧的神经细胞凋亡。

人参皂甙Rb1抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡研究

目的探讨人参皂甙Rb1对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机理。方法应用“Neurobasal加B2 7Supplement”体外培养大鼠大脑皮层神经细胞 ,并在缺氧条件下使用台盼蓝拒染法、Hoechst 3 3 3 42荧光染色法、免疫细胞化学染色法观察人参皂甙Rb1对原代神经细胞的抗凋亡保护作用。结果在 10— 10 0 μg/ml的浓度范围内 ,人参皂甙Rb1能降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率 (10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5 ) ,增加缺氧神经细胞Bcl 2蛋白的表达 (5 0— 10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5 ) ,同时减少Bax蛋白的表达 (5 0— 10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5—P <0 .0 0 1) ,提高Bcl 2 /Bax比值 (5 0— 10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5 )。 结论在 5 0— 10 0μg/ml的浓度范围内 ,人参皂甙Rb1通过上调缺氧神经细胞Bcl 2表达和下调Bax表达 ,避免缺氧神经细胞凋亡。

黄芪抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡研究

目的 :研究黄芪对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机理。方法 :应用“Neurobasal加B2 7Supplement”体外培养大鼠脑皮层神经细胞并在缺氧条件下使用Trypanblue拒染法、Hoechst 33342荧光染色法、免疫细胞化学染色法 ,观察黄芪对原代神经细胞的抗凋亡保护作用。结果 :在 10mg ml～ 10 0mg ml的浓度范围内 ,黄芪注射液能显著降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率 ,增加了缺氧的神经细胞Bcl 2蛋白的表达 ,同时也减少了Bax蛋白的表达 ,提高Bcl 2 Bax比值。结论 :黄芪对缺氧条件下的神经细胞有直接的抗凋亡作用 ,其作用机理是通过上调Bcl 2蛋白和下调Bax蛋白的表达 ,达到调节缺氧的神经细胞避免凋亡。

抗牙龈卟啉单胞菌IgY的制备及抑菌效果

目的:使用牙龈卟啉单胞菌(P.g)诱导产蛋母鸡特异性IgY抗体产生及制备,特异性IgY抗体抑制P.g及其它牙周病病因菌生长。方法:采用免疫接种、水稀释、盐析、液体培养抑菌及ELISA等方法,诱导、提纯IgY抗体,抑制P.g及其它牙周病病因菌生长。结果:诱导产生的IgY抗体经硫酸铵盐析提取纯度达87.6%～89.1%,IgY特异性结合牙龈卟啉单胞菌抗原的结合效价1∶1600。制备的抗牙龈卟啉单胞菌IgY抗体与牙龈二氧化碳噬纤维菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌等牙周病致病菌的交叉免疫反应抗原结合效价分别为1∶800、1∶800、1∶6400、1∶12800。抗牙龈卟啉单胞菌IgY在5.0、1.0、0.1g/L时,分别与牙龈卟啉单胞菌、牙龈二氧化碳噬纤维菌、伴放线放线杆菌、中间普氏菌、具核梭杆菌、粘性放线菌、变形链球菌等厌氧菌在(1×108)CFU/L和(5×108)CFU/L时培养24h和72h均有不同程度的抑制其生长作用。结论:牙龈卟啉单胞菌免疫产蛋母鸡诱导产生的特异性IgY抗体在一定的浓度内有抑制牙龈卟啉单胞菌生长,以及抑制多种牙周病致病菌生长的作用。牙龈卟啉单胞菌与这些牙周病病因均存在着共同抗原,其可能具有防治牙周病的前景。

脑细胞活性因子对小鼠学习、记忆能力的影响

目的 观察脑细胞活性因子 (BCAF)对小鼠学习、记忆能力提高和改善的作用。方法 通过改良的Morris水迷宫法测试4月龄小鼠 ,并将其分为学习记忆障碍组 (A、B) ,学习记忆减退组 (C、D) ,学习记忆正常组 (E、F) ,以及学习记忆正常加东莨菪碱组(G、H)。每组均设BCAF治疗组 (B、D、F、H)与生理盐水 (NS)对照组 (A、C、E、G)。治疗 14天后 ,再次水迷宫测试小鼠定向航行能力。结果 ①BCAF治疗组 :B、D和F组治疗后平均逃避潜伏期明显缩短 ,治疗前后比较差异十分显著 (均为P <0 .0 0 1)。②NS对照组 :A、C和E组治疗前后平均逃避潜伏期无显著差异 (分别为P >0 .5 ,P >0 .2和P >0 .2 )。③NS的A组与BCAF的B组治疗后比较差异显著 (P <0 .0 2 )。④BCAF加东莨菪碱治疗组 (H组 )与NS加东莨菪碱对照组 (G组 )一样 ,各组治疗前后平均逃避潜伏期比较均无显著差异 (P >0 .2和P >0 .1)。结论 BCAF可提高和改善小鼠学习记忆能力 。

抗伴放线放线杆菌IgY的制备及抑菌试验研究

目的:观察伴放线放线杆菌诱导母鸡产生特异性IgY抗体情况,以及其抑制伴放线放线杆菌(A.a)和牙龈二氧化碳噬纤维菌(C.g)生长效果。方法:应用免疫接种法、水稀释法、盐析法、液体培养抑菌法、以及ELISA法,诱导、提取和纯化IgY抗体,取一定量抗体与细菌共同培养,测定抑制伴放线放线杆菌和牙龈二氧化碳噬纤维菌生长效果。结果:两步硫酸铵盐析沉淀的IgY抗体纯度达85.6%～90.3%;抗原结合效价为1∶32000;抗伴放线放线杆菌IgY抗体与牙龈二氧化碳噬纤维菌交叉免疫反应的抗原结合效价为1∶8000;当抗伴放线放线杆菌IgY抗体浓度在5.0、1.0、0.1g/L时,细菌浓度在5×108CFU/L培养24h其抑菌率分别为31.60%(P=0.004)、10.24%(P=0.024)、-3.30%,培养72h其抑菌率分别为64.20%(P=0.004)、53.21%(P=0.002)、11.20%。细菌浓度在1×108CFU/L培养24h其抑菌率分别为35.71%(P=0.004)、30.95%(P=0.012)、11.11%,培养72h其抑菌率分别为65.11%(P=0.005)、54.04%(P=0.002)、16.17%;5.0g/L的抗伴放线放线杆菌IgY与1×108CFU/L牙龈二氧化碳噬纤维菌培养24h其抑菌率为41.61%(P=0.005),培养72h抑菌率为86.99%(P=0.014)。结论:伴放线放线杆菌能够诱导母鸡产生高效价的特异性IgY抗体,该抗体在一定的浓度内有抑制伴放线放线杆菌和牙龈二氧化碳噬纤维菌生长的作用;伴放线放线杆菌与牙龈二氧化碳噬纤维菌存在着共同抗原。

抗TNF-α、IL-1βIgY抗体抗豚鼠过敏性支气管哮喘的实验研究

目的:探讨抗TNF-α、IL-1βIgY抗体治疗过敏性支气管哮喘的作用机制。方法:卵清白蛋白雾化吸入制备Hart-ley豚鼠过敏性支气管哮喘动物模型,随机分正常对照组(A组)、过敏性支气管哮喘模型组(B组)、0.1%抗TNF-α、IL-1βIgY(C组)和1.0%抗TNF-α、IL-1βIgY雾化吸入治疗组(D组)。各组豚鼠治疗结束后2、4、8、24小时处死,肺组织切片H.E.染色;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)Wright’s染色计数炎症细胞。结果:①肺组织病理改变:B组各时间点可见肺泡管和肺泡壁结构受损,肺泡腔内充满渗出液、上皮细胞和白细胞,肺间质水肿、炎性细胞浸润、毛细血管扭曲或扩张淤血、有效血流的毛细血管显著减少。C组和D组肺泡管和肺泡壁结构受损轻于B组,肺泡腔内偶见少量炎症细胞,支气管腔及肺泡中的粘液栓较B组明显减少,支气管周围少见炎性细胞浸润,支气管粘膜上皮修复现象明显。②BALF细胞学变化:与B组相比,C和D组嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数量显著下降(2、4、8小时,P均<0.05);巨噬细胞显著上升(2、4、8小时,P均<0.05)。结论:抗TNF-α、IL-1βIgY抗体雾化吸入治疗豚鼠过敏性支气管哮喘能够显著减轻炎症病理反应。0.1%与1.0%的抗TNF-α、IL-1βIgY抗体疗效相当。

神经活性物质对小鼠学习记忆能力及耐力的影响

目的观察神经活性物质 (胚脑组织提取物 ,NAF)对小鼠学习、记忆能力提高的作用 ,以及对小鼠耐力的影响。方法采取随机分组法 ,将 51只小鼠按体重等分 ,分为 5个实验组 :生理盐水组 (A) 9只、脑活素组 (B) 1 1只和 3个不同浓度 (C :0 1mg,1 0只、D :0 2mg,1 0只、E :0 4mg ,1 1只 )的NAF治疗组。用自制的复杂迷宫检测小鼠的迷宫觅食时间及行走的错误次数 ,测定小鼠负重5%体重游泳至淹死的时间。结果迷宫觅食时间A组治疗前后无明显差异 (P >0 1 ) ,B、C、D、E组治疗后缩短或明显缩短 (P <0 0 5- 0 0 0 1 ) ;治疗前后小鼠行走的错误次数A组和B组无显著性差异 (P >0 2 - 0 5) ,C、D、E组有非常显著性差异 (P <0 0 2 - 0 0 1 ) ;小鼠负重 5 %体重游泳淹死时间 5组间方差分析有显著性差异 (P <0 0 5) ,进一步分析差异来自于C与E组 (P <0 0 5)和D与E组(P <0 0 1 )。结论NAF可提高小鼠的学习、记忆能力 ,也可增强小鼠的耐力。腹腔注射≥ 2 0mg kg体重时 。

肝素对人髓系白血病K562细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨肝素对长春新碱诱导的人髓系白血病K562细胞增殖及凋亡的影响。方法：肝素（5、25、50、100、200U／mL）处理K562细胞1h后，加入长春新碱（0．05μg／mL）24h，应用Trypan blue拒染法和MTT法检测不同浓度肝素对K562细胞增殖的影响，DNA琼脂糖凝胶电泳检测肝素对长春新碱诱导的K562细胞凋亡的影响。结果：肝素各组的细胞数量与对照组之间差异均无统计学意义（P均〉0．05），肝素各组的OD值与对照组之间差异均无统计学意义（P均〉0．05）；肝素在5～200U／mL的浓度时能够抑制长春新碱诱导的K562细胞凋亡及DNA凋亡梯带的形成。结论：不同浓度肝素对K562细胞无毒，无刺激或抑制作用，但可抑制由长春新碱诱导的K562细胞凋亡。

急性淋巴细胞白血病免疫分型研究

使用一组单克隆抗体及抗ＩｇＭ多抗对２４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞表面抗原标志进行分析。结果表明：急性非Ｔ细胞白血病（Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ）为６２．５０％，急性Ｔ细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）为２９．１７％，急性未分化型白血病（ＡＵＬ）为４．１７％，急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ－Ⅱ）为４．１７％。Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ－Ⅰ型以ＨＬＡ－ＤＰ＋，Ⅱ型以ＣＤ１９＋，Ⅲ型以ＣＤ１０＋，Ⅳ型以ＣＤ２０＋，Ⅵ型以ＳＩｇＭ＋为诊断条件。Ｔ－ＡＬＬ－Ⅰ期以ＣＤ７＋、Ⅲ期以ＣＤ３＋、ＣＤ４＋或ＣＤ８＋为诊断条件，其它表面抗原变化不定。Ｔ－ＡＬＬ中ＨＬＡ－ＤＰ表达率达４２．８６％。２４例ＡＬＬ中３例为Ｂ－Ｔ杂合型白血病，占１２．５０％，均分布在Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ之中。ＦＡＢ形态学分型符合率为９５．６５％。非诊断性表面抗原标志的变化是进一步分亚型的依据，也可能与药物敏感性等治疗和预后相关。

脑细胞活性因子治疗小儿脑瘫5例临床观察

目的:观察脑细胞活性因子对脑瘫的治疗效果。方法:门诊随机选取年龄为7～32个月的病例重症脑瘫患儿给予脑细胞活性因子治疗,3个月为1个疗程并判断结果。结果:5例重症脑瘫患儿经脑细胞活性因子治疗1个疗程后,显效者4例,有效者1例。结论:脑细胞活性因子对重症脑瘫患儿有促进康复的作用,治疗时机与年龄大小有密切关系。

神经活性物质对小鼠学习记忆能力及耐力的影响

目的 :观察神经活性物质 (胚脑组织提取物 ,NAS)对小鼠学习、记忆能力提高的作用 ,以及对小鼠耐力的影响。方法 :用自制的复杂迷宫检测小鼠的迷宫觅食时间及行走的错误次数 ,测定小鼠负重 5 %体重游泳至淹死的时间。将实验动物随机分为五组 :生理盐水组 (A)、脑活素组 (B)和三个不同浓度 (C :0 .1mg、D :0 .2mg、E :0 .4mg)的NAS治疗组。结果 :①A组迷宫觅食时间治疗前后无显著性差异 (P >0 .1) ,B、C、D、E组治疗后迷宫觅食时间缩短 ,治疗前后有显著性差异或有非常显著性差异 (依次为P <0 .0 0 5、P <0 .0 5、P <0 .0 0 1、P <0 .0 0 1) ;②治疗前后小鼠行走的错误次数A组和B组无显著差异性 (P >0 .2和P >0 .5 ) ,C、D、E组有显著性差异 (依次为P <0 .0 2、P<0 .0 2、P <0 .0 1) ;③小鼠负重 5 %体重游泳 ,其淹死的时间五组方差分析有显著性差异 (P <0 .0 5 )。但组间比较只有C组与E组 (P <0 .0 5 )和D组与E组 (P <0 .0 1)有差异。结论 :NAS可提高小鼠的学习、记忆能力 ,也可增强小鼠的耐力。但其腹腔注射≥ 2 0mg/kg组体重时 ,小鼠的耐力反而下降。