Survivin基因在喉癌中的表达及意义

目的 研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术,研究42例喉癌标本、20例癌旁组织、20例喉角化症、10例正常喉黏膜中Survivin 蛋白的表达情况;并用RT-PCR技术检测喉癌细胞株Hep-2中Survivin mRNA的表达。结果 正常喉黏膜中无Survivin表达, 喉癌组织中Survivin 蛋白的表达 (66.6 %) 明显高于癌旁组织 (40.0 %)和喉角化症(35.0 %)(P<0.001),喉癌组织中Survivin表达与临床分期、病理分级及有无颈淋巴结转移无明显相关性(P > 0.05)。喉癌细胞株Hep - 2中有较强Survivin mRNA的表达。结论 Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的高表达可能与喉癌的发生关系密切,具体机制有待于进一步研究。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征围手术期并发症的预防及处理

目的总结阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者围手术期并发症的预防及处理。方法分析98例OSAHS患者的临床资料,术前高血压、糖尿病及心脏病者均对证治疗。81例选择全麻(82.7%),17例选择局麻(17.3%)。同期或术前1周行气管切开36例,占本组全麻患者的44.44%),其中体重指数超过正常上限29例,最低血氧饱和度<50%29例,同时行鼻部手术者5例,心脏异常或伴高血压20例。结果1例局麻下气管切开时出现心率、血氧下降,气管切开待病情稳定后再手术;1例全麻术后拔除气管插管后出现呼吸抑制,重新气管插管;术后创口出血1例,再次全麻止血;短期进食返呛23例(23.5%)。结论重视OSAHS患者术前检查并对症治疗,以减少术中、术后心脑血管并发症;全麻患者应严格掌握拔管指征,待患者意识完全清醒后拔管;严重肥胖、重度OSAHS最低血氧饱和度<50%或伴有较重的心血管合并症或同时行鼻部手术者,气管切开术可降低严重并发症的发生。

Survivin反义RNA真核表达载体的构建

目的构建Survivin反义RNA表达载体,从基因水平靶向封闭Survivin功能,为探讨喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法将Survivin大部分编码序列cDNA片段反向插入pEGFPC1载体,构建Survivin反义RNA表达载体。用脂质体转染技术将重组质粒转染人喉癌细胞株Hep2,并利用G418(300mg/ml的维持浓度)筛选,获得稳定细胞株(命名为HpEGFP/Survivin)。用蛋白免疫印迹Westernblot从蛋白质水平检测反义SurvivinRNA封闭Survivin的表达效果。结果构建的Survivin反义RNA表达载体(命名为pEGFP/Survivin),经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性。蛋白免疫印迹Westernblot结果表明,构建的Survivin反义RNA表达载体转染人喉癌细胞株Hep2,从蛋白水平抑制了Survivin的表达,抑制率为30%。说明反义SurvivinRNA载体构建成功。结论构建的Survivin反义RNA表达载体从蛋白水平抑制了Survivin的表达,可以进一步用于抑制Survivin基因表达的实验研究。

Survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒的构建

目的构建survivin小干涉RNA和干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid interferon induced mortality-19,GRIM-19)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法以survivin小干涉RNA重组质粒pGCsilencer-siRNA-survivin(简称psi-survivin)为模板设计PCR引物,PCR产物经测序后与线性化pCDNA3.1-GRIM-19(简称p-GRIM-19)连接,构建survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒pCDNA3.1-siRNA survivin/GRIM-19(简称p-siRNA survivin/GRIM-19)。将质粒用脂质体lipofetamine2000包裹转入人喉癌Hep-2细胞中,用半定量RT-PCR检测survivin和GRIM-19 mRNA的含量。结果构建的survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒p-siRNA survivin/GRIM-19经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性,p-siRNA survivin/GRIM-19转染人喉癌Hep-2细胞,从mRNA水平能降低survivin的表达,抑制率55.9%,同时增加GRIM-19表达,表明共表达质粒的构建是成功的。结论构建的siRNA survivin和GRIM-19共表达质粒从mRNA水平能降低survivin的表达,同时增加GRIM-19表达,为进一步实验奠定了基础。

低温等离子刀扁桃体腺样体切除术后出血原因及预防的探讨

目的探讨应用低温等离子刀行儿童扁桃体及腺样体切除术后出血的原因及预防。方法回顾分析2010年11月～2013年2月188例患儿应用低温等离子刀行扁桃体及腺样体切除术,年龄19个月～12岁,平均(5.3±3.1)岁,其中单纯行扁桃体切除60例,同时行扁桃体及腺样体切除69例,单纯行腺样体切除59例。结果 4例发生术后出血,其中3例为术后7～10 d,1例为术后24 h内,均为扁桃体切除术后出血,无腺样体切除术后出血病例。结论患儿自身因素及术者的操作水平是导致术后出血的重要原因,术前及术后宣教及护理、术中充分止血及较高的手术技巧是减少术后出血的关键。

CO2激光治疗早期声门型喉癌临床疗效分析

目的评价显微镜下支撑喉镜下CO2激光治疗早期声门型喉癌的临床疗效、术后并发症、患者生存情况、复发相关因素以及术后嗓音功能恢复情况。方法 回顾性分析吉林大学第二医院耳鼻咽喉头颈外科2014年1月~2018年12月间收治的早期声门型喉癌患者40例,评价CO2激光手术的近期和远期临床疗效、术后并发症及复发相关因素、黏膜恢复情况以及嗓音功能恢复情况等。结果 对40例患者进行术后随访,随访时间6个月~5年,其中失访6例,随访者无死亡病例,术后半年出现远处转移1例,术后1年于对侧声带出现癌变1例,局部复发2例。术后创面完全愈合期为(3.2±0.3)个月。18例患者出现新生声带,与无声带新生组相比,嗓音质量具有显著差异。患者术后生存质量高,喉保留率达97.5%。术后并发症少,2例出现声带粘连,1例出现术后出血,2例出现舌体麻木,2例出现误咽及呛咳,余患者均未出现严重并发症。结论 CO2激光对于治疗早期声门型喉癌临床疗效显著,对患者病变范围准确评估后进行CO2激光下内镜下声带病变切除后喉功能保留率高、并发症少、复发率低、损伤小恢复快,术后患者生活质量及发音质量均明显提高,是早期声门型喉癌安全有效的治疗方法。

咽喉反流与老年患者耳鼻喉科疾病相关性研究进展

咽喉反流性疾病（LPRD）是胃食管反流疾病的食管外反流表现，反流的胃内容物到达临近上呼吸道的食管上括约肌以上部位，引起包括鼻咽、口咽、喉咽等部位的一系列症状和体征的总称。LPRD与诸多老年耳鼻喉科疾病如声带良恶性病变、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）、鼻窦炎、喉狭窄及慢性阻塞性肺疾病等发病相关，咽喉反流（LPR）不是一个独立的疾病，往往患者无特异性临床症状及体征，易被误诊或漏诊。

Nd:YAG激光治疗耳鼻咽喉囊肿123例疗效观察

目的:探讨Nd:YAG激光治疗耳鼻咽喉囊肿的疗效。方法:表面麻醉或局部浸润麻醉下,Nd:YAG激光治疗会厌囊肿51例,鼻咽咽囊囊肿15例,扁桃体囊肿46例,耳廓假性囊肿6例,鼻前庭囊肿5例。结果:术后1个月至年复诊。所有复诊的耳廓假性囊肿(6例)和扁桃体囊肿(41例)病人均一次性治愈,无复发。鼻咽咽囊囊肿1例、扁桃体囊肿5例、会厌囊肿6例治疗后失访。1例鼻咽咽囊囊肿病人术后仍有少许后鼻滴涕症状,一个月后行二次YAG激光治疗,治愈。两例巨大会厌囊肿病人术后一个月复查时发现原发囊肿部位仍有小囊肿存在,行二次YAG激光治疗,治愈。1例鼻前庭囊肿1月后复发,改行唇龈沟切口切除,术中见粘连较重。结论:Nd:YAG激光治疗会厌囊肿、鼻咽咽囊囊肿、扁桃体囊肿是一种较为理想的方法,值得推广使用。而耳廓假性囊肿与鼻前庭囊肿,Nd:YAG激光治疗局部反应较重,打孔处有瘢痕,未推广使用。

新城疫病毒致Hep-2肿瘤细胞死亡方式的研究

目的研究新城疫病毒弱毒株致Hep-2肿瘤细胞死亡方式及其作用机制。方法应用AO/EB染色、电子显微镜观察、DCFA染色测定细胞内活性氧水平及罗丹明123染色法测定细胞线粒体膜电位等方法分析新城疫病毒弱毒株致Hep-2肿瘤细胞的死亡方式及途径。结果新城疫病毒弱毒株感染能够导致Hep-2肿瘤细胞浓缩,被AO/EB浓染,细胞核缩小,染色质边集。FACS细胞周期分析显示,感染后的Hep-2肿瘤细胞72 h出现二倍体亚峰,G1期细胞凋亡率为8.59%,电子显微镜观察显示,肿瘤细胞核染色质边集、浓缩,细胞核呈固缩状,呈现典型的凋亡形态。另外,细胞内活性氧水平上升,线粒体膜电位下降。结论新城疫病毒弱毒株主要通过细胞内线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡,从而发挥其抑瘤作用。

鼻内镜下低温等离子射频切除鼻咽肿瘤

低温等离子射频系统具有消融、切割、止血、冲洗、吸引等功能,工作温度低,对周围组织损伤小等优势。较广泛应用于一些耳鼻咽喉头颈外科疾病的治疗,已从开始的低温等离子射频扁桃体切除、腺样体切除、喉乳头状瘤切除,

耳鼻咽喉科网络化图像教学资源整合模式的构建及其在临床教学中的应用

耳鼻咽喉头颈外科学专业性强,解剖生理、影像学、疾病发展及转归知识复杂,难以直观理解,在教学上存在一定难度。根据耳鼻咽喉头颈外科学教学特点,本研究建立耳鼻咽喉科"网络化图像教学资料库",将各种疾病的发生、发展、转归的过程以高清内镜和影像学图像表现出来,同时结合术中手术视频资料及术后病理学资料增加学生的学习兴趣和对疾病的认知。将该网络化资料库应用于临床实践教学中,丰富教学内容、加强教学的实践性和应用性,有效提升教学质量。

白细胞介素-5和白细胞介素-16在变应性鼻炎患者血清中的表达及临床意义

目的探讨白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)和白细胞介素-16(interleukin-16,IL-16)在变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者血清中的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测64例持续性AR患者及20例正常对照组血清中IL-5、IL-16水平,并分析与AR之间的相关性。结果与对照组相比,持续性AR患者血清中IL-5、IL-16均明显升高(P<0.05)。持续性中重度组患者血清中IL-5、IL-16水平均明显高于持续性轻度组,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。持续性AR患者血清中的IL-5与IL-16水平呈正相关(r=0.566,P<0.05)。结论 IL-5、IL-16参与变应性鼻炎的发生发展,二者在AR的临床诊断、治疗中具有广阔应用前景;IL-16具有较高特异性,对AR患者早期诊断具有重要临床意义。

慢性鼻前庭炎的激光治疗

探讨应用Nd:YAG激光治疗顽固性慢性鼻前庭炎。方法:采用Nd:YAG激光鼻前庭照射、凝固,治疗顽固性慢性鼻前庭炎,随访2-9年。结果:31例病人中,5例失访;11例反复发作者中仅有一例2年后复发,再次Nd-YAG激光治疗。治疗随访的26例病人,至今病变无再复发。结论:Nd-YAG激光治疗顽固性慢性鼻前庭炎是非常有效的方法。

半完壁式乳突病变切除鼓室成形术在中耳后天原发性胆脂瘤治疗中的应用

目的:研究半完壁式乳突病变切除鼓室成形术治疗中耳后天原发性胆脂瘤的疗效。方法:行半完壁式乳突病变切除鼓室成形术治疗中耳后天原发性胆脂瘤21例,同期行开放式乳突切开鼓室成形术治疗中耳后天原发性胆脂瘤28例,两组进行对照研究。结果:平均干耳时间:半完壁式(18.0±1.7)d,开放式为(21.0±3.0)d,差异有统计学意义。随访6～18个月,半完壁式术后外耳道形态和功能正常,外耳道无结痂及分泌物,无胆脂瘤复发。半完壁式和开放式术后气骨导差分别为(21.7±5.6)dBHL和(27.0±7.0)dBHL,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:半完壁式乳突病变切除鼓室成形术治疗中耳后天原发性胆脂瘤,术后干耳快,有利于去除病灶,听力改善满意,值得推广。

扁桃体炎的Nd：YAG激光治疗及其机理的研究

目的:探讨慢性扁桃体炎患者经Nd:YAG激光治疗前后T淋巴细胞亚群的变化特点及临床意义。方法:采用流式细胞仪检测正常健康人及慢性扁桃体炎患者激光治疗前后外周血中T淋巴细胞亚群(CD_3、CD_4、CD_8)水平。结果:慢性扁桃体炎患者外周血中CD_3^+、CD_4^+及CD_4^+/ CD_8^+均显著低于正常对照组(P<0.01),CD_8^+细胞则明显高于正常对照组(P<0.05)。经激光治疗后,CD_3^+、CD_4^+及CD_4^+/CD_8^+水平较治疗前明显升高(P<0.01),达到正常对照组水平(P>0.05),CD_8^+水平则较治疗前下降(P<0.01),接近正常对照组水平(P>0.05)。结论:慢性扁桃体炎患者机体细胞免疫功能受到抑制,导致机体免疫力下降。而通过Nd:YAG激光治疗提高了机体的免疫力,而且对机体损伤小,同时减少了复发次数,避免了手术摘除。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的蛋白质组学研究

目的 通过血清蛋白质组学方法分析阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的蛋白质表达差异,并分析差异蛋白对临床诊断的价值。方法 纳入10例OSAHS患者和10例健康受试者作为训练组,对外周血清进行蛋白质组学研究,筛选出有差异表达显著的蛋白,并进行生物信息学分析;继续纳入33例OSAHS患者和25名健康受试者作为验证组,检测外周血清中差异蛋白的表达水平,并结合已有文献,分析有意义的差异蛋白对临床诊断的价值。结果 与健康受试者相比,OSAHS患者血清表达上调蛋白32个,表达下调蛋白44个。与健康受试者相比,OSAHS患者血清差异表达蛋白主要与免疫功能、细胞分泌和金属离子结合等相关。KEGG通路富集结果显示,差异蛋白主要富集在唾液分泌(salivary secretion)和胃酸分泌(gastric acid secretion)通路中。ROC曲线分析结果显示,超氧化物歧化酶(SOD)预测OSAHS的曲线下面积(AUC)为0.878(95%CI=0.788~0.967),敏感度为0.840,特异度为0.758;过氧化氢酶(CAT)预测OSAHS的AUC为0.845(95%CI=0.731~0.959),敏感度为0.840,特异度为0.788。结论 OSAHS患者与健康受试者血清差异表达蛋白主要与与免疫功能、细胞分泌和金属离子结合等相关。OSAHS患者血清SOD和CAT表达均显著下降,SOD和CAT对OSAHS均具有一定的诊断效能。

1479例未通过新生儿听力筛查的婴幼儿听力评估结果分析

目的采用“两步骤诊断法”对长春地区1479例初筛、复筛未通过听力筛查的婴幼儿进行听力学评估，以鉴定其听力障碍的发病情况，并确定听力障碍类型及听力损失程度。方法研究对象为2011年7月～2016年6月在长春市妇幼保健院进行新生儿听力筛查2次未通过、疑为听力障碍并转诊到我院听力筛查鉴定中心就诊的婴幼儿，共1479例，常规行“两步骤诊断法”进行听力鉴定：第一步采用畸变产物耳声发射（DPOAE）＋自动听性脑干反应（AABR）＋声导抗检查做初步诊断，对未通过初诊者进入第二步骤（确定诊断），包括听性脑干反应（ABR）、多频听性稳态反应（ASSR）进行听力学评估及鉴定，必要时辅助颞骨高分辨CT扫描。对所有病例都进行密切的跟踪随访。结果我院共接诊由长春市妇幼保健院转诊的婴幼儿1479例，经初步诊断法通过1360例（视为听力正常者），通过率为92％；经第二诊断步骤确诊听力障碍者119例，占8．0％，其中传导性聋44例：包括分泌性中耳炎40例，先天性外耳道闭锁4例，其中双耳2例，单耳2例，确诊感音神经性聋75例，40例为重度听力损失，35例为极重度听力损失，影像学资料确诊为大前庭导水管综合征15例。结论①新生儿听力筛查目前仍存在较高的假阳性率，采用畸变产物耳声发射（DPOAE）＋自动听性脑干反应（AABR）＋声导抗联合初步诊断法可以快速、便捷、准确的排除假阳性结果。②“两步骤诊断法”对于听力障碍的婴幼儿可以做到早发现、早诊断，利于早期干预。

泪小点进路鼻内镜下Nd∶YAG激光泪囊鼻腔造孔术治疗慢性泪囊炎

目的探讨泪小点进路鼻内镜下激光泪囊鼻腔造孔术治疗慢性泪囊炎的方法及疗效。方法鼻内镜下Nd∶YAG激光光纤由泪小点进路行泪囊鼻腔造孔治疗慢性泪囊炎患者37例38只眼。术前均行泪道探查,排除泪小点、泪小管及泪总管阻塞及闭锁。随访6个月。结果 37例38只眼慢性泪囊炎患者,治愈32只眼(其中包括1例双眼患者),治愈率为84.2%;好转5只眼,占13.2%;无改善1只眼,占2.6%。总有效率达97.4%。结论泪小点进路鼻内镜下Nd∶YAG激光泪囊鼻腔造孔术治疗慢性泪囊炎具有操作简便,定位准确,创伤小,出血少,疗效好、费用低等优点,是一种新型微创术式。