2018-2022年浙江省钩端螺旋体病流行特征与时空聚集性分析

目的分析2018-2022年浙江省人间钩端螺旋体病(钩体病)的流行特征与时空分布特点,为制定钩体病防控策略提供科学依据。方法钩体病数据来源于中国疾病预防控制信息系统,采用描述性流行病学方法进行分析。应用ArcMap 10.8软件进行空间自相关分析和结果可视化展示,通过SaTScan 10.1.2软件进行时空扫描,分析和描述钩体病时空聚集性特征。结果浙江省2018-2022年共报告人间钩体病病例255例,包含1例死亡病例,年均发病率为0.0843/10万,年均死亡率为0.0003/10万。8月至10月为浙江钩体病高发月份,病例以45~86岁的中年及老年人为主(221例,86.67%),65~69岁年龄组发病人数最多(57例),男女比例为4.67∶1,职业主要为农民(190例,74.51%)。温州市和丽水市的5年累计发病数(201例)占总发病数的78.82%。2018-2022年全局空间自相关分析表明全省钩体病发病率呈现空间正自相关;局部空间自相关分析显示,“高-高”聚集区主要集中在浙江省南部山地丘陵地带的温州市、丽水市和台州市。时空扫描分析在浙江省南部发现3个高发聚集区域。结论浙江省钩体病发病呈现明显的地区聚集性和季节性,高发区域主要位于浙江南部的山地和丘陵地区,病例以中老年男性农民为主,需加强农村居民健康教育,防范潜在流行风险。

白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制研究

目的:探讨白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制。方法:Caco-2细胞建立体外肠道吸收模型,将细胞分别设为空白对照组、抑制剂(SGLT1抑制剂根皮苷、P38MAPK抑制剂SB203580、Ezrin抑制剂NSC668394)组、白术内酯Ⅰ组、白术内酯Ⅰ+抑制剂组,采用2-NBDG测定白术内酯Ⅰ对Caco-2细胞葡萄糖摄取的影响;Western Blot法检测SGLT1、p-P38MAPK、p-MAPKAPK2、p-AKT2、p-Ezrin、MLCK、p-MLC、NHE3等蛋白表达,荧光定量PCR检测SGLT1、MLCK、NHE3 mRNA表达。结果:白术内酯Ⅰ促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,上调SGLT1、NHE3、MLCK的表达;此外,白术内酯Ⅰ增加了MLCK和P38MAPK/Ezrin信号通路中的蛋白磷酸化。结论:白术内酯Ⅰ可激活SGLT1促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,通过P38MAPK/Ezrin信号通路上调其下游靶点NHE3和MLCK促进水钠吸收是其治疗腹泻的机制之一。

虎金方对MAFLD小鼠脂质代谢相关因子的影响

目的:探讨虎金方对MAFLD模型小鼠脂质代谢相关因子的影响及治疗作用。方法:将50只SPF级健康雄性C57/BL6J小鼠随机分为5组:正常对照组、模型组及虎金方高(21.24 g/kg)、中(10.62 g/kg)、低(5.31 g/kg)剂量组,每组10只。正常对照组予低脂饲料进行喂养,其余各组予高脂饲料进行喂养。造模成功后,虎金方各剂量组灌胃相应浓度药液,其余各组灌胃相应体积生理盐水,1次/d,共4 w。末次给药后,采血用于检测血脂及肝功能。分离适量肝组织投入4%多聚甲醛溶液内用于制作病理切片,其他肝组织用于检测脂质代谢相关因子的基因表达。结果:与正常对照组比较,模型组中TC、TG、ALT、AST水平显著升高(P<0.01);HE及油红O染色观察结果显示,在小鼠的肝组织内可见分布较多脂肪空泡,肝细胞体积增大,部分组织细胞呈气球样病变,红色脂滴分布广泛;RT-PCR结果显示肝组织mTOR、S6K1、LXRα、FAS、SCD1 mRNA表达显著升高,ACC mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,虎金方各剂量组TC、TG、ALT、AST水平显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织内脂肪空泡明显减少,仅部分仍可见散在脂滴,其中以高剂量组改善尤为明显;虎金方各剂量组肝组织mTOR、S6K1、LXRα、FAS、SCD1 mRNA表达显著降低,ACC mRNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:虎金方对MAFLD小鼠有一定治疗作用,其机制可能与调控脂质代谢相关因子,抑制脂质积累,促进脂质代谢有关。

白藜芦醇和姜黄素联用对油酸诱导HepG_(2)细胞脂肪变性的抑制作用

目的:探讨白藜芦醇和姜黄素联用对HepG_(2)细胞脂肪变性的抑制作用及可能机制。方法:以油酸钠体外诱导HepG_(2)细胞产生脂肪变性,并分别以白藜芦醇单体、白藜芦醇-姜黄素联用、姜黄素单体进行干预,采用CCK-8法测定细胞活力;油红O染色法观察脂滴分布;生物试剂盒测定细胞内TG、HDL-C、LDL-C含量;ELISA法测定各组细胞SIRT1含量。结果:以400μmol/L油酸钠诱导HepG_(2)细胞时,细胞活力不受抑制且细胞内TG含量和脂滴分布均显著高于正常细胞。白藜芦醇-姜黄素(12∶1)联用可显著降低油酸钠诱导HepG_(2)细胞引起的脂滴分布增加及TG、LDL-C含量升高,并可上调其SIRT1蛋白表达水平。结论:白藜芦醇-姜黄素联用可显著抑制油酸钠诱导的HepG_(2)细胞脂肪变性,其抑制作用优于白藜芦醇单体或姜黄素单体,其作用机制可能与上调SIRT1蛋白表达有关。

火麻仁油藻油组合物与丹参山楂三七组合物联用对代谢相关脂肪性肝病模型小鼠的改善作用及机制探讨

目的 探讨火麻仁油藻油组合物(商品名:悦通凝胶果糖,简称YT)与丹参山楂三七组合物(商品名:怡瑞胶囊,简称YR)在小鼠代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)中的改善作用和分子机制。方法 采用高脂饮食(High Fat Diet,HFD)诱导C57BL/6J小鼠高脂模型6周,随后干预组分别采用YT、YR和高、低剂量YT+YR灌胃给药10周。16周后,检测各组小鼠血清脂质沉积、肝功能、炎症因子和氧化应激水平,分析肝脏组织病变程度,并采用RT-PCR和Western Blot技术分别测定氧化应激通路和NLRP3炎性小体的表达水平。结果 表观特征观察显示,模型组小鼠体质量、腹部脂肪增多,肾周脂肪指数升高(P<0.01);给药后肾周脂肪指数明显下降(P<0.05,P<0.01)。YT+YR高剂量组,能降低血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)水平,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,改善MAFLD组织病理学评分,降低肝脏指数及血清TNF-α、IL-1β、IL-18水平,升高Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达水平,升高NQO-1的mRNA,降低NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β及IL-18的mRNA和蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 YT、YR可通过抑制NLRP3炎症小体的激活,增强Nrf2信号通路,调控氧化应激反应,从而改善高脂饮食诱导的MAFLD肝脏脂质沉积和炎症浸润,且YT+YR联合应用较单用更具优势。

直立锁边曲线型屋面防渗漏控制技术

铝镁锰板直立锁边曲线型屋面渗漏现象时有发生,为此通过BIM+Fuzor软件建立屋面模型,找出暴风、暴雨和暴雪天气条件下屋面渗漏水易发部位,优化屋面排水及关键节点施工方案。研发直立锁边曲线型屋面卷材防水压槽密封装置,解决屋面固定支座施工破坏防水卷材完整性的问题,保证防水卷材的有效性。采用无缝焊接铝镁锰板代替泛水板,解决直立锁边曲线型屋面天窗侧边泛水板收口易渗漏的问题。

补中益气汤及益气升阳配伍对脾气虚大鼠药理效应的影响

【目的】观察补中益气汤及益气升阳配伍(黄芪—升麻、柴胡)对脾气虚大鼠药理效应的影响。【方法】采用大黄法、游泳力竭法、饥饿法3因素复合的方法复制脾气虚大鼠模型,造模成功后,将动物随机分成正常对照组、脾气虚模型组、补中益气汤组(12 g.kg-1.d-1)、益气升阳组(4.5 g.kg-1.d-1)和原方去益气升阳组(7.5 g.kg-1.d-1),给药14 d后测定各组大鼠胃黏膜血流量、肌酸激酶活性、D-木糖血清浓度及淀粉酶活性。【结果】与脾气虚模型组比较,补中益气汤组能显著提高脾气虚大鼠胃黏膜血流量、血清D-木糖浓度、淀粉酶活性及血清肌酸激酶活性(均P<0.05),而益气升阳组和原方去益气升阳组除了能显著提高淀粉酶活性外(P<0.05),对其他3项指标均无显著影响(P>0.05)。【结论】补中益气汤能有效改善脾气虚大鼠的相关药理指标,益气升阳配伍是方中不可或缺的重要组成部分。

补中益气汤治疗慢性浅表性胃炎脾气虚证的代谢组学研究

【目的】研究补中益气汤对慢性浅表性胃炎脾气虚证患者尿液代谢组学的影响。【方法】记录26例慢性浅表性胃炎脾气虚证患者四诊资料,并收集其治疗前、治疗4周和8周后的尿液进行核磁共振氢谱(1H-NMR)检测,综合使用多变量统计分析方法 [主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和重复测量资料的方差分析]探讨相关代谢标志物的含量变化。【结果】(1)26例患者中,10例仅坚持治疗4周,16例完整随访8周。治疗4周后的总有效率为84.6%,治疗8周后的总有效率为100.0%,治疗8周后的疗效优于治疗4周后(P<0.05)。(2)证候积分方面,治疗4周和8周后均较治疗前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)主成分分析法(PCA)和偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)分析结果显示,补中益气汤治疗前后患者尿液代谢表型有明显差异,并在尿液中鉴定了与补中益气汤治疗相关的10种生物标志物。【结论】补中益气汤治疗慢性浅表性胃炎脾气虚证的作用机制可能与提高机体能量代谢、调整肠道菌群代谢有关。

脾气虚证4种造模方法的比较研究

【目的】比较不同造模方法的实验结果,筛取最接近中医证候的有效的脾气虚证造模方法。【方法】选用SD大鼠分别采用酒醋硝黄饲料法、酒硝黄灌胃法、大黄灌胃法和利血平法复制脾气虚证模型,造模成功后,比较各模型组与正常对照组大鼠的体质量、脾指数、胸腺指数以及血清肌酸激酶(CK)与淀粉酶(Ams)活性之间的差异,筛选出最科学可行的造模方法。【结果】与正常对照组比较,喂饲酒醋硝黄饲料组大鼠的体质量、脾指数、胸腺指数、血清肌酸激酶与淀粉酶活性均显著降低(P<0.05),其他3组各项指标均有不同程度降低。【结论】酒醋硝黄饲料法为本研究4种造模方法中最理想、有效、接近中医脾气虚证候的大鼠模型的造模方法。

补中益气汤配伍对脾气虚大鼠胃泌素及其基因表达的影响

目的研究补中益气汤及其配伍对脾气虚大鼠胃泌素(GAS)及GAS mRNA表达的影响,并探讨相关作用机制。方法以大黄、游泳力竭、饥饿三因素复合方法复制脾气虚大鼠模型,造模成功后,将SD大鼠随机分为正常对照组、脾气虚模型组、补中益气汤组、黄芪-升麻、柴胡配伍组和减方组(原方去"黄芪-升麻、柴胡"配伍组),给药14 d后测定大鼠血清GAS含量和GAS mRNA。结果与脾气虚模型组比较,补中益气汤组能有效升高脾气虚大鼠GAS含量(P<0.01)并增强GAS mRNA的表达(P<0.01),而黄芪-升麻、柴胡配伍组和减方组对脾气虚大鼠GAS含量及GAS mRNA的表达影响不大(P>0.05)。结论补中益气汤能显著提高GAS及GAS mRNA的表达来改善脾气虚,推测是其治疗脾气虚证的机制之一,"黄芪-升麻、柴胡"配伍是方中不可或缺的重要组成部分。

补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响

目的探讨补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响。方法采用"大黄+利血平+控制饮食"的多因素法建立脾虚泄泻大鼠模型,连续造模15 d;大鼠随机分为正常组,模型组,补中益气汤低、中、高剂量组(4.67,9.35,18.70 g·kg-1),连续给药15 d;观察并计算大鼠腹泻指数;测定大鼠肠黏膜Na+-K+ATP酶的活性;Western Blot法检测钠依赖性葡萄糖转运体(SGLT1)、葡萄糖转运体2(GLUT2)、钠-氢交换体3(NHE3)、p38MAPK、p-p38MAPK、MAPKAPK2、p-MAPKAPK2、Akt2、p-Akt2、Ezrin、p-Ezrin蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠小肠黏膜Na^+-K^+ATP酶活性显著降低(P<0.01),小肠黏膜中SGLT1、GLUT2、NHE3、p-p38MAPK、p-MAPKAPK2、p-Akt2、p-Ezrin蛋白相对表达量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,补中益气汤中、高剂量组大鼠在第25,30天的腹泻指数明显下降(P<0.05,P<0.01),补中益气汤高剂量组大鼠小肠黏膜Na^+-K^+ATP酶活性显著提高(P<0.05),补中益气汤中、高剂量组的SGLT1、GLUT2蛋白相对表达量及补中益气汤高剂量组的NHE3、p-MAPKAPK2、p-Akt2、p-Ezrin蛋白相对表达量显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论通过提高SGLT1蛋白的表达,促进p38MAPK/Ezrin通路中蛋白的磷酸化,可能是补中益气汤治疗脾虚泄泻的机理之一。

补中益气汤“益气升阳”配伍对脾虚小鼠作用的研究

目的:研究补中益气汤及"益气升阳"配伍对脾虚小鼠药理效应的影响。方法:造模成功后将动物随机分成补中益气汤组、益气升阳组、原方去益气升阳组、脾虚模型组和正常对照组,分别在给药1周后进行耐寒冷及抗疲劳机能试验,观察不同组别药物对小鼠胸腺指数、脾指数及胃肠推进的影响。结果:补中益气汤组、益气升阳组、原方去益气升阳组小鼠抗疲劳机能、脾指数、胸腺指数及胃肠推进率均呈显著性升高,与脾虚模型组比有统计学意义(P<0.01)。而益气升阳组和原方去益气升阳组对小鼠耐寒冷能力影响不大,与脾虚模型组相比并无显著性差异(P>0.05)。结论:补中益气汤及"益气升阳"配伍能有效改善脾虚小鼠的相关药理指标,但拆分使用作用弱于全方。

脾气虚证大鼠尿液代谢组学异常及补中益气汤干预作用的研究

目的运用代谢组学方法研究脾气虚证大鼠尿液的代谢表型变化,筛选出与脾气虚证相关的代谢标志物,并探讨补中益气汤的治疗作用。方法利用核磁共振氢谱(1H-NMR)技术建立大鼠尿液的代谢指纹谱。应用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究正常对照组与模型组、模型组与补中益气汤组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在尿液中选取生物标志物。结果模型组及补中益气汤组的代谢表型发生了明显的变化,并筛选出与脾气虚证相关的9种代谢产物,补中益气汤对部分生物标志物有逆转作用。结论脾气虚证大鼠的脂质及氨基酸代谢都出现了紊乱,能量代谢降低;经补中益气汤治疗后大鼠蛋白质代谢明显增强,保证了大鼠机体能量的供给。

补中益气汤治疗脾气虚证的血清代谢组学研究

【目的】运用代谢组学的方法研究脾气虚证大鼠血清代谢表型的变化,筛选出与脾气虚证相关的代谢标志物,并探讨补中益气汤的治疗效果。【方法】采用核磁共振氢谱(1H-NMR)技术建立大鼠血清的代谢指纹谱。应用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,研究正常组与模型组及模型组与补中益气汤组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在血清中选取生物标志物。【结果】脾气虚大鼠及补中益气汤组大鼠的代谢表型发生了明显的变化,并在血清中筛选出了8种与脾气虚相关的代谢标志物。【结论】脾气虚模型主要是改变了大鼠的能量代谢,使无氧呼吸增多;补中益气汤可从能量代谢、氨基酸代谢方面对脾气虚证起治疗作用。

乌头汤及其配伍对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨乌头汤及其各配伍组对佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量的影响。方法:用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,并用乌头汤及其不同配伍的各组药物进行干预,采用放射免疫法测定大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-浕的水平明显升高;与模型组相比,经过乌头汤及其配伍各组、MTX组治疗干预后,大鼠血清中IL-1β、TNF-浕的水平明显下降;上述作用以乌头汤为强,各个配伍组与之相较有明显的差异。结论:乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-浕有抑制作用。

黄芪桂枝五物汤及其配伍对佐剂性关节炎大鼠的抗炎、抗氧化作用研究

目的:探讨黄芪桂枝五物汤和方中不同药对对佐剂性关节炎大鼠的影响。方法:将黄芪桂枝五物汤按药对研究法拆方分组,观察全方及方中不同药对对佐剂性关节炎大鼠原发性、继发性关节炎的预防治疗作用,以及对红细胞超氧化物歧化酶(SOD)、全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、血浆丙二醛(MDA)、血清一氧化氮(NO)含量的影响。结果:全方及方中各药对均能显著抑制关节炎大鼠的原发性关节炎、继发性关节炎,使佐剂性关节炎(AA)大鼠过高的MDA、NO降低,使已降低的SOD、GSH-PX升高。结论:黄芪桂枝五物汤对大鼠佐剂性关节炎有治疗作用,此作用可能与其降低制脂质过氧化,恢复抗氧化酶活性,抑制致炎因子NO的合成等有关;全方疗效明显优于任何一组药对配伍,方中其他药均能增强黄芪的作用。

HPLC测定黄芪桂枝五物汤及方中药对的黄芪甲苷含量

目的:测定黄芪桂枝五物汤不同配伍情况下黄芪甲苷的溶出量。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:色谱柱:Hypersil ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇-水(20∶80)为流动相;检测波长:201nm;流速:1.0mL/min。结果:不同配伍组黄芪甲苷的溶出量也不同,全方组为0.079%,黄桂组、黄姜组、黄白组、黄枣组、黄芪组分别为0.079、0.069、0.061、0.055、0.062%。结论:方中不同药味与黄芪配伍后,对黄芪甲苷的煎出量有不同程度的影响。

虎金颗粒对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤指标的影响

[目的]探讨虎金颗粒对免疫性肝纤维化模型大鼠肝功能和血清中肝纤指标的变化的影响。[方法]用猪血清腹腔注射诱导免疫性肝纤维化模型,并用不同剂量的虎金颗粒进行干预,用全自动生化分析仪测定肝功能,用放射免疫分析法测定血清肝纤指标。[结果]猪血清诱导的肝纤维化大鼠血清中AST、ALT、HA、LN、IV-C和PCⅢ含量均明显升高,虎金颗粒对上述指标有一定的逆转作用,并能升高血清中白蛋白含量。[结论]虎金颗粒对免疫性肝纤维化有一定的防治作用,能降低肝纤维化程度,同时有效减轻肝细胞损伤,改善肝功能。

白虎追风丸对佐剂性关节炎大鼠血液中氧自由基的影响

目的:探讨白虎追风丸对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用及其作用机理。方法:随机对照观察白虎追风丸组、对照组大鼠关节肿胀情况及血液中脂质过氧化物(LPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量和活性。结果:白虎追风丸不仅抑制足跖肿胀,而且降低AA大鼠过高的LPO水平,同时还使其过低SOD和GSH-PX活性增高或恢复正常。结论:白虎追风丸对AA大鼠有抗炎和抗氧化作用。