植物单宁对K562细胞诱导红系分化抑制作用

目的研究可水解单宁诃子酸和特里马素I对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素I对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型糖蛋白A（GPA）在细胞表面的表达。结果诃子酸和特里马素I在0.04～0.09 mmol/L浓度下均可显著抑制K562细胞的生长增殖。2种单宁化合物（0.002～0.01 mmol/L）可显著抑制丁酸钠诱导的K562细胞血红蛋白合成,2种单宁化合物（0.01～0.05 mmol/L）还可显著抑制氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成,特里马素I（0.01 mmol/L）还抑制丁酸钠诱导的GPA在细胞表面表达。结论诃子酸和特里马素I对红系分化有抑制作用。

肿瘤化学预防药物的临床前筛选体系

简要描述了国外在开展肿瘤化学预防药物研究时所使用的一系列临床前筛选试验方法 ,这些方法组成了一个比较系统的肿瘤化学预防药物筛选体系 ,这一体系将会在我国的癌症预防药物特别是中药癌症预防药物研究中起到借鉴作用。

啤酒酵母复制衰老的分子机制

复制衰老是啤酒酵母衰老形式之一,表现出芽痕累积、细胞体积变大、不对称分裂丧失、不育、核仁脆裂和代谢变化等特征.染色体外rDNA环累积是啤酒酵母复制衰老的重要原因,而组蛋白去乙酰化酶家族成员Sir2蛋白在调节染色体外rDNA环累积、啤酒酵母衰老和寿命方面起到核心作用.作为去乙酰化反应底物的NAD+正性调节Sir2组蛋白去乙酰化酶活性,NAD+代谢产物尼克酰胺对Sir2有负性调节作用,而有尼克酰胺参与的NAD+补救合成途径对于Sir2活性十分重要.目前,已经在人等动物细胞中发现参与这些调节过程的相关蛋白的同源基因,在功能上也表现出一定的相似性.啤酒酵母的衰老机制研究将为人体衰老的认识提供重要线索.

卫星搭载啤酒酵母糖代谢相关酶类活性变化

分析了搭载于实践八号育种卫星的啤酒酵母的存活情况和糖代谢相关酶类活性。啤酒酵母于YPD液体培养基培养,培养过夜后用新鲜YPD稀释10^(-6)倍,分装后分别置于地面和卫星搭载两种条件下15 d。返回地面后收集样品,利用稀释平板计数法检测啤酒酵母活力,采用酶解结合分光光度法检测酵母糖原水平,分光光度法检测己糖激酶、琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性。结果发现,卫星搭载样品的菌落形成数显著高于地面对照组,卫星搭载样品是地面对照的3.1倍;卫星搭载啤酒酵母样品的己糖激酶和琥珀酸脱氢酶活性均明显低于地面对照组,而卫星搭载样品的苹果酸脱氢酶活性明显高于地面对照组;卫星搭载样品的糖原水平均低于相对应的地面对照组。表明,太空飞行下可导致啤酒酵母的存活率提高,同时伴有糖代谢相关酶活性和糖原水平的变化,提示太空飞行条件下引起糖代谢变化有利于啤酒酵母存活。

转染突变基因对HELF细胞有丝分裂的影响

目的 观察正常人胚肺成纤维细胞 (HELF)在转染突变关卡基因hBub1后有丝分裂关卡功能的变化。方法 应用脂质体转染突变hBub1基因表达载体 ,流式细胞术检测细胞的有丝分裂关卡功能。结果 HELF细胞经pTet On质粒和pBI GFP hBub1共转染后 ,在转染 2 4h后可见部分细胞有报告基因绿色萤光蛋白 (GFP)的表达 ;转染HELF细胞经秋水仙素处理 1 2h后收获 ,于流式细胞仪上检测细胞的周期分布情况 ,反应细胞的有丝分裂关卡功能 ,可见未转染的对照细胞经秋水仙素处理后有较高的G2 /M期细胞比例 (43 2 1 % ) ;转染野生型hBub1细胞无论有无GFP表达也有类似的G2 /M期细胞比例 (44 2 7%和 43 37% ) ;而转染 2种突变型hBub1的细胞 ,有GFP表达的细胞有相对较低的G2 /M期细胞比例 (2 3 1 3 %和 2 0 87% )。

有丝分裂关卡功能下降在中国仓鼠肺细胞恶性转化过程中的作用

目的 观察中国仓鼠肺细胞 (CHL)在经化学致癌物恶性转化后的染色体不稳定性、有丝分裂关卡功能和对秋水仙素细胞毒性的抗性。方法 CHL细胞在经甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)恶性转化后 ,进行核型分析 ,以秋水仙素诱导细胞停滞于有丝分裂中期的比例反映有丝分裂关卡功能 ,MTT法检测秋水仙素的细胞毒性。结果 细胞经 2 μg mlMNNG处理 2 4h ,3周后出现明显的形态转化 ,而且软琼脂集落形成率 ( 5 4 2 %)明显高于对照细胞 ( 10 %) ,表明处理细胞已恶性转化 ;核型分析显示转化细胞的染色体数目在 14～ 48之间 ,只有 7%的细胞有 2 5条染色体 ;而对照细胞 81%有 2 5条染色体 ,表明转化细胞染色体 (数目 )不稳定性 ;以 0 5 μg ml秋水仙素处理转化和对照CHL细胞不同时间 ,计数细胞有丝分裂中期相细胞比例 ,可见在各时间点 ,转化细胞的中期相细胞比例都低于相应的对照细胞 ,这表明转化细胞的有丝分裂关卡功能下降 ;以不同浓度秋山仙素处理转化和对照细胞 2 4h ,可见各浓度组转化细胞生存率明显高于对照细胞 ,这显示恶性转化细胞具有明显的秋水仙素毒性抗性。结论 有丝分裂关卡功能下降可能在细胞的恶性转化过程中有重要作用。

模拟微重力下秀丽隐杆线虫的力学感知和肌萎缩的发生机制——太空飞行线虫试验地面平行对照研究部分

目前,微重力导致肌萎缩的分子机制尚不清楚,重力感知是该事件发生的关键环节.为了回答这一问题,在此之前首先实施了太空线虫试验,这部分结果已经在本刊报道过.而本次研究主要是在地面上建立了模拟微重力环境,观察处理后秀丽隐杆线虫(C.elegans)体壁肌细胞结构和功能的变化,一方面用于验证太空试验,同时比较两种处理结果的异同,以便于评价地面模拟微重力的有效性.经过14天19.5h旋转模拟微重力处理后,对线虫生存率和运动能力进行了观察,并检测了几个重要的肌相关基因表达和蛋白质水平.模拟微重力下线虫生存率没有明显变化,但运动频率显著下降,爬行轨迹也发生了轻微改变,运动幅度降低,提示线虫运动功能出现障碍.从形态学上观察发现:肌球蛋白A(myosinA)免疫荧光染色显示模拟微重力组肌纤维面积缩小,而肌细胞致密体(dense-body)染色可见荧光亮度下降.这些结果直接提示模拟微重力使线虫出现了肌萎缩.随后Western blotting试验结果揭示,模拟微重力组线虫体壁肌的主要结构蛋白——myosinA含量减少,进一步确证了微重力性肌萎缩发生.在基因水平,旋转后抗肌萎缩蛋白基因(dys-1)表达明显上升,而hlh-1,unc-54,myo-3和egl-19的mRNA水平均下调,提示dys-1在骨骼肌感知和传导力学信息方面有重要作用,而hlh-1,unc-54,myo-3和egl-19则分别从结构和功能两个途径促进了微重力性肌萎缩的发生和发展.本次试验所得到的结果同太空飞行试验结果十分相似,一方面强化了太空试验结论,另一方面说明在地面上模拟微重力对生物体进行研究是有效可行的,将有助于提高太空试验的质量.

太空飞行后秀丽隐杆线虫肌相关基因和蛋白质变化(英文)

太空飞行所致的肌萎缩和重力感知的分子机制至今尚不清楚.研究太空飞行对秀丽隐杆线虫(C.elegans)体壁肌细胞结构和功能的影响.经过近15天太空飞行后对其生存率和运动能力进行了观察,并检测了5个重要的肌相关基因的表达和3种蛋白质含量.太空研究是在动物的整体水平进行的,而不是就单个细胞的研究.经历太空飞行后线虫生存率没有明显变化,但运动频率变慢,爬行轨迹也发生了改变,提示线虫运动功能出现障碍,这些数据揭示:微重力下秀丽线虫肌肉发育发生了变化.肌球蛋白A(myosinA)免疫荧光染色观察发现,太空飞行组肌纤维面积缩小,肌细胞致密体(dense-body)荧光亮度下降.这些形态学观察直接提示太空组线虫出现了肌萎缩.但是,肌动蛋白(F-actin)荧光染色显示两组并无明显差别.基因表达水平的分析结果显示,在太空飞行组动物中dys-1表达明显上调,同时hlh-1,myo-3,unc-54和egl-19基因表达下调.抗肌萎缩蛋白(dystrophin,由dys-1编码)是抗肌萎缩蛋白-糖蛋白复合物(DGC)的主要组成成分,而该复合物在微重力下增多,提示肌细胞是为了接受更多的力学刺激以维持细胞内外的力学平衡,所以该复合物在肌细胞的重力感知中起关键作用.基因hlh-1,myo-3,unc-54和egl-19表达下调,说明它们分别从结构和功能两个途径促进了微重力性肌萎缩的发生.最后,Western blot结果提示,太空组线虫体壁肌内肌球蛋白A减少,进一步确证了太空飞行中线虫有肌萎缩发生.

抗虫灵对大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶的抑制作用

有机磷杀虫剂是最常用的杀虫剂之一。抗虫灵是华中师范大学农药研究所研制的新型有机磷杀虫剂，又称９１０５，化学名称为Ｏ－甲基－Ｏ－对甲硫基苯基硫代磷酰胺酯（Ｏ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｏ－Ｐ－ｍｅｔｈｉｏｐｈｅｎｙｌｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｏｔｓ），经田间...

血管紧张素Ⅱ和醛固酮对心脏成纤维细胞Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的 研究肾素 血管紧张素 醛固酮系统 (RAAS)的效应激素血管紧张素Ⅱ (ANGⅡ )和醛固酮 (ALD)对培养的心脏成纤维细胞Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法 用RT PCR的方法检测原代培养心脏成纤维细胞Ⅲ型胶原mR NA表达。结果 ANGⅡ (10 - 8mol L)和ALD(10 - 8mol L)分别能促进心脏成纤维细胞Ⅲ型胶原mRNA表达 ,其各自的受体拮抗剂可分别拮抗它们的作用。结论 ANGⅡ和ALD可直接促进Ⅲ型胶原在心肌间质沉积 ,在心室重塑的病理生理过程中扮演重要角色。应用ANGⅡ和ALD的受体拮抗剂可抑制心肌纤维化 ,预防心室重塑的发生。

通过实践教学实现生物技术相关课程的系统化

微生物学、分子生物学和生物技术是生物工程领域的三门核心课程,这三门课程内容上是联系非常紧密的,但是在现有的教学中往往不能把它们有机地结合起来。本研究旨在通过实验环节设定、实验内容更新和实验平台开放三个方面的改革,使该三门课程能够系统而有机地结合起来,培养学生理论和实践中的综合与创新能力。

血管紧张素Ⅱ和醛固酮对培养鼠心脏成纤维细胞Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和醛固酮对培养的大鼠心脏成纤维细胞Bcl 2蛋白表达的影响 ,探讨其引起心肌间质成纤维细胞数目增多的原因。方法 培养SD大鼠乳鼠心脏成纤维细胞 ,以 10 -8mol/LAngⅡ或 10 -8mol/L醛固酮作用于心脏成纤维细胞 ,2 4h后收集细胞涂片 ,进行免疫组化染色 ,观察Bcl 2蛋白的表达情况。得到阳性结果者加其拮抗剂。结果 10 -8mol/LAngⅡ对心脏成纤维细胞刺激 2 4h后 ,Bcl 2蛋白的表达呈阴性 ;10 -8mol/L醛固酮作用 2 4h后 ,Bcl 2蛋白的表达呈阳性 ,其受体拮抗剂螺旋内酯可拮抗醛固酮的作用。结论 醛固酮促进心脏成纤维细胞Bcl 2蛋白的表达 ,提示醛固酮有可能通过抑制其凋亡的途径使心脏成纤维细胞数目增多 ,这一作用是通过其核受体实现的 ;AngⅡ无类似作用 。

上工治未病——预防药学的发展与未来

我国传统医药学历来重视“不治已病治未病” ,强调预防为主、防重于治的医学观点 ,并具体体现在未病先防 ,既病防变 ,病后防复三个方面。随着现代医学模式的转变和人们健康观的不断发展 ,药学研究的范畴也由过去单纯发展疾病治疗药物转变到发展预防药物和治疗药物并重。近些年来 ,药物在预防疾病方面显示出良好的应用前景 ,我国目前预防药学应从建立系统的筛选和安全性评价体系、充分利用我国宝贵的中药材资源和中医理论等两个方面为研究重点。

微重力条件下细胞电融合研究进展

生物分离、细胞培养和细胞电融合是目前在空间条件下研究的主要生物过程。空间微重力环境是细胞电融合技术的理想场所,由于不存在重力和对流的影响,使电融合技术得到了改善。在提高杂交瘤得率、培植新品种和研究微重力细胞生物学效应方面具有广阔的应用前景。本文综述了微重力条件下细胞电融合的研究进展,细胞电融合过程中细胞骨架发生的变化,以及微重力条件下提高融合效率潜在的原因。

抗虫灵对大鼠全血乙酰胆碱酯酶的抑制作用

实验研究了抗虫灵在急性、亚慢性染毒时对大鼠全血乙酰胆碱酯酶(AchE)的影响,以及在体外条件下,以人红细胞膜制备物为对象,抗虫灵抑制AchE的机理。结果表明,抗虫灵在急性染毒时(6.81mg/kg体重)对全血AchE有抑制作用,亚慢性(90天)时,雄性中剂量(0.25mg/kg体重)组和高剂量(1mg/kg体重)组动物全血AchE有明显抑制,雌性低剂量组(0.05mg/kg体重)和高剂量(1.00mg/kg体重)组动物全血AchE活力有明显抑制;体外试验表明,抗虫灵对人红细胞膜AchE的抑制作用有剂量效应和时间效应关系,并为不可逆抑制。

吞蛋白A2在非网格蛋白内吞中的作用研究进展

内吞作用是细胞从细胞外空间和内化横跨膜的细胞表面蛋白转运物质到细胞内的过程.吞蛋白(endophilin)一直被认为参与了网格蛋白介导的细胞内吞作用,2015年《自然》(Nature)发表的两篇研究论文报道了一种由endophilin A标记和控制的独立于网格蛋白的有被囊泡内吞作用.本文主要综述近年来endophilin A2的研究,着重介绍endophilin A2在非网格蛋白介导的内吞作用中的功能和机制.

适应医工交叉专业的免疫学实践教学改革

医工交叉专业重视"厚基础、重实践、善创新"的人才培养要求,突出生物学、医学与工程的融合。对于医工交叉专业的学生,传统的免疫学教学方法已经不适合于这类专业的学生,交叉学科的新特点对免疫学的教学提出了新的要求。提出面向医工交叉专业的学生,免疫学的教学应该明确教学目标、确定相应的教学内容,并且通过专业实践、大学生创新计划和毕业设计等实践活动,实现免疫学教学中理论与实践的有效结合,从而逐步深入,凸显医工交叉特色,探索出医工交叉背景下免疫学实践教学改革的新思路和新方法。

斜卧青霉原生质体制备和再生的研究

研究了斜卧青霉原生质体制备和再生的条件,确定了培养方式、菌龄、渗透压稳定剂、酶的配比、酶解时间等因素对原生质体制备和再生的影响。最佳条件:菌丝体培养12h,用1%溶壁酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶的混合酶液酶解,将NaCl作为渗透压稳定剂,酶解时间为1.5h。在此条件下原生质体的形成量达到5.3×105个/mL,再生率为19.4%。