吉林省玉米种质资源SSR和SNP分子身份证的构建及应用

【目的】农作物种质资源具有重要的战略地位。吉林省玉米种质资源库主要存储具有北方春玉米区特色的种质资源。鉴于在传统农作物种质资源管理过程中难以获取真实身份信息的现状,利用分子标记技术构建种质资源分子身份证可以有效鉴定种质资源真实身份,强化种质资源的分类管理。通过深度发掘吉林省玉米种质资源库的优异资源,推动共享利用。【方法】以吉林省玉米种质资源库中的2918份玉米种质资源为研究对象,采用玉米品种鉴定检测标准中推荐的40对SSR标记,以及61214个SNP标记来构建其分子身份证。根据获得的分子身份证信息将种质资源划分为核心、同近源、异质和群体等类进行管理,并进一步针对核心种质进行遗传多样性分析。【结果】为2918份种质资源构建了SSR分子身份证,为除异质性种质外的2502份种质资源构建了SNP分子身份证。分别制定了玉米种质资源SSR和SNP分子身份证的建设规范。其中,SSR分子身份证由40个SSR位点指纹转化为三位数字和一位字母的编码组合构成,并以二维码形式存储;SNP分子身份证由61214个SNP位点指纹转化为可视化的条形码。根据样品纯合度和指纹特异性等特征,将样品划分为1561份核心类、705份同近源类、416份异质类及236份群体类种质资源。遗传多样性分析表明,以旅大红骨群、黄改群为代表的国内种质资源是该库的主要种质资源,占全部核心种质资源的64.38%。【结论】提出了玉米种质资源分子身份证构建流程,为吉林省玉米种质资源库2918份种质资源构建了全部的SSR分子身份证和2502份SNP分子身份证;建立了核心、同近源、异质、群体四类种质资源筛选方案,实现了种质资源的分类管理。

叶绿体标记在玉米种质资源快速分组中的应用分析

叶绿体标记具有遗传保守性高且不受核基因重组干扰等特点,适于对玉米种质资源进行分类管理。本研究基于Maize6H-60K芯片对玉米叶绿体标记筛选获得叶绿体分组候选位点,使用上述位点对3549份玉米种质资源进行聚类分析,将玉米种质资源划分为B、D、H、C、T共5个类群。通过基因型信息对比筛选出29个叶绿体分组特异标记(Varietal Chloroplast Panel,VCP)并设计KASP引物。开发兼容芯片、KASP平台的快速分组分析算法,算法结果与聚类分析一致。挑选5个类群特异位点利用序贯法对种质资源进行快速分组检测,构建玉米种质资源快速分组方法,减少了95%的检测量,为玉米种质资源提供一种新型高效的分组管理方法。

用于玉米品种真实性鉴定的最优核心SNP位点集的研发

品种真实性是种子质量监测的一个重要指标。为建立准确可靠、快速简便、高通量、低成本的玉米品种真实性鉴定技术,本文利用200个核心SNP位点构建的5816个玉米杂交品种,3274个自交系的指纹数据,基于遗传算法、品种识别率评估确定了一套高鉴别力的核心SNP位点集,包含96个SNP位点。这96个SNPs全部位于基因内区域,相对均匀分布在10对染色体上。采用上述杂交品种和自交系的指纹数据评估显示这96个位点具有较高多态性和品种区分能力,PIC、MAF、DP平均值分别为0.36、0.40、0.60和0.36、0.39、0.48,对杂交品种、自交系的品种识别率达到99.14%和99.24%。两两样品成对比较结果显示,99.99%的品种间差异位点数目≥3个,杂交品种和自交系中96.74%和95.67%的成对比较差异位点数目集中在30~65个和30~60个。基于221个主推杂交品种的40个SSR位点、96个SNP位点的基因型数据分析结果显示,这2组标记集的鉴定结果具有较高的一致性。综上所述,本研究报道了一套具有位点数量最少、区分能力最强,兼容多平台、适于自动化分型等优点的最优核心SNP集。期望位点集将在玉米品种真实性监测、种子质量控制中得到广泛应用,进而维护玉米种子市场秩序、保障育种者权利以及保护农民利益。

玉米品种SSR标记毛细管电泳荧光检测法与变性PAGE银染检测法的比较研究

以192份玉米品种为材料,用7对SSR引物对毛细管电泳荧光检测和常规的变性PAGE银染检测两种SSR标记检测方法进行比较分析。结果表明,两种方法检测的SSR标记片段大小一致。毛细管电泳荧光检测法检测的结果更为精确、灵敏、高效,更适用于高通量材料的检测分析。对少量材料进行检测分析以及SSR标记的筛选时,使用常规的变性PAGE银染检测法更经济适用。

鼻咽癌组织中GNAT1基因的表达、杂合性丢失及甲基化分析

背景与目的:在鼻咽癌中,染色体3p21.3为高频缺失区,杂合性丢失(lossofheterozygosity,LOH)分析和功能学研究都表明3p21.3区存在与鼻咽癌相关的抑瘤基因。GNAT1基因也定位于3p21.3,但在鼻咽癌中未见关于GNAT1基因的研究报道。本研究旨在探讨GNAT1基因在鼻咽癌组织中的表达、LOH及甲基化情况。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)方法检测了33例鼻咽癌组织和15例慢性鼻咽炎组织中GNAT1基因的表达,并通过微卫星分析技术和甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation-specificpolymerasechainreaction,MSP)分析GNAT1基因LOH和启动子区甲基化情况。结果:GNAT1基因在慢性鼻咽炎组织中均稳定表达,而在72.7%(24/33)的鼻咽癌组织中表达下调或缺失,显著低于慢性鼻咽炎组织(100%,15/15)(P=0.022);LOH分析显示鼻咽癌组织中GNAT1基因的杂合性丢失率为15%(3/20),且LOH与基因表达存在相关性(P=0.016);甲基化分析发现在100%的鼻咽癌组织和80%慢性鼻咽炎组织中存在GNAT1基因启动子区高甲基化。结论:GNAT1基因在鼻咽癌组织中表达下调或缺失,这一现象与GNAT1基因的LOH存在相关性,而与3p21.3区基因启动子区CpG岛的甲基化可能无关。GNAT1基因的甲基化可能不是鼻咽癌的发病机制。

2014-2019年国家玉米区域试验参试组合DNA指纹检测及遗传多样性分析

随着我国玉米品种审定制度的改革和参试渠道的扩宽,近年来玉米参试组合年均近8 000份,为了解我国近几年育种水平、发展趋势和存在的问题,对2014-2019年共计2 949份国家玉米品种试验参试组合进行DNA指纹检测和遗传多样性分析。40个SSR位点,平均每个位点检测到14.55个等位变异,平均遗传多样性和PIC(多样性信息)分别为0.71和0.67。2014-2019年不同年份参试组合的遗传多样性基本一致,其中爆裂组遗传多样性最低,鲜食玉米组遗传多样性最高,生态种植区上从北向南多样性有上升趋势。遗传聚类结果表明,爆裂、鲜食、热带和亚热带、极早熟几个组别分别归属不同的亚类,遗传背景与其他组别差异较大,其他区组的遗传背景相互渗透,东华北和西北组之间遗传关系最近。DNA指纹真实性检测结果表明,参试组合与数据库比对筛查出DNA指纹差异位点在5个以内的样品数量逐年下降。近10 a来我国玉米区域试验参试组合遗传多样性日趋丰富,SSR技术在玉米品种区域试验中发挥了重要的作用,随着育种新技术的不断发展,建议加快SNP等新技术在区域试验中的研究和应用。

中医医院责任护士心理资本与工作投入及离职意愿的相关性分析

目的 :探讨中医医院责任护士心理资本与工作投入及离职意愿的关系。方法 :采用一般情况调查表、护士心理资本问卷中文修订版、Utrecht工作投入量表中文版、离职意愿量表,对浙江中医药大学3所附属三级甲等中医医院的527名责任护士进行问卷调查。结果:分层逐步多元回归分析显示身体状况、学历对责任护士的离职意愿有重要影响,责任护士心理资本、工作投入与离职意愿三者之间存在显著的相关性(P<0.05)。心理资本、工作投入水平对责任护士离职意愿起着重要的反向预测作用。其中,乐观及奉献对责任护士的离职意愿影响最大。结论 :提高中医医院责任护士的心理资本及工作投入水平,能够降低责任护士离职意愿,对稳定中医医院护理队伍将会产生积极影响。

农民增收的主要政策效应分析

本文分析了1994-2002年间影响我国东部地区、中部地区和西部地区农民收入的主要因素,探讨了我国农业国内支持政策调整对改变农民增收的影响与作用。

不同取样方式对DNA快速提取效果的影响

利用快提法对不同取样部位及不同取样时期的样品提取DNA并进行PCR检测，结果表明：PCR扩增效果较好的样品包括种子胚、胚乳、未发芽时的水培初生根和次生根的根尖、发芽1d的胚芽（幼叶）、发芽1—3d的胚芽鞘、以及发芽3．5d的中胚轴；而发芽后的水培根尖、发芽3d的幼叶、发芽5d的胚芽鞘、发芽10d的中胚轴提取的DNA扩增效果较差或没有扩增产物。

中西医结合医院护士职业倦怠与同事支持的相关性研究

目的了解中西医结合医院护士的职业倦怠情况,探讨中西医结合医院护士对同事支持的认可程度。方法采用护士职业倦怠量表和同事支持量表对杭州市某三级甲等中西医结合医院的283名护士进行调查。结果中西医结合医院护士情感耗竭和去人格化得分明显高于杭州市常模(P<0.01);同事支持A量表得分为(18.92±7.87)分,B量表总分为(43.05±19.87)分。中西医结合医院护士人口统计学资料中的年龄、性别、工作年限、所在科室与职业倦怠3个因子均有显著相关性(P<0.01);同事支持量表中的护士长支持、行动计划、过程管理、合作与职业倦怠3个因子均有显著相关性(P<0.01)。结论同事支持水平越好,职业倦怠程度越低,说明建立一个强有力的同事支持系统对中西医结合医院护士非常重要。

新型农村合作医疗:农民认知与受益调查

利用对5个省25个县(市)2 024个农户的抽样调查数据,研究2007年农村居民参加新型农村合作医疗的受益水平,以及这些农户对新型农村合作医疗补偿政策的认知状况。研究结果表明,相对于新型农村合作医疗制度实施初期而言,参合患者从新型农村合作医疗得到的补偿金额占其当年医疗总支出的比例显著上升,但是,与理论补偿水平相比还存在很大的差距,尤其是对大病医疗支出的实际补偿水平不到其理论补偿水平的1/3。从农民对新型农村合作医疗补偿政策的认知来看,曾报销过住院费的农户的认知水平要高于其他农户,但总体而言,认知水平依旧非常低,且大多数农户对补偿政策的认知都低于实际执行的补偿政策。

农村基础设施投资与农民投资需求的关系--来自5省的实证分析

近年来,随着对农村基础设施建设的加强,大量的资金用于投资道路、灌溉和饮用水等设施,至于这些投资是否是当地居民迫切需要的仍然是一个有待回答的问题。本文利用5省101个村的村级和农户的追踪调查资料,描述了2005年初样本村的普通村民和村干部对基础设施建设的投资需求以及2005-2006年期间这些村的村级公共投资水平和投资结构,并以道路、灌溉设施、饮用水设施为例,详细分析了当地居民对这3类基础设施的投资需求排序与各村对这些项目的实际投资行为之间的关系。结果表明,农村村级饮用水设施和灌溉设施的项目实施与当地村民对这两类基础设施的投资需求呈现出高度的正相关关系;但是,虽然过去两年中样本村实施的道路项目最多,但并不是所有的道路投资都是村民最需要的。

农村最低生活保障政策在实施过程中的瞄准分析

随着我国扶贫战略从区域扶贫向个人扶贫的转变,2007年我国在农村地区全面建立了最低生活保障制度。基于一份具有全国代表性的农户资料,本文采用赤贫指数从多维度度量了农户的贫困程度,并将其应用于农村最低生活保障制度的瞄准效率研究。赤贫指数越低,表示农户越贫困,理论上,这些农户也越应该获得领取最低生活保障资格。结果发现,现阶段我国农村最低生活保障制度瞄准效率不高,瞄准遗漏和瞄准漏出同时存在。其中,在村级层面的分析结果发现,样本村中只有25.5%的最贫困农户在2007年得到了低保;同时,处于赤贫指数最低端的20%和40%的农户分别只得到了最低生活保障名额的50.67%和73.33%。而在获得最低生活保障的农户中,有1/5以上的农户认为低保金对改善他们家庭经济状况帮助很小或者没有任何帮助。基于以上研究结论,本文认为政府在继续增加对农村最低生活保障制度的财政投入的同时,应当在建立健全更为规范完善的收入核算标准的基础上,从研究和实践两个方面继续探索发展适合我国农村的多维度的贫困户鉴别制度,提高农村低保的瞄准效率。

GS环保型试剂在病理技术工作中的应用体会

病理组织标本的处理是病理技术中的关键，直接决定常规制片、特殊染色、免疫组化、原位杂交、PCR等一系列检测的结果。一直以来，病理工作者均采用10％中性福尔马林作为组织样本的固定液，用二甲苯对组织进行透明处理，这两种试剂不仅污染环境，且对病理工作者的身心健康危害严重。

农民参合行为及其对新型农村合作医疗财务可持续性的影响分析

新型农村合作医疗的可持续发展关乎8亿农民的医疗保障,对提高农民健康水平、统筹城乡发展、全面实现小康社会目标具有重要意义。基于一份具有全国代表性的面板数据,本文从理论和实证两个方面分析了农民参合行为的影响因素。研究发现,那些健康状况相对较差的农民参加新型农村合作医疗的概率显著高于那些健康状况相对较好的农民,即农民在参合的过程中存在着显著的逆向选择,尤其是那些选择全家都参合和全家都不参合的农民。同时,由于参合之前参合者的人均医疗支出水平明显高于未参合者的人均医疗支出水平,逆向选择对新型农村合作医疗基金的财务可持续性具有潜在的影响。但由于目前总体参合率很高,逆向选择还未对新型农村合作医疗基金产生明显的冲击。基于以上研究结论,本文在最后提出了相关政策建议。

SEMA3B基因在鼻咽癌组织中的表达、杂合性丢失和甲基化分析

SEMA3B基因定位于鼻咽癌高频缺失区域3p21.3上,最近被证明具有抑瘤基因的功能.分析了鼻咽癌组织中SEMA3B基因的表达、杂合性丢失(LOH)和甲基化情况.首先应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测了33例鼻咽癌组织和15例慢性鼻咽炎组织中SEMA3B基因的表达,结果显示75.8%(25/33)鼻咽癌组织中SEMA3B基因表达缺失或下调,显著低于慢性鼻咽炎组织中的表达(P=0.001).进一步选取3个微卫星位点D3S1568、D3S1621和D3S4597分析了20例鼻咽癌组织中SEMA3B基因LOH的情况,结果表明3个位点的丢失率分别为10%、20%和15%,总的丢失率为45%,统计分析发现LOH与基因表达之间存在明显相关(P=0.023).最后,采用甲基化特异性PCR方法分析了SEMA3B基因启动子区甲基化,结果发现在100%的鼻咽癌组织和73.3%的慢性鼻咽炎组织中检测到SEMA3B基因启动子区高甲基化.由此得出结论,SEMA3B基因在鼻咽癌组织中表达缺失或下调,LOH是引起其表达异常的原因之一.

同事支持干预对中西医结合医院护士心理健康的影响

目的:探讨同事支持干预对中西医结合医院护士心理健康的影响,为中西医结合医院护士制定同事支持方案提供依据。方法:开展同事支持干预实验研究,采用症状自评量表(SCL-90)对某中西医结合医院的护士进行评估,根据评估结果,对护士群体的心理状况情况进行分析,把筛选出的172名护士分为实验组(同事支持干预)和对照组(无特殊干预)。结果:干预后实验组护士SCL-90、同事支持得分均较干预前明显改善,其中实验组护士症状自评量表中的阳性症状数、躯体化、焦虑、恐怖、偏执及精神病性因子得分改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:同事支持干预能够改善中西医结合医院护士的心理健康状况,尤其是躯体化症状、焦虑、恐怖、偏执等情绪。同事支持干预体现了人性化管理,为增进中西医结合医院护理队伍心理健康水平提供参考依据。

新农合对农民医疗服务利用和医疗支出的影响--基于5省份的面板数据

目的:评价新型农村合作医疗在不同时期对参合农民医疗服务利用和医疗支出的影响。方法:通过对我国5省25个县(市)2000户、8000多人进行长期追踪调查,形成了2004、2007和2011年三期的面板数据,采用描述性统计的分析方法进行数据分析。结果:新农合显著增加了参合农民患病后就诊的可能性和农民的医疗总支出;参合患者年度自付医疗费用比例显著下降,参合住院患者的自付医疗费用在2011年首次低于未参合住院患者;参合住院患者的受益面也逐年上升,2011年已经达到81.8%。但是,新农合对参合患者的大病保障作用有限,参合住院患者年度自付医疗费用仍然超过农民年人均纯收入。结论:新农合在实现"广覆盖"的目标后,在"深度保障"方面有待于进一步加强。

探究爬行运动的防病健身机制

爬行运动使人体全身重量分散到四肢,可缓解脊柱受力,改善人体各个系统的功能,对于治病强体有很好的效果。本文主要探讨其作用机制。

新媒体时代高校思想教育方式的新需求研究

随着新媒体时代的到来,高校思想政治教育工作者应该如何提升自身的媒介素养,变革传统的教育方式显得尤为重要。需从新媒体给思想政治教育主客体双方带来的影响以及高校思想政治教育面对新需求而采取的对策进行有益探索。