南柴胡抗抑郁药效物质及作用机制研究

目的网络药理学结合实验验证探讨南柴胡抗抑郁药效物质及作用机制。方法通过中药系统药理学数据库分析平台、有机小分子生物活性数据库和药效团匹配与潜在识别靶标平台收集化学成分靶点,通过高通量基因表达数据库下载GSE19738基因芯片,分析并获得抑郁症相关基因,将南柴胡化学成分靶点与疾病相关基因取交集,进一步获得核心靶点并富集通路。通过反向溯源分析获得关键药效物质,并进行分子对接验证。采用随机数字表法将斑马鱼分为空白组,模型组,阳性药组,绿原酸,秦皮素和柴胡皂苷c高、低剂量组,每组15尾。验证潜在药效成分的抗抑郁作用及对靶点表达的影响。结果通过分析共获取南柴胡化学成分作用靶点和抑郁症交集靶点24个。京都基因与基因组数据库富集分析显示南柴胡可能通过调控FoxO、NF-κB、IL-17等信号通路发挥抗抑郁作用。分子对接结果显示柴胡皂苷c、秦皮素、荜澄茄素、绿原酸、乙酰基-柴胡皂苷d和6-O-Vanilloylajugol与CDK2、STAT3、IGF1R、TGFBR2和SOD2有良好的结合活性。实验验证结果显示,与空白组比较,模型组斑马鱼运动总距离和总次数减少,体内5-羟色胺含量降低(P<0.05);与模型组比较,柴胡皂苷c高、低剂量组、秦皮素高剂量组和绿原酸高、低剂量组运动总距离延长及运动次数增多,体内5-羟色胺含量升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组STAT3表达水平增加、CDK2表达降低(P<0.01)。与模型组比较,柴胡皂苷c高、低剂量组STAT3表达水平降低(P<0.05),秦皮素高剂量组CDK2的表达水平升高(P<0.01)。结论南柴胡中柴胡皂苷c、秦皮素等药效物质通过影响FoxO等信号通路发挥抗抑郁作用。

基于“五寓”课程思政理念的中医药人才培养策略研究——以“中药炮制学专论”课程为例

中药学类研究生课程重视中药学思维的培养,具有课程思政挖掘的良好基础,但课程思政缺乏系统设计,思政教育与专业教育融入未形成长效机制,专业课程考核和评价欠缺“课程思政”相关指标,“两张皮”问题仍然存在.为此以“中药炮制学专论”课程为例,课程团队践行“五寓”课程思政理念,通过对教学内容进行重构,改进教学方法,拓宽教育场域,实现思政目标与知识目标、能力目标和素质目标“同频共振”.“五寓”课程思政理念的凝练针对性地解决了研究生课程思政教与学中的问题,为中药学学科课程思政建设提供了保障.

炮制、配伍对栀子豉汤有效成分的影响

目的考察炮制、配伍对栀子豉汤有效成分的影响。方法取生品、炒制品、焦制品及三者与淡豆豉的配伍适量,HPLC法同时测定京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、染料木苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、大豆苷元、染料木素的含量,计算溶出率。结果7种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9994),平均加样回收率95.22%~104.94%,RSD≤3.36%。炮制后,生品中栀子苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ含量降低;配伍后,生品、炮制品水提物中环烯醚萜苷类、二萜色素类成分溶出率降低;乙醇提取时有利于环烯醚萜苷类成分溶出,提取溶剂对西红花苷类成分溶出的影响更大。结论该方法简便、重复性好,可为栀子豉汤质量标准建立提供理论依据。

荔枝草抗炎质量标志物的研究

目的阐明荔枝草抗炎质量标志物,并对其含量进行测定,为荔枝草药材质量控制提供参考。方法采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)表征荔枝草的主要成分,根据二级质谱裂解碎片信息,并结合文献数据,进行分析鉴定。进一步通过SwissADME平台,从鉴定获得的化学成分中筛选出口服生物利用度(Oralbioavailability,OB)高且符合类药五原则的活性成分;运用SwissTargetPrediction数据库查找和预测荔枝草的成分靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据库(Online MendelianInheritanceinMan,OMIM)、GeneCards数据库等筛选疾病靶点。采用String11.5数据库和Cytoscape3.7.2软件构建PPI网络,并筛选核心靶点。利用DAVID6.8进行基因本体(Gene ontology,GO)注释和KEGG通路富集分析,对富集得到的通路进行实验验证,以阐明其作用机制。对关键通路采用反向溯源分析潜在的药效物质基础进行实验验证,并建立高效液相含量测定方法。结果从荔枝草中共鉴定出36个主要成分,包括黄酮类、萜类化合物等;进一步筛选出活性成分与疾病交集靶点190个;通过网络拓扑筛选获得核心靶点18个;富集分析发现荔枝草抗炎作用主要涉及的通路为NF-κB信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路。对NF-κB信号通路进行反向溯源得到高车前苷、高车前素、木犀草素和异鼠李素4个相关成分,分子对接发现其与PTGS2的活性位点的结合能分别为-9.5、-9.7、-9.4和-9.4 kcal·mol^(-1),均具有良好的对接活性。根据质量标志物的可测性,确定高车前苷和高车前素可作为荔枝草的抗炎质量标志物。Western blot实验结果表明高车前苷和高车前素能显著降低COX-2和NF-κB p-p65的表达(P<0.05,P<0.01)。结论荔枝草抗炎质量标志物为高车前苷和高车前素,可通过NF-κB通路发挥抗炎作用。

刺五加总苷提取工艺研究

采用L9(34)正交试验法考察刺五加总苷提取的各影响因素(A乙醇体积分数、B溶剂量、C提取次数),以多指标(刺五加总苷收率、丁香苷质量分数以及浸膏得率)综合评分法进行直观分析及方差分析,确定最佳提取工艺条件.试验结果表明影响刺五加总苷提取的主要因素为B(溶剂量),优选出最佳提取工艺条件为A1B3C1,即乙醇体积分数60%,10倍量,提取2次,每次1h.此工艺简单易行,稳定可行,适于工业化生产.

青龙衣中胡桃醌提取工艺研究

目的:研究青龙衣中胡桃醌的最佳提取方法及该方法的最佳提取工艺。方法:以95%乙醇为溶剂,胡桃醌含量为指标考察冷浸法、热回流法、超声法对青龙衣中胡桃醌含量的影响,确定胡桃醌的最适提取方法。采用L9(34)正交试验法考察各影响因素(A溶剂种类、B溶剂量、C提取时间),以胡桃醌含量为指标进行直观分析及方差分析,确定最佳提取工艺。结果:胡桃醌的最佳提取方法为超声波法,该法的最佳提取工艺条件为:A2B2C3,即氯仿,8倍溶剂量,提取40min,影响胡桃醌提取的主要因素为A(溶剂种类)。结论:此提取工艺简单易行,稳定可行,适于青龙衣中胡桃醌的大规模提取。

枳实研究进展

枳实为药食同源中药,具有潜在的开发应用价值。近年,对于枳实的化学成分、药理作用及其质量评价等方面的研究日渐增多,本文对枳实的最新研究进展作以综述,为其进一步开发利用提供科学依据。

虎眼万年青总皂苷的纯化及抗氧化活性研究

对虎眼万年青总皂苷的纯化工艺及抗氧化活性进行研究。以比吸附量和比洗脱量为指标,筛选大孔树脂型号,进一步优化工艺条件。结果表明,AB-8型大孔树脂对虎眼万年青总皂苷具有良好的吸附和洗脱效果,最佳纯化条件为药材量与树脂用量比不超过7∶1,用水、30%乙醇除杂,70%乙醇洗脱,在此条件下得到的虎眼万年青总皂苷纯度为55.18%。对纯化后虎眼万年青总皂苷的抗氧化活性进行研究,发现虎眼万年青总皂苷对羟自由基、超氧自由基阴离子和DPPH自由基的IC_(50)分别为2.43、2.28和0.05 mg/m L,具有良好的抗氧化活性。

虎眼万年青总皂苷诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的机制研究

目的:探讨虎眼万年青总皂苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:MTT法检测虎眼万年青总皂苷对HepG-2细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪测定细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位和Cyt-C蛋白表达水平;透射电镜观察细胞超微结构的改变;酶标仪检测细胞内Caspase-3活性。结果:虎眼万年青总皂苷对HepG-2细胞增殖有抑制作用,IC_(50)为(79.80±0.18)μg/m L;虎眼万年青总皂苷作用细胞后,倒置显微镜下可见细胞变圆,折光性减弱,悬浮细胞增多;透射电镜下可见细胞出现典型的凋亡特征;随着虎眼万年青总皂苷浓度的增加,细胞凋亡率、细胞内Cyt-C表达水平及Caspase-3的活性均显著升高,细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:虎眼万年青总皂苷可显著抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,并可通过启动线粒体途径诱导HepG-2细胞发生凋亡。

中药五味子研究进展

五味子为常用中药,具有保肝、兴奋呼吸中枢、镇咳祛痰、催眠、抗氧化、抗衰老、提高免疫力等作用,为可用于保健食品的药品。本文全面综述五味子的化学成分、药理作用及质量评价等,以期为五味子的新药研发、临床应用及开发保健品等奠定基础。

青龙衣不同萃取部位抗肿瘤活性研究

目的研究青龙衣乙醇提取物及不同溶剂萃取部位对肿瘤细胞的体外抑制作用,筛选青龙衣抗肿瘤活性部位。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,选用4种细胞株(SGC-7901,HepG-2,HCT-8,Capan-2)进行体外实验,对青龙衣不同萃取部位的抗肿瘤活性进行筛选。结果青龙衣乙醇提取物、石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位对肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用。其中青龙衣乙醇提取物对SGC-7901,HepG-2,HCT-8,Capan-2的IC_(50)分别为47.18,31.12,35.45,27.81 mg/L;石油醚部位对SGC-7901, HepG-2,HCT-8,Capan-2的IC_(50)分别为56.72,57.14,25.96,15.21 mg/L;氯仿部位对SGC-7901,HepG-2,HCT-8,Capan-2的IC_(50)分别为32.08,29.59,32.47,60.72 mg/L;乙酸乙酯部位对SGC-7901,HepG-2,HCT-8,Capan-2的IC_(50)分别为35.79,35.48,24.48, 25.46 mg/L。正丁醇部位和水溶性部位对各肿瘤细胞无抑制作用。结论青龙衣的乙醇提取物、石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位有一定的细胞毒作用,石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位初步确定为青龙衣抗肿瘤活性部位。

药物诱导肿瘤细胞有丝分裂灾难机制研究

有丝分裂灾难是一种发生在细胞有丝分裂期,由于细胞分裂出现异常而造成的细胞死亡的现象,它通常伴随着细胞周期检查点异常或纺锤体结构的损伤而发生.近年来诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难成为开发抗肿瘤药物的新分子靶向目标,为对传统化疗药物具有耐药性的肿瘤治疗开辟新的途径.对近年来有关有丝分裂灾难的特征以及药物诱导肿瘤细胞发生有丝分裂灾难机制的研究进展进行全面综述,为发现抗肿瘤新靶点和抗肿瘤新药提供参考依据.

五味子泡腾片的制备工艺及质量评价

研究五味子泡腾片的制备工艺,并对其进行质量评价。以崩解时限、产气量、pH值为评价指标,采用单因素和正交试验优化泡腾崩解剂配比、泡腾崩解剂质量分数、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)6000的用量,并通过片剂重量差异、崩解时限、pH值、产气量、硬度及脆碎度和五味子醇甲的含量对产品进行质量控制。结果表明,柠檬酸∶碳酸氢钠最佳配比为1∶0.7(质量比),泡腾崩解剂的最佳质量分数为55%,五味子水提物浸膏质量分数26%,PEG 6000的最佳质量分数为5%,甜菊糖苷2%,氯化钠2%,乳糖10%。最优工艺条件下制备的泡腾片,外表呈浅粉色,片剂表面光滑,可迅速溶于水中,产生丰富气泡,汤色呈浅粉色,并伴有五味子特有香气,口味酸甜适中,口感良好,每片泡腾片中五味子醇甲的含量为(9.79±0.18)mg,平均片重(500±20)mg,崩解时限为(87.42±1.91)s,pH值平均值为4.63±0.071,崩解时限、pH值均符合药典规定。

紫萼玉簪花总皂苷的纯化及抗肿瘤活性研究

本文旨在研究紫萼玉簪花总皂苷的纯化工艺及抗肿瘤活性。以比吸附量和比洗脱量为指标,筛选大孔树脂型号,进一步优化工艺条件。通过体外实验(MTT法)对紫玉簪花总皂苷进行抗肿瘤活性研究。实验结果显示AB-8型大孔树脂适合富集纯化紫萼玉簪花总皂苷,最佳纯化条件为药材量与树脂用量比小于1∶15,分别用4 BV水和20%乙醇除杂,6 BV 70%乙醇在2 BV·h^(-1)流速下洗脱,在此条件下得到的紫萼玉簪花总皂苷(纯度57.49%)对SGC-7901、MCF-7、HepG-2肿瘤细胞有较强的抑制作用,IC_(50)分别为15.47μg·L^(-1)、28.08μg·L^(-1)、17.37μg·L^(-1),表明具有良好的抗肿瘤活性。

龙葵碱药理作用研究进展

龙葵碱主要存在于茄科植物马铃薯(Solanum tuberosum)的块茎及龙葵(Solanum nigrum)的全草中。近年研究发现,龙葵碱除具有毒性作用外,还具有抗肿瘤、抗病原微生物作用。国内外学者对其药理、毒理作用及机制进行了深入研究。本文对龙葵碱药理学和毒理学研究相关进展进行综述,为其进一步的研究和应用提供参考。

构建“四位一体”的中药鉴定学实践教学体系

中药鉴定学是中药学专业的核心课,培养中药真伪鉴定、质量评价、质量标准制定和质量检验等方面的能力,对培养应用复合型人才培养目标起着重要支撑作用。院校教学过程中在坚定学生的中医药文化自信基础上,架构综合设计性实验、开展学科竞赛、开拓实训实习、设置学科科研实践,构建"四位一体"的中药鉴定学实践教学体系。该实践教学体系的多年实践证明,学生的中药性状鉴定和显微鉴定的传统技能、理化鉴定和质量评价的综合实验技能得到提高,从而提升了中药学专业应用复合型人才培养的质量。

基于GC-MS的小青龙汤挥发性成分研究

探讨小青龙汤组方药材组成复方前后挥发油成分和比例的变化.采用《中国药典》挥发油测定甲法提取小青龙汤复方、组方中含挥发油的单味药(麻黄、桂枝、细辛、干姜、五味子)及各单味药的阴性对照处方的挥发油,并采用GC-MS联用技术对其进行分析比较,应用峰面积百分比法计算相对百分含量.从小青龙汤中共鉴定出80个挥发性成分,其中百分含量较高的是甲基丁香酚(9.98%)、姜烯(9.86%)、肉桂醛(7.61%)、黄樟醚(7.56%)、衣兰烯(6.74%).另对各色谱峰进行归属,其中71个色谱峰已归属至药材,占已鉴定总峰个数的87.32%.小青龙汤、单味药及各药材阴性对照品中的挥发性成分存在差异.复方新增1,4-钙二烯、(-)-吉马烯、α-古芸烯等9个化合物,同时单味药中也存在个别挥发性成分未在复方中检测到.各单味药之间存在着促进或抑制溶出现象.在含挥发性成分的中药组成复方的汤剂中,不仅存在挥发性成分量的变化,还存在一系列成分间的相互作用和转化导致的质的变化,即生成新的化合物.

虎眼万年青粗多糖的提取工艺研究

目的:对虎眼万年青粗多糖的提取工艺进行优化。方法:采用水提醇沉的提取方法,以粗多糖的多糖含量为考察指标,通过单因素实验筛选出主要影响因素,分析料液比、提取次数、提取温度及提取时间对虎眼万年青粗多糖含量的影响。结果:单因素试验结果显示最佳料液比为1:25,提取次数为3次,提取温度为90℃,提取时间为3h。虎眼万年青粗多糖的多糖含量为9.79%。结论:该提取工艺操作简单,条件易于控制,为虎眼万年青的开发利用提供参考。

野生与栽培黄芩中总黄酮及黄芩苷含量的比较研究

目的:比较野生黄芩与栽培黄芩中总黄酮及黄芩苷的含量。方法:采用紫外分光光度法测定黄芩中总黄酮的含量,采用高效液相色谱法测定黄芩苷的含量,比较野生黄芩与人工栽培黄芩中总黄酮及黄芩苷含量的差异。结果:野生黄芩总黄酮的含量为16.31±2.91%,栽培黄芩总黄酮的含量为25.60±3.03%,存在显著性差异(P=0.005);野生黄芩黄芩苷的含量为8.46±1.23%,栽培黄芩黄芩苷的含量为11.66±1.36%,存在显著性差异(P=0.016)。栽培黄芩总黄酮和黄芩苷的含量显著高于野生黄芩。结论:从总黄酮和黄芩苷含量角度而言,栽培黄芩优于野生黄芩,可以替代野生黄芩用于临床和实际应用。