根际化学与生物多样性的表征方法:组学技术的机遇与挑战

根际是联结植物、土壤和微生物的重要界面,是化学与生物过程耦合最活跃的区域.根际环境影响土壤中有机和无机污染物的行为,而研究方法的完善与提升有助于阐释根际中复杂的过程与作用机制.本文从传统的化学和生物学方法到新兴的组学技术对根际科学的方法学研究进展进行了综述,重点讨论了当今组学技术在根际研究中应用机遇与挑战,同时展望了今后需要关注的科学问题.根际化学组分的传统分析方法涵盖了光谱、色谱、质谱和色质联用等技术,主要聚焦于低分子量有机酸等小分子的定性定量测定,导致对根际化学多样性的认知偏差;传统的根际微生物研究依赖于培养技术,对微生物多样性的描述存在很大的局限.揭示根际异质性和复杂性,亟需采用高端的技术,组学方法显示出极大的优势,显著提高了研究者对根际科学的认识.基于靶向和非靶向代谢组学有利于深入研究根际复杂的化学多样性过程;基于宏基因组学、转录组学和蛋白组学等组学工具能够提供微生物组基因和蛋白的表达、功能特性等更详细的信息,可以全面地揭示根际微生物的多样性.应该强调的是,未来多组学整合分析更是表征根际化学与生物多样性的一个强有力工具,但需要更多的模型、框架和计算基础来实现根际基因、蛋白、转录和代谢水平的多层次关联,以助于挖掘根-微生物-土壤界面大量尚未揭示的关键过程、机理及生态环境效应.

自动清洗类型流式细胞仪进样端清洗新方法

自动清洗类型流式细胞仪长期高负荷使用,会存在碎片信号过多问题,对低浓度定量实验产生严重干扰。本工作设计了一种三阶段清洗进样端的新方法,清洗的同时进行信号采集,监视仪器状态变化。结果表明,通过预清洗,可基本清除悬浮颗粒并且附着在进样端的生物膜发生了活化;正式清洗可以有效地去除进样端内壁附着物;复清洗则使破碎悬浮的生物膜碎片颗粒被充分冲洗去除并且背景颗粒数及荧光值达最低水平。通过这种新的清洗方法,能使得细胞仪保持良好的工作工况状态。

基于生物质谱的蛋白质组学绝对定量方法研究进展

蛋白质组学定量方法包括相对定量和绝对定量两部分。相对定量蛋白质组学(也称比较蛋白质组学)是指对不同生理病理状态下细胞、组织或体液蛋白质表达量的相对变化进行比较分析;绝对定量蛋白质组学是测定细胞、组织或体液蛋白质组中每种蛋白质的绝对量或浓度。目前蛋白质组学的绝对定量方法主要有基于内标法的蛋白质组学绝对定量方法和基于质谱数据统计分析的非标记方法。蛋白质组学定量的信息可以帮助了解蛋白质在相互作用网络中所起的作用;通过对临床生物标记物绝对量的分析,可以帮助直观地判断疾病的发生和发展过程,这对于临床诊断和疾病治疗都具有现实的指导意义。

反相高效液相色谱法测定丹参滴注液中丹参素和原儿茶醛

目的建立同时测定丹参滴注液中丹参素和原儿茶醛含量的方法。方法利用RP-HPLC法，采用Diamonsil^TM C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇-乙腈-冰醋酸-水（10：5：0．25：85）为流动相，流速为1．0mL·min^-1，检测波长为281nm。结果用RP-HPLC法测定2个活性成分丹参素和原儿茶醛分别在20．6～82．4μg·mL^-1和7．8～56．0μg·mL^-1与峰面积呈良好线性关系，相关系数分别为0．9990和0．9996。回收率丹参素为99．46％（RSD=1．0％，n=3）、原儿茶醛为99．96％（RSD=0．97％，n=3）。结论本方法简便、快速，两峰分离良好，可用于丹参滴注液的质量控制。

基质辅助激光解析电离质谱用于多肽和蛋白质亚硝基化修饰研究

亚硝基阴离子是生物体内重要的生物调控小分子,广泛分布于生物体的血液和组织中,能使蛋白质发生硝基化和亚硝基化修饰,并且调控生物体的多种生理过程。本研究应用高灵敏度的基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)技术,以合成的标准肽段和肌红蛋白为模型系统。研究了蛋白质和多肽主链N端氨基与赖氨酸侧链氨基对HNO2反应的敏感性,并考察了反应体系和不同的反应时间对HNO2与多肽的反应完全程度的影响。结果表明,HNO2能与肽段N端的伯氨基发生重氮化反应,形成的叠氮化中间产物不稳定,放出氮气形成碳正离子,碳正离子可进一步发生取代或消除反应。发生取代反应,水溶液中的羟基取代N-末端氨基形成M+1产物,既使得产物比原肽段分子量多1Da;发生消除反应,脱掉1分子的氨,又生成M-17烯烃衍生物,从而使产物比原肽段分子量少17Da。当采用1mol/L乙酸和1mol/L的亚硝酸钠作为反应体系时,反应5min,肽段的N端氨基即可完全与HNO2反应生成羟基取代产物和烯烃衍生物。而在上述条件下,未发现赖氨酸侧链氨基与HNO2反应,说明HNO2主要与肽段和蛋白的N端氨基发生反应。

反相高效液相色谱法测定不同产地和种属丹参饮片中3种脂溶性成分

用超声法提取丹参饮片中的脂溶性有效成分,然后用反相高效液相色谱法同时测定丹参饮片中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的含量。采用DiamonsilTM(钻石)C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以V甲醇∶V水=75∶25为流动相,流速为0.8mL/min,检测波长为270nm。3个活性成分隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA分别在1.456～10.19、2.160～15.12和3.152～22.06μg/mL含量范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数r分别为0.9991、0.9992和0.9996;平均回收率隐丹参酮为98.04%(RSD=1.3%,n=3),丹参酮Ⅰ为99.65%(RSD=1.2%,n=3),丹参酮ⅡA为99.31%(RSD=1.2%,n=3)。所建立的质控方法快速、简便、准确,可用于丹参饮片的质量控制。

丹参注射液及滴注液质量控制研究

目的建立丹参注射液及滴注液中水溶性酚酸总量的测定方法，以控制该两种制剂的内在质量。方法利用丹参中水溶性酚酸类成分与亚硝酸钠和硝酸铝溶液在碱性条件下的显色反应，比色法测定该两种制剂中水溶性酚酸（以原儿茶醛计）的总量。结果原儿茶醛在3．336～14．46mg／L范围内呈良好的线性关系，回归方程为：A=0．02777C＋0．01279（r=0．9996），加样平均回收率为100．8％，RSD为0．96％。结论该法简便快速，结果准确，重现性好，可用于该制剂的质量控制。

对跆拳道比赛安全性的研究

根据第九届全国运动会比赛的裁判记录及录像 ,进行统计、综合分析跆拳道项目的安全性 ,让更多的人了解这个新兴项目 ,使更多的人参与跆拳道运动。

丹参及丹参制剂中水溶性酚酸总量的测定

目的:研究建立丹参及丹参制剂中水溶性酚酸总量的测定方法,以控制内在质量。方法:在1 mol／L的冰醋酸溶剂中,利用丹参中水溶性酚酸类成分与铁氰化钾-三氯化铁的显色反应,比色法测定丹参及其制剂中水溶性酚酸(以原儿茶醛计)的总量。结果:原儿茶醛在0．4448～ 2．002μg／ml范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=0．05237C+0．07654(r=0．9998),加样平均回收率为100．0％,相对标准偏差(RSD)为0．93％。结论:该法简便快速,结果准确,重现性好, 可用于丹参及其制剂的质量控制。

磺化修饰结合离子交换色谱和生物质谱富集鉴定含组氨酸肽段

通过在肽段的N端引入磺酸基,从而使含组氨酸的肽段与其他肽段在pH<3.0的条件下产生电荷差异,建立了一种基于强阳离子交换色谱(SCX)结合生物质谱富集鉴定含组氨酸肽段的方法,并以含有组氨酸的标准蛋白质为模型,进行了方法学考察。结果表明,经N端磺酸化后,含组氨酸的肽段能有效地被阳离子交换色谱富集,且在肽的N端引入磺酸基促进了肽的裂解,使之产生简单而信息丰富的二级质谱图,从而得到完美的质谱鉴定结果。这说明磺化修饰结合强阳离子交换色谱用于含组氨酸肽段的富集鉴定是可行的,且具有在蛋白质组研究中应用的潜力。

基于AT89S51的新型打铃器的研制

介绍了一种由AT89S5 1单片机和DS12 887时钟芯片构成的新型打铃器。对打铃器的硬件构成、工作原理和部分软件的编程流程进行了详细地阐述。打铃器以DS12 887为基准时间,走时精确,万年历时间显示,可存储5 6条作息时间,掉电数据不丢失。在软件的编程中,调用AT89S5 1芯片自带的看门狗(WDT) ,增强了系统的抗干扰性能。经在多所学校测试,均实现了定时、存储和控制功能,具有很高的科研和商业价值。

孔子的体育思想及其对后世的影响

孔子以"仁"为主体的体育思想,对后世体育产生了重大影响,构成了中国古代体育的主体精神。在当代,它更是培植了一种巨大的文化范畴内的精神力量,铸就了中华民族的体育精神。

关于儒、道两家体育思想的研究

孔子的体育思想是一种伦理体育观 ,庄子体育思想是美学。两种体育思想在漫长的中国封建社会中 ,时而冲突 ,时而互补 ,指导着中国古代体育循环式前进。

中美两国竞技体育与教育结合的比较与分析

本文用比较分析的方法,比较了中美两国竞技体育与教育结合的状况,试图找出两国的差异,并提出了可行性建议。

论先秦时期养生理论的科学内涵及对后世的影响

中国养生术博大精深 ,集医家、体育于一身 ,融强身、医疗为一体 ,在强身健体方向独具特色 ,能起到现代体育无法替代的效用。究其根源 ,就要追溯到百家争鸣、思想界空前自由的先秦时代。

复方丹参注射液中水溶性酚酸总量的测定

研究建立复方丹参注射液中水溶性酚酸总量的测定方法,以控制该制剂的内在质量。在1mol/L的冰醋酸溶剂中,利用丹参中水溶性酚酸类成分与铁氰化钾—三氯化铁的显色反应,比色法测定该制剂中水溶性酚酸(以原儿茶醛计)的总量。结果显示,原儿茶醛在0.4448—2.002μg/mL范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.05237C+0.07654(r=0.9998),加样平均回收率为100.0%,RSD为0.93%。该法简便快速,结果准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制。

基于AT89S51的新型定时控制系统的研究和实现

本文介绍了一种以ATmel公司的AT89S51单片机和达拉斯半导体公司的DS12887时钟芯片构成的定时控制系统,详细介绍了单片机的硬件电路和软件控制的编程方法,具有很高的科研和商业价值。