置换弱毒C株非编码区的嵌合猪瘟病毒对猪的致病性研究

猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病。研究表明,CSFV的非编码区(UTR)与病毒复制和毒力相关。为了分析置换CSFV弱毒疫苗C株UTR的嵌合毒株对病毒复制和猪致病性的影响,以构建的C株和QZ14(CSFV 2.1 d型毒株)感染性克隆质粒pA-C和pA-QZ14为基础,扩增pA-C的UTR区和pA-QZ14除UTR以外的基因组序列,利用同源重组技术构建重组质粒pA-QZ14-CUTR;将体外转录的病毒基因组RNA转染PK-15细胞,连续传代以拯救嵌合病毒株QZ14-CUTR;将其接种PK-15细胞,通过免疫荧光和测序鉴定以确定拯救是否成功;RT-qPCR和毒价滴定法测定病毒生长趋势,分析其细胞适应性;将嵌合病毒以1×10^(5)TCID 50剂量肌肉接种试验猪以观察其致病性。结果表明,QZ14-CUTR拯救成功,基因组中稳定携带C株UTR序列;生长曲线显示,QZ14-CUTR病毒基因组拷贝数和滴度均低于亲本毒株QZ14;相较于QZ14株,QZ14-CUTR仅引起猪轻微的临床症状,不显著影响猪白细胞和淋巴细胞数;病理变化程度、排毒阳性率和组织中的病毒核酸阳性率均低于QZ14株;QZ14-CUTR能诱导特异性CSFV E2抗体,且抗体水平持续上升。综上所述,CSFV流行毒株QZ14的UTR被弱毒C株UTR置换后,其在PK-15细胞中的复制能力有所下降,对猪的致病力降低。

黄柏油纳米乳的制备及其安全性评价

为了解决中药提取物黄柏油在推广中遇到的问题，试验采用纳米技术将其制成纳米乳剂，依据纳米乳的稳定性和安全性，利用伪三元相图筛选出最佳配方，按照配方制备出黄柏油纳米乳，并对其理化性质及皮肤安全性进行评价。结果表明：黄柏油纳米乳最佳配方为黄柏油6．23％，RH-4029．72％，无水乙醇5．15％，水58．90％；经鉴定，其结构类型为水包油型，外观澄清透明，粒径介于7—26nm之间，平均粒径为16．8nm，多分散系数（PDI）为0．317，平均Zeta电位为-22．9mV；稳定性和皮肤安全性良好。说明该纳米乳符合临床应用的要求。

“互联网+”背景下的中职思想政治教育创新实践

在互联网时代,网络逐渐走入千家万户,影响着人们的生活和学习方式。但网络也是一把双刃剑,会带给学生更多的迷惑,让学生被手机捆绑,被互联网所累。所以,在现阶段,互联网背景下,一定要有效开展思想政治教育。特别是面对中职生这一群体,要实现教育创新,让互联网价值和作用发挥到最大,让学生在无形中具备正确的思想言行。

猪瘟病毒基因2型流行毒株和疫苗C株抗血清与相应E2蛋白交叉免疫反应性分析

为研究猪瘟病毒(CSFV)2.1基因亚型病毒株和疫苗C株E2蛋白与相应抗血清的免疫反应性差异,本研究在分析4株CSFV浙江流行株(QZ-14、JH-14、QZ-07和HZ-08)与疫苗C株E2变异程度的基础上,制备了流行病毒株和疫苗C株全病毒猪抗血清以及针对流行株E2的单克隆抗体(MAb)4F4,比较了它们与同源株和异源株重组杆状病毒表达的E2蛋白的亲和性。结果显示,4株浙江分离株中2株(QZ-14和JH-14)属于亚型2.1d,另2株(QZ-07和HZ-08)为亚型2.1b,它们与C株E2的核苷酸同源性在82%~84%;间接免疫荧光鉴定显示MAb 4F4能够识别4株流行株,但不与C株反应;接种流行株的动物均出现不同程度临床症状;ELISA分析显示疫苗C株血清与流行株E2蛋白的反应性约为C株E2蛋白的27%~49%,2株流行株感染血清与C株E2蛋白反应性约为流行株E2蛋白的34%~50%,免疫印迹分析显示类似结果。以上结果表明CSFV基因2型流行株与疫苗C株E2蛋白的差异显著影响其与相应抗血清的交叉免疫反应性,这一现象是否与C株猪瘟疫苗免疫保护效果下降有关还有待于进一步研究。

猪瘟弱毒标记疫苗候选株RecC-M1对猪的安全性研究

为探究猪瘟弱毒标记疫苗候选株RecC-M1(将牛病毒性腹泻病毒1型E^(rns)和猪瘟病毒基因2型流行株E2高变区分别置换弱毒疫苗C株对应区域构建而成)对猪的安全性,本实验以2.0×10^(5)FAID_(50)(50%荧光抗体感染剂量)高剂量的RecC-M1株经颈部肌肉注射接种12头35日龄猪瘟病毒(CSFV)抗体阴性仔猪,另设生理盐水对照组6头。接种后观察各组猪的临床症状,并于接种后不同时间(0、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、28 d和42 d)采血用于细胞计数;接种后7 d和42 d各取6头猪(包括第42 d对照组6头猪),剖杀后观察各组织剖检病变,并取各组织制作切片观察组织病变,采用qPCR检测病毒在各组猪各组织中的分布。根据qPCR结果,选择阳性组织样品(扁桃体、肾脏和淋巴结)的病理切片采用免疫组化法检测RecC-M1株在猪上述各组织中的分布。于接种后0~7 d、14 d、28 d和42 d分别采集各组猪的鼻拭子和肛拭子样品以及不同时间采集的血液,均采用qPCR检测各组猪的病毒血症及排毒;采用间接ELISA分别检测各组猪血清中分别针对BVDV及CSFV相应抗原的抗体水平。结果显示,RecC-M1组猪在42 d的观察期内均未出现临床症状,体温、白细胞数和淋巴细胞数与阴性对照组猪均无明显差异,且均在正常范围内;剖检及组织病变观察结果显示,接种后7 d和42 d猪的各组织均未见淤血或出血;扁桃体、淋巴结、脾、肾、膀胱、回盲瓣等CSFV嗜性组织均未见明显的病理学变化;各组织样品的qPCR结果显示,接种后7 d所有6头猪的肾脏和扁桃体样品和2头猪的淋巴结样品中均检出CSFV核酸,而接种后42 d所有猪的组织样品均为阴性;免疫组化结果显示,接种后7 d猪扁桃体和肾脏样品中CSFV抗原均呈阳性,接种后42 d猪的所有组织样品则均转为阴性;病毒血症和排毒的qPCR结果显示,接种后14 d内部分猪血液、鼻拭子和肛拭子样品中检出CSFV核酸,接种后28 d和42 d所有猪血液、鼻拭子和肛拭子则均为阴性。间接ELISA结果显示,接种后14 d针对BVDV1 E^(rns)抗体开始上升,而针对CSFV E2的抗体则在接种后7 d开始上升,此后两种抗体水平均随时间的推移呈持续上升趋势。阴性对照组猪各组织均未见明显剖检及组织病变,各组织CSFV抗原,各组织、血液及拭子样品均为阴性,也未产生针对相应病毒抗原的抗体。上述结果表明,高剂量的RecC-M1株对猪是安全的,本研究为RecC-M1株作为猪瘟弱毒标记疫苗的产业化开发奠定实验基础。

自制便携式简易负压封闭引流装置在剖宫产术后切口脂肪液化治疗中的应用

目的:探讨自制便携式简易负压封闭引流装置修复剖宫产术后切口脂肪液化创面的可行性及临床效果。方法:2016年1月至2021年12月,徐州市中心医院收治11例剖宫产术后切口严重脂肪液化患者,年龄23~35岁,横切口8例,纵切口3例,腹膜外切口全层裂开,长度10~15 cm,宽度2~4 cm,深度3~4 cm,局部筋膜外露。患者或家属主观意愿拒绝手术,采用自制便携式简易负压封闭引流装置对切口进行治疗,观察其效果。结果:11例患者切口均愈合良好,平均住院时间(16.55±4.08)d,自简易负压治疗开始到创面完全愈合时间(24.91±6.39)d,平均换药(7.09±2.02)次。随访1年温哥华瘢痕量表评分(3.09±0.70)分。结论:简易负压封闭引流操作简单,携带方便,可使剖宫产术后切口脂肪液化创面的愈合时间缩短,使换药次数减少,住院天数减少,效果明显,值得推广。

穆民称赞的李超英阿訇

山东省政协委员、曹县政协常委、东关清真寺阿訇李超英,在爱国主义和社会主义旗帜的指引下,努力学习党的民族和宗教政策,积极协助党和政府做好民族团结工作,为促进曹县社会安定和经济发展做了许多有益的工作,受到了全县各族人民的赞誉。

自制简易封闭负压引流联合异种脱细胞真皮基质在老年Ⅳ期压力性溃疡治疗中的应用

目的探讨自制简易封闭负压引流联合异种脱细胞真皮基质对老年Ⅳ期压力性溃疡(压疮)的治疗效果及可行性。方法对24例老年Ⅳ期压疮患者采用自制的简易封闭负压吸引装置联合异种脱细胞真皮基质治疗,观察创面愈合效果。结果12例治疗45～70 d后创面完全愈合;8例疗效显著,出院时创面缩小75%左右,肉芽新鲜,随访20～35 d创面愈合;4例好转,创面缩小30%～50%,有少量至中等渗液或脓液,部分肉芽水肿。结论自制简易封闭负压引流联合异种脱细胞真皮基质对老年Ⅳ期压疮的治疗效果显著,能明显减轻患者经济负担,缩短换药时间,促进肉芽组织生长及创面愈合。

中职思政课“工匠精神”培养的策略与教学方法探析

中职思政课教育是培养中职学生敬业精神、精益求精精神、奉献精神的有效途径和主要渠道,将"工匠精神"融入中职思政课教学能够让中职学生实现对自身所应具有的道德品质、从业品质的深刻认知,对中国制造、中华民族伟大复兴有着极高的社会意义。本篇文章首先介绍"工匠精神"的内涵,并阐述中职思政课教育的目标和核心,最后结合中职思政课"工匠精神"培养的意义,针对中职思政课"工匠精神"培养的教学方法提出几点建议。

中职思政课生活化教学的尝试与思考

中职阶段,学生的世界观、人生观和价值观尚未完全确立,容易受到外界各种思想的影响。所以,学校应当对其进行正确的引导,通过开设思想政治课程,使学生树立正确的价值观。在中职思政课程的教学过程中应用“生活化”教学,能够将教材上的思想理论与生活中的实际案例结合讨论,从而有效提高课堂的教学效果,提升学生的思想道德素质水平。

李喆:扎根一线筑匠心

“能参与到重点项目建设中,发挥自己的作用,这是我的荣幸,更是一份沉甸甸的责任。”谈起自己的工作,山东省机关事务管理局建设工程管理处四级调研员李喆深感使命光荣、责任重大。李喆长期奋战在建设工程一线,凭着对事业的执着追求和满腔热忱,将智慧和力量都倾注到了自己热爱的工作之中。

激动素对D-半乳糖致衰雌性小鼠卵巢和子宫的影响

本文旨在研究激动素对氧化损伤雌性小鼠卵巢和子宫的影响。采用普通级雌性昆明小鼠80只,以D-半乳糖复制小鼠衰老模型。按体重随机分为正常组、D-半乳糖模型组、25mg/kg激动素组和50mg/kg激动素组。通过检测小鼠的发情周期、卵巢和子宫湿重及脏器指数、雌二醇(E2)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)和总蛋白含量以及卵巢形成成熟卵母细胞的能力,观察激动素对D-半乳糖致衰雌鼠卵巢和子宫的作用。结果显示,与D-半乳糖模型组相比,25mg/kg和50mg/kg激动素组小鼠发情周期变短,卵巢和子宫湿重显著增加,血清E2含量显著提高;同时,卵巢和子宫的SOD及GSH-Px活性和总蛋白含量均显著增高,而MDA的含量则显著降低;而卵巢形成成熟卵母细胞的数量也极显著增加。以上结果表明,激动素能抵抗卵巢和子宫的氧化损伤,预防因卵巢氧化损伤而造成的雌激素分泌量低下、成熟卵母细胞减少问题,改善小鼠的发情周期,维持卵巢和子宫的器官功能并保持其活力。

丙型肝炎病毒核心蛋白对人源性肝细胞凋亡的影响

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对人源性肝细胞凋亡的影响。方法构建HCV核心蛋白真核表达载体pIRES-core,转染人源永生化肝细胞QSG7701,Western blotting印记法检测核心蛋白及转录因子NF-κB的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 QSG7701/core组细胞凋亡率为(1.34±0.07)%,低于QSG7701组(2.35±0.11)%和QSG7701/pcDNA3.1组(2.58±0.13)%,三组比较差异有统计学意义(P<0.05);同时转录因子NF-κB表达上调。结论 HCV核心蛋白上调转录因子NF-κB的表达,可能是抑制人源性肝细胞QSG7701凋亡的主要机制。

清创联合负压伤口疗法和局部皮瓣治疗魟鱼刺伤一例

2018年1月10日徐州市中心医院收治1例魟鱼刺伤左大腿3 d的35岁男性患者。入院时患者左大腿红肿、疼痛明显,入院当天即在门诊手术室急诊行局部清创,去除感染坏死组织。常规换药创面好转后行手术清创、负压伤口疗法,最终采用局部皮瓣修复创面。皮瓣修复术后14 d患者拆线出院。随访半年,患者术区恢复良好。本病例提示魟鱼刺伤后及时正确的院前处理、入院后及时彻底清创、全身抗生素应用是减少毒素进一步损害重要手段,负压伤口疗法完善"创面床"准备后采用局部皮瓣移植方式修复创面可达到较佳效果。

基于纳米颗粒的赭曲霉毒素A高灵敏酶联免疫检测方法的建立及应用

赭曲霉毒素(ochratoxins)主要是由青霉菌Penicillium和曲霉菌Aspergillus产生的有毒次级代谢产物,常见于发霉或发酵的农产品中,其中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)毒性最强且最为普遍。OTA是粮食作物和饲料的重要污染物,在加工、储存或运输过程中均可产生,具有肾毒性和免疫毒性,可通过蓄积作用发挥毒性效应,对人类和动物健康造成严重威胁。本研究通过将OTA单克隆抗体包被于纳米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs)表面,获得具有免疫活性的磁珠抗体复合物(MNPs-Anti OTA),并制备生物素标记的偶联抗原OTA-BSA-Bio,后续采用链酶亲和素标记的纳米金颗粒(Strep-HRP-AuNPs)催化底物进行信号检测,最终建立了OTA高灵敏检测方法(MNPs-bs-AuNPs-ELISA)。在最优条件下,经计算该方法检测下限(IC10)为0.01ng/mL,检测区间(IC20-IC80)为0.02-0.73ng/mL,半数抑制率(IC50)为0.13ng/mL。与OTA类似物OTB、OTC交叉反应性为4.3%和8.1%,对其他常见真菌毒素AFB1、ZEN、FB1、DON、CIT和PAT均无交叉反应。玉米、面粉和大豆样本中的加标回收率可达85.6%-115.7%,对天然样本中OTA含量的检测结果表明,该方法与LC-MS/MS相关性良好。本研究建立的MNPs-bs-AuNPs-ELISA可满足谷物及饲料样本中OTA的快速、高灵敏度定量检测,成本较低,具有很好的应用前景。

自制简易负压联合VSD治疗下肢坏死性筋膜炎合并臀部压疮一例

患者男,41岁,因'左臀部溃烂流脓1年,左下肢溃烂流脓半个月'于2016年12月28日入院。患者因腰骶部神经发育异常,自幼双下肢活动障碍,左下肢为重。因长期坐立,1年前左侧坐骨结节局部皮肤破溃,范围逐渐扩大加深,伴脓性分泌物,半个月前左大腿后侧皮肤突发红肿胀痛,并蔓延至左小腿上段,于当地医院住院治疗,床旁行左下肢切开清创引流,未见明显好转,间断发热,为进一步治疗转至徐州市中心医院烧伤整形科。

自制便携式简易负压辅助闭合疗法在下肢慢性溃疡治疗中的应用

目的探讨自制便携式简易负压辅助闭合疗法对下肢慢性溃疡的治疗效果以及可行性。方法选取徐州市中心医院烧伤整形科2016年1月至2017年1月收治的30例下肢慢性溃疡患者,采用随机数字表法将患者分为对照组和试验组,每组15例,对照组外用重组人表皮生长因子凝胶+湿润烧伤膏包扎,根据创面渗出情况每1~2 d换药1次,待创面肉芽组织新鲜且无明显渗出后可3 d换药1次。试验组采用凡士林纱布、无菌纱布、输液皮管、注射器及手术贴膜,自制便携式简易负压辅助闭合装置进行治疗,每更换1次简易负压为1个疗程,前期每4~5 d更换1次简易负压,创面基底条件好转、肉芽组织生长良好后每5~7 d更换1次简易负压。观察2组患者创面换药次数及愈合时间。对数据行t检验。结果试验组换药次数为(4.1±0.8)次,创面愈合时间为(16.5±2.5)d,对照组换药次数为(11.4±2.3)次,创面愈合时间为(22.9±4.5)d,2组之间比较,差异均有统计学意义(t=11.698、4.838,P值均小于0.05)。结论自制便携式简易负压辅助闭合疗法是一种创新性的实用型设计,对下肢慢性溃疡的治疗效果显著,能减少换药次数,缩短创面愈合时间,操作简单,携带方便,在病房及门诊均值得进一步推广应用。

“新闻联播校本化”策略在中职思政课教学中的尝试和思考

目前,中职学校如何对学生创新性和科学性地开展思想政治课教学,实施思想政治教育成为中职思政课教师关注的重点。“新闻联播”的内容与中职思政治课教学内容紧密联系的特点,为思政课创新性教学策略的探索带来了一个新的路径,教育者要立足于新闻联播的内容优势和中职学生学习思政课的现实,尝试和思考“新闻联播校本化”策略,促进新闻联播与中职学生思想政治教育教学的融合发展。