鸡盲肠菌群的厌氧连续培养及培养物的生理生化特性

目的 对鸡盲肠菌群的厌氧连续培养方法及培养物的生理生化的特性进行初步研究。方法用鸡盲肠内容物接种连续培养装置 ,进行厌氧连续培养 ,稀释率为 0 .0 4h- 1 ,运转 7～ 10 d后达到稳定状态。在稳定状态时 ,对培养系统中的菌群结构、p H、OD值以及挥发性脂肪酸 (VFA)进行了分析。结果 当该培养系统过到稳定状态时 ,培养物的 p H、OD值 ,以及 VFA的产量都达到了一个相对稳定的水平。结论 有机酸中的丁酸、乙酸、丙酸等维持在一个较高的水平 。

呈味核苷酸的开发及现状

本文研究了呈味核苷酸的化学性质及特性,对其开发和生产现状作了简介,并综合概述了几种生产方法,闸明了呈味核苷酸在食品、医药及农业方面的使用价值。

胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的建立

为建立胰岛素抵抗脂肪细胞模型,以3T3-L1前脂肪细胞为研究材料,通过3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松和胰岛素联合诱导其分化为3T3-L1脂肪细胞,通过葡萄糖消耗实验研究胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗的作用浓度和时间关系,发现10-7mmol/L胰岛素诱导处理48h是3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗的最适条件,该细胞模型的胰岛素抵抗状态可维持48h。通过高浓度胰岛素成功诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,具有建模周期短、重复性好、操作简便的优点,该细胞模型可以用于抗胰岛素抵抗天然产物的筛选研究。

应用PCR-DGGE技术分析泡菜中乳酸菌的多样性

从泡菜液中抽提总DNA,扩增16S rDNA的V7-V8区,变性梯度凝胶电泳分离PCR片段,发现不同样品间的菌种差异显著。对片段直接测序和克隆测序,进行Blast分析,绘制进化树。结果表明,DGGE和克隆技术相结合是研究泡菜中乳酸菌多样性的可行方法。

分子印迹柱-高效液相色谱法测定猪肉中磺胺嘧啶(英文)

建立了分子印迹柱-高效液相色谱法检测猪肉中磺胺嘧啶残留方法。制备了磺胺嘧啶的分子印迹柱,并优化了分子印迹柱的萃取条件。研究结果表明,在最佳萃取条件下,分子印迹柱-高效液相色谱法的加标回收率≥75.6%,相对标准偏差≤6.1%。分子印迹柱为固相萃取柱可以预浓缩与纯化猪肉样品中磺胺嘧啶。与氧化铝萃取柱比,分子印迹柱具有较好的重复性和萃取效率。本方法已成功用于实际猪肉样品中磺胺嘧啶含量的检测,结果满意。

降解黄曲霉毒素微生物筛选中降解与吸附结合作用的区分

黄曲霉毒素的污染不仅带来巨大的经济损失,而且严重危害人和动物的健康,因而生物降解真菌毒素一直引人关注。但在研究黄曲霉毒素微生物降解时,首先必须要有可靠的方法来判定毒素是被降解还是可逆的吸附结合。该文在黄曲霉毒素B1(AFB1)降解菌株筛选中,对区分降解与吸附结合作用的方法进行了研究,建立了可靠的分析方法,通过比较不同pH的影响,细胞灭活对AFB1去除的影响,分析菌株细胞水洗脱、有机溶剂萃取后AFB1的变化等方法,有效地排除了生物吸附结合以及pH的干扰,区分了降解作用和可逆的吸附作用,这些方法简单实用。据此,从动物粪便中成功筛选到了2株能高效降解AFB1的菌株F4、F7。

响应面法优化中性蛋白酶水解棉籽蛋白工艺

采用中性蛋白酶对棉籽蛋白进行水解。选用温度、pH值、加酶量和水解时间四个反应因素作为研究对象,以蛋白质的水解度为评价指标,在单因素试验的基础上,通过三因素三水平的Box-Behnken响应面分析法优化棉籽蛋白质的水解工艺条件。结果表明,在加酶量为6000U时,最优水解条件为温度39.5℃、水解pH7.5、水解时间5.5h,在此水解条件下,水解度可达到38.09%。

乳酸乳球菌食品级诱导表达系统的构建及异源蛋白的表达

以α-aga基因为食品级选择标记构建了乳酸乳球菌食品级高效诱导细胞内和细胞壁锚定表达系统,并用这一表达系统表达了铜绿假单胞菌融合外膜蛋白基因OprF/H。首先以pRAF800和pNZ8048构建了含有α-aga、PnisA-MCS-TpepN和θ复制子的乳酸乳球菌食品级细胞内诱导表达载体pRNA48,再以pRNA48和pVE5524为出发载体构建了含有α-aga、PnisA-SPUsp45-nucA-CWAM6-t1t2和θ复制子的乳酸乳球菌细胞壁锚定诱导表达载体pRNV48。然后以食品级载体pRNA48和pRNV48为基础,构建了不含抗生素抗性选择标记的铜绿假单胞菌融合外膜蛋白基因的表达质粒pRNA48-OprF/H和pRNV48-OprF/H。利用nisin进行重组乳酸乳球菌菌株的诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,检测到表达蛋白分别占细胞内可溶蛋白的9.6%和细胞壁锚定蛋白的9.8%,表达产物具有免疫原性,可与含OprF/H的乳球菌以及铜绿假单胞菌发生特异性的凝集反应。

乳酸菌抗氧化活性及检测方法

通过对30株乳酸菌清除DPPH自由基和抗亚油酸过氧化能力的实验,筛选出了抗氧化活性较强的乳酸菌L3和L4。从得到的两株乳酸菌分别制备无细胞提取物(菌数为1010mL-),利用6种方法对这两株乳酸菌无细胞提取物的抗氧化性能进行了检测分析,发现L31和L4可螯合Fe2+,分别为54.3×10-和41.3×10-,清除超氧自由基分别为14.9%和87.0%,清除羟自由基分别为83.5%和45.7%,并具有还原66活性。进一步研究发现乳酸菌L4SOD活性为(73.70±1.77)U/mg,但这2株乳酸菌均未检测到GSH-Px活性。

施氏假单胞菌F4产黄曲霉毒素B_1降解酶条件的优化

在前期工作中分离到可高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的施氏假单胞菌F4,本实验对其产AFB1降解酶的发酵条件进行考察和优化,选择与产酶相关的种龄、接种量、起始pH值、发酵时间以及发酵温度5个因素,以AFB1降解酶酶活力为评价指标,在单因素试验的基础上,通过三因素三水平的Box-Behnken响应面分析法优化施氏假单胞菌发酵产AFB1降解酶的条件。结果表明,在接种量和起始pH值分别为3%和6.5时,最优发酵条件为种龄10.47h、发酵时间42.52h、发酵温度30.28℃,在此发酵条件下,酶活力可达到2768.7U,比优化前提高了28.99%。

尿素包合法纯化玉米油中亚油酸的研究

研究了尿素包合过程中回流时间、包合时间、包合温度、尿素与溶剂配比等主要条件与纯化得到的亚油酸纯度和得率的关系。结果表明,尿素与溶剂配比是影响亚油酸纯度和得率的主要因素。当尿素/乙醇为1∶2(W/V)时,亚油酸的纯度和得率均较高,当混合脂肪酸/尿素/乙醇为1∶3∶6(W/W/V)时,在室温下,通过一次尿素包合就能使亚油酸的纯度从44 48%提高到95 68%,得率为72 41%。

微生物生产共轭亚油酸的研究

介绍了共轭亚油酸的结构、性质、作用和机理 。

共轭亚油酸分析方法的研究进展

共轭亚油酸由含有共轭双键的亚油酸的位置和几何异构体组成 ,具有多种生理活性作用。综述了共轭亚油酸分析方法的研究进展 ,包括气相色谱、银离子高效液相色谱、气 -质联用和高效毛细管电泳。选择可靠的分析方法是共轭亚油酸研究的关键。

双歧杆菌选择计数方法的研究进展

综述了近年来双歧杆菌选择计数方面的研究进展。介绍了国外报道的几种应用效果较好的选择计数培养基，提出了这方面需要进一步开展的工作与想法。

红外二阶导数指纹图谱用于紫花地丁药材的产地分类

建立了紫花地丁药材的红外二阶导数指纹图谱。采用傅里叶变换-红外光谱法测定10个不同产地紫花地丁试样的红外光谱,红外分辨率为8 cm^-1,扫描范围为4 000-400 cm^-1,利用二阶导数重构指纹图谱后,进行系统聚类分析和Fisher′s判别分析。结果表明所建立的方法能够能有效地对样品产地进行预测,可为紫花地丁药材质量控制提供一种简便、有效的手段。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及初步鉴定

γ-氨基丁酸是哺乳动物体内的一种抑制性神经递质,具有许多重要的生理功能。利用MRS培养基从自然生境中分离了1000余株细菌,经纸层析和HPLC检测,发现其中一株能转化谷氨酸钠生成GABA,产量为4.84g/L;转化产物通过HPLC-MS得到了证实。通过形态特征和生化特性鉴定,初步判断该菌为乳酸菌。

广昌白莲微生物发酵产物多肽的抗氧化活性研究

广昌白莲(Nelumbo nucifera Gaertn)具有高蛋白、低脂肪、氨基酸含量丰富等特点,蛋白降解后的小分子多肽既利于吸收且具有新的功能。本实验主要利用菌种发酵中产生的蛋白酶水解白莲蛋白质,以水解度作为指标,对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵白莲的条件进行了优化,经葡聚糖凝胶G-25对发酵产物进行分离并检测多肽对羟自由基的清除活性。结果表明,在白莲粉4%、麸皮1%、接种5%、37℃、120r/min、发酵48h的条件下,水解度可达49.2%。此时发酵液对羟自由基的清除率为65.6%。此发酵液经凝胶层析后各吸收峰具有不同羟自由基的清除能力,吸收峰3具最高羟自由基的清除率,达85.2%。实验证明,广昌白莲多肽具有较高的羟自由基清除活性,在食品和医药上均具有应用前景。

施氏假单胞菌F4对黄曲霉毒素B_1的酶解作用及其降解产物的初步分析

施氏假单胞菌F4能高效降解黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)。研究了F4的AFB1降解活性、降解动力学以及蛋白酶K和SDS对其降解性能的影响。F4细胞悬液与毒素共培养72 h后降解率达80.03%;蛋白酶K处理对降解率没有影响,SDS处理的细胞悬液基本丧失了降解活性。不同时间点的降解液上清液仍能有效降解残留AFB1,其中以60 h的降解液上清液活性较好,与残留AFB1继续作用48 h后降解率达84.30%;而经蛋白酶K处理后降解率仅为45.42%。低浓度AFB1诱导对菌体的降解活性没有影响。上述结果提示,F4通过胞内酶作用降解AFB1。高效液相色谱对产物分析表明,F4可将AFB1酶解为至少2种产物。

黄曲霉毒素B1降解酶的分离纯化及其酶学特性

施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)F4能产生黄曲霉毒素B_1的降解酶(aflatoxin B_1-degrading enzyme,ADE),本实验通过3步法提取纯化ADE,即包括硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析。结果表明,通过以上纯化方法,ADE的回收率为56%,纯化的ADE比活力为6.4x10^4U/mg,纯化了123倍。利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得ADE分子质量约为24kD;ADE与AFB_1反应的最适温度和pH值分别为30℃和6.0;CU^(2+)对ADE酶活性有抑制作用;利用双倒数作图法测得ADE表观K_m值为5.61×10^(-5)mol/L。