福氏2a宋内氏双价痢疾菌aroD基因缺失减毒株FS－5441的构建

通过Ｐｌｋｃ噬菌体将Ｔｎ１０插入灭活的ａｒｏＤ基因片段导入双价有毒痢疾菌ＦＳ－１５中，构建了该株的芳香族氨基酸营养缺陷减毒株，并通过Ｂｏｃｈｎｅｒ培养基去除Ｔｎ１０所携带的四环素抗性，经原位杂交从中检测到ａｒｏＤ基因缺失株ＦＳ－５４４１。该株稳定表达福氏及宋内氏双价Ｏ抗原，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ显示该株表达Ｉｐａ蛋白，具有穿入ＨｅＬａ细胞的能力，穿入率为１９％。营养缺陷表型的回复突变率小于１０￣（－１１）。小白鼠毒力试验证明安全无毒，免疫小白鼠后对福氏及宋内氏毒株的攻击具有保护活性。

CD4^+T细胞在痢疾疫苗诱导小鼠肠粘膜免疫应答中的作用

以本室构建的双价痢疾候选疫苗株ＦＳ５４１６ 作为口服免疫原，检测了小鼠ＰＰ 结（Ｐｅｙｅｒ ，ｓ ｐａｔｃｈｅｓ） 中Ｔ 淋巴细胞的体外增殖反应， 观察了腹腔注射抗Ｌ３Ｔ４ ｍ Ａｂ 对小鼠肠粘膜部位产生特异性Ｉｇ 分泌细胞的影响。结果表明：①小鼠口服免疫后，ＰＰ 结中的ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞可产生明显的特异性增殖反应：②选择性地删除ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞后，小鼠肠粘膜无抗原特异性Ｉｇ 分泌细胞产生。以上提示，小鼠肠粘膜对痢疾疫苗的免疫应答需要ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞的参与。

幽门弯曲菌对理化因子抗力的研究

在实验室内测定了幽门弯曲菌对热、干燥、紫外线与14种消毒剂的耐受力,以及14种抗菌药物对该菌的抑制作用。结果表明,幽门弯曲菌对理化因子抗力较弱,一般消毒措施均可将其杀灭,多种抗生素对其有明显抑菌作用。

双价痢疾候选疫苗诱导小鼠产生粘膜免疫应答机制的初步研究

目的探讨痢疾疫苗诱导粘膜产生免疫应答的调节机制，为研制安全有效的痢疾疫苗提供免疫学的理论依据。方法以本室构建的两株福氏２ａ、宋内氏双价痢疾候选疫苗ＦＳ－２１１７与ＦＳ－５４１６经不同途径免疫小鼠，分离小鼠ＰＰ结（Ｐｅｙｅｒｓｐａｔｃｈｅｓ）与脾脏中的ＣＤ４＋Ｔ细胞并以ＭＴＴ法检测其对疫苗不同抗原成分的增殖反应。结果（１）口服痢疾疫苗可诱导ＰＰ结中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生显著的增殖反应，而未对脾脏中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生刺激作用；（２）皮下注射痢疾疫苗能使小鼠脾脏中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生显著的增殖反应，但未见ＰＰ结中的ＣＤ４＋Ｔ细胞产生明显的免疫应答；（３）痢疾疫苗可能有多种抗原成分参与了刺激肠粘膜ＰＰ结中ＣＤ４＋Ｔ细胞的增殖反应。结论口服痢疾候选疫苗可有效地诱导肠道粘膜产生免疫应答；免疫应答的产生可能依赖多种抗原成分的共同作用。ＰＰ结中ＣＤ４＋Ｔ细胞的特异性活化可能是诱导肠道粘膜免疫应答最重要的早期事件。

两株双价痢疾菌苗免疫小鼠后GALT中CD4^+、CD8^+ T细胞亚群的反应

目的ＦＳＭ－２１１７和ＦＳ－５４１６是两株具有不同生物表型的福氏、宋内氏双价痢疾菌苗株，ＦＳＭ－２１１７无侵袭表型，无溶血活性，不表达侵袭蛋白抗原（Ｉｐａ－），ＦＳ－５４１６则为Ｉｐａ＋，本实验是为了观测两株菌苗（Ｉｐａ－，Ｉｐａ＋）免疫后引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的细胞免疫反应，以探明痢疾菌苗在肠粘膜的免疫保护机制。方法以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分成两组，每组２５只，灌胃免疫ＦＳＭ－２１１７及ＦＳ－５４１６，８×１０８ＣＦＵ／只，分别在１，４，７，１０，１３天随机取各组小鼠５只分离ＧＡＬＴ淋巴细胞；同时设一组ＰＢＳ对照组，以间接免疫荧光法检测ＧＡＬＴ中诱导部位〔派伊尔小结（ＰＰ）、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）〕及效应部位〔上皮间淋巴细胞（ＩＥＬ）、粘膜固有层（ＬＰＬ）〕Ｔ细胞亚群的变化，荧光显微镜计数２００个细胞计算阳性率。结果用ＳＡＳ软件，单因素方差分析，表明两株双价菌苗株均可引起肠粘膜ＧＡＬＴ中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞亚群改变，不同粘膜部位免疫反应不同。诱导部位（派氏小结、肠系膜淋巴结）ＣＤ４＋细胞亚群明显升高，末次免疫后第７天达峰值，而后迅速下降；在效应部位，粘膜固有层表现为ＣＤ４＋细胞亚群明显?

慢性胃炎与消化性溃疡患者幽门螺杆菌的感染状况及诊断方法

本文通过200例患者活检标本的对比研究证明,幽门螺杆菌在消化性溃疡与活动期慢性胃炎中有较高的感染率,分别为68%～92%和62.9%～92.6%;而非活动期慢性胃炎仅为36.6%～39.8%.同时证明,用pH试纸检测尿素酶的存在是一个经济、简易、快速、有较高特异性和敏感性的诊断幽门螺杆菌感染的方法.

T_H1和T_H2细胞在痢疾疫苗诱导小鼠产生粘膜免疫应答中的调节作用

目的 在初步了解ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞参与痢疾疫苗诱导小鼠肠粘膜免疫应答的基础上，从细胞及分子水平进一步探索ＴＨ１ 和ＴＨ２ 细胞在小鼠肠粘膜对痢疾疫苗免疫应答中的调节作用。方法 以本室构建的福氏２ａ 及宋内氏双价痢疾疫苗株ＦＳ２１１７ 或ＦＳ５４１６ 灌胃免疫小鼠，从细胞表型及几种细胞因子ｍ ＲＮＡ 表达水平两方面观察小鼠肠粘膜中Ｐａｙｅｒ 氏结（ Ｐｅｙｅｒ’ｓ ｐａｔｃｈ ， ＰＰ） 及肠系膜淋巴结等免疫诱导部位ＴＨ１ 和ＴＨ２ 细胞的动态变化规律。结果 （１） 痢疾疫苗灌胃免疫后早期，小鼠肠粘膜的免疫诱导部位表现为ＴＨ１ 型细胞亚群百分率的显著降低；免疫后晚期ＴＨ１ 型细胞亚群百分率则显著升高，且高于未免疫的正常小鼠。（２） 痢疾疫苗免疫后从小鼠ＰＰ 中分离的ＣＤ４ ＋ Ｔ 细胞，在特异性痢疾疫苗抗原刺激下，先出现ＩＬ５ 、ＩＬ６ 的高表达，后出现ＩＦＮγ、ＩＬ２ 的高表达。结论 痢疾疫苗免疫后小鼠肠粘膜免疫的诱导部位早期表现为ＴＨ２ 型细胞亚群的优势活化，晚期逆转为ＴＨ１ 型细胞亚群的优势活化。