基于Delphi法构建全科住院医师规范化培训教学查房细化评分量表

目的探索构建标准化全科住院医师规范化培训教学查房细化评分量表。方法采用焦点小组法组织从事全科医学工作10年以上的专家进行讨论,初步构建《全科住院医师规范化培训教学查房细化评分表》。然后,由10名全科教学查房指导专家,根据指标的重要性、可行性及专家的积极性、协调性等进行两轮Delphi问卷咨询。最后,运用层次分析法计算各级指标的权重,确定评价指标体系。结果共进行2轮焦点小组讨论,5名成员对各级指标进行讨论修改分类,初步建立教学查房评估指标体系。10名咨询专家共进行2轮问卷咨询,问卷回收率均为100%。第一轮、第二轮专家咨询的权威系数分别为0.93,0.97,协调系数Kendall’s W分别为0.522,0.421,P<0.001。根据两轮专家咨询结果构建7项一级指标、20项二级指标、119项三级指标,其中一级指标的权重分别为0.0327、0.0464、0.1599、0.2815、0.1599、0.1599、0.1599,所有指标判断矩阵的一致性比率CR均小于0.1。结论本研究构建的全科教学查房细化评分体系合理、完整、可操作性好,多维度反映查房教师及住院医师表现,可作为全科教学查房评价的参考依据。

特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应

为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中hTERT mRNA的表达。与对照组相比,4段siRNA中有3段在转染后12h即对hTERT mRNA的表达产生抑制,48h抑制率最高,72h后下降,其中位于hTERT mRNA二级结构中的结构相对简单区域的siRNA抑制率最高,达到75%,说明特异性siRNA对hTERT基因有明显的抑制效果,且该抑制效应具有位置及时间依赖性。

基于“talk+”模式的基础医学整合课程探索与实践

在国家大力推进“健康中国”战略和“新医科”建设的背景下,为培养具有融合视野和创新能力的综合型基础医学人才,助力现代医学的发展,针对学院基础医学专业,本教研团队探索构建由宏观到微观的基础医学有机整合课程--《基础医学talk》,并创新性地以“talk+”模式教学激发学生学习热情和创新思维,促进知识内化和融合,以期培养高素质综合型基础医学人才。

沉默SEPT9基因对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨SEPT9基因与肝癌的关系,进一步揭示SEPT9基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法将构建的针对SEPT9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blot法分别检测SEPT9 mRNA和蛋白质的表达抑制情况,CCK-8检测细胞的生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果荧光显微镜观察细胞的转染效率达到70%以上;SEPT9 mRNA及蛋白表达抑制率均受到明显抑制。CCK-8法检测结果显示,实验组HepG2细胞的生长受到明显抑制;流式细胞术检测结果显示实验组HepG2细胞凋亡明显(P<0.05)。结论抑制SEPT9基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,并对细胞凋亡有明显的促进作用。

论高等医学院校基础医学专业科研兴趣小组活动的开展

对于高等医学院校来说，基础医学教台是临床专业医学生培养中非常重要的一环。这些基础医学学科包括医学生物学、生理学、组织胚胎学、病理学、生物化学、免疫学、解剖学等，学好他们不仅能为学好临床医学理论打下基础，而且也为将来科研工作打下理论和技术基础。如何提高临床专业医学生的实践操作能力及科研水平．及对基础医学学科的重视程度是高等医学院校一个亟待解决的问题。

Survivin启动子调控的hTERT基因RNAi载体的构建及其肿瘤靶向干扰作用研究

目的:构建带有肿瘤特异性Survivin启动子、hTERT基因靶向的shRNA表达载体pYr-Survivinp-miR30-hTERT,探讨该载体的肿瘤靶向性及其RNAi作用效率,为RNAi技术在肿瘤基因治疗中的进一步优化进行有益的探索。方法:化学合成hTERT基因shRNA寡核苷酸序列,克隆至质粒pYr-CMV-Mir30-shRNA,构建重组质粒pYr-CMV-Mir30-hTERT;克隆Survivin启动子序列,取代该质粒原有的CMV启动子,构建重组质粒pYr-Survivinp-miR30-hTERT,同时构建阴性对照质粒pYr-CMV-Mir30-NC,以上质粒均进行酶切及测序鉴定。将以上载体分别转染人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞及293T细胞,荧光显微镜下观察细胞转染情况,并采用半定量RT-PCR、western blot技术检测MCF-7细胞和Hela细胞中hTERT mRNA和蛋白的表达。结果:重组质粒经酶切及测序鉴定证实均符合设计要求,构建成功;荧光检测结果表明,CMV组在三种细胞中均有荧光蛋白的表达,而Survivin组质粒仅在MCF-7细胞和Hela细胞中表达绿色荧光,转染效率均能达到70%以上,而在293T细胞中则未见荧光;RT-PCR和Western blot的结果均显示MCF-7细胞和Hela细胞的Survivin组和CMV组中hTERT mRNA和蛋白的表达均受到明显抑制(P<0.05),两组之间无明显差异(P>0.05)。结论:Survivin启动子调控的hTERT基因RNAi载体能有效抑制Survivin阳性肿瘤细胞中hTERT的表达,而对正常细胞不产生影响。

四川省全科住院医师规范化培训基地教学查房竞赛结果分析

目的分析四川省全科住院医师规范化培训教学查房现状。方法组建全科教学查房专家评审团队,采用经Delphi法构建的全科教学查房评分表,对四川省32家参与教学查房竞赛的全科住院医师规范化培训基地提交的教学查房视频进行评分。结果Delphi法构建的全科教学查房评分表结果显示,总分90分以上、60分以下基地各2家,教学查房总成绩不理想,均分(74.49±9.39)分。从地区分布来看,成都市内较成都市外的全科基地教学查房质量高(t=2.67,P<0.05);在不同的经济区中,川东北经济区较成都平原经济区总成绩低(t=5.80,P<0.05);大专院校附属医院与非大专院校附属医院全科基地在教学查房总分比较,差异无统计学意义(t=1.15,P>0.05)。结论四川省全科教学查房水平不高,参差不齐,薄弱环节为教学查房具体实施过程,尤其在病房阶段、示教室讨论阶段。教学查房过程中全科理念及技巧培训指导有待提高。

DF3启动子调控的hTERT基因RNAi载体的构建及靶向干扰效果的鉴定

目的:构建带有肿瘤特异性DF3启动子、针对hTERT基因的RNA干扰表达载体pGenesil-10-miR30-DF3-hTERT,探讨该表达载体的肿瘤靶向性基因抑制作用。方法:分别用针对hTERT基因的RNA干扰寡核苷酸序列及DF3启动子取代质粒pGenesil-10-Micro30中原有的miR30序列及CMV启动子,构建pGenesil-10-miR30-DF3-hTERT载体并进行酶切及测序鉴定。将该载体分别转染人乳腺癌MCF-7细胞、肝癌HepG2细胞及造血干细胞,ELISA法检测hTERT蛋白的表达情况。结果:重组质粒经酶切及测序鉴定证实符合设计要求,构建成功。ELISA法检测结果显示,实验组MCF-7细胞及HepG2细胞的hTERT蛋白下降显著(P<0.05),其中以MCF-7细胞下降更为明显;造血干细胞实验组则无明显变化(P>0.05)。结论:DF3启动子调控的hTERT基因的RNA干扰表达载体能有效抑制DF3阳性肿瘤细胞中hTERT的表达,以乳腺癌细胞效果最为显著,而对端粒酶阳性的正常细胞不产生影响。

医学遗传学实验教学中对医学生综合实践能力的培养初探

＂以实验为中心安排教学＂是近年来美国高校正在开展的一项极有影响力的实验教学改革计划（enhanced biology education programe,EBE）,其教学重点为能力的培养[1-2]。医学遗传学是应用遗传学的理论和方法研究人类遗传性疾病和人类疾病发生的遗传学问题的一门综合性学科[3],是横跨基础医学与临床医学的桥梁课程。

研究型教学与合作学习模式的创建与实践

如何培养学生解决实际问题的能力和创新能力是当前高等教育改革的重要课题之一。创新能力是在创造性解决问题的过程中培养出来的综合能力[1]。启发学生主动实践,是创新能力培养的关键所在。医学是一门不断创新与发展的学科。高等医学院校在培养学生的过程中,不仅要培养学生的专业知识水平,而且要培养学生的自学能力及敏捷的科学思维[2]。

hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTCAGCGTGCTCAACTA,构建重组siRNA表达质粒pGenesil-hTERT,同时构建不针对任何基因的阴性对照重组pGenesil-HK。两种重组质粒经酶切、电泳分析和测序鉴定后,用脂质体转染法分别转染乳腺癌MCF-7细胞,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。转染pGenesil-hTERT的MCF-7细胞,凝胶电泳见端粒酶特征性条带明显减少,端粒酶活性受到明显抑制;pGenesil-hTERT转染细胞后凋亡率较对照组明显升高(P<0.01),且转染48h凋亡率最高,达54.7%±2.41%。结论hTERT-siRNA可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性、促进细胞凋亡,此法有望应用于肿瘤基因治疗。

人TRF2基因有效siRNA序列的筛选

目的设计合成干扰端粒重复序列结合因子2(telomeric repeatbinding factor 2,TRF2)基因表达的不同小型干扰RNA(siRNA),筛选出能高效抑制TRF2基因表达的siRNA。方法根据人TRF2 mRNA的序列,设计合成3对不同的针对TRF2的siRNA、应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂将三对siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞,实时荧光定量RT-PCR技术检测TRF2 mRNA表达水平、Western印迹法检测TRF2蛋白表达以确定干扰效果。结果设计合成的3对TRF2 siRNA中有2对siRNA可有效抑制TRF2基因表达。结论成功设计合成了针对TRF2基因的siRNA,并从中筛选出能特异且高效阻断TRF2表达的siRNA,为进一步应用RNAi技术抗TRF2基因进行肿瘤基因治疗研究奠定实验基础。

siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究

目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。

互交哲学理论模式在医学分子生物学教学中的应用

作为医学院校,医学教育应是科学精神与人文精神的统一[1-2]。医学教育只有与医学人文相互交融[3-4],通过培养学生的哲学思维[5-6],让学生的内在得到熏陶,才能培养出合格的医学人才。结合本校冯志强教授35年的教学和研究工作,在中西方哲学和教育思想的影响下,

siRNA表达载体对hTERT基因的效应评价

目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰表达载体,探讨其对人乳腺癌MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达的影响。方法:设计针对hTERT基因的干扰靶序列并构建重组siRNA表达载体pGenesil-hTERT。酶切测序鉴定后,脂质体转染MCF-7细胞,应用RT-PCR和Weston Blot法检测hTERT基因的表达情况,应用流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功,且转染MCF-7细胞后,hTERT mRNA和蛋白质表达水平显著抑制,细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.01)。结论:以DNA质粒为载体的siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞生长、促进细胞凋亡。

黄芪注射液对蟾蜍和小鼠中枢、神经-肌接头和肌疲劳的影响

目的:利用已建立的蟾蜍和小鼠中枢、神经-肌接头和肌疲劳模型,比较不同剂量的黄芪注射液对蟾蜍和小鼠中枢、神经-肌接头和肌疲劳的影响。方法:分别记录蟾蜍和小鼠坐骨神经干动作电位和腓肠肌收缩曲线,测定中枢、神经-肌接头和肌疲劳的时间。结果:①0.8g.kg-1、1.2g.kg-1、1.6g.kg-1和2.0g.kg-1剂量的黄芪注射液均能延缓小鼠中枢、神经-肌接头和肌的疲劳,蟾蜍仅有0.8g.kg-1和1.2g.kg-1有此作用,1.6g.kg-1及以上剂量的黄芪注射液对蟾蜍有加速上述部位疲劳的作用。两种动物均以1.2g.kg-1剂量作用最显著;②最佳剂量1.2g.kg-1黄芪注射液延缓两种动物神经-肌接头和肌疲劳的作用与延缓中枢疲劳的作用比较差异具有统计学意义(P<0.05);③最佳剂量1.2g.kg-1黄芪注射液对小鼠三个部位的作用同蟾蜍比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪注射液对两栖动物和哺乳动物中枢、神经-肌接头和肌疲劳的影响具有差异性;其抗疲劳作用主要发生在神经-肌接头和肌等部位,即延缓外周疲劳;其抗疲劳效应,哺乳动物优于两栖动物。

留学生医学细胞生物学全英文授课探讨

留学生教育有利于稳定和发展我国与世界各国在教育、科技、经贸、文化等领域的关联和合作,是新时期教育国际化的一个重要组成部分。近年来,随着我国经济实力的快速发展和综合国力的不断提高,在教育方面与国外的交流不断深入扩大,来华留学生不断增多,尤其是医科留学生。作为反映高校教育水平的重要标志,医科留学生教育能有效提升高校的国际声望,同时,也对教师的教学水平和教学质量提出了更高要求。

研究生医学细胞生物学教学探讨

细胞生物学是医学教育的重要基础课程，生命科学的发展对医学细胞生物学教学提出了新的要求，建立适合新发展要求的医学细胞生物学教学体系是当前各高等医学院校教学改革的重点。从理论教学方法、实验教学模式、考核方式等方面详细论述了完善研究生细胞生物学教学体系的改革措施。

精细化理论在医学细胞生物学及遗传学教学中的应用

目的:建立基于精细化管理理论的医学教学模式。方法:在医学细胞生物学和遗传学课程教学运行过程的课前准备、课堂教学、课外拓展学习、考核等环节运用精细化理论进行细化管理,组织教学。结果:通过改革,形成教学"密切结合科研,密切结合实践,密切结合新进展"的特色教育模式。结论:精细化培养是高等人才培养的有效途径之一。运用精细化的管理思想构建人才培养体系,是现阶段高等教育发展的需要。

PBL教学法在医学分子生物学教学中的应用

PBL教学法是一种近年来引入我国的一种全新教学模式,它可以提高学生的自学能力和解决问题的能力。本文作者总结了在《医学分子生物学》理论课教学中采用PBL教学模式的实践经验,证明了PBL教学方法对于提高学生综合思考能力很有帮助,激发了学生学习的积极性、主动性和创造性,同时也显示学生对于PBL教学模式有很高的热情,通过讨论合作,提高了学生的团队合作精神。