昆明山海棠与类风湿关节炎滑膜细胞体外增殖和凋亡

背景:昆明山海棠应用于类风湿关节炎治疗已被证实有确切疗效,但对于其作用机制目前尚不明确。目的:验证昆明山海棠对类风湿关节炎滑膜巨噬样细胞和成纤维样细胞体外增殖活性及对其凋亡影响,分析其剂量效应关系。设计、时间及地点:细胞学体外分组对照实验,于2003-08/2007-06在汕头大学医学院第一附属医院中心实验室和南方医科大学细胞生物实验室完成。材料:类风湿关节炎6例及正常滑膜组织3例,来源于汕头大学医学院第一附属医院骨科和南方医院脊柱骨病科患者术中获得的标本。昆明山海棠制备水提取液,含生药0.667g/mL。方法:收集获得的滑膜组织,通过消化法获得原代类风湿关节炎及正常滑膜细胞,第2～4代细胞用免疫磁珠法筛选滑膜CD68+细胞和CD68-细胞,在接种72h后加入实验各组分别在培养液中加入最终体积分数分别为5,10,20mL/L的昆明山海棠药液处理24h和48h。同时设立不加药物的阴性对照及不加细胞空白对照。主要观察指标:相差倒置显微镜、扫描电镜观察细胞形态,用MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测和TUNEL法检测细胞凋亡。结果:分选后滑膜CD68-细胞为成纤维样细胞,滑膜CD68+细胞为滑膜巨噬样细胞。施予干预因素后,各组有部分细胞体积缩小,胞膜皱缩,微绒毛和伪足减少或消失,部分细胞可见团块脱落形成凋亡小体。当昆明山海棠体积分数为2%时,各组细胞均有不同程度抑制,显示昆明山海棠有细胞毒性,对类风湿关节炎滑膜CD68-、CD68+细胞的抑制效应和诱导细胞效应强于同种正常滑膜细胞(P<0.01)。在药物体积分数为1%时,对类风湿关节炎滑膜细胞有明显抑制效应(P<0.01)。昆明山海棠对诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡作用有明显时间依赖性和剂量依赖性,且凋亡率与相同条件下的抑制率表现出较好的直线相关关系(r=0.497,P<0.01)。结论:昆明山海棠对于类风湿关节炎滑膜巨噬样细胞和滑膜成纤维样细胞有诱导凋亡和明显抑制异常增殖作用。在一定浓度下,昆明山海棠对于正常滑膜细胞毒性较小且对类风湿关节炎滑膜细胞的有较明显抑制异常增殖和诱导细胞凋亡的效应。

膝关节类风湿关节炎滑膜切除术后远期观察

目的连续观察膝关节类风湿关节炎(RA)滑膜组织切除对改善关节损害及对生活质量的远期效果。方法1988-1997年中21例RA患者做24个膝关节滑膜切除。在术前、术后0.5年以及连续8年每年检查X光平片并用Larsen评分法评估骨破坏情况及健康评定问卷(HAQ)评分情况。结果滑膜切除术后关节损害均有不同程度改善,关节周围骨质疏松有明显好转。在手术0.5年开始Larsen评分下降,1年时获得最好效果并至少能持续5年,此后再度出现关节损害。HAQ评分在术后0.5年出现最好效果并至少维持2年,术后4年恢复至术前水平并逐步恶化。结论膝关节滑膜切除不仅能阻止局部病变的进展,而且有利于改善关节周围骨破坏,提高生活质量。但在术后远期,随着滑膜组织增生再度出现关节损害和生活质量下降。因此,从临床上证实RA滑膜组织参与关节周围骨破坏和全身疾病活动。

陈旧性胸腰椎及脊髓损伤手术治疗的远期随访

本文对１９７Ｏ年８月～１９９３年８月住院治疗的２８１例陈旧性胸腰椎及脊髓损伤患者中的１５７例进行了远期结果与并发症进行分析，发现通过手术减压恢复脊柱稳定性，有利于脊髓神经功能恢复，减少并发症出现，以获得最大可能康复。

人外周血CD68^+单核细胞体外的分选及诱导分化为破骨细胞

目的建立高纯度人活性破骨细胞方法,用于对破骨细胞生物化学和分子生物学的研究。方法用免疫磁珠法在人类外周血单核细胞中分选出CD68+细胞,用流式细胞仪分析分选效能,体外在10-8 mol/L地塞米松及25 μg/L巨噬细胞集落刺激因子的培养条件下用16 μg/L可溶性核因子κB受体活化子配体诱导(s-RANKL)分化,用降钙素受体抗体免疫组化染色及抗酒石酸磷酸酶染色鉴定,扫描电镜观察骨片贴壁细胞及骨吸收陷窝。结果分选获得CD68+单核细胞纯度为(93.06±0.61)%(n=4),经核因子κB受体活化子配体诱导后降钙素受体抗体免疫组化染色阳性,抗酒石酸磷酸酶染色,扫描电镜观察有骨吸收陷窝形成。结论人外周血单核细胞中CD68+细胞是破骨前体细胞,在RANKL在诱导下分化为成熟破骨细胞。

四种常用抗类风湿性药物对成纤维样滑膜细胞体外增殖的影响

目的:探讨吲哚美辛、雷公藤多甙、甲氨蝶呤、地塞米松4种常用抗类风湿性药物对成纤维样滑膜细胞体外增殖的影响,为类风湿性关节炎患者临床用药,改善其功能提供依据。方法:实验于2003-05/2004-02在的第一军医大学细胞生物实验室完成。类风湿性关节炎及正常滑膜组织,分别来源于第一军医大学南方医院脊柱骨病科和汕头市第二人民医院外二科因类风湿性关节炎而行全膝关节置换术或经关节镜滑膜切除术的患者和无关节炎病史的创伤性截肢患者,用原酶消化法获得成纤维样滑膜细胞。用第2～4代细胞在接种12h后分别加入上述药物处理24h,在第5和第10天分别用四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖情况并统计分析。结果:雷公藤、甲氨蝶呤第5天对成纤维样滑膜细胞体外增殖抑制率分别为(46.14±4.20)%和(31.52±2.86)%,第10天分别(47.00±1.89)%和(46.73±3.83)%。消炎痛及地塞米松对成纤维样滑膜细胞增殖无明显抑制作用。这种抑制作用对于类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖尤为明显。雷公藤多甙比甲氨蝶呤对成纤维样滑膜细胞体外增殖抑制作用有更明显的时间依赖性。结论:雷公藤、甲氨蝶呤对于类风湿性关节炎的成纤维样滑膜细胞增殖有明显抑制作用,适当延长甲氨蝶呤用药间隔时间对于抑制滑膜组织过度增生及血管翳的形成效果可能相似。

类风湿关节炎滑膜CD68阳性细胞筛选的意义

目的:探讨用CD68作为细胞标志筛选类风湿关节炎和正常滑膜组织中的滑膜巨噬细胞CD68+细胞,并观察筛选后细胞的活性及特性。方法:滑膜组织来源于2003-02/2004-03南方大学南方医院脊柱骨病科收治的12例住院患者。类风湿关节炎组6例源自全膝关节置换术或经关节镜滑膜切除术的类风湿关节炎患者,正常滑膜组6例来自无关节炎病史的半月板损伤患者,均经病理诊断证实。从滑膜组织中分离滑膜细胞,免疫磁珠法筛选滑膜CD68+和CD68-细胞,用流式细胞仪检测筛选效能;用免疫组化染色观察类风湿关节炎组和正常滑膜组筛选前后滑膜CD68+细胞所占比例;以四甲基偶氮唑盐比色法观察筛选后细胞体外培养增殖活性。结果:所获12例滑膜组织全部进入结果分析。①滑膜细胞分离后观察:滑膜细胞24h后贴壁生长,滑膜巨噬样细胞在类风湿关节组的比例较正常滑膜组高。②筛选后滑膜细胞的观察结果:免疫磁珠法筛选的CD68+和CD68-细胞均在2h内开始贴壁,24h后CD68-细胞呈极向排列生长,贴壁能力强于CD68+细胞。筛选后的滑膜CD68+细胞与磁珠结合在一起,具有巨噬样细胞形态,胞周可有突起,分裂增殖较慢,但在体外能传数代;CD68-细胞未与磁珠结合,表现为长梭形成纤维细胞样形态,细胞分裂增殖迅速。③CD68+细胞的纯度分析:经流式细胞仪分析细胞纯度为93.6%,主峰右移,细胞平均体积增大。滑膜CD68-细胞不能被FITC标记。④滑膜细胞CD68的表达观察:筛选后CD68+细胞均为棕黄色。细胞核大、较疏松,细周有突起。CD68-细胞基本为成纤维样细胞,胞浆未被黄染,细胞核位于细胞中央,呈卵圆形,核仁明显。⑤两组滑膜细胞体外增殖速度:在体外均有不同程度增殖活性。类风湿关节炎和正常滑膜CD68-细胞增殖速度快于同一组织来源滑膜CD68+细胞的增殖速度[(0.680±0.047),(0.236±0.014);(0.605±0.031),(0.195±0.019);t=21.989,P<0.05]。类风湿关节炎滑膜CD68+细胞增殖速度快于正常滑膜CD68+细胞的增殖速度[(0.236±0.014),(0.195±0.019);t=4.149,P<0.05]。结论:CD68可作为一种标志来筛得滑膜细胞中的巨噬细胞和其他滑膜细胞,筛选后滑膜细胞均具有良好增殖活性。CD68+细胞具有典型巨嗜样细胞形态,CD68-细胞主要为成纤维样细胞,两种细胞区分程度好有助于临床对疾病活动期和严重程度判断。

胫骨外侧平台骨折关节镜下经皮复位植骨螺钉内固定:4年随访

背景:有研究表明,胫骨平台骨折切开复位内固定的病例中远期出现继发性骨性关节炎,但很少有研究者报道关节镜辅助下胫骨平台骨折内固定的中远期效果。目的:关节镜下经皮植骨或螺钉内固定治疗胫骨平台骨折后1年及4年后的效果及放射学评价。方法:收集2007年3月和2009年3月期间,汕头大学医学院第一附属医院骨科收治的胫骨外侧平台骨折经关节镜辅助下植骨或螺钉内固定病例的资料,记录骨折Schatzker分型、术中平台侧软骨缺损、股骨侧软骨损伤、关节内软组织损伤、复位不足及术后外侧平台骨折沉降资料。评估植骨或螺钉内固定后1年和4年时膝关节Lysholm评分、Ahlback骨性关节炎分级以及Rasmussen功能评分和放射性评分。结果与结论:23例患者完成随访研究,植骨或螺钉内固定后1,4年平均Lysholm评分分别为90分和87分(P=0.23),Rasmussen功能评分平均为26分和24分(P=0.30)。术后4年有11例(47.8%)出现膝关节骨性关节炎,Rasmussen放射学评分从术后初期17.4分下降至术后4年的13.6分(P=0.01)。各型骨折与预后无相关性;老年病例、软骨损伤或/和缺损、关节内软组织损伤以及术后外侧平台沉降影响术后中期功能和影像学结果;但统计中发现,胫骨侧软骨缺损对于中期发生关节炎的作用远低于股骨侧的软骨损伤。结果提示:术后早期的影像学结果并不能完全与术后4年的结果相匹配,但中期随访的临床和功能结果仍然满意。患者年龄、合并关节内软骨和软组织损伤以及术后胫骨平台沉降均是影响治疗后患膝出现骨性关节炎的消极因素。胫骨侧软骨缺损对于中期发生关节炎的消极作用远低于股骨侧的软骨损伤,可能与完好的外侧半月板功能有关。

膝关节交叉韧带和侧副韧带体部损伤与膝前区挫伤部位的相关性研究

目的探讨X射线检查无骨形态改变的膝关节静态韧带稳定结构损伤与膝前区挫伤部位的相关性。方法回顾性分析我们两所医院2008年1月-2013年1月期间所接诊的膝前区挫伤患者临床资料,分析这些患者中膝关节交叉韧带和侧副韧带体部损伤与膝前区挫伤部位的相关性。结果共有5843例纳入统计分析,178例有交叉韧带或/和侧副韧带体部损伤。在331例有浮髌试验阳性中有146例为交叉韧带或/和侧副韧带体部损伤。从分布情况来看,62.82%交叉韧带损伤表现为挫伤区在关节线下方,78.75%侧副韧带损伤表现为挫伤区在关节线水平,59.46%交叉韧带合并侧副韧损伤表现为挫伤区在关节线下方。仅有11.24%患者有韧带损伤表现为挫伤区在关节线上方。经Pearson检验,χ2值为81.96,P<0.01,有统计学意义。本组有5.7%患者浮髌试验阳性,其中有韧带结构损伤患者中82.0%有浮髌试验阳性,Pearson检验卡方值为2003.06,P<0.01有统计学意义。结论膝前区挫伤且X射线检查并没有阳性发现的病例中,约有3%患者合并有膝关节韧带结构损伤。挫伤区在关节线水平下方合并有韧带结构损伤可能性最高,主要为交叉韧带体部损伤和交叉韧带合并侧副韧带体部损伤。挫伤区在关节线水平,合并韧带结构损伤主要为侧副韧结构体部损伤。挫伤区在关节线水平上方合并韧带体部结构损伤可能性较低。

老年股骨颈骨折人工关节置换术后并发症分析

目的 :探讨人工关节置换对老年股骨颈骨折的疗效及其术后早期并发症的防治。方法 :采用人工关节置换治疗老年股骨颈骨折 56例 ,其中人工股骨头置换 35例 ,全髋置换 2 1例。回顾分析术后早期并发症的原因。结果 :疗效按Harris评分标准评定 ,优良率 81 %。术后早期并发症 8例。结论 :采用人工股骨头置换术对高龄、全身健康状况较差及偏瘫病人 ,疗效满意 ;人工关节置换术后的早期并发症与并存症、全身健康状况及年龄相关。

胫骨带锁髓内钉治疗骨折与锁钉装置的改进

目的 探讨应用带锁髓内钉治疗胫腓骨骨折 ,在不需X线引导下进行手术的可行性和效果。方法 应用非扩髓带锁髓内钉治疗胫骨骨折 46例。其中闭合性骨折 2 5例 ,开放性骨折 2 1例。改进带锁髓内钉远端瞄准器 ,增设辅助定位装置。结果 全部病例经随访 6个月以上 ,除 1例骨折术后1 0个月愈合外 ,45例骨折愈合时间平均 4 8个月。患者膝、踝关节功能均恢复正常。改进后的带锁髓内钉远端瞄准器 ,一次钻孔交锁成功 45例 ,无锁钉放置失败 ,术后无髓内钉或锁钉断裂。结论 非扩髓带锁髓内钉治疗胫腓骨骨折 ,手术不需X线引导 ,改进后的带锁髓内钉远端瞄准器 ,锁钉准确 ,简便实用。

原发性肺癌血清骨钙素水平与骨转移的关系

目的:观察血清骨钙素水平与肺癌骨转移的关系。方法:应用Pharmacia CAP系统检测86例原发性肺癌和36例正常人血清骨钙素水平。结果:肺癌及其不同细胞类型病人之间以及与正常人比较,无骨转移者血清骨钙素水平无明显差异,伴有骨转移者血清骨钙素水平(6.26±1.68)明显高于无骨转移者(4.53±1.50)和正常人(4.56±1.53)(P<0.05)。结论:血清骨钙素检测对预示肺癌发生骨转移有参考价值。

家属健康教育对髋关节置换术后患者康复的效果研究

目的:探讨对髋关节置换患者家属同步实施健康教育对患者康复的影响。方法:选择80例髋关节置换住院患者,随机分为观察组和对照组,两组患者在常规治疗的同时接受健康教育,观察组在此基础上对家属同步实施健康教育。对两组患者出院前康复知识、技能的掌握情况及病人的满意度、术后6个月髋关节的Harris评分进行比较和统计学分析。结果:观察组Harris评分、康复知识、技能的掌握情况及病人的满意度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:对髋关节置换患者家属同步实施健康教育,可提高家属的知识水平、配合程度及患者的康复锻炼能力,提高患者的生活质量。

老年髋部骨折下肢深静脉血栓形成的早期预防

目的探讨老年髋部骨折围术期下肢深静脉血栓形成(DVT)的早期预防措施。方法采用多普勒超声与静脉造影,在手术前、后检测65岁以上老年髋部骨折患者121例,早期综合防治DVT,选择合适的手术方法治疗骨折。结果该组检出DVT5例,术前检出DVT3例,术后2例。经早期的综合治疗,血栓缩小机化,无出现症状性肺梗塞,术后患肢功能良好。结论老年髋部骨折手术前后均可发生DVT,围术期采用彩超监测与综合治疗是早期预防DVT的有效措施。

地塞米松治疗逆行岛状皮瓣血运障碍患者的护理

总结30例患者逆行岛状皮瓣移植术后出现血运障碍早期应用地塞米松治疗的护理经验。术后第1个24h内每30min严密观察皮瓣1次，主要观察颜色、温度、毛细血管的充盈反应以及肿胀情况；24h后每1h观察皮瓣1次，至术后3d；3d后每4h观察皮瓣1次。本组有5例患者术后2-6h内出现动脉供血不足，25例患者术后22h内出现静脉回流障碍，均在30min内给予地塞米松治疗；应用地塞米松后每15min观察皮瓣1次，并仔细记录用药后皮瓣的反应，给予针对性心理护理，做好体位护理：5例皮瓣动脉供血不足的患者，患肢平放于床上，以利于动脉血流；25例静脉回流障碍患者，患肢抬高10～20cm，以利皮瓣静脉及淋巴回流。同时做好敷料管理，术后伤口敷料底层保持湿润，以利于伤口生长及减少敷料干燥对皮瓣形成压迫。经精心治疗与护理，30例出现血运障碍的皮瓣，完全成活27例，大部分成活2例，1例大部分坏死，改行其他皮瓣治疗。认为严密观察皮瓣血运，在皮瓣血运障碍可疑的情况下早期应用地塞米松治疗，能有效改善逆行岛状皮瓣血运障碍。

形状记忆合金环抱器治疗锁骨骨折不愈合的体会

目的探讨形状记忆合金环抱器治疗锁骨骨折不愈合的疗效。方法使用形状记忆合金环抱器治疗锁骨骨折不愈合13例,其中内固定术后失败12例,非手术治疗1例,均采用植骨。结果13例均获随访,平均12.7个月,X线片显示术后平均2.4个月骨折愈合。结论形状记忆合金环抱器治疗锁骨骨折不愈合固定坚强,操作安全,愈合率高。

带锁髓内钉治疗股骨干骨折与远端安锁定位装置

目的 总结带锁髓内钉治疗股骨干骨折的临床经验 ,改进远端锁钉瞄准器。方法 股骨干骨折 32例中 ,新鲜骨折 2 5例 ,陈旧性骨折 7例。采用闭合穿钉治疗 11例 ,半开放穿钉 12例 ,开放穿钉 9例。设制髓内钉定位孔及安锁定位装置。结果 本组病例随访 6～ 2 3个月 ,平均 12个月骨折均已愈合。按Klemm功能恢复分级评定 :优 2 1例 ,良 9例 ,中 2例。远端锁钉瞄准器改进后手术使用 30例 ,无锁钉放置失败 ,一次交锁成功 2 9例。结论 ①应用带锁髓内钉固定 ,对闭合复位困难的股骨干新鲜骨折 ,采用半开放穿钉术 ,效果良好。②改进后的远端锁钉瞄准器无需X线引导 ,锁钉准确可靠。

应用Steffee手术治疗脊柱不稳18例报告

1994年5月～1996年5月,我院应用 Steffee 椎弓根螺钉钢板内固定系统治疗脊柱不稳18例,其中脊椎骨折脱位15例,腰椎滑脱3例。通过椎弓根螺钉,短节段固定前后三柱,固定牢靠;并利用 Steffee 钢板的杠杆作用和螺旋动力作用,取得良好复位效果。随访平均6个月,18例均无内固定松脱现象,术后可早期活动,为促进神经功能恢复创造条件。13例胸腰椎骨折脱位台并脊髓损伤的神经功能均有不同程度的恢复。Steffee 手术是治疗脊椎骨折脱位、腰椎滑脱等脊柱不稳疾患的一种理想的新手术方法。

逆行交锁髓内钉治疗股骨髁上及远端骨折

目的:探讨逆行交锁髓内钉治疗股骨髁上及远端骨折的疗效.方法:应用逆行交锁髓内钉治疗股骨髁上骨折及远端骨折19例,其中股骨远端粉碎型骨折12例.术后随访临床评定效果.结果:随访8～25个月(平均13个月),骨愈合良好,骨愈合时间3～10个月(平均4.5个月),术后功能恢复总体优良率达94.7%.结论:逆行交锁髓内钉治疗股骨髁上及远端骨折,固定牢靠,术后并发症少,愈合率高,功能恢复快.

应用主观活动功能评估预测老年患者髋关节置换后的活动功能

背景:置换前步行能力和活动功能能够很好的预测患者髋关节置换后的康复和功能状态,但对于置换前没有任何行走能力的股骨颈骨折患者来说,无法使用这些客观评估手段来预测置换后功能效果。目的:探讨置换前主观活动功能评估对老年髋关节置换患者置换后6个月活动功能预测的效果,并分析影响置换后6个月活动功能的患者特征资料。方法:前瞻性研究了两个中心在2010年11月和2013年2月期间收治的髋关节置换病例,分为股骨颈骨折行全髋关节置换组、髋关节骨性关节炎行全髋关节置换组和股骨颈骨折行人工股骨头置换组。评估各组患者的特征资料、伤前(骨折患者)或置换前(骨性关节炎患者)2周SF-36评分和LAPAQ评分与置换后6个月患者主观和客观活动功能评价的相关性。置换后6个月主观功能评价包括LAPAQ问卷调查表、SF-36评分量表,客观功能评价包括起立-行走测定和六分钟步行测试。结果与结论:115例患者完成研究。①置换前LAPAQ评分和SF-36评分均能预测股骨颈骨折和骨性关节炎患者在髋关节置换后6个月的主观和客观活动功能状态。置换前LAPAQ评分对置换后活动功能的预测似乎优于置换前SF-36评分。对于置换前无法用客观活动功能评价的髋部骨折患者来说,置换前LAPAQ评分是一种预测置换后6个月活动功能的方法。②与置换前相比,股骨颈骨折患者在术后6个月能够恢复到伤前的70%-80%活动功能,骨性关节炎患者在置换后活动功能明显优于置换前,在置换后6个月,能够增加约27%活动功能。③患者的基本特征也影响置换后的活动功能,其中并发症数是影响置换后6个月功能最主要的因素。

合并下胫腓联合分离的踝关节骨折脱位的诊断与治疗

目的:探讨治疗合并下胫腓联合分离的踝关节骨折脱位诊断治疗与临床效果。方法:回顾性分析手术治疗的合并下胫腓联合分离的踝关节骨折脱位患者24例。患者外踝均采用钢板固定;内踝:19例采用松质骨螺钉固定,3例采用三叶草钢板固定,2例采用克氏针固定;后踝:均采用松质骨螺钉固定;下胫腓联合均采用单枚螺钉经或不经钢板孔固定。结果:依据术后踝关节功能恢复情况,症状和X线征评定疗效:本组优15例,良6例,可2例,差1例,优良率为87.5%。所有患者均未发生深部感染,断钉等情况。结论:术前全面评估,正确的手术方法及技术,精确的解剖复位固定是提高踝关节骨折疗效的关键。