产后奶牛子宫机能复旧治疗方案的研究

为了探讨产后奶牛子宫机能恢复的有效治疗方案,本试验随机选择生殖正常的荷斯坦奶牛,在产后特定时间内注射缩宫素、氯前列烯醇、苯甲酸雌二醇、促黄体释放激素A3,并结合中药制剂和土霉素,直肠检查产后子宫形态,观察产后子宫恶露排放情况以及发情时间,统计受胎率,分析产后奶牛子宫机能的恢复状况。结果显示:试验组(A组)产后奶牛在30和45 d内发情率分别为75%、85%,60 d内的受胎率为55%,极显著高于对照组(B组)。A组中恶露排尽的时间,子宫孕角以及子宫颈恢复的时间要比B组提前,差异极显著(P<0.01);由此得出:以缩宫素、氯前列腺素、苯甲酸雌二醇、促黄体释放激素A3结合中药制剂和土霉素的治疗方案,可有效的加快奶牛产后恶露的排放和子宫机能的恢复,而且可以有效的预防和治疗子宫内膜炎、卵巢囊肿等产后疾病,起到了提高受胎率,缩短产犊间隔的作用。

酮病奶牛乳液与血液中β-羟丁酸浓度的相关性试验

为了在观察新疆荷斯坦酮病奶牛乳液和血清中β一羟丁酸（BHBA）浓度的相关性.以40头新疆荷斯坦酮病奶牛为试验动物,用酮粉法和改良的水杨醛检测法对其乳样和血清进行检测,将检测为阳性样本按照产奶量和产犊胎次分为2组,每组分别检测乳液和血液中β一羟丁酸浓度,应用磷钨酸沉淀法对乳液进行脱蛋白处理,采用酶荧光法测定乳中β-羟丁酸浓度,应用酶联免疫分析法测定血液中β-羟丁酸浓度.结果：酮病奶牛乳液中β-羟丁酸平均浓度为1.21±0.25 mmol/L;血液中β-羟丁酸平均浓度为2.19±0.35 mmol/L;二者的相关系数在0.7964～0.9105.表明随着产犊胎次的增加,酮病奶牛乳液中的BHBA浓度也逐渐升高,但血液中BHBA浓度变化不显著,其二者的相关系数较高;产奶量越高,乳样和血清中的BHBA含量也在逐渐增高,且二者的相关系数较高.

也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达

为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。

也木勒白羊种质资源现状调查与分析

也木勒白羊(原名喀拉也木勒羊)作为新近被发现的新疆宝贵地方绵羊品种资源之一,主要分布于新疆额敏县及其周围地区,具有很强的环境适应性和较强的抗寒抗病力。具有生长发育快、耐高寒、耐粗饲等优良特性。曾由于各种原因,其选种、选育工作没有得到足够的重视,加上引入大量外国优秀绵羊品种并进行无计划的杂交,使纯种也木勒羊的数量一度急剧下降。2012—2013年间,在县、乡畜牧部门的协同下,进行种群生产现状调查的同时,在新疆额敏县喀拉也木勒乡牧区,对部分核心种群120只处于不同生长阶段的也木勒白羊及100只4岁以上成年也木勒白羊进行了体重、基本体尺测定,并对其结果进行了整理。

羊卵泡抑制素α亚基基因siRNA真核表达载体的构建

为了构建羊抑制素α亚基(IHNα)基因靶向siRNA真核表达载体,以也木勒白羊为试验动物,依据Gen Bank的INHα基因序列(KP-113678.1)设计3个不同位点的干扰片段,利用RNAi技术和实验室常规方法将3个干扰片段连接到干扰RNA真核表达载体中,并对干扰载体进行相关检测和鉴定。结果表明:干扰表达质粒能在绵羊颗粒细胞中成功表达,且转染率50%左右,通过Q-PCR和蛋白表达试验发现,沉默率达到83%。

也木勒白羊INHα基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备

实验旨在验证INHα基因真核表达载体的表达、纯化以及多克隆抗体的制备。利用基因重组技术构建也木勒白羊INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα),并将质粒(pEGFP-INHα)作为抗原免疫,制备抗INHα的多克隆抗体。结果表明:成功构建了INHα基因的真核表达载体(pEGFP-INHα);该抗体能特异性地与INHα的抗原以及卵巢组织产生明显免疫亲和反应,说明(pEGFP-INHα)能够有效提高家兔的排卵率。本研究建立了高效稳定的INHα真核表达系统,获得具有生物学活性的蛋白,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。