吞噬细胞吞噬作用实验方法的改进

目的探讨和改进实验方法,以便更清晰、有效地观察吞噬细胞对外来异物的吞噬作用。方法小吞噬试验是用金黄色葡萄球菌感染昆明小鼠、大吞噬试验是将鸡红细胞注入Hartly豚鼠体内,然后取鼠腹腔液涂片、甲醇固定,分别用瑞氏染色法和瑞氏-姬姆萨染色法进行染色,镜下观察吞噬细胞对外来异物的吞噬作用。结果瑞氏-姬姆萨染色法制作的标本比瑞氏染色法制作的标本显微镜下观察吞噬细胞的形态结构更清晰,能更好地显示出不同种类的细胞及细胞的不同成分的色彩特征,可以更快、更有效地分辨各类细胞的细胞核、细胞浆和被吞噬的外来异物。结论采用瑞氏-姬姆萨染色法制作的吞噬作用实验标本在镜下形态结构清晰、色彩特征明显,易于分辨细胞成分和外来异物的种类,便于学生观察和计数,有助于学生对吞噬细胞吞噬作用的理解和掌握。

论Haniwa(三叶虫)的分类位置

自1933年小林贞一(T. Kobayashi)建立Haniwa属以来,至今对其分类位置未能有统一的归属。广西那坡上寒武统凤山组内保存完美的Haniwa背壳标本,对其分类位置的归属有较重要的意义。依据广西完整的Haniwa背壳的特征,笔者认为Haniwa归属于Remopleuridacea超科,Richardsonellidae科较为合适。

CD4^+T细胞的分裂与表面标志和细胞因子产生相关性的探讨

目的 :阐明抗原特异性CD4 + T细胞的分裂、细胞表面分子的表达和细胞因子产生之间的关系。方法 :从T细胞受体转基因小鼠 (DO11、10 )的脾和淋巴结中分离CD4 + T细胞。在抗原提呈细胞存在的情况下 ,经OVA多肽抗原刺激后 ,检测细胞的分裂、表型和细胞因子的产生。结果 :经抗原刺激 3天后 ,CD4 + T细胞分裂 1～ 5次 ,细胞膜表面抗原CD2 5、CD4 4的表达随着细胞的分裂而增加 ,相反 ,CD6 2L和CD6 9随着细胞分裂次数的增加而递减。细胞因子IFN γ、IL 4和IL 10随着细胞分裂次数的增加而递增。IL 12促进细胞的分裂 ,增加IFN γ的产生 ,抑制IL 4和IL 10的产生。结论 :当CD4 + T细胞活化后 ,随着细胞的分裂 ,其细胞膜表面分子的表达和细胞因子的产生均发生质和量的变化。

微波凝固肝癌细胞活性的酶组织化学检测

目的比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞活性的价值。方法用10W、1.5～2min(85～95℃)和5W、1.5～2min(55～65℃)两种条件的微波消融,分别治疗A、B两组(每组3只)小鼠移植型肝癌,并取微波消融前后的肿瘤组织标本制成切片,进行常规HE染色及琥珀酸脱氢酶的酶组织化学染色,在显微镜下观察两种染色的情况。结果从HE染色观察到,A、B两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻,其细胞核形态和排列较消融前无明显改变。酶组织化学染色显示,A组肿瘤消融区内的琥珀酸脱氢酶的活性均消失,这说明了癌细胞的灭活;B组肿瘤消融区内上述的酶活性都呈散在阳性,提示部分癌细胞仍存活,A、B两组的肿瘤灭活效果明显不同(Ρ<0.01)。结论HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应,用酶组织化学染色测琥珀酸脱氢酶的活性能判定MA对肝癌的灭活效果。

在单个细胞水平上分析抗原特异性Th1/Th2细胞因子产生的关联性

目的 在单个细胞水平上 ,观察抗原特异性Th1和Th2细胞因子产生的关联性 ,为进一步阐明CD4 + T细胞的分化 ,细胞因子产生的相互关系及其特征提供理论依据。方法 从OVA TCR转基因小鼠的脾和淋巴结中分离CD4 + T细胞 ,在体外在抗原提呈细胞存在下 ,用卵白蛋白 (OVA)抗原多肽刺激 3d后 ,再以同样的培养条件刺激 5～ 6h ,固定细胞 ,然后进行细胞表面和细胞内细胞因子染色 ,最后利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析Th1和Th2细胞因子产生的关联性。结果 抗原特异性CD4 + T细胞经抗原再一次刺激后 ,分泌Th1(IFN γ和IL 2 )和Th2 (IL 4、IL 5和IL 10 )细胞因子。IL 12促进IFN γ的表达 ,控制Th2细胞的分化。此外 ,大多数抗原特异性CD4 + T细胞只产生 1种细胞因子 ,1个细胞同时产生 2种细胞因子极少见。结论 在单个细胞水平上的研究结果表明 ,经抗原短暂刺激后 (3d) ,不同的CD4 + T细胞亚群只产生 1种Th1和 或Th2细胞因子 。

Th1细胞亚群和Th1记忆细胞在体内的功能和组织分布

目的 :检测抗原特异性Th1细胞亚群和记忆性Th1细胞在体内的功能和分布。方法 :抗原特异性Th1细胞在体外分化的不同时期 ,在单个细胞水平上同时检测细胞因子IL 2、IFN γ和IL 4的表达和细胞膜表面分子表达。将标记的初始CD4 + T细胞和Th1细胞被动输给小鼠后 ,观察Th1记忆细胞在体内组织器官的分布和IFN γ的产生。结果 :根据细胞因子产生的不同 ,可将Th1细胞分为不同的亚群。随着Th1细胞分化次数的增加 ,IFN γ产生细胞的百分率也随之增加 ,但IL 2阳性细胞的百分率下降。CD6 2L随着Th1细胞分化次数的增加而减少。当细胞被动输给小鼠 2周后 ,初始CD4 + T细胞几乎等数量地分布于淋巴结、脾和肺组织 ,随着Th1细胞分化次数的增加 ,效应 记忆T细胞优先地分布于非淋巴器官肺组织。当再次受到抗原刺激后 ,迅速产生IFN γ。结论 :Th1细胞是一群非均一细胞 ,效应 记忆性Th1细胞在细胞膜分子标记、组织器官的分布和功能等方面均与初始CD4 +

SARS康复者M抗原特异性记忆性T细胞免疫应答的探讨

目的探讨SARS患者康复后,外周血单个核细胞(PBMCs)中是否存在SARS-CoVM抗原特异性T细胞。方法从完全康复期SARS患者和健康人外周血中分离PBMCs,体外经M混合多肽刺激后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、酶联免疫斑点试验(ELISpot)及流式细胞仪检测技术,分析抗原特异性T淋巴细胞的反应性。结果在未经任何抗原刺激的情况下,PBMCs几乎不分泌IFN-γ。当SARS-CoVM混合多肽刺激后,SARS康复期患者的PBMCs分泌大量的IFN-γ,并可检测出高频率的IFN-γ产生细胞。与健康刺激组及康复期SARS患者未刺激组相比,差异显著(P<0.05)。流式结果显示,SARS康复期患者PBMCs经M多肽刺激后,分别有0.11%CD4+和0.16%CD8+T淋巴细胞分泌IFN-γ。根据IFN-γ和IL-2的表达与否,可将CD4+T细胞分为三个亚群IFN-γ-IL-2+、IFN-γ+IL-2+和IFN-γ+IL-2-。结论SARS-CoV感染后,机体可以产生针对SARS-CoVM蛋白的抗原特异性细胞免疫反应,其免疫记忆可以在体内维持很长时间。

抗CD3、CD7单抗-PAPs免疫毒素的构建及其联合杀伤效应

[目的]应用抗人T淋巴细胞单抗(抗CD3和抗CD7),分别与商陆抗病毒蛋白(PAPs)偶联构成两种免疫毒素,并探讨这两种免疫毒素在体外联合对T淋巴细胞和T淋巴母细胞(CEM细胞)的杀伤效应。[方法]选用抗CD3和抗CD7杂交瘤细胞制备单克隆抗体腹水,经纯化后以SPDP为交联剂,将两种单抗分别与商陆抗病毒蛋白偶联构建成抗CD3和抗CD7单抗免疫毒素;分别以及联合后对T淋巴细胞和CEM细胞进行体外细胞毒试验。[结果]构建的两种单抗-PAPs免疫毒素活性良好,其特异性杀伤T淋巴细胞和T淋巴母细胞CEM细胞的效应比单一抗CD3-PAPs和抗CD7- PAPs更强,对照组仅有轻微的杀伤效应。[结论]成功地构建了抗 CD3和抗 CD7单抗-PAPs免疫毒素,及其不同抗原决定簇的单抗免疫结合物,并证明联合应用抗CD3-PAPs和抗CD7-PAPs免疫毒素有相加的杀伤效果。

高校病原生物学实验室生物安全体系建设与实施

高校病原生物学实验室不可避免地存在生物安全隐患,对师生生命财产安全和教学、科研工作造成严重威胁。本文通过介绍中山大学医学实验教学中心病原生物学实验室在生物安全管理、生物安全体系建设过程中的成效与经验,指出实验室可能存在的生物安全风险与隐患;并结合国家、省、学校实验室生物安全三级管理规章制度,提出防范隐患、进一步完善实验室生物安全体系建设的建议。

抗人CD154单克隆抗体的构建及免疫学特性分析

为进一步研究人CD15 4单克隆抗体在抑制动脉粥样硬化发生和发展中的作用 ,采用重组人CD15 4分子免疫BALB c小鼠 ,用杂交瘤技术制备抗人CD15 4单克隆抗体 ,并分析其免疫学特性。结果发现 ,(1)有 6c5、1b6、5d3共三株杂交瘤细胞株的培养上清与GST hCD15 4融合蛋白反应 ,与GST不反应。 6c5、1b6和 5d3培养上清效价分别为 1∶12 8、1∶2 5 6和 1∶6 4。 (2 )经Western bolt鉴定 ,在分子质量为 5 6kDa处有一抗原抗体结合的条带 ,而分子质量为2 6kDa处无特异性条带。证明三株杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体可以结合GST hCD15 4但不与GST反应 ,是特异性结合人CD15 4的单克隆抗体。 (3)流式细胞术发现 ,6c5细胞株分泌的单克隆抗体能与激活的人外周血T细胞结合。说明已构建的单克隆抗体是特异性针对人CD15 4的 ,为下一步用人CD15 4单克隆抗体抑制动脉粥样硬化的研究打下了基础。

新疆阿克苏—乌什地区寒武系划分与对比

新疆塔里木盆地西北缘阿克苏—乌什地区(图1)寒武纪地层发育较好,主要为一套浅海—滨海相的碳酸盐岩,下、中统化石较为丰富,厚度530余米。

山东长清张夏中寒武统徐庄阶三叶虫

文内记述了山东长清张夏徐庄阶三叶虫 ,计有 13属 16种 ,其中 1新亚属及 5新种 ;划分为 4个三叶虫化石带 (自上而下 ) :Bailiella Lioparia带、Poriagraulosnanum带、Sunaspislaevis带和Hsuchuangia Ruichengella带 ,并与辽东地区、山西中条山和河南中 西部徐庄阶三叶虫化石带作了对比。由于此地是徐庄阶命名所在地 ,故其三叶虫化石带可做为对比的标准。

虚拟玻片标本技术在人体寄生虫学实验教学中的应用

虚拟玻片标本技术的运用可以克服实验教学玻片标本的保存以及开放使用的多种问题。麦克奥迪 VM1000 全自动切片扫描系统的扫描技术能够实现玻片标本的高精度、多层次的自动扫描,生成数字化的标本图像,能被电脑网络以及其他的移动终端访问。结合 Flash 动画软件制作成课件可以模拟在显微镜下观察人体寄生虫实验教学玻片标本的真实情况,帮助学生学习。

地方财政风险的防范

地方财政是国家财政的基础,地方财政的稳固是整个国家财政稳固的前提条件,因此地方政府的财政状况在很大程度上决定了整个国家公共财政体系的稳定性和效率。近年来,地方财政风险预警监测的研究已经成为世界性课题。本论文对地方财政风险的预控提出了政策性建议。

对基层财政困难的探讨

基层财力不足,县乡财政困难是当前我国财政体制中出现的严重问题。本文针对基层财政存在的问题和面临的困难提出了如何合理地划分基层的财权和事权,如何精简机构,消减冗员;如何高效使用财政资金。这些对策和措施既要切实可行,解决实际问题,又要有比较普遍的适应性。

菲律宾、泰国沼气见闻

1983年春季我们去菲律宾、泰国参加了由联合国教科文组织(UNESCO)和加拿大培训基金会(FIT)资助的沼气技术培训班的讲学活动,给我们留下了深刻的印象。 菲律宾的沼气技术 菲律宾地处热带,终年气温高,一般在27—35℃间,全年只有旱、雨季之分。作物以水稻、玉米为主,其他热带果木繁多,如:椰子、菠萝、芒果、木瓜、香蕉、木薯、咖啡等。

华北上寒武统崮山阶研究新进展

崮山阶的层型剖面在山东济南市长清区崮山镇东北的唐王寨,damesellid类三叶虫的出现标志崮山阶的开始,崮山阶包括了Damesella paronai、Blackwelderia paronai和Drepanura premesnili3个三叶虫带。

寒武系崮山阶三叶虫生物地层新认识

由于Diceratocephalus已在华北的若干地点找到,如莱芜九龙山、淄博黑石寨和泰安大汶口,Dicerato-cephalus三叶虫亚带可以提升为三叶虫带,这样崮山阶便包含了4个三叶虫带(自上而下)Diceratoceph alusarma-tus带、Drepanura premesnili带、Blackwelderia paronai带和Damesella paronai带。

SARS康复者特异性细胞免疫和免疫记忆T细胞功能的研究

目的 观察完全康复期严重急性呼吸综合征 (SARS)患者外周血针对SARS冠状病毒(SARS CoV)S抗原多肽的特异性细胞免疫反应。方法 分离外周血单个核细胞 (PBMC) ,经混合S抗原多肽刺激后 ,采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和酶联免疫斑点试验 (ELISPOT)检测 ,分析完全康复期SARS患者抗原特异性T淋巴细胞应答反应。结果 当SARS CoV的S抗原混合多肽刺激后 ,只有SARS康复期患者的PBMC分泌大量的IFN γ。同时 ,IFN γ产生细胞的阳性率也显著高于健康对照组 (P <0 .0 5)。此外 ,当用多克隆刺激剂 (PMA +ionomycin)刺激后 ,正常人和康复期SARS患者的PBMC产生等量的IFN γ及IFN γ产生细胞 ,两者经统计学处理 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5)。结论SRAS CoV不仅能诱导中和抗体的产生 ,而且还可诱导抗原特异性细胞免疫应答反应 ,并可在体内长期维持免疫记忆功能。