靶向FBXL20基因的siRNA片段的筛选及其验证

在人结肠腺癌SW480细胞株及口腔鳞癌HSC3细胞株中,筛选有效干扰fbxl 20的siRNA片段.设计合成3对靶向fbxl 20 mRNA的小干扰RNA片段,通过阳离子脂质体介导转染SW480细胞和HSC3细胞.结果发现siRNA-1,siRNA-2,siRNA-3均能抑制SW480细胞和HSC3细胞fbxl20 mRNA的表达,siRNA-2抑制作用最明显,抑制率分别为86.8%和100%.MTT试验显示:siRNA-2转染SW480细胞和HSC3细胞后,细胞增殖能力明显降低,细胞增殖抑制率分别为29.5%和43.4%.Transwell小室迁移实验表明,HSC3细胞在转染24 h后,细胞迁移能力明显减弱,迁移抑制率高达72.4%.流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:转染36 h后,SW480细胞实验组细胞凋亡率为21.9%;转染24 h后,HSC3细胞实验组细胞凋亡率为44.7%.本实验成功的筛选出了特异性的抑制fbxl 20基因的siRNA片段,并初步鉴定了fbxl 20基因的功能.

沉默CDC37抑制结肠癌细胞Lovo和Ls174T侵袭迁移

前期研究发现周期分裂蛋白37(cell division cycle 37,CDC37)的异常表达可能与结直肠腺癌的转移有关,但是其作用机制尚不清楚。本研究通过实时定量PCR和免疫印迹实检测CDC37在不同肠癌细胞中的m NRA和蛋白质表达水平,结果发现CDC37在结肠癌Lovo和Ls174T细胞中表达较高。siRNA靶向沉默CDC37表达后,细胞侧向迁移能力、垂直迁移能力、侵袭活性均显著降低。实时定量PCR和免疫印迹实验结果发现,敲除CDC37后,MMP9和MMP2的m NRA和蛋白质表达水平均显著下调。以上研究结果表明,CDC37通过调节MMP9和MMP2等侵袭转移关键分子的表达在结肠癌细胞侵袭转移过程中发挥关键作用。

靶向沉默EphA8基因对人结肠腺癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:通过转染siRNA片段,研究EphA8基因沉默后对结肠腺癌Ls174T细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:设计合成三对靶向沉默EphA8基因表达的siRNA片段,通过Lipofectamine2000介导转染人结肠腺癌细胞Ls174T。采用实时荧光定量PCR技术和Western Blot检测EphA8基因沉默效率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果:三对siRNA片段均能沉默结肠腺癌Ls174T细胞EphA8 mRNA的表达,siRNA3抑制效果最明显,抑制率为85.71%。流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:转染48 h后,Ls174T细胞实验组细胞凋亡率为33.29%;流式细胞术检测细胞周期结果显示:转染60 h后,结肠腺癌Ls174T细胞实验组S期细胞和G2期细胞比例显著降低。结论:本实验成功筛选出特异性靶向沉默EphA8基因的siRNA片段,并初步鉴定了EphA8基因的功能。

泛素蛋白酶体系统在Wnt通路中的研究进展

Wnt信号传导通路是一个由多种分子参与、相互影响、相互制约和协同作用的复杂体系,与细胞信号转导、细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡、细胞黏附和迁移以及干细胞的分化潜能等有关。泛素蛋白酶体系统通过调控蛋白活性、亚细胞定位以及蛋白间相互作用等方式在细胞活动中发挥重要的作用。Wnt信号传导通路中β-catenin等关键分子受泛素蛋白酶体途径精密调控。本文就泛素蛋白酶体系统和Wnt通路信号传导相互之间的关系作一综述。

Cdc37在结直肠腺癌中的表达及临床意义的研究

目的研究Cdc37基因的表达水平与结直肠腺癌发生、发展的相关性。方法收集26例结直肠腺癌组织及对照癌旁正常组织,用半定量RT-PCR技术检测Cdc37基因的表达水平并进行分析。结果 Cdc37基因在结直肠腺癌组织中的表达水平低于其在对照癌旁结直肠组织中的表达水平(P=0.012);Cdc37基因在有远处淋巴结转移的结直肠腺癌组织中的表达水平低于其在无远处淋巴结转移的结直肠腺癌组织中的表达水平(P=0.010);随着结直肠腺癌的恶性程度的增加,其表达水平有下降的趋势,但差异无统计学意义(P=0.562)。≥60岁患者的结直肠癌组织中Cdc37的表达水平高于<60岁患者,但差异无统计学意义(P=0.619);Cdc37基因表达水平差异与结直肠腺癌患者的性别无相关性(P=0.054)。结论 Cdc37基因在结直肠腺癌中的表达水平显著降低,可能与结直肠腺癌的发生、发展有关。

压电材料中切口接头端部平面电弹性场奇异性有限元分析

为了对平面载荷作用下压电材料中切口或接头端部附近电弹性场奇异性问题进行分析,首先以应力平衡方程、Maxwell方程和和边界条件为基础,得到一种求解压电材料特征问题的弱式方程;其次,假定楔形切口或接头端部附近单元内位移和电势沿径向分布为指数形式,而周向方向分布则采用泡函数插值,将其代入弱式方程,建立一种只需对楔形切口或接头端部附近周边进行离散的一维简单有限元方法.压电材料的极化轴可以是任意方向.利用该有限元模型讨论了楔形切口角度、极化轴方向和边界条件对奇性场的影响.通过和其它特定情况下的现有解相比,证实了该文有限元数值方法的有效性,而且精度很高.

应用MRA研究大脑前动脉A1段发育与交通动脉开放之间的关系

目的探讨大脑前动脉A1段发育与前后交通动脉开放情况之间的关系。方法回顾性分析了107例3.0T磁共振血管成像(MRA)无脑血管病的检查者和体检者。观察双侧大脑前动脉A1段发育、前交通动脉和双侧后交通动脉开放情况,测量双侧大脑前动脉A1段、前交通动脉及后交通动脉的管径,分析二者的相关性。结果 1右侧大脑前动脉A1段发育不良占22.43%(24/107),缺如占0.93%(1/107),左侧大脑前动脉A1段发育不良占16.82%(18/107),缺如占1.87%(2/107)。2前交通动脉开放占47.66%(51/107)。3单侧或双侧后交通动脉开放共有39例,其中双侧同时开放占21例,仅左侧开放占7例,仅右侧开放占11例。4大脑前动脉A1段发育不良与交通动脉开放相关(r=0.654,P<0.01)。结论大脑前动脉A1段发育不良可引起交通动脉代偿性开放。

结直肠腺癌发病基因fbxl20和set的相关性研究

目的:通过半定量PCR技术,研究fbxl20基因与set基因与临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性研究。方法:收集50例结直肠腺癌组织及癌旁正常组织,用半定量PCR技术检测fbxl20基因及set基因的表达水平并进行分析。结果:fbxl20基因及set基因在结直肠腺癌组织中的表达水平均显著高于癌旁组织;fbxl20基因与set基因在本实验50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性。但是,在低分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中,fbxl20基因与set基因的表达水平呈正相关。结论:fbxl20基因及set基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著升高,其可能与癌细胞的分化过程有关。

免疫组化法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1)基因在结直肠腺癌的表达水平及其与临床病理特征的联系。方法:q PCR技术检测川北医学院附属医院2014年9月至2016年2月新鲜结直肠腺癌组织及癌旁正常组织46例中FBP1基因的表达水平。免疫组化方法检测川北医学院附属医院2015年7月至2016年6月结直肠腺癌及癌旁对照组织的蜡块标本30例中FBP1的表达及分布情况。结果:q PCR技术检测结果表明,FBP1基因在结直肠腺癌组织中的表达水平低于在癌旁正常组织中的表达水平(t=2.934,P=0.006);FBP1基因在结直肠腺癌组织中的表达水平随着结直肠腺癌肿瘤的恶性程度的增加(F=13.267,P=0.000)、Duke’s分期的增加(F=15.864,P=0.000)、远处淋巴结的转移(t=14.285,P=0.000)而降低;FBP1基因在男性患者的结直肠腺癌组织中的表达水平高于其在女性患者的表达水平,但差异无统计学意义(t=1.294,P=0.165)。免疫组化结果显示FBP1在结直肠腺癌组织中低表达甚至缺失,而在癌旁正常组织中高表达,二者差异具有统计学意义(χ~2=19.461,P=0.000)。结论:FBP1基因及蛋白质的低表达可能在结直肠腺癌的发生发展中有着重要的作用,是其潜在的治疗靶标。

结直肠腺癌发病基因fbxl20和E—cadherin的相关性研究

目的研究fbxl20与E—cadherin基因与结直肠癌临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性。方法收集50例结直肠腺癌组织及对照癌旁组织，用半定量PCR技术检测fbxl20及E—cad．herin基因的表达水平并进行相关性分析。结果fbxl20基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织（0．479±0．141 vs．0．296±0．121，P=0．001）；E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织（0．440±0．026vs．0．741±0．059，P=0．000）；fbxl20与E—cadherin基因在本研究50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性（r=-0．165，P=0．251）。但是，在低分化和高分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中，fbxl20与E—cadherin基因的表达水平呈负相关（r=-0．600，P=0．008；r=-0．784，P=0．017；r=-0．643，P=0．032）。结论E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的低表达可能与fbxl20基因的高表达有关，且结直肠腺癌晚期肿瘤的高迁移性及高侵袭性可能与E—cadherin有关。

线粒体靶向小清蛋白表达载体构建及其对肝癌细胞线粒体钙稳态的影响

目的构建线粒体靶向小清蛋白(PVALB)表达载体,探讨线粒体靶向PVALB在肝癌细胞(MHCC97H)中的表达及对线粒体内钙稳态的影响。方法以骨骼肌细胞的c DNA为模板,通过PCR法扩增得到PVALB,经酶切后与MTS、pc DNA3.1(+)载体连接;重组质粒经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染法转染肝癌细胞MHCC97H,用激光共聚焦显微镜检测PVALB定位及转染后MHCC97H线粒体中钙离子浓度。结果 pc DNA3.1(+)-MTS-PVALB经酶切、测序鉴定完全正确,真核表达载体构建成功;表达的MTS-PVALB定位于线粒体;MTS-PVALB可下调线粒体内钙离子浓度。结论成功构建pc DNA3.1(+)-MTS-PVALB线粒体靶向真核表达载体,MTSPVALB定位于MHCC97H线粒体并调节线粒体钙稳态。

静水中平板闸门自振诱导流体附加质量的计算

附加质量是研究结构在流体环境中流固耦合的一个重要参数。静水中结构振动诱导的流场附加质量,可根据势流理论,采用奇点配置法利用空间点源(汇)及偶极子基本解推导的计算式求得。利用此计算方法求得某平板闸门在静水中的振动模态,有限元计算软件Ansys自身拥有流固耦合计算模块,通过此模块可验证此计算方法对于平板闸门在工程中流固耦合求解的合理性与准确性。

复合压电材料尖劈端部奇性问题有限元分析

从应力平衡方程、电场Maxwell方程和尖劈边界条件构成的控制方程出发,导出一个基于位移场、电势的弱式方程.采用一维有限元分析技术,沿着尖劈端部领域进行单元离散,建立求解压电复合材料尖劈附近奇性场问题的有限元特征分析方法.对于压电材料非常重要的电学边界问题,本文也有所涉及,并给出了平面导电裂纹和绝缘裂纹的算例.

CYP27A1对肝细胞癌预后的影响及生物学作用

目的分析细胞色素P450家族27亚家族A成员1(CYP27A1)对肝细胞癌(HCC)预后的影响及生物学作用,并初步探讨其影响HCC生长的分子机制。方法基于癌症基因数据库(TCGA)分析CYP27A1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系;基于CYP27A1表达量中位值,将样本分为CYP27A1高表达组(n=170)与CYP27A1低表达组(n=170),利用基因集富集分析(GSEA)分别对两组进行基因集富集分析;免疫荧光染色检测及数据库查找CYP27A1蛋白亚细胞定位;构建过表达CYP27A1质粒,转染HCC细胞MHCC-97H和HCCLM3,设置阴性对照组(转染空载质粒)与CYP27A1过表达组(转染过表达CYP27A1重组质粒)。采用CCK-8法、流式细胞仪、活性氧(ROS)荧光探针等检测过表达CYP27A1对HCC细胞活力、凋亡及ROS生成的影响;结合生物信息学分析CYP27A1与ROS生成相关基因及HCC增殖相关基因表达的相关性。结果与正常肝组织比较,HCC组织中CYP27A1 mRNA表达量明显降低(P<0.01)。CYP27A1表达与HCC患者性别、T分期、肿瘤分级和肿瘤分期有关(P<0.05)。CYP27A1低表达组总生存率明显低于高表达组(P<0.01)。GSEA富集分析结果显示,CYP27A1低表达组HCC“干性”亚类和“增殖”亚类基因集水平升高。在MHCC-97H和HCCLM3细胞中,CYP27A1主要定位于细胞核;在HepG2细胞中,CYP27A1主要定位于线粒体。与阴性对照组比较,过表达CYP27A1后,HCC细胞活力下降(P<0.01)、ROS水平降低(P<0.05),而细胞凋亡水平无明显改变(P>0.05)。CYP27A1与抑制ROS生成相关基因表达呈正相关(P<0.05),抑制ROS生成相关基因与HCC增殖相关基因表达呈负相关(P<0.05)。结论CYP27A1在HCC中呈低表达,下调CYP27A1可能通过促进ROS生成促进HCC恶性生长。

长非编码RNA PART1抑制喉鳞癌细胞增殖和侵袭

长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)PART1可作为竞争性内源RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA),在多种肿瘤的发生发展中发挥关键作用,然而PART1在喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的研究尚属空白。我们基于前期lncRNA测序数据发现,PART1在LSCC组织中显著低表达。进一步分析TCGA等公共数据库中的测序和临床数据,共发现了LSCC癌/癌旁组织中146个差异表达的lncRNA(95个上调,51个下调)和2424个差异表达的mRNA,结果显示,PART1在LSCC中普遍低表达(P<0.0001),且PART1高表达组预后明显更好(P<0.05)。本文采用生物信息学手段构建了LSCC中PART1的ceRNA调控网络,并确定与之相互作用的miRNA与mRNA。在体外验证了PART1对LSCC细胞的重要性。通过过表达载体,显著提高了PART1在LSCC细胞中的表达量(P<0.001);5-乙炔基-20-脱氧尿苷染色实验、凋亡分析、划痕愈合实验、Transwell实验和鬼笔环肽染色等研究结果显示,体外过表达PART1可以显著影响LSCC细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭(P<0.001)。因此,PART1可能参与并抑制LSCC的发生和发展。本研究将为阐明PART1在LSCC中的作用提供理论依据。

季节性自回归模型适用性分析

月径流序列的随机模拟通常采用季节性自回归模型[SAR(p)],该模型考虑了月径流随周期变化的特性。以仁里水文站37年的实测月径流序列为基础,计算分析其统计特性参数,根据序列中各月自回归系数的不同,对不同月取不同阶数的SAR(p)模型,并根据当地资料采用适线法估计偏态系数Cs值,建立混合SAR(p)模型。与SAR(1)模型和SAR(2)模型的模拟结果对比,混合SAR(p)模型的模拟结果更接近实测资料,偏态系数Cs值和二阶自相关系数明显优于一、二阶模型,能较好的模拟原序列的统计特性。

基于遗传算法的漫湾水电站厂内优化运行研究

运用MATLAB采用遗传算法对水电站厂内机组负荷分配情况进行模拟计算,在发电量满足调度要求并保证安全优质的情况下对机组负荷分配进行调整,优化机组运行使电站的耗流量减少;并对计算数据进行分析,研究峰谷负荷差对耗流量的影响。结果显示,峰谷负荷差对电站耗流量的影响可以做出定量的分析,该结论对于制定峰谷时差电价有一定指导意义,对于安排水电站优化运行,提高水电站运行效率有十分重要的现实意义。

结直肠腺癌转移相关基因的研究进展

结直肠腺癌的发生和发展是一个涉及多基因,多步骤的复杂过程。在结直肠腺癌的发生发展过程中,癌基因被激活,或者抑癌基因被沉默,或者基因间的相互作用,最终导致结直肠腺癌的不断发展,进而导致癌症的转移与浸润。近年来研究发现,与结直肠腺癌迁移与浸润相关的的基因越来越多。但是,这些基因是如何作用,在结直肠腺癌的发病过程中是否起着重要的作用。本文就近年来与结直肠腺癌迁移与浸润相关的基因,例如:RUNX3、TGF-β1、MACC1、MMP-2、MMP-7等展开综述。

智慧猪场的建设与应用

浙江金华乌啦乌两头乌国际牧场将现代信息技术、数字技术装备与现代养猪技术深度融合、系统集成与综合运用,建成了包含智能环境控制、智能行为监测、智能饲喂控制、智能人员洗消、智能饮水、智能刮粪和除臭、智能洗消、智能监控、智能能源管理、智能设备维护保养和智能报警等内容的智慧猪场,将人、猪、设备与场景连接在一起,形成基于生猪全生命周期的养猪生产物联网控制闭环系统,极大限度地减少生产管理人员,减轻劳动强度,改善工作环境,降低疫病发生风险,提高精细管理能力和有效管理水平,增加猪场经济效益,真正实现生猪健康养殖的智能化、精准化、可视化、可控化、科学化管理,成为数字农业典范,对加快现代化畜牧业转型升级产生积极影响。

建筑工程造价的动态管理分析及成本优化控制探讨

建筑工程造价动态管理是一项十分重要的工作,通过开展该项工作,能够促进建筑工程全过程成本的管控,提升建筑企业的经济效益。但是因为受到多种因素的影响,当前我国建筑工程造价动态化管理中还存在很多问题,这些问题是否能够得到解决,直接影响到建筑行业的可持续发展。基于此,文章对这方面内容进行了分析,并结合建筑行业的实际发展状况提出一些造价动态化管理及成本优化控制的措施。