细胞色素P_(450)酶系在药物代谢中的作用

该文从细胞色素P4 50 概述、参与药物代谢的人类细胞色素P4 50 亚型、细胞色素P4 50 与药物的相互作用、细胞色素P4 50 多态性在药物不良反应中的作用及细胞色素P4 50 酶系产生药物不良反应的机制等方面综述细胞色素P4 50 酶系对药物代谢的影响 ,为指导临床合理用药 。

T－2毒素对ATP的影响及硒的保护作用

报告了高效液相色谱法测定Ｔ－２毒素和Ｔ－２加硒饲料喂养的鸡肝、脑、肾、心等组织ＡＴＰ含量的结果。表明：Ｔ－２毒素可引起肝脏、心脏和脑组织ＡＴＰ含量下降，其中肝组织ＡＴＰ含量下降最为明显；加硒组肝脏ＡＴＰ含量和对照组相似，而心和脑组织ＡＴＰ含量则和Ｔ－２组相同，仍低于对照组。揭示Ｔ－２毒素主要影响肝组织ＡＴＰ的含量；硒对Ｔ－２毒素引起的肝脏ＡＴＰ减少有保护作用。

CYP1A1基因型与吸烟及肺癌的关系

细胞色素 P450 1A1(CYP 1A1)基因存在着3种多态性。其多态性可影响烟草中苯并芘和其它前致癌剂的活化,其中基因型 C 与吸烟引起的肺癌有关。各种族间 CYP 1A1基因型的频率分布有很大差别。

大骨节病儿童尿液游离氨基酸谱短期动态变化

本文报告了大骨节病儿童尿液游离氨基酸谱短期动态变化的情况。在病情活跃时,丝氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和组氯酸尿中的含量病区儿童明显高于非病区儿童;随着病情好转,大部分氨基酸恢复到正常水平,仅丝氨酸、谷氨酸仍高于非病区。作者认为前者可能反映致大骨节病因子活跃的情况,与病理的破坏过程有关;丝氨酸、谷氨酸似乎同病理的修复过程有关,并进行了扼要计论。

大骨节病患儿尿液游离氨基酸谱生化类型的研究

作者曾报告过大骨节病尿液游离氨基酸谱短期动态变化和病区粮,几种嗜软骨和肾细胞毒物的比较生化毒理学结果。揭示大骨节病患儿尿液存在着较特异的游离氨基酸谱;病区粮和各种毒物喂养的大白鼠尿液游离氨基酸有其各自的特点。在此基础上,本文对大骨节病儿游离氨基酸的生化类型进行探讨,并对其流行病学意义,临床特异性和短期变动进行了讨论。

15-HETE调节肺动脉节律的分子和离子通道机制

缺氧引起肺小动脉持续性收缩的机制尚不完全清楚.可能和白三烯、细胞色素P450代谢产物、一氧化氮等因素有关,但上述机制都不能完全解释缺氧引起肺小动脉持续性收缩的原因.近年来的研究揭示缺氧抑制外向性K+电流,导致膜去极化,Ca2+通过电压依赖性Ca2+通道内流,引起小动脉平滑肌收缩.

15-HETE对肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响

目的 通过阻断细胞外钙离子 (Ca2+ )内流,观察 15 羟化二十烷四烯酸 ( 15 HETE)对兔肺动脉环收缩张力和肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度 ( [Ca2+ ]i)的影响,探讨缺氧时 15 HETE引起细胞钙动员的机制。方法 采用组织浴槽血管环方法观察L 型钙通道阻断剂硝苯地平和无钙液对15 HETE诱导的兔肺动脉环收缩力的影响;酶法分离培养兔肺动脉平滑肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜测定 15 HETE对细胞内 [Ca2+ ]i的作用。结果 在正常组和缺氧组, 10μmol·L-1硝苯地平和无钙液对 1μmol·L-1 15 HETE引起的肺动脉环收缩均没有影响;培养的 15 HETE组细胞 (正常培养的细胞暴露于 1 μmol·L-1 15 HETE下继续孵育 8min)与正常对照组相比,细胞内 [Ca2+ ]i明显增加 (P<0 05)。结论 15 HETE可引起肺动脉平滑肌细胞 [Ca2+ ]i增加,且此钙来源于细胞内贮钙库的释放。

清开灵注射液对大鼠CYP1A2和2D6的影响

目的:通过清开灵注射液的大鼠体内、外实验,观察清开灵注射液对大鼠CYP1A2亚型,CYP2D6亚型的影响。方法:通过HPLC法测定全血中咖啡因的代谢率,观测清开灵注射液对大鼠CYP1A2活性的影响;通过HPLC法测定大鼠肝微粒体重组系统非那西丁的代谢比率,确定清开灵注射液对大鼠肝微粒体CYP1A2亚型的作用;测定大鼠肝微粒体重组系统右美沙芬的代谢比率,确定清开灵注射液对大鼠肝微粒体CYP2D6亚型的作用。结果:实验组中给予大鼠不同浓度的清开灵注射液(0.15,0.3,0.6 mL.kg-1),其咖啡因代谢率为(15.9±3.8)%,(14.5±1.8)%,(12.3±1.2)%,对照组为(16.8±5.9)%,各剂量组及对照组间均无显著性差异;肝微粒体体外重组系统中,实验组各浓度清开灵注射液对CYP2D6没有影响;高剂量组清开灵注射液对CYP1A2有抑制作用。结论:清开灵注射液对CYP1A2和CYP2D6的活性没有影响。

15-HETE对缺氧兔肺动脉平滑肌钾离子通道的影响(英文)

用肺动脉环和全细胞膜片钳技术研究15-羟化二十烷四烯酸(15-HETE)对缺氧兔肺动脉平滑肌钾离子通道的影响。新出生的幼兔分两组,一组放入吸氧分数为0.12 的低氧舱内;另一组保持正常氧环境。9 d 后, 称重、取肺动脉进行细胞培养并制作肺动脉环。分别加入4-氨基吡啶(4-aminopyridione, 4-AP)、四乙胺(tetraethylammonium, TEA)、glyburide(GLYB)三种特异性钾离子通道阻断剂, 观察15-HETE 对兔肺动脉平滑肌钾离子通道的作用变化,同时采用全细胞膜片钳测定钾电流。结果显示: 5 mmol/L 4-AP 阻断KV通道后可以抑制15-HETE 诱导的缺氧兔肺动脉收缩;TEA和GLYB 分别阻断大电导型钙激活钾通道(BKCa)和KATP通道后并不影响15-HETE诱导的缺氧兔肺动脉收缩; 15-HETE可降低兔肺动脉平滑肌细胞钾电流幅度。上述结果提示: 缺氧兔肺动脉中,15-HETE阻断电压依赖钾通道(KV通道), 引起膜去极化, 可能是缺氧性肺血管收缩的机制之一。

柴胡注射液对大鼠细胞色素P450各亚型活性的影响

目的:观察柴胡注射液对大鼠细胞色素P450各亚型活性的影响。方法:24只Wistar大鼠,随机分成3组:对照组,柴胡注射液低、高剂量组。3组分别腹腔注射生理盐水、0.36、0.72mL/kg(相当于原药材0.72、1.44g/kg)柴胡注射液诱导两周后,于d15清晨灌胃给予探针药物咖啡因(10mg/kg),6h后处死。用HPLC法观察探针药物代谢率的变化来反映柴胡注射液对大鼠CYP1A2活性的影响;West-ernbloting测定大鼠肝微粒体CYP1A2、3A4、4A1蛋白的相对含量。结果:体内、外探针药物代谢率在各剂量组及对照组间均无统计学差异(P>0.05),CYP1A2在各剂量组中表达亦无统计学差异。CYP3A4在柴胡注射液高剂量组中表达明显增多(P<0.05),CYP4A1在柴胡注射液低、高剂量组表达均明显减少(P<0.05)。结论:柴胡注射液对大鼠CYP1A2亚型没有影响,但在蛋白质水平,可抑制大鼠肝CYP4A1表达。高剂量柴胡注射液可诱导大鼠肝CYP3A4表达。

奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响

目的通过奥扎格雷钠的大鼠体内、外实验,观察奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响。方法对照组和奥扎格雷钠诱导组大鼠分别经口给予生理盐水和奥扎格雷钠1wk,HPLC法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬的代谢率,观察奥扎格雷钠对CYP2D6活性的影响。结果①大鼠给予奥扎格雷钠(37mg·kg-1),其尿样中右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);②奥扎格雷钠诱导组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬(0·324mmol·L-1),其右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);③奥扎格雷钠与CYP2D6特异性抑制剂西米替丁可明显降低右美沙芬的代谢率(P<0·01),并且奥扎格雷钠组其右美沙芬的代谢率低于西米替丁组(P<0·05);④奥扎格雷钠IC50=26·5μmol·L-1,西咪替丁IC50=86·3μmol·L-1,奥扎格雷钠诱导组肝微粒体Km=0·67mmol·L-1,Vmax=2·13nmol·min-1·g-1protein;对照组肝微粒体Km=0·29mmol·L-1,Vmax=0·91nmol·min-1·g-1protein;⑤体内和体外相应实验数据具有很好的相关性(r=0·9811)。结论奥扎格雷钠可诱导CYP2D6酶的活性。

15-酮基二十碳四烯酸对大鼠离体肺动脉环的作用

目的 用组织浴槽血管环技术研究15-酮基二十碳四烯酸（15-KETE）收缩大鼠离体肺动脉的作用及其离子通道机制。方法 16只健康的Wistar大鼠，体重为（220±20）g，随机分为两组（n=8）；正常组置于正常环境中饲养（FiO2=21％），缺氧组置于缺氧的培养箱中饲养（FiO2=10％），连续饲养9d后处死，游离直径为0．5～1、0mm肺内肺动脉（PA）剪成3mm长的血管环，观察钾离子通道阻断剂、L-型钙离子通道阻断剂和无钙离子Krebs液对15-KETE诱导的正常和缺氧大鼠肺动脉环收缩的影响。结果①15-KETE以浓度（10-～10^-6mol·L^-1）依赖的方式收缩大鼠离体肺动脉环；②2mmol·L^-14-氨基吡啶（4-aminopyridione，4-AP）可明显降低15．KETE收缩大鼠离体肺动脉环的作用，正常组和缺氧组的结果相似；③10mmol·L^-1四乙胺（tetraeth—ylammonium，TEA）、10～mol·L^-1格列本脲（glyburide，GLYB）对15-KETE收缩大鼠离体肺动脉环的作用无明显影响；④10～mol·L^-1硝苯地平（nifedipine）和无钙Krebs液对10～mol·L^-1 15-KETE引起的离体肺动脉环收缩具有显著抑制作用。结论 15-KETE收缩离体肺动脉环的作用依赖于KV通道、细胞外液钙离子和L-型钙离子通道。

PKC和血管内皮细胞在15-HETE收缩肺动脉中的作用

目的探讨蛋白激酶C(PKC)、蛋白激酶A(PKA)信号转导途经及血管内皮完整性在15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)收缩肺动脉中的作用。方法采用组织浴槽血管环法与PKC、PKA抑制剂以及除去血管内皮细胞相结合的方法。结果用6·8mmol·L-1hypericin阻断PKC途径可使15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉量效曲线右移(P<0·01);用0·112mmol·L-1KT5720阻断PKA途径使15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉量效曲线右移不明显;除去血管内皮细胞可降低对照组和缺氧组肺动脉血管环对15-HETE的反应性。结论15-HETE收缩肺动脉的作用和PKC信号转导系统以及血管内皮细胞的完整性有关。

15-羟廿碳四烯酸对缺氧性大鼠颈内动脉环的收缩作用及机制

目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(FiO2)为21%和缺氧组:置于FiO2为10%的缺氧箱中(n=8).9 d后将大鼠处死,游离颈内动脉(ICA)制备血管环,KH液中分别加入不同浓度15-HETE以及2 mmol·L-1 4-AP、10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB后平衡15 min后,再加入15-HETE,观察不同浓度15-HETE、不同K+通道阻断剂对颈内动脉环收缩反应程度的变化.结果 15-HETE以浓度依赖方式(10-8 mol·L-1～10-6mol·L-1)使游离颈内动脉环张力增加,对缺氧组大鼠颈内动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异有显著性(15-HETE浓度为10-8 mol·L-1、10-7 mol·L-1时,P<0.05,10-6 mol·L-1时,P<0.01,n=8);2 mmol·L-1 4-AP使颈内动脉环血管张力增高(P<0.05，n=8),但预先应用 2 mmol·L-1 4-AP后浴液中加入10-6 mol·L-1 15-HETE,血管张力无进一步增加的趋势;10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB,对血管环张力差异无显著性(P>0.05,n=8);但进一步应用15-HETE使血管环张力增加,变化幅度接近单纯应用15-HETE组.结论 15-HETE收缩ICA,缺氧情况下尤为明显;Kv通道在15-HETE所致的ICA收缩中起作用.

应用大鼠肝微粒体筛选对细胞色素P4502D6有抑制作用的中药

目的从17种中药(单体、提取物和注射液)中快速筛选出对细胞色素P4502D6(CYP2D6)亚型有抑制作用的中药,建立高通量筛选对CYP2D6有抑制作用中药的技术平台。方法取大鼠空白肝微粒体,分别加入17种中药,HPLC法测定大鼠肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬(DM)的代谢率,通过代谢率降低的现象初步筛选出能抑制肝微粒体中CYP2D6代谢的药物。结果槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液可明显降低DM的代谢率(P<0.01)。结论初步筛选出槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液这5种中药可抑制肝微粒体CYP2D6酶活性。此方法可作为高通量筛选对CYP2D6活性有抑制作用中药的技术平台。

菟丝子水煎液对大鼠肝微粒体细胞色素P450亚型酶活性的影响

目的观察菟丝子对大鼠肝细胞色素P450酶系统中CYP1A2,2D6以及3A4 3种亚型活性的影响。方法对照组和实验组大鼠分别经口给予生理盐水和菟丝子水煎液2周,差速离心分离肝微粒体,HPLC法分别测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4探针药物的代谢率;通过Western blot测定大鼠肝微粒体中CYP1A2,2D6以及3A4蛋白的相对含量。结果①实验组探针药物非那西丁代谢率高于对照组(P<0.05),Western blot分析显示实验组CYP1A2蛋白表达略高于对照组;②实验组探针药物右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0.05),CYP2D6蛋白表达亦明显高于对照组;③两组间探针药物咪哒唑仑代谢率及CYP3A4蛋白表达无明显差异。结论中药菟丝子水煎液可诱导大鼠肝微粒体中的CYP2D6和CYP1A2,而对CYP3A4无影响。

ERK1/2通路在4-AP诱导大鼠肺动脉收缩中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶-1/2(ERK1/2)通路在4-氨基吡啶(4-aminopyridione,4-AP)阻断正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜上电压依赖性钾通道(KV)所引起的肺动脉收缩中的作用。方法取正常鼠肺动脉制作肺动脉环,分别加入4-AP(KV通道阻断剂),PD98059/U0126+4-AP,比较肺动脉收缩的变化。同时培养肺动脉平滑肌细胞进行Western blot分析4-AP对ERK1/2的影响。结果①在血管环试验中,4-AP引起的肺动脉收缩有浓度依赖性;加入20mmol.L-1PD98059或2μmol.L-1U0126可以抑制4-AP引起的肺动脉收缩。②4-AP可刺激PASMCs ERK1/2蛋白磷酸化;③U0126可抑制4-AP引起的ERK1/2蛋白磷酸化。结论ERK1/2通路参与4-AP阻断正常大鼠肺动脉平滑肌细胞膜上电压依赖性钾通道(KV)引起肺动脉收缩。

细胞色素P450 3A4抗原表位的分析及其抗体的制备与鉴定

目的：制备兔抗人细胞色素P450 3A4（CYP3A4）抗体及其特性鉴定。方法：利用生物信息学方法分析CYP3A4蛋白的序列,根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择多肽序列,合成CYP3A4多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素（KLH）偶联,免疫日本大耳白兔制备抗CYP3A4抗体。辛酸-硫酸铵法纯化抗体,间接ELISA测定抗体的效价及相对亲和力常数,Western blot鉴定其特异性,免疫组化进行定位。结果：获得针对小分子CYP3A4的抗体。该抗体效价为1∶16000;相对亲和力常数在10^5～10^6M^-1,具有实用价值;可与CYP3A4合成肽及天然CYP3A4出现特异性反应;可识别正常人肝脏组织CYP3A4;Western blot的结果显示,该抗体识别的相应抗原的相对分子质量（Mr）为46000。结论：合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗体。制备的兔抗CYP3A4合成肽抗体可应用于ELISA、Western blot和免疫组化实验。

缺氧大鼠脑组织中的15-脂加氧酶表达与定位研究

目的:通过对15-脂加氧酶(15-lipoxygenase,15-LO)在缺氧大鼠脑组织中的表达及定位研究,明确15-羟廿碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetrae-noicacid,15-HETE与脑缺氧的关系,进一步探讨缺氧引起中枢神经系)统功能障碍的机制。方法:实验于2002-01/12在哈尔滨医科大学药理学教学基地与病理学实验室完成。将12只Wistar大鼠随机分为两组:对照组,吸大气FiO2为210mL/L;缺氧组,即将大鼠置于缺氧箱中,吸入氮气与氧气的混合气体(90∶10),即FiO为100mL/L。9d后将动物麻醉后断头取脑,制成2冷冻切片,进行免疫组化与原位杂交实验。结果:正常组,15-LOmRNA、蛋白质在脑内有少量表达。缺氧条件下,二者表达均增加(P<0.01)。15-LOmRNA定位于血管内皮细胞、平滑肌细胞、海马、脉络膜及神经元的胞核内,胞浆亦有少量。此外神经胶质细胞内也有少量表达。15-LO蛋白质阳性染色主要存在于血管内皮细胞、平滑肌细胞的胞浆内,海马、神经元内未见表达。此外,神经胶质细胞、脉络膜亦有少量表达。结论:缺氧条件下脑组织15-LO表达增加,参与了脑缺氧后的损伤过程。