TNF-α和IL-13对人肺成纤维细胞胶原蛋白生成的影响

以胶原蛋白过量沉积为主要特征的纤维化是临床肺部疾患常见的病理现象。该研究利用RT-PCR技术检测不同剂量TNF-α和IL-13对人肺成纤维细胞IL-13Rα1、IL-13Rα2和Ⅰ型胶原蛋白转录水平的影响;ELISA检测细胞培养上清sIL-13Rα2分泌量;羟脯氨酸法定量分析各组肺成纤维细胞胶原蛋白生成情况。结果发现:在实验剂量条件下,TNF-α和IL-13对人肺成纤维细胞IL-13Rα1的表达无显著影响;两者均能不同程度地上调IL-13Rα2的表达;与对照组相比,TNF-α对胶原蛋白的表达有下调作用,IL-13则无显著影响。

IL-13促进肝星状细胞增殖和胶原蛋白表达

肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是肝纤维化发展过程中过量细胞外基质的主要来源。该研究首先利用MTT法检测IL-13实验剂量和时间条件下肝星状细胞增殖情况;然后运用RT-PCR技术检测IL-13对人肝星状细胞LX-2细胞系IL-13Rα1、IL-4Rα、TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白转录水平的影响;最后通过羟脯氨酸法定量分析各组细胞培养上清液中的胶原蛋白含量。结果发现:IL-13能促进肝星状细胞的增殖;在不改变IL-13Rα1和IL-4Rα转录水平的同时,对TGF-β和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达以及细胞总胶原蛋白含量的上调作用均呈现出较为明显的剂量和时间依赖性。

A-2巨球蛋白对骨关节炎软骨细胞的作用

[目的]研究A-2巨球蛋白(alpha-2-macroglobulin, A2M)在骨关节炎(osteoarthritis, OA)软骨中的表达情况,并观察其对OA软骨细胞的作用。[方法]选取因OA行全膝关节置换术患者胫骨平台24例,将平台软骨面分为相对病变区域与绝对病变区域,q PCR法检测不同区域A2M的表达水平。原代OA软骨细胞进行培养,分为3组:正常培养组(对照组)、IL-1b刺激组、IL-1b刺激后A2M处理组(A2M组),24 h后q PCR法检测软骨细胞合成和分解代谢情况;48 h后,蛋白印迹法检测细胞中基质金属蛋白酶-13 (MMP-13)的表达水平,ELISA法检测上清液中MMP-13的浓度。[结果] OA胫骨平台绝对病变区域A2M表达水平较相对病变区域显著下降(P<0.05)。细胞培养中,A2M组II型胶原和Aggrecan的表达水平显著高于IL-1b刺激组(P<0.05),而MMP-3和-13的表达水平则明显低于IL-1b刺激组(P<0.05)。蛋白印迹和ELISA检测均显示经A2M处理后,MMP-13的水平显著降低。[结论]A2M能够有效地抑制软骨的分解代谢,未来将进行体内试验来验证其对OA的抑制作用。